分析方法验证方案

1、下载可编辑异烟肺含量测定分析方法验证方案.专业.整理.验证原因:新项目验证再验证V 其它验证类型:I预验证回顾性验证转移验证方法描述:本分析方法为中国药典 2010版二部方法。为确保其检测结果准确，对该分析方法的专属性、精密度（系统精密度、方法精密度、中间精密度） 、线性和范围、准确度、耐用 性进行评价。验证依据:中国药典2010年版分析方法（295页）验证时间:2010年07月09日2010年07月10日验证项目组成员及职责：部门成员职责QC仪器设备的确认QC分析方法编写QC分析测试QC数据评估质量部审核批准验证内容:-序列号确认测试项目可接受标准01仪器设备的确认01.1高效液相色谱仪的确

2、认符合仪器设备的确认要求01.2天平的确认符合仪器设备的确认要求02具体测试内容异烟肌峰面积RS庆2.0%,02.1系统精密度保留时间RS改2.0%。异配置1份异烟肥工作标准溶液，连续进针 6次，记录烟册理论塔板数大于异烟肌峰面积、保留时间。4000,拖尾因子在 0.9 1.4之间。02.2方法精密度平行配制同一批样品的6份样品溶液，每份溶液进样2针，计算样品含量及其相对标准偏差。样品含量的RS52.0%。02.3线性和范围以异烟肥工作标准品溶液的浓度为 100%配制20% 60% 100% 140% 180麻度的工作标准品溶液，每个 浓度的标准品溶液进样1次，计算出回归方程和相关 系数R。R

3、>0.99902.4准确度该定量方法的回收率应为以异烟肥工作标准品溶液的浓度为 100%取同一批样 品，配制浓度为80% 100%口 120%勺样品溶液各3份， 每份进样2针。计算具回收率。98.0% 102.0%。02.5耐用性理论塔板数大于4000,拖配制异烟酸和异烟肌混合溶液，JTT取条件改变方法，尾因子在0.91.4之间，稳定后按顺序进样，计算异烟册的理论塔板数，混合分离度R> 1.5 ,相对保留溶液中异烟酸和异烟肌的相对保留时间 RRT时间RRT®差绝对值不大a.改变流速为 0.9ml/min 和 1.1ml/min 。b.改变柱温为23c和27Coc.改变流动

4、相缓冲液与甲醇配比为 83:17和87:13。d.同一填料/、同色谱柱。于 20%。03程序及文件03.1液相色谱仪校正规程符合要求03.2液相色谱仪操作规程符合要求03.3分析天平校正规程符合要求03.4分析天平操作规程符合要求验证前准备:a）人员培训:培训人姓名培训时间培训内容b）仪器设备、标准品和试剂:仪器设备仪器名称型号编号校验后效期图效液相色谱仪MODEL200标准品和试剂名称级别厂家批号c）样品名称厂家批号验证过程:色谱条件色谱条件色谱柱：agilent ODS-2 长度：250cm,内径：4.6mm,填料C18 ,填料粒度：5m 检测波长：262nm带宽30柱温：25 C进样量：

5、20 口流速：1.0ml/min流动相A: 0.02mol/l磷酸氢二钠溶液（用磷酸调 pH至6.0）,流动相B:甲醇A:B=85:15停止时间：12min1 .系统精密度1.1 .溶液配制系统精密度溶液：取异烟肌10mg置100ml容量瓶中，精密称量，用水溶解并稀释至刻度。1.2 验证过程及结果系统精密度溶液连续进样6次，记录其异烟肌峰面积、保留时间。可接受标准：异烟肌峰面积 RS改2.0%,保留时间RS改2.0%。厅P保留时间（min）峰面积123456RSD%结论:2 .重现性试验（方法精密度）2.1 溶液配制2.1.1. 对照溶液：取异烟肥工作标准品10mg精密称量，置100ml容量瓶

