选修一生物技术实践资料含练习版

1、选修一生物技术实践学习资料一微生物的培养和利用基本概念培养基：配制出来的供微生物生长繁殖的营养基质。一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐等。还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。分液体培养基、固体培养基等。选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。消毒：指使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。方法：煮沸消毒法；利用化学药剂消毒，如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等灭菌：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灼烧灭菌：如将微生物接

2、种工具在酒精灯上充分燃烧层灼烧干热灭菌：160170加热12h高压蒸汽灭菌：100 以上，100kPa，1530min无菌技术：1对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；2将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；3为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；4实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。筛选菌株：人为地提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。例如：从7080的热泉中筛选出水生耐热细菌Taq统计菌落数目：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一

3、个活菌。一般选择菌落数在30300的平板进行计数。（一）微生物的实验室培养实验目的1了解有关培养基的基础知识。2学习无菌技术的操作。3学习微生物的实验室培养方法。实验原理1微生物能在适宜的温度下，在培养基上传代生长。2无菌技术是获得纯净的培养物和防止外来杂菌入侵的关键。实验仪器与用具高压灭菌锅、恒温水浴锅、恒温培养箱、超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的涂布器、酒精棉球、接种环、电子天平、称量纸、药匙、量筒、烧杯、培养皿、锥形瓶。实验材料与试剂牛肉膏、琼脂粉、NaCl、蛋白胨、大肠杆菌菌种。方法步骤配制培养基在电子天平上称量牛肉膏0.5g，将牛肉膏连同称量纸一同放入250mL的锥形瓶中，再

4、依次加入已经称好的蛋白胨1g 、NaCl 0.5g、琼脂粉2 g，最后加入100 mL蒸馏水。将锥形瓶放在水浴锅中加热、搅拌，使上述各种成分溶解，待完全溶解后挑出称量纸。将溶解好的固体培养基加上封口膜备用。如需配制牛肉汤，则无需加入琼脂粉。培养基和实验用具灭菌在灭菌锅中加入适量的水后，放入包好的培养皿和装有培养基的锥形瓶，之后在121、0.1兆帕压力下灭菌20min。冷却后取出锅内物品，放置在超净工作台上。倒平板（培养基）用酒精棉球擦试超净台和实验者的双手。待锥形瓶内培养基冷却至50，点燃酒精灯，在酒精灯的火焰附近打开锥形瓶的封口膜，右手持封口膜和锥形瓶口，左手持培养皿，向培养皿中倒入培养基约

5、20mL，在超净台上轻轻摇匀后冷却，倒置备用。接菌种取大肠杆菌斜面试管一支，在酒精灯的火焰上灼烧接种环，将接种环放入斜面试管内稍稍冷却，之后用接种环轻刮一圈菌体，将菌体划线接种到固体培养基上。划线时，先在培养皿的一个区域内划线，然后转动培养皿90度，在酒精灯的火焰上将接种环上的余菌杀灭，冷却后再在第一次划线的后端往第二区域内划线，如此重复操作4次。划线时注意不要将培养基划破。总共划3个平板和1个空白对照。培养和观察将上述4个平板放入恒温培养箱内，30培养24h。取出平板，可以看到已经分离的单个培养基菌落，而空白培养基上没有任何菌落生长。微生物接种方法平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连

6、续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，可以分离到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。（二）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验目的1从土壤中分离出能够分解尿素的细菌。2统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。实验原理1利用以尿素作为唯一氮源的尿素分解菌选择培养基从土壤中分离尿素分解菌。2对土壤样品进行稀释涂布培养，计算每克土壤样品中含有多少利用

7、尿素的分解菌。实验仪器与用具高压灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的涂布器、酒精棉球、接种环、电子天平、称量纸、药匙、微量可调移液器与吸头、量筒、烧杯、培养皿、锥形瓶（100 mL 、500 mL）、玻璃棒、试管架、试管。实验材料与试剂琼脂粉、葡萄糖、MgSO4、KH2PO4、Na2HPO4、尿素、农田或者厕所附近的土样。方法步骤配制以尿素为唯一氮源的培养基（选择培养基）蒸馏水取土样121、0.1兆帕环境灭菌20min10g土样无菌培养基无菌水浓度梯度稀释在无菌条件下接种（取各稀释液0.1mL涂布在平板上，每种浓度涂3个平板）分别取得稀释104、105、106土样菌液已

