常见病毒鉴定分析

1、会计学1常见病毒鉴定分析常见病毒鉴定分析第1页/共112页 第一节 呼吸道病毒 1 第二节2 第五节5肝炎病毒 第六节6 第四节4 第三节3 反转录病毒 疱疹病毒 肠道病毒 朊粒及其他病毒第2页/共112页第3页/共112页第4页/共112页第5页/共112页核衣壳核酸(单股负链RNA) 核蛋白（NP） RNA多聚酶核衣壳包膜基质蛋白（MP）脂蛋白（LP）刺突血凝素（HA）神经氨酸酶（NA）第一节 呼吸道病毒第6页/共112页第一节 呼吸道病毒第7页/共112页第一节 呼吸道病毒第8页/共112页第一节 呼吸道病毒第9页/共112页第一节 呼吸道病毒第10页/共112页第一节 呼吸道病毒第11

2、页/共112页第一节 呼吸道病毒第12页/共112页第一节 呼吸道病毒第13页/共112页第一节 呼吸道病毒第14页/共112页第一节 呼吸道病毒第15页/共112页第一节 呼吸道病毒第16页/共112页第一节 呼吸道病毒第17页/共112页第一节 呼吸道病毒第18页/共112页第一节 呼吸道病毒第19页/共112页第一节 呼吸道病毒第20页/共112页第一节 呼吸道病毒第21页/共112页第一节 呼吸道病毒第22页/共112页病毒名称形态结构所致疾病SARS冠状病毒球形、冠状，有包膜，单正链RNA发热、干咳、胸闷、气短，急性呼吸窘迫综合症、休克、多器官功能障碍综合症等麻疹病毒球形、衣壳呈螺旋

3、对称型，有包膜，不分节段的单股负链RNA发热、咳嗽、流涕、眼结膜充血、皮肤出现红色斑丘疹腮腺炎病毒球形，核心为单股负链RNA，衣壳呈螺旋对称，有包膜一侧或双侧腮腺肿大，伴有疼痛、发热第一节 呼吸道病毒第23页/共112页病毒名称形态结构所致疾病腺病毒球形、双链DNA、核衣壳20面体对称、无包膜咽炎、扁桃体炎、肺炎、流行性眼结膜炎、急性出血性膀胱炎、胃肠炎等副流感病毒球形、单负链RNA、核衣壳螺旋对称、有包膜小儿气管炎、支气管炎、肺炎、普通感冒等呼吸道合胞病毒球形、单负链RNA、核衣壳螺旋对称、有包膜婴幼儿喘息性支气管炎、肺炎、成人普通感冒等鼻病毒球形、单正链RNA、核衣壳20面体对称、无包膜婴

4、幼儿支气管炎、支气管肺炎、成人普通感冒等第一节 呼吸道病毒第24页/共112页第25页/共112页第26页/共112页第二节 肝炎病毒第27页/共112页第二节 肝炎病毒第28页/共112页第二节 肝炎病毒第29页/共112页第二节 肝炎病毒第30页/共112页第二节 肝炎病毒第31页/共112页第二节 肝炎病毒第32页/共112页小球形颗粒:直径22nm；管形颗粒:直径22nm，长度在50700nm之间；大球形颗粒:即Dane颗粒，直径42nm。第二节 肝炎病毒第33页/共112页第二节 肝炎病毒即完整的HBV颗粒，也称Dane颗粒，直径约42nm，分为包膜和核心两部分。包膜含HBsAg、糖

5、蛋白和细胞脂肪，核心含核心蛋白（即乙型肝炎核心抗原，HBcAg）、环状双股HBV-DNA和HBV-DNA多聚酶。第34页/共112页第二节 肝炎病毒小球形颗粒：直径约22nm。管状颗粒：直径约22nm，长度100500nm。这两种颗粒均由与病毒包膜相同的脂蛋白（即乙型肝炎表面抗原，HBsAg）组成，不含核酸，一般无传染性。第35页/共112页第二节 肝炎病毒第36页/共112页第二节 肝炎病毒第37页/共112页第二节 肝炎病毒第38页/共112页第二节 肝炎病毒第39页/共112页第二节 肝炎病毒第40页/共112页第二节 肝炎病毒第41页/共112页第二节 肝炎病毒5.抵抗力具有顽强的抵抗