6、中，用水溶解 并稀释至刻度。2.1.2. 方法精密度溶液：取异烟肥样品10mg置100ml容量瓶中，精密称定，用水溶解并 稀释至刻度。用此方法配置同一批号的样品溶液6份。2.2 验证程序及结果工作标准品溶液进2针，样品溶液各进2针。记录异烟肌峰面积，计算样品含量。可接受标准：异烟肌含量的RS氏2.0%。样品批号：称样里（mg峰面积含量%RS阴12平均值结论:3 .线性和范围3.1 溶液配制3.1.1. a供试品溶液：取异烟肌50mg置100ml容量瓶中，精密称量，用水溶解并稀释 至刻度，混匀，即得。3.1.2. 线性点溶液：精密移取a供试品溶液5ml、2ml、1ml、分别置10ml容量瓶中，用

7、 水稀释至刻度，得到浓度约为50ug/ml （d供试品溶液）、100ug/ml （c供试品溶液）、 250ug/ml （b供试品溶液）、500ug/ml （a供试品溶液）的线性点溶液，再精密移取 1ml b供试品溶液1ml置100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，得到浓度约为2.5ug/ml （e供试品溶液）。3.2 验证程序及结果按色谱条件分别对线性点溶液进行分析，每个溶液进样1次。以浓度为X轴，主峰峰面积平均值为Y轴，画出线性图，求出回归方程，计算线性相关系数R。可接受标准：R> 0.999项目(X)(X0(X3)X4)(%)线性点溶液浓度（ug/ml）异烟肌峰面积线性范围（ug/ml）

8、线性回归方程相关系数R结论:4 .准确度4.1 溶液配制4.1.1. 对照溶液：取异烟肌10mg置100ml容量瓶中，精密称量，用水溶解并稀释至刻 度，混匀，即得。4.1.2. 准确度溶液：以对照溶液浓度为100%配置80% 100120麻度的准确度溶液。 即分别取同一批异烟肥样品8mg 10mg 12mg至100ml容量瓶中，精密称量，用水 溶解并稀释至刻度。每个浓度的准确度溶液配制3份。4.2 验证程序及结果按照色谱条件分别对对照溶液和准确度溶液进行分析，每个溶液各进2针，按外标法计算准确度溶液中异烟肥含量，计算其回收率。可接受标准：该定量方法的回收率应为 98.0%102.0%。回收率R

9、SDX2.0%。样品批号相应含量称样量(mg峰面积实测量(mg)回收率12平均值80%100%120%结论:5 .耐用性5.1 溶液配制5.1.1. 混合溶液：精密称取10mg异烟酸和10mg异烟册样品置100ml容量瓶中，用水溶 解并稀释至刻度，混匀，即得。5.2 验证过程及结果按下列条件改变方法，原条件溶液和改变色谱条件的顺序进样，计算异烟册的理论塔板数，拖尾因子。计算相对保留时间 RRT®差绝对值。a.改变柱温为23c和27cb.改变流速为 0.9ml/min 和 1.1ml/min 。c.改变0.02mol/l磷酸氢二钠溶液（磷酸调pH至6.0）与甲醇配比为87:13和83:

10、17。d.选用同一填料的两个不同色谱柱比较可接受标准：理论塔板数大于 4000,拖尾因子在0.91.4之间。分离度R> 1.5,相对保留时间RRT偏差绝对值不大于20%条件异烟肌理论塔板数异烟肌拖尾因子原条件a0.9ml/min1.1ml/minb23 c27 cc87:1383:17d色谱柱1色谱柱2条件异烟酸RRT偏差绝对值%原条件a23 c27 cb0.9ml/min1.1ml/minc87:1383:17d色谱柱1色谱柱2结论:验证结论:验证结果见表验证项目可接受标准验证结果判定系统精密度异烟肌的峰面积及保留时 间的RSD%均不大于 2.0%。异烟肌理论塔板数 大于4000。方法精密度RS阴不大于2.0 %线性和范围线性回归系数R