8、接种的平板（外加一个空白平板作对照）30恒温培养箱培养48h观察并计数选择菌落数在30300个的稀释度平板，取3个平板的平均值，再依此平均值计算出每克土壤中分解尿素细菌的数量（三）分解纤维素的微生物的分离实验目的1利用特定的选择培养基和鉴定培养基从土壤中分离出能够分解纤维素的微生物。2掌握刚果红染色的机理和操作。实验原理1以纤维素作为唯一碳源的培养基能选择分离出分解纤维素的微生物。2刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。实验仪器与用具高压灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的涂布器、酒精棉球、接种环、电子天平、称量纸

9、、药匙、微量可调移液器与吸头、量筒、烧杯、培养皿、锥形瓶（100 mL 、500 mL）、玻璃棒、试管架、试管、恒温振荡培养箱。实验材料与试剂取自湿地或原生林地的土样、羧甲基纤维素钠、酵母粉、蛋白胨、琼脂粉、KH2PO4、NaCl、NaNO3、FeSO4、MgSO4、Na2HPO4、纤维素粉（或秸秆粉）、蔗糖、刚果红。配制以纤维素为唯一碳源的选择培养基（液体）配制鉴定培养基方法步骤灭菌（121、0.1兆帕20min）无菌的选择培养基称取20g取土样封口，振荡培养箱中培养（200转/min、30、48h）接菌种（无菌，每种稀释度涂布23个平板）取1mL培养基中的菌液，在无菌条件下进行浓度梯度稀释

10、，获得103、104、105的稀释液已接种的平板在30恒温培养2448h每个平板加入2滴管刚果红，染色10min后倒去加入2滴管1moL/LNaCl，浸泡15min后倒去观察，挑选出周围出现透明圈的菌落二植物的组织培养技术（一）菊花的组织培养实验目的1了解植物组织培养技术在生产中的应用。2熟悉植物组织培养的基本过程。3了解影响植物组织培养的各种因素。4掌握培养基制备、外植体消毒和接种、培养、移栽以及栽培等基本操作技术。实验原理当植物细胞脱离了原来所在植物体的组织或器官而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件作用下，就可能表现出全能性，发育成完整植株。植物全能性的表达包括脱分化和再

11、分化。脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。再分化：脱分化产生的愈伤组织继续分化，有可能重新分化成根或芽等器官。实验仪器与用具超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的镊子和手术刀、酒精棉球、培养架、高压灭菌锅、电子天平、称量纸、药匙、封口膜、橡皮圈、锥形瓶、玻璃棒、玻璃漏斗、量筒、铁架台、吸水纸、pH试纸。实验材料与试剂菊花茎段（生长旺盛的嫩枝）、蔗糖、琼脂、母液（大量元素10×、微量元素100×、有机物100×、铁盐200×）、0.1 g/mL的 NAA、0.1 g/mL的 IAA、0.1%的升汞、70%酒精。MS培养基配制方法取称量好

12、的10 g琼脂加入800mL的蒸馏水中，熔化后依次加入蔗糖30g、大量元素母液100mL、微量元素10mL、铁盐5 mL、有机物10mL、蒸馏水75 mL、BA5 mL、IAA5 mL。调节pH为5.8。 在MS培养基中BA与NAA比例适中。如果在MS培养基配方中上添加不同质量浓度的BA、NAA，可配制成丛芽培养基（BA效应大于NAA）、生根培养基（NAA效应大于BA）。配制MS培养基方法步骤消 毒切段外植体灭菌无菌培养基接种（无菌条件下）脱分化无菌，1822，光照12h/d，2030d流水冲洗75%酒精无菌水0.1%氯化汞浸泡12min愈伤组织丛芽转移至丛芽培养基中，无菌，1822，1020