6、力：它对低温、干燥、紫外线、对一般浓度的化学消毒剂，都能够耐受；常用的消毒剂，如酒精、来苏儿、碘酒等对它根本不起作用，不能杀死它们，所以家里有了乙肝病人就不要用这些消毒剂来消毒，但是HBV怕高热，如加热到100度，只要10分钟就可使其失去传染性。HBV对0.5%过氧乙酸非常敏感，5%次氯酸钠也可用来杀灭HBV。第42页/共112页第二节 肝炎病毒第43页/共112页第二节 肝炎病毒第44页/共112页第二节 肝炎病毒1.形态结构 球形，单正链RNA 有包膜 2.抵抗力：对有机溶剂敏感1.标本：血清或血浆2.鉴定：检测病毒抗体：用ELISA法检测抗-HCV检测病毒RNA：因HCV在血液中含量很少

7、，常用敏感的RT-PCR法（二）微生物学检验第45页/共112页第二节 肝炎病毒第46页/共112页HDV结构模式图第二节 肝炎病毒第47页/共112页第二节 肝炎病毒第48页/共112页第二节 肝炎病毒第49页/共112页第二节 肝炎病毒第50页/共112页第二节 肝炎病毒第51页/共112页第二节 肝炎病毒第52页/共112页第二节 肝炎病毒第53页/共112页病毒名称形态结构所致疾病HAV球形、线性单正链RNA、核衣壳20面体对称、无包膜急性甲型肝炎HBV球形、双链环状DNA、层衣壳急性、慢性乙型肝炎，并与肝硬化及肝癌相关HCV球形、单正链RNA、有包膜急性或慢性丙型肝炎HDV球形、单链

8、环状RNA、有包膜加重乙型肝炎HEV球形、单正链RNA、无包膜戊型肝炎第二节 肝炎病毒第54页/共112页人类嗜T细胞病毒人类免疫缺陷病毒（HIV） HIV-I型和HIV-II型获得性免疫缺陷综合症（AIDS）第55页/共112页 中国AIDS流行现状截至2014年2月28日，我国累计报告报告的HIV/AIDS 587182例，死亡138956例。现存活艾滋病病毒感染者271624例，艾滋病病人176602例。我国艾滋病疫情总体上保持低流行态势，但依然呈上升趋势，幅度较以前有所减缓。据统计，自2005年至今，性传播比例持续攀升。2014年3月新发现的HIV/AIDS中，异性性传播4515例（6

9、9.8%），同性性传播1260例（19.5%），注射毒品传播430例（6.6%），母婴传播36例（0.6%），性接触加注射毒品传播13例（0.2%），既往输血及使用血制品传播11例（0.2%），既往采血浆传播5例（0.1%），传播途径不详203例（3.1%）。50岁以上群体和学生群体所占比例上升，这也是我国HIV传播的新特点 知识拓展第三节 反转录病毒第56页/共112页第三节 反转录病毒第57页/共112页第三节 反转录病毒第58页/共112页HIV-1P24-可用于“窗口期”及HIV-1抗体阳性的母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断第三节 反转录病毒第59页/共112页（2）血清抗体检测 分为筛

10、查和确认试验免疫印迹法-是HIV血清学检测中最常用的确证性试验筛查阳性者必须进行确认试验第三节 反转录病毒第60页/共112页（3）测定病毒核酸临床常用于测定感染者体内游离病毒的RNA含量即病毒载量（4）CD4+T细胞计数 应用流式细胞仪（FCM）进行CD4+T细胞记数及占淋巴细胞的百分率（正常情况下与CD8+T细胞比例为2:1）CD4+T细胞数: 0.5109/L时，为抗反转录病毒药物治疗的指征0.2109/L时，应立刻进行卡氏肺孢子菌的预防治疗 0.1109/L时，易感染巨细胞病毒和结核分枝杆菌（5）耐药性检测检测患者标本中HIV基因序列，监控变异的发生，间接估计药物耐药情况。第三节 反转

