钇离子对氟喹诺酮药物荧光增强效应的研究及应用

1、主要内容u绪论绪论u实验部分实验部分 钇离子对氟喹诺酮类药物的荧光增强效应钇离子对氟喹诺酮类药物的荧光增强效应 钇钇- -铕铕- -氟喹诺酮类药物配合物荧光性氟喹诺酮类药物配合物荧光性初探初探u结论结论u致谢致谢兽药残留问题荧光增强机理不同荧光增强机理不同 稀土离子稀土离子+ +氟喹诺酮类药物氟喹诺酮类药物 （EuEu3+3+,Tb,Tb3+3+等）等）稀土离子特征荧光稀土离子特征荧光 稀土离子稀土离子+ +氟喹诺酮类药物氟喹诺酮类药物 （LaLa3+3+，Y Y3+3+等）等）增强氟喹诺酮的荧光增强氟喹诺酮的荧光 稀土离子共发光效应稀土离子共发光效应 表面活性剂增敏表面活性剂增敏稀土离子与氟

2、喹诺酮类药物配稀土离子与氟喹诺酮类药物配合物的荧光性质合物的荧光性质立题思想立题思想稀土离子稀土离子Y Y增强氟喹诺酮类药物的荧光性增强氟喹诺酮类药物的荧光性检测氟喹诺酮类药物检测氟喹诺酮类药物FNNNCOOHO以下分别为环丙沙星，培氟沙星，依诺沙星的结构图FNNH3CNOCOOHC2H5.CH3SO3HNFNNOCOOHCH2CH3仪器与设备仪器与设备荧光分光光度计荧光分光光度计（上海三科仪器有限公司（上海三科仪器有限公司970CRT970CRT型）型）Cary 100 Cary 100 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计（美国瓦里安公司）（美国瓦里安公司）920 920 稳态荧光分

3、光光度计稳态荧光分光光度计（英国（英国EdinburghEdinburgh公司）公司）pHpH计计 (PHS-3C,(PHS-3C,上海康仪有限责任公司上海康仪有限责任公司) )三氧化二钇标准品三氧化二钇标准品 三氧化二铕标准品三氧化二铕标准品 环丙沙星环丙沙星 培氟沙星培氟沙星依诺沙星依诺沙星实验部分实验部分钇离子对氟喹诺酮类药物的荧光增强效应钇离子对氟喹诺酮类药物的荧光增强效应材料与试剂材料与试剂荧光光谱检测荧光光谱检测5 ml 1.0 10-4 mol/L 钇离子溶液1 ml 1.0 10-5 mol/L 环丙沙星/培氟沙星/依诺沙星2 ml 0.2 mol/L Tris-HC1缓冲溶液

4、+加二次蒸馏水定容至10ml，放置15分钟，用荧光分光光度计测定荧光强度 实验方法实验方法 结果与讨论结果与讨论 紫外可见吸收光谱紫外可见吸收光谱2002503003504004505000.00.10.20.30.4 Absorbance (a.u.)Wavelength (nm)1.0 10-5 mol/L环丙沙星环丙沙星的紫外的紫外可见吸收光谱可见吸收光谱1.0 10-5 mol/L培氟沙星培氟沙星的紫外的紫外可见吸收光谱可见吸收光谱1.0 10-5 mol/L依诺沙星依诺沙星的紫外的紫外可见吸收光谱可见吸收光谱2002503003504004505000.000.050.100.150

5、.200.250.300.35 Absorbance (a.u.)Wavelength (nm)270 nm319nm274nm313nm200250300350400450500550600-0.050.000.050.100.150.200.250.300.35 Absorbance (a.u.)Wavelength (nm)266nm338nm荧光光谱荧光光谱3 5 04 0 04 5 05 0 05 5 001 0 0 0 02 0 0 0 03 0 0 0 04 0 0 0 05 0 0 0 06 0 0 0 07 0 0 0 0 Fluorescence IntensityW a

6、ve le n g th (n m ) C P L X C P L X -Y3+环丙沙星环丙沙星加入钇离子前后的荧光光谱图加入钇离子前后的荧光光谱图 培氟沙星培氟沙星加入钇离子前后的荧光光谱图加入钇离子前后的荧光光谱图 3003504004505005500100002000030000400005000060000 Fluorescence IntensityWavelength (nm) ENX ENX-Y3+依诺沙星依诺沙星加入钇离子前后的荧光光谱图加入钇离子前后的荧光光谱图 实验条件：实验条件：5.05.01010-5 -5 mol/L mol/L钇离子溶液，钇离子溶液，1ml 1.0

7、 1ml 1.0 1010-6 -6 mol/L mol/L氟喹诺酮类药物，氟喹诺酮类药物，2ml 0.2 mol/L Tris-HC12ml 0.2 mol/L Tris-HC1缓冲溶液缓冲溶液350400450500550020000400006000080000100000 Fluorescence IntensityWavelength (nm) PEFX PEFX-Y3+缓冲溶液对体系的影响缓冲溶液对体系的影响不同缓冲溶液对Y3+-培氟沙星体系荧光强度的影响实验条件：实验条件：5.05.01010-5 -5 mol/L mol/L钇离子溶液，钇离子溶液，1ml 1.0 1ml 1.0