13、d丛状苗生根转移至生根培养基中，无菌，1020d试管苗移栽正常植株（二）月季的花药培养实验目的1了解植物的花药培养在育种上的特殊意义。2了解被子植物花粉发育的过程以及花药培养产生花粉植株的两种途径。3学习花药培养的基本技术。实验原理花粉是单倍体生殖细胞，和体细胞一样，在离体条件下也具有发育成完整植株的潜能。通过花粉培养产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两条途径：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株；二是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化出植株。在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。通过镜检确定花药中花粉发育时期的方法有醋酸洋红法（常用）和焙花青铬矾法。实验仪器

14、与用具超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的镊子和手术刀、酒精棉球、培养架、高压灭菌锅、电子天平、称量纸、药匙、封口膜、橡皮圈、锥形瓶、玻璃棒、玻璃漏斗、量筒、铁架台、吸水纸、pH试纸。实验材料与试剂月季花蕾（完全未开放）、蔗糖、琼脂、母液（大量元素10×、微量元素100×、有机物100×、铁盐200×）、0.1 g/mL的 IAA、0.1 mg/mL的KT、0.1 mg/mL的2，4D、0.1%的升汞、70%酒精、1%的醋酸洋红溶液。培养基配方月季花药培养基配方：1LMS培养基添加2，4D 0.4 mL、KT 0.2 mL、IAA 4 mL。调节pH

15、为5.8。诱导丛芽培养基配方：MS培养基添加GA、IBA和BA，质量浓度分别为0.1 mg/L、0.5mg/L、1 mg/L。制备月季花药培养基方法步骤灭菌无菌培养基花蕾接种（无菌条件下）检查选择选择含单核期花粉的花药剥离花药培养无菌，25，无需光照，2030d花药开裂，释放出胚状体花药开裂，长出愈伤组织移至分化培养基移至新培养基植株（单倍体）三酶的研究与应用（一）果胶酶在果汁生产中的作用实验目的探讨温度和pH值对果胶酶活性的影响以及酶的最小用量。实验原理相同重量的苹果泥在不同的反应温度、pH值和不同果胶酶用量下，加入体积的果胶酶溶液后反应相同的时间，通过衡量得到的过滤果汁体积大小来比较果胶酶

16、活性，从而确认果胶酶的最适反应温度、pH值范围和酶的最小用量。实验仪器和用具电子天平、榨汁机、水浴锅、吸头盒和吸头、微量可调移液器、移液器架、定性滤纸、pH试纸、量筒、烧杯、玻璃棒、药匙、定时器、小刀、铁架台、三角漏斗。实验材料和试剂蒸馏水、1 moLHCl、1moLNaOH、2%果胶酶溶液、苹果。1. 探究温度对果胶酶活性的影响方法步骤将苹果去皮、籽、柄，切成小块，放入匀浆杯中，利用榨汁机制取苹果泥。称取20g苹果泥放入小烧杯中，加入1 mL2%果胶酶溶液，搅拌均匀。将烧杯放入45水浴锅中，不停搅拌，20min后取出并过滤苹果泥，将取得的苹果汁收集到10 mL量筒中，过滤10min后记录果汁

17、的体积。在25、35下分别重复步骤，记录所得果汁的体积。步骤加入试剂或处理方法烧杯试管ABCabc1苹果泥（g）20202022%果胶酶溶液（mL）1113水浴保温5min2535452535454将a酶液加入 A烧杯中， b酶液加入 B烧杯中， c 酶液加入 C烧杯中，混合均匀，搅拌，保温2535455对A、B、C中的苹果泥进行过滤、收集6记录果汁体积实验结果在45条件下获取的果汁最多，表明果胶酶的活性较高。2探究pH对果胶酶活性的影响方法步骤天然的苹果汁的pH值一般为45。分别用1 moLHCl和1moLNaOH将苹果泥的pH值调至3、4、5、6、7，在45条件下分别重复实验1，记录所得果

18、汁的体积。实验结果较适pH值为35。（为了不影响果汁的口味，一般生产果汁时不调pH值。）3探究果胶酶的用量随着酶用量增加，过滤到的果汁的体积也增加；当酶的用量增加到某个值后，再增加酶的用量，过滤到的果汁的体积不再改变，说明酶的用量已经足够，这个值就是酶的最低用量（最适用量）。方法步骤按实验1的方法制取苹果泥。准备5个洁净的烧杯，编号A、B、C、D、E，按下表加入材料和试剂：材料或试剂ABCDE苹果泥（g）20202020202%果胶酶溶液（mL）00.250.500.751蒸馏水（mL）10.750.500.250将各个烧杯放置于45恒温水浴锅中保温30min。过滤出果汁，记录果汁的体积。（二