11、录病毒第61页/共112页（三）临床意义HIV无症状携带者和AIDS患者传播途径性接触、输血或血制品、母-婴传播传染源病毒选择性侵犯CD4+细胞，细胞变性、坏死，导致以CD4+细胞缺陷为主的严重免疫缺陷1致病机制第三节 反转录病毒第62页/共112页（1）急性期：（2）无症状潜伏期：（3）AIDS期:感染后26周内一般为810年通常难以检测到HIV抗体血清抗体阳性，具传染性。持续发热、盗汗、失重、不明原因的慢性腹泻、湿疹、银屑病、脂溢性皮炎、皮炎、疱疹-带状疱疹、口腔念珠菌病、黏膜白斑病等机会感染和肿瘤2临床特征第三节 反转录病毒第63页/共112页机会性感染 带状疱疹 毛囊炎第三节 反转录病

12、毒第64页/共112页在AIDS患者中念珠菌属感染是很常见的, 象鹅口疮（上图）尽管不危及生命但十分讨厌. 左图为念珠菌性肺炎.机会性感染第三节 反转录病毒第65页/共112页恶性肿瘤图为AIDS患者常出现的Kaposi肉瘤第三节 反转录病毒第66页/共112页第三节 反转录病毒第67页/共112页患艾滋病的孩子 第三节 反转录病毒第68页/共112页二、人类嗜T细胞病毒 引起T细胞白血病和毛细胞白血病人类嗜T细胞病毒(HTLV)（一）生物学特性u电镜下HTLV呈球形，直径约100nm，中心为病毒的RNA和反转录酶u最外层系病毒的包膜，其表面嵌有gp120，能与细胞表面的CD4分子结合而介导病

13、毒的感染。包膜内有病毒的衣壳，含有P18和P24两种结构蛋白第三节 反转录病毒第69页/共112页（二）微生物学检查*电镜观察*免疫血清或单克隆抗体鉴定*血液中HTLV-I抗体的存在即可诊断为该病毒感染；而血液中异常淋巴细胞数量的大量增生，同时证实这些淋巴细胞中有HTLV-IDNA，则可支持成人T淋巴细胞白血病的诊断第三节 反转录病毒第70页/共112页HTLV-I可经输血、注射或性接触等传播，也可通过胎盘、产道或哺乳等途径垂直传播。（三）临床意义成人T淋巴细胞白血病主要采取化疗，但对HTLV-I的抵抗效果不佳；AZT和其他反转录酶抑制剂能够有效的对抗细胞培养中的HTLV-II。第三节 反转录

14、病毒第71页/共112页 第四节 疱疹病毒疱疹病毒（Herpesviruses）是一群中等大小的有包膜的双股DNA病毒，有110个以上成员，其中与人感染有关的人疱疹病毒已发现有8种常用名单纯疱疹病毒1型巨细胞病毒单纯疱疹病毒2型人类疱疹病毒6型水痘带状疱疹病毒人类疱疹病毒7型EB病毒人类疱疹病毒8型第72页/共112页球形，直径约为120300nm。核心为双链线性DNA，衣壳呈20面体，有包膜感染类型感染类型增殖感染破坏宿主细胞潜伏宿主细胞部分整合到宿主细胞DNA中经胎盘感染胎儿，先天畸形对脂溶剂敏感，临床采集标本不应与脂溶剂接触。最适保存温度为-196（液氮），在-70病毒感性可保存数月，4

15、可保存数天，-20易破坏病毒包膜，短期保存即完全灭活疱疹病毒共同的特： 第四节 疱疹病毒第73页/共112页一、单纯疱疹病毒（HSV）HSV-1 HSV-2HSV-2型则与生殖器疱疹和新生儿感染有关 主要引起口唇和角膜疱疹（一）生物学特性基因组DNA有40%左右的序列同源 HSV的增殖周期短，常潜伏于神经节中引起潜伏感染。抵抗力较弱，易被脂溶剂灭活。温度高于56 30分钟失去感染性 第四节 疱疹病毒第74页/共112页（二）微生物学检验1标本 采集水疱液、唾液、脑脊液、角膜刮取物、阴道拭子等标本，经常规处理后接种或置低温冰箱保存2分离培养鉴定 常用原代兔肾、人胚肺、人胚肾细胞或地鼠肾等传代细胞

