3、1菊花的组织培养(经典)总结

1、菊花的组织培养菊花的组织培养 指植物的离体部分（包括任何器官、指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或组织、细胞或原生质体原生质体），在人工控制的），在人工控制的培养基及环境条件培养基及环境条件（温度及光照）下，得（温度及光照）下，得以生长和以生长和分化分化成完整植株的一种无菌培养成完整植株的一种无菌培养技术。技术。又称：又称：植物离体培养植物离体培养一、一、植物组织培养的概念植物组织培养的概念离体组织离体组织完整植株完整植株人工控制条件人工控制条件离体组织离体组织完整植株完整植株人工控制条件人工控制条件1、离体、离体2、无菌、无菌3、营养物质：、营养物质：4、激素：、激素：5、其他外界条

2、件：、其他外界条件：大量元素大量元素 微量元素微量元素 有机物有机物生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素pHpH值值温度温度光照光照1、概念：、概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。有发育成完整个体的潜能。2、原因：、原因：是生物体的每一个细胞都含有该物是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质都有发育成为完种所特有的全套遗传物质都有发育成为完整个体所必需的全部基因整个体所必需的全部基因植物组织培养原理：植物组织培养原理：植物细胞的全能性植物细胞的全能性植物全能性植物全能性的表达的表达离体的植物器官、离体的植物器官、组织、细胞组织、细胞

3、 胚状体胚状体根、芽根、芽 愈伤组织愈伤组织 人工种子人工种子再生植株再生植株 脱脱分分化化 愈伤组织愈伤组织二、影响植物组织培养的因素：二、影响植物组织培养的因素：1、外植体的选取、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同2、培养基的配制、培养基的配制(MS培养基培养基) 大量元素：大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：微量元素：Fe 、Mn、 B、 Zn、 Mo、 Cu、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生

4、长素、细胞分裂素、赤霉素等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等未开花植物的茎上未开花植物的茎上部新萌生的侧枝部新萌生的侧枝3、不同植物激素使用顺序、不同植物激素使用顺序使用顺序使用顺序 实验结果实验结果 先生长素，先生长素，后细胞分裂素后细胞分裂素 有利于细胞分裂但不分化有利于细胞分裂但不分化 先细胞分裂素，先细胞分裂素，后生长素后生长素 细胞既分裂也分化细胞既分裂也分化 同时使用同时使用 分化频率提高分化频率提高 4、不同植物激素使用量、不同植物激素使用量生长素生长素/ /细胞分裂素比值细胞分裂素比值结果结果 比值高时比值高时 促根分化，促根分化，抑芽形成抑芽形成 比值低时比值低时 促芽分

5、化，促芽分化，抑根形成抑根形成 比值适中比值适中 促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长 思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？5、pH、温度、光照、温度、光照（菊花组培）（菊花组培） pH=5.8 温度控制在温度控制在1822 再分化需要光照再分化需要光照,每日光照每日光照12h6、消毒、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境5.植物组织培养应用植物组织培养应用快速繁殖：快速繁殖： 运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株，而且均来自一单一的个体，遗传性状一致。例如一株葡萄一年繁殖到3万多

6、株，一株兰花一年繁殖到400万株。种苗脱毒种苗脱毒：由于病毒的感染严重影响作物的产量和品质，而利用组织培养技术可以有效地除去植物体内的病毒，得到大量的无病毒种苗。主要的方法是培养植物茎尖分生组织，也可以采用热处理或加入化学试剂的方法达到脱毒的效果。已经取得成功的有马铃薯、草莓、香蕉、葡萄等等。Vi rus el i m i nat i onw hy does t he m eri st em have l ow / no vi rus t i t re? vi rus spreads pri m ari l y t hrough vascul ar syst em -t hi s i s no

7、t devel oped i n t he m eri st em m i t osi s and chrom osom e repl i cat i on com pet e w i t h vi rus repl i cat i on hi gh auxi n i n m eri st em i nhi bi t s vi rus repl i cat i on a vi rus “ i nact i vat i ng” syst em has great est act i vi t y i n m eri st emTobacco m eri st emvi rus-f reet i

8、ssuevi rus part i cl esf ound 远缘杂交：利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种。突变育种：采用组织培养可以直接诱变和筛选出具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状的品种基因工程：基因工程：基因工程主要研究DNA的转导，而基因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株再生 生物制品：生物制品：有些极其昂贵的生物制品，可以用大规模培养植物细胞来直接生产 种质保存：种质保存：繁殖量大，省空间，保存时间长制备制备MS固固体培养基体培养基外植体消毒外植体消毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培四、实验操作四、实验操作 移移 栽栽1、培养基的灭菌（高压

9、蒸汽灭菌）、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）灼烧）4、无菌箱中的培养；、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。在整个操作过程中，是如何来实现在整个操作过程中，是如何来实现无菌无菌环境的？环境的？结果分析与评价结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）是否进行了统计、对照与记录（三）是否进行了统计

10、、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格课题延伸（略）练习练习1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再