19、）探讨加酶洗衣粉的洗涤效果实验目的1探讨温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响。2探讨不同种类的加酶洗衣粉对同一污物洗涤效果的区别。实验原理1酶作为一种蛋白质，其作用效果与温度有关。加酶洗衣粉的洗涤效果受温度影响。2洗衣粉中酶的种类不同，对污物的洗涤效果也不同，即不同的酶水解不同的污渍。实验仪器和用具恒温水浴锅、电子天平、药匙、称量纸、吹风机、秒表、滴管、玻璃棒、量筒、烧杯、镊子、植物油、小方块棉布。实验材料和试剂普通洗衣粉、蛋白酶洗衣粉、复合酶洗衣粉。1. 探索复合酶洗衣粉在不同温度下的洗涤效果方法步骤将4份称量好的复合酶洗衣粉中的一份（5g），加入到放置在35的恒温水浴锅内的大烧杯中，再加入500

20、mL自来水，搅拌溶解。取4块沾有相同血渍的小棉布中的一块放入大烧杯中，开始计时，均匀搅拌。5min后用镊子夹出小棉布，放入另一烧杯的自来水中漂洗，尽量洗去泡沫。之后取出，展开放直晾干。其他条件不变，在25、15、5的水浴锅中分别洗涤第2、3、4块小棉布。晾干后，观察比较各棉布的干净程度。实验结果35条件下洗涤效果最好，25条件下次之， 5条件下最差。2. 探究不同洗衣粉对同一污物的洗涤效果方法步骤称取普通洗衣粉、蛋白酶洗衣粉、复合酶洗衣粉各5g。取三块相同的小棉布，分别滴上植物油10滴，用吹风机吹干。取一个烧杯，加入5g普通洗衣粉，再加入500mL自来水，放入1块小棉布后不断搅拌，0.5min

21、检查一次，记录洗涤干净耗费的时间。先后向另两个烧杯中加入5g蛋白酶洗衣粉、5g复合酶洗衣粉，重复步骤。对比记录下的时间，分析不同洗衣粉的洗涤效果实验结果用普通洗衣粉将棉布上的油渍洗涤干净耗时约4.5min，用蛋白酶洗衣粉将棉布上的油渍洗涤干净耗时约3min，用复合酶洗衣粉将棉布上的油渍洗涤干净耗时约2min。表明复合酶洗衣粉对同一污物的洗涤效果最好。（三）酵母细胞的固定化固定化酶或固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。固定化酶技术实现了酶制剂的反复利用，从而大大降低了生产成本。实验目的1了解固定化酶和固定化细胞的作用原理。2尝试制备

22、固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。实验原理海藻酸钠溶液遇到钙离子，会形成凝胶，从而将酵母细胞包埋在凝胶中，达到固定化效果。实验仪器和用具恒温水浴锅、电子天平、称量纸、药匙、恒温培养箱、250 mL锥形瓶、烧杯、玻璃棒、量筒、注射器、橡皮筋、塑料膜。实验材料和试剂10%葡萄糖溶液、无水氯化钙、干酵母、海藻酸钠。酵母菌活化（1g干酵母+10mL蒸馏水，搅拌，放置1h）方法步骤配制CaCl2溶液（0.86g+100mL蒸馏水，溶解）配制海藻酸钠溶液（0.7g海藻酸钠+100mL蒸馏水， 99加热10min，溶化，冷却）混合液（装入注射器）滴入凝胶珠蒸馏水洗涤加入150mL10%葡萄糖

23、溶液培养，25，2448h观察发酵情况四DNA和蛋白质技术（一）DNA的粗提取和鉴定提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（右图），利用这一特点，选择适当的NaCl浓度就能使DNA充分溶解，而杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。DNA不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步分离。DNA对酶、高温和洗涤剂的耐