8、 1010-6 -6 mol/L mol/L氟喹诺酮类药，氟喹诺酮类药，2ml 2ml 缓冲溶液缓冲溶液NH4Ac-HAc Tris-HCL HAc-NaAc NH4CL-NH3NaH2PO4-NaOHNaB4O7-HCLpHpH值对体系的影响值对体系的影响pH值对Y Y3+3+- -环丙沙星环丙沙星体系荧光强度的影响 pH=5.0pH=5.0pH=5.5pH值对Y Y3+3+- -培氟沙星培氟沙星体系荧光强度的影响 pH值对Y Y3+3+- -依诺沙星依诺沙星体系荧光强度的影响 实验条件：实验条件：5.05.01010-5 -5 mol/L mol/L钇离子溶液，钇离子溶液，1 ml 1.0

9、 1 ml 1.0 1010-6 -6 mol/L mol/L氟喹诺酮类药物，氟喹诺酮类药物， 2 ml 0.2 mol/L Tris-HC12 ml 0.2 mol/L Tris-HC1缓冲溶液缓冲溶液 Y Y3+3+浓度对体系的影响浓度对体系的影响（以以培氟沙星培氟沙星为例）为例） 钇离子钇离子对培氟沙星荧光强度的影响对培氟沙星荧光强度的影响实验条件：实验条件：1 ml 1.0 1 ml 1.0 1010-6 -6 mol/L mol/L培氟沙星溶液，培氟沙星溶液，2 ml 0.2 mol/L Tris-HC12 ml 0.2 mol/L Tris-HC1缓冲溶液缓冲溶液干扰离子干扰离子的

10、影响的影响 与体系与体系稳定性稳定性试验试验 以钇以钇- -培氟沙星为例，加入的干扰物质的相对荧光强度培氟沙星为例，加入的干扰物质的相对荧光强度在在5%5%范围内进行实验，结果表明实验结果表明范围内进行实验，结果表明实验结果表明100100倍的倍的K K+ +、NaNa+ +、MgMg2+2+、CaCa2+2+;100;100倍的倍的ZnZn2+2+、FeFe3+3+;10;10倍的倍的NiNi2+2+、MnMn2+2+、PbPb2+2+对体系均无干扰。对体系均无干扰。 体系在配位后即刻产生荧光，随着时间的增加荧光强体系在配位后即刻产生荧光，随着时间的增加荧光强度有微弱的增强，在度有微弱的增强

11、，在1515分钟后荧光强度达到最大值，分钟后荧光强度达到最大值，之后保持稳定，同时可在之后保持稳定，同时可在2 2天内保持稳定。天内保持稳定。分析应用分析应用 培氟沙星在浓度范围为培氟沙星在浓度范围为1.0 10-6 mol/L-20.010-6 mol/L时，呈现很好的线性关系时，呈现很好的线性关系 检出限为检出限为8.510-8 mol/L 样品测定样品测定 线性方程为线性方程为y = 20.285x - 23.152， 测定结果准确度高且灵敏度高。测定结果准确度高且灵敏度高。 工作曲线及检出限工作曲线及检出限 机理的初步探讨 La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等离子在与氟喹诺酮类药物药

12、物结合后，由于其结构稳定，不能产生能量转移而增强稀土离子的特征峰。而当其m1电子能级在配合物的S1能级之上时，这些稀土离子相当于一个惰性原子，与氟喹诺酮类药物形成一个螯合物，并使配位体转变为刚性平面结构或加强了其刚性，使原来不发荧光或弱荧光的配位体转变为发强荧光的物质。讨讨 论论 本文对稀土离子钇对氟喹诺酮类药物的荧光增强效应进行了研究，对各种影响因素进行了条件优化，并对机理进行了初步探讨，建立了利用钇增强氟喹诺酮药物荧光检测该类药物的新方法。该方法具有操作简单，检测快速且灵敏度高的特点，干扰少，稳定性好，若与分离技术相结合，在食品中氟喹诺酮类药物残留的检测方面具有良好的应用前景。钇钇- -铕

13、铕- -氟喹诺酮类药物配合物氟喹诺酮类药物配合物荧光性初探荧光性初探v实验材料，仪器及溶液：v实验方法：v优化实验条件： pH值及缓冲溶液的影响值及缓冲溶液的影响 钇离子的影响钇离子的影响 表面活性剂的影响表面活性剂的影响实验结果与讨论依诺沙星，铕依诺沙星，铕- -依诺沙星依诺沙星的荧光发射光谱图的荧光发射光谱图 依诺沙星，铕依诺沙星，铕- -依诺沙星，依诺沙星，铕铕- -钇钇- -依诺沙星的荧光发射光谱图依诺沙星的荧光发射光谱图 实验结果表明当铕离子与依诺沙星形成配合物时发生能量转移，实验结果表明当铕离子与依诺沙星形成配合物时发生能量转移，依诺沙星的荧光强度减弱，同时铕的荧光强度增强。但加入钇依诺沙星的荧光强度减弱，同时铕的荧光强度增强。但加入钇之后，铕的特征峰没有荧光增强效应，只是增强了依诺沙星的之后，铕的特征峰没有荧光增强效应，只是增强了依诺沙星的荧光强度荧光强度绿线：依诺沙星依诺沙星黄线：铕-依诺沙星依诺沙星红线：依诺沙星依诺沙星黄线：铕黄线：铕- -依诺沙星依诺沙星绿线：铕绿线：铕- -钇钇- -依诺沙星依诺沙星实验结果与讨论 在表面活性剂的影响试验中，Triton X- 100对体系无增敏作用，CTMA，SDBS和SDS则有不同程度的增敏作用，其中以SDS效果最好。 说明在实验条件下，钇离子只能微弱的增强铕