ezh2在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

1、ezh2在食管鳞癌组织中的表达及临床意义摘要：目的研究ezh2在食管鳞癌组织中的表达情况，探讨其与食管鳞癌临床 病理特征的关系。方法应用免疫组化envision二步法检测48例食管鳞癌组织 中ezh2和mel-18的表达情况。结果 食管鳞癌组织及相应癌旁组织中ezh2 蛋白阳性表达率分别为79.2% ( 38/48 )和16.6% ( 8/48 ), mel-18蛋白阳性表达 率分别为18.7% (9/48 )和83.3% (40/48),两组间相比差异均具有统计学意义(p <0.05),食管鳞癌组织中ezh2蛋白的表达与患者的性别、年龄及肿瘤大小无关 (p>0.05 )，而与肿瘤

2、的淋巴结转移及分化程度有关(p <0.05 ), ezh2和mel-18 蛋白的表达呈显著负关联(r二0.674, p <0.05)。结论 从蛋白水平证明ezh2 的异常表达可促进食管癌的发生发展，并可能为食管癌的早期诊断提供新的手 段。关键词：食管癌；ezh2;免疫组化染色expression of ezh2 in esophageal squamous cell carcinoma tissue and its clinical significanceabstract aim： to investigate the expressions of ezh2 proteins i

3、n esophageal squamous cell carcinoma(escc) tissue, and analyze the clinicopathological characteristics of both proteins in escc methods the expressions of ezh2 and mel-18 proteins were detected by immunohistochemistry in 48 escc tissue and 48 normal esophageal mucosa specimens. results the positive

4、expression rate of ezh2 in escc and normal esophageal mucosa tissue was792% and 16.6 %，and that of mel-18 was 18.7% and 83.3%, and there were significant differences(p<0.05). the expressions of ezh2 proteins were associated with tumor lymph node metastasis and differentiation of esophageal carcin

5、oma(p<0.05), but not with age, sex, and tumor size a negative association was noted between the expression of ezh2 and that of mel-18 in escc (r=-0.674, p <0.05) conclusion： the abnormal expressions of ezh2 may play an important role in the carcinogenesis and development of escc, which provide

6、s some new ways on early diagnosis for escckey words: esophageal squamous cell carcinoma; ezh2;immunohistochemistry食管癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，是严重危害人类生命和健康的疾 病，发病率近年来有上升的趋势山。食管癌的病因和发病机制目前仍不明确，包 括一些癌基因、抑癌基因、细胞凋亡相关基因的异常表达等。ezh2和melj8 基因属于多梳基因家族(polycoinb of genes, pcg), pcg在造血干细胞、神经干细 胞及肿瘤干细胞的增殖、分化和肿瘤的发生中都发挥着关键

7、的作用。本研究采 用免疫组织化学法检测ezh2和mel-18蛋白在48例食管鳞癌组织及癌旁组织 中的表达，探讨两者在食管鳞癌发生发展中的作用。1材料和方法1.1材料 本研究病理资料取自我院2008-2010年间住院手术的食管鳞癌患者， 每例手术标本分别在食管鳞癌组织及对应癌旁5cm组织取材，全部病例术前均 未做化疗、放疗；其中男30例，女18例，年龄40-70(平均65.3)岁，高、中、 低分化分别为12、23、13例；有无区域淋巴结转移分别为36、12例。所有病例 均经病理确诊。sp试剂盒及dab显色剂由福州迈新公司提供，兔抗人ezh2 多克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司，兔抗人me

8、l-18单抗购自santa cruz biotechnology 公司。1.2免疫组织化学染色 标本经4%中性甲醛固定，石蜡包埋，切片厚34yn), 免疫组织化学采用envision二步法。抗原修复采用微波炉热修复，其余染色步 骤按试剂盒说明进行，dab显色，苏木精复染。阳性对照用已知阳性片，阴性 对照用pbs代替一抗。结果判断：染色阳性信号呈棕黄色颗料，均定位于细胞 核，判定方法为在高倍镜下观察至少10个有代表性的高倍视野，肿瘤细胞中有 10%以上阳性细胞被判定为表达阳性。1.3统计学处理 实验数据采用spss13.0统计分析软件分析，食管鳞癌临床病 理参数与ezh2和melj8蛋白表达率之

9、间的比较采用咒2检验，采用列联系数 分析食管癌组织中两种蛋白表达的关系，p<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1食管鳞癌及癌旁正常黏膜组织中ezh2和melj8蛋白的表达免疫组织化学结果显示，在食管鳞癌中ezh2蛋白呈高表达，癌旁组织中无表 达或低表达，mel-18蛋白在食管鳞癌中无表达或低表达，癌旁组织中高表达(见图1)。食管鳞癌组织及相应癌旁组织中ezh2蛋白阳性表达率分别为79.2%(38/48 )和 16.6%(8/48), mel-18 蛋白阳性表达率分别为 18.7%(9/48)和 83.3%(40/48 ),两组间相比差异均具有统计学意义(p<0.05),图1:

10、a:ezh2蛋白在食管鳞癌组织中的免疫组化染色(x200)b:mel-18蛋白在食管鳞癌组织中的免疫组化染色(x200)fig 1 immunohistochcmixal staining showing ezh2 and mel-18 protein expression inescc tissues(x200)2.2 ezh2蛋白表达率与食管鳞癌的临床病理特征关系ezh2蛋白在食管鳞癌组织的表达与患者的性别、年龄及肿瘤大小无关(p>0.05),而与肿瘤的淋巴结转移及分化程度有关(p<0.05),见表1。表1食管鳞癌组织中ezh2蛋白的表达与临床病理特征的关系tab 1 rela

11、tion between ezh1 protein expression and clinical characteristics ofescc(n,%)clinicalexpression of ezh2 proteinpathologic characteristicsnpositivenegativepositive rate(%)psexmale30246800.854female1814477.8age (year)<6035287800.816>601310376.9size<5cm3830878.90.942>5cm108280lymph node met

12、astasisno1267500.002yes3632488.8degree of differentiationhigh125741.6middle2320386.90.001low131301002.3食管癌中ezh2和mel-18蛋白表达的关系48例食管癌组织中ezh2蛋白阳性表达率为79.2%, mel-18蛋白在48例食管 癌中阳性表达率为18.7%, ezh2蛋白表达与mel-18蛋白的表达呈显著负关联 (r二0.674, p <0.05 )3.讨论ezh2和mel-18基因都属于多梳基因家族中的一员，ezh2基因定位于人 类染色体7q35,参与转录抑制，调控细胞的生长增殖和

13、细胞周期。大量研究表 明其高表达可促进癌细胞增殖，与恶性肿瘤的发生密切相关，曹相玫等研究发 现ezh2在原发性肝癌组织中的表达率显著高于正常肝组织，随着原发性肝癌分 化程度的降低，ezh2阳性表达的强度和范围明显增强。也有研究发现ezh2在 胃癌中的表达水平高于正常组织，并认ezh2基因可以促进胃癌的发生发展。 国外的研究则表明ezh2高表达的结直肠癌患者预后比低表达患者差5omel-18 基因定位于染色质17ql2,与其他多梳基因家族成员一样，mel-18也参与了胚 胎发育，干细胞和肿瘤细胞的增殖、自我更新和分化过程。目前认为mel-18是 一种新的抑癌基因，可能通过抑制cyclin d2活

14、性，阻滞细胞由g,向s期转化, 导致dna合成受阻，进而抑制肿瘤的发生。田永等研究发现，mel-18在 大肠癌组织中的阳性表达率低于癌旁正常大肠黏膜组织，其阳性表达率随肿瘤浸 润程度加深、淋巴结转移及分化程度的降低而下降，甚至出现表达缺失，提示了 mel-18可能在大肠癌的发生发展中发挥了抑制作用，也有研究提示mel-18阴 性表达的前列腺癌患者生存期更差冈。我们的研究发现48例食管鳞癌组织中有38例ezh2阳性表达，阳性率为 79.2% ;而癌旁组织中仅8例表达，阳性率为16.6%,提示了在食管癌中存在 ezh2基因表达的增高，从蛋白水平证明了 ezh2基因与食管癌的发生有关，同 时我们发现

15、癌旁组织中mel-18有40例表达，阳性率为83.3%,而48例食管鳞 癌组织中仅有9例mel-18阳性表达，阳性率为18.7%，这也进一步提示mel-18 基因具备抑癌基因功能。我们的研究结果还提示ezh2阳性表达率与食管鳞癌患者年龄、性别、肿瘤 大小无关，与组织分化程度有关，组织分化程度越低，ezh2阳性表达率越高， 说明检测其蛋白表达对判断食管癌的恶性分化程度有一定意义。同时伴有淋巴结 转移的患者，阳性表达率也增高，这表明ezh2蛋白的高表达促进食管癌淋巴结 转移，预示着较差的预后，这与王浩然等刃研究结果也是一致的。本研究还发现 ezh2与mel-18蛋白在食管癌组织中的表达呈负关联，推

16、测ezh2可能通过某 种调控机制或信号传导通路抑制mel-18的表达，从而参与食管癌的进展。总之，本实验表明ezh2可能成为提示食管癌分化程度和转移能力的分子标 志物，对食管癌的早期诊断及治疗靶点的选择具有一定参考价值。参考文献1) 明帮春，骆志国，胡江等，放疗联合紫杉醇奈达钳同期化疗治疗食管癌 的临床分析,现代肿瘤医学，2013,21 (3 ): 559-5622) 李辉，刘媛，龚燕华.肿瘤干细胞与多梳家族，武警医学院学报， 2010,19(9):746-7523) 曹相玫，王映梅，谷雨等，ezh2在原发性肝癌中的表达及与分化和增 殖的关系 现代肿瘤医学,2013, 21 (3 ): 453

17、-4564) he lj, cai my, xu gl, et al. prognostic significance of overexpression of ezh2 and h3k27me3 proteins in gastric cance匚 asianpac j cancer prev, 2012, 13(7):3173-3178.5) mimofi k, ogawa k, okamoto m，et al. clinical significance of enhancer of zeste homolog 2 expression in colorectal cancer cases. eur j surg oncol. 2005, 31: 376-3806) chun t, rho s b, byun h j> et al. the polycomb groupgene product mel-18 interacts with cyclin d2 and modulates its activity. febs lett, 2005, 579: 52755280.7) 田永，邹艳芳，徐峰，大肠癌组织中mina53和mel