24、受性 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080高温，而DNA在80以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。（本实验目的、原理及方法步骤等见实验复习资料。）（二）多聚酶链式反应扩增DNA片段实验目的通过尝试PCR（DNA多聚酶链式反应）技术的基本操作，了解PCR这一常规的分子生物学实验方法，理解PCR原理，了解PCR的应用。实验原理PCR是体外迅速扩增DNA片段的技术。它能以少量的DNA作为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。PCR每个循环包括变性、退火和延伸三个步骤。实验以大肠杆菌基因组中编码16SrRNA的DNA作为模板，在PCR仪中扩增

25、DNA，用琼脂糖凝胶电泳检测PCR结果。DNA的两条链是反向平行的，通常将DNA的羟基（OH）末端称为3端，而磷酸基团的末端称为5端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。实验仪器和用具微量可调移液器、电子天平、吸头和吸头盒、高速离心机、恒温水浴锅、超净工作台、高压灭菌锅、恒温振荡器、PCR仪、电泳仪、水平电泳槽、DNA电泳观察仪、酒精灯、火柴、镊子、酒精棉、离心管、称量纸、药匙、点样膜、带封口膜的锥形瓶、量筒。实验材料和试剂大肠杆菌菌种、已灭菌的LB液体培养基、裂解液、PCR试剂盒、加样缓冲液、模板（在实验中制得）、DNAMarker、1倍T

26、AE缓冲液、琼脂糖。方法步骤模板的制备 PCR（变性复性延伸） DNA琼脂糖凝胶电泳（三）血红蛋白的提取和分离实验目的通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。实验原理1凝胶色谱法可根据蛋白分子大小不同而流出色谱柱的顺序不同，将分子大小不同的蛋白分开。2聚丙烯酰胺凝胶电泳根据蛋白分子大小、所带电荷多少以及形状的不同在电泳时的泳动速度不同，而将蛋白分开；SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳则只根据蛋白分子的大小将蛋白分开。实验仪器和用具色谱柱、铁架台、滴管、玻璃棒、试管、试管架、洗瓶、试剂瓶、烧杯、定性滤纸、玻璃

27、漏斗、剪刀、透析袋、透析袋夹、离心管、低速离心机、托盘天平、电子天平、分液漏斗、吸头、微量可调移液器、电泳仪、电泳槽、一次性手套、微量进样器、培养皿、吸水纸。实验材料和试剂pH为7.0的0.02moL/L磷酸缓冲液、甲苯、10%柠檬酸钠、生理盐水、交联葡聚糖凝胶G-75、鸡血（预加入1倍的10%柠檬酸钠）、10%过硫酸铵溶液、TEMED、30%丙烯酰胺混合液、1moL/L Tris缓冲液（pH为6.8）、1.5 moL/L Tris缓冲液（pH为8.8）、水、电解缓冲液、染色液、脱色液、2×加样缓冲液、蛋白Marker。方法步骤新鲜血液（静置或离心）分离红细胞蒸馏水多次洗涤，加入40

28、%甲苯，搅拌10min，红细胞破裂释放出血红蛋白离心，分离混合液血红蛋白样品装填凝胶色谱柱取1mL加入透析（除去杂质）血红蛋白溶液加入缓冲液洗脱（进一步提纯血红蛋白）收集红色洗脱液电泳：鉴定血红蛋白纯度电泳：电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。高二理综生物选修一专题训练专题1 传统发酵技术的应

29、用1.下列有关果酒，果醋和腐乳制作的叙述，正确的是( )A. 参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体B. 果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋C. 在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白酶的微生物参与D. 在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量2.图甲是果醋发酵装置。发酵初期不通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。图乙中能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是( )A B C D3下列关于相关实验描述正确的是（ ）A制作腐乳的卤汤时，料酒加的量较多，造成豆腐腐败变质B制作泡菜时，放盐的比例过大，造成泡菜腐烂发霉C制

30、作果醋时，通氧不足或温度过低，造成发酵失败D利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌4.下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述正确的是 （ ） A.腐乳制作所需要的适宜温度最高 B.果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵 C.使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 D.使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA5.下列评价果酒和果醋制作是否成功的方法中不合理的是 （ ）A.通过观察相关微生物的存在或数量变化进行鉴定B.通过向果酒发酵液中加入重铬酸钾试剂进行鉴定 C.通过检测果醋发酵前后发酵液的pH变化进行鉴定D.通过检测果酒发酵前后发酵液的温度变化进行鉴定（2013江苏卷）6. 某研