16、分离培养病毒。在鸡胚绒毛膜上，HSV-2形成大空斑，而HSV-1形成针尖大小的空斑。常用实验动物有家兔、豚鼠、小鼠等3血清学检测 中和试验、免疫荧光等鉴定也可分离病毒DNA，根据DNA酶切图谱差异鉴定型别 第四节 疱疹病毒第75页/共112页（三）临床意义直接接触传染或被唾液污染的餐具 间接传染HSV感染一般分为原发感染和复发感染。原发感染好发于婴幼儿或儿童，多为隐性感染，并不表现出症状HSV-2侵及躯体腰以下部位，主要是生殖器，它是引起性病的主要病原体之一HSV-1主要侵犯躯体腰以上部位，可引起口腔、唇、眼、脑及腰以上部位感染 第四节 疱疹病毒第76页/共112页单纯疱疹病毒感染-多核细胞

17、第四节 疱疹病毒第77页/共112页二、水痘-带状疱疹病毒（VSV）（一）生物学特性 水痘-带状疱疹病毒（VZV） 初次感染再次感染水痘 （多见于儿童） 带状疱疹（多成人和老人） 第四节 疱疹病毒第78页/共112页（二）微生物学检验水痘一带状疱疹的临床症状典型，一般不需作微生物学诊断。必要时可检查嗜酸性核内包涵体和多核巨细胞细胞内抗原（三）临床意义 传染源： 主要是患者，病毒经呼吸道、口、咽、结膜、皮肤等处侵入人体1人是水痘-带状疱疹病毒的唯一自然宿主2带状疱疹 是潜伏在体内的VZV复发感染 第四节 疱疹病毒第79页/共112页三、人巨细胞病毒（HCMV）和EB病毒一般是宫内感染侵犯胎儿神经

18、系统、肝、肾等器官，人巨细胞病毒（HCMV） EB病毒（EBV）与多种人类疾病相关如传染性单核细胞增多症、Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤等鼻咽癌和EB病毒关系密切，血清学检查有高效价EB病毒抗原抗体可采集各种体液、分泌物等样本进行病毒分离、抗原或核酸检测 第四节 疱疹病毒第80页/共112页第81页/共112页第五节 肠道病毒第82页/共112页较强较强第五节 肠道病毒第83页/共112页第五节 肠道病毒第84页/共112页第五节 肠道病毒第85页/共112页电镜下的轮状病毒第五节 肠道病毒第86页/共112页第五节 肠道病毒第87页/共112页第五节 肠道病毒第88页/共112页

19、第五节 肠道病毒第89页/共112页第五节 肠道病毒第90页/共112页与脊髓灰质炎病毒生物性状类似；为球形无包膜单股正链RNA病毒；柯萨奇病毒在多种组织细胞中生长并产生CPE；埃可病毒在猴肾细胞中增殖良好。柯萨奇病毒血凝抑制试验鉴定；埃可病毒中和试验鉴定第五节 肠道病毒第91页/共112页第五节 肠道病毒第92页/共112页第六节 朊粒及其他病毒PrPscPrPc氨基酸序列完全一致空间构象对蛋白酶K抗性致病性有差异强第93页/共112页第六节 朊粒及其他病毒第94页/共112页神经病理学检查免疫学检查基因分析法第六节 朊粒及其他病毒第95页/共112页第六节 朊粒及其他病毒第96页/共112

20、页第六节 朊粒及其他病毒第97页/共112页直接镜检病毒分离免疫荧光检测抗原分子生物学技术检测第六节 朊粒及其他病毒第98页/共112页第六节 朊粒及其他病毒第99页/共112页分离培养血清学检查分子生物学技术检测第六节 朊粒及其他病毒第100页/共112页病毒分离培养血清学检查核酸检测第六节 朊粒及其他病毒第101页/共112页小鼠最为敏感，任何途径接种均能感染病毒检测方法与乙型脑炎病毒相似森林硬蜱为主要传播媒介及储存宿主第六节 朊粒及其他病毒第102页/共112页 球形或卵圆形，RNA、有包膜，对酸、热抵抗力弱 常用免疫荧光法、免疫酶染色法、分子生物学技术检测 带毒动物为传染源，以鼠传播为主，以高热、出血和