31、究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列相关叙述正确的是( )A. 酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高B. 先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵C. 与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好D. 适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖7.下列有关传统发酵的叙述,正确的是( ).在氧气不充足条件下制作果醋,选用醋酸菌 .在无氧条件下制作果酒,选用毛霉 .在无氧条件下制作泡菜,选用乳酸菌 .在氧气充足条件下制作腐乳,选用酵母菌8.在“探究果酒制作过程中影响酵母菌种群数量变化因素”时，获得下图所示的实验结果(图中O、M、N、P代表相应发酵时间)。

32、下列相关分析正确的是( )A. M点前酵母菌不进行细胞呼吸 B终止发酵时间应选择在P点时 C酒精浓度的增加会抑制酵母菌繁殖 DN点时酵母菌种群增长率最大 9. （双选）下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，不合理的是 A在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长 B条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸 C果酒发酵过程中发酵液密度不变 D将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量（2013新课标卷）10回答下列有关泡菜制作的习题：（15分）（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是 。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。（2）泡菜制作过程

33、中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是： 。专题2微生物的培养与应用1.甲、乙、丙是三种微生物，下表I、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ）粉状硫 10gK2HPO4 4gFeS04 0.5g 蔗糖 10g(NH4)2SO4 0.4g H20 100ml MgS04 9.25

34、g CaCl2 0.5gI+十+A.甲、乙、丙都是异养微生物 B.甲、乙都足自养微生物、丙是异养微生物 C.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙足自养微生物 D.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物注：固氮微生物是指能够还原分子态氮为氨态氮的微生物（2013江苏卷）2.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是( )A.培养基分装到培养皿后进行灭菌 B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 D.培养过程中每隔一周观察一次3.在培养酵母菌时，培养基中加入下列哪种特殊物质，可以抑制其他杂菌的繁殖（ ）A.生长因子 B.食盐 C.高

35、浓度蔗糖溶液 D.青霉素4.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是( )A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B碳源物质也是该微生物的能源物质 C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D水是该微生物的营养要素之一 5. 下列叙述错误的是（ ）培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性培养细菌时需将PH调至中性或微碱性 培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件6.产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（ ）A一个细菌，液体培养基 B许多细菌，液体培养基 C一个细菌，固体培养基 D许多细菌，固体培养基 7

36、. 下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是（ ） A微生物培养前，需对培养基进行消毒 B测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法 C分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度 D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源8下列有关生物学的研究方法中，不正确的是（ ） A用鲜葡萄制作果酒时,需给发酵装置适时排气 B用稀释涂布平板法测定土壤溶液活菌数C用龙胆紫溶液染色，观察洋葱表皮细胞的染色体形态、数目D用刚果红染色法可以筛选纤维素分解菌 9.(双选)稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是（ ）A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 B需将不同稀

37、释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面 C不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落 D操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格干热灭菌处理（2013新课标卷II）10.临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_法或_法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。（2）取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，在37培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C

38、，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明_；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的_。（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_。11. 有机磷农药杀虫能力强，在粮食增产、传染病防治等方面作用显著，但污染环境并危害人体健康。在众多的有机磷农药残留物降解技术中，生物降解有高效、彻底、无二次污染的优势，其中，微生物由于具有较复杂多样的

39、代谢途径，是有机磷农药降解的主力军。（1）在富含有机磷农药残留成分的土壤中，更容易分离到能降解农药的微生物。根据达尔文的理论，这是因为有机磷农药对于此类微生物具有 作用。（2）微生物具有复杂多样的代谢途径，从根本上说，是由微生物的 所决定的。（3）微生物主要通过酶促反应，将有机磷农药分解为无毒或者低毒的化合物。研究发现，利用有机磷农药降解酶净化农药比利用微生物菌体更有效。微生物群体中，最初的降解酶基因是由于 而产生的。从微生物中提取到一种降解酶后，需要确定在何种环境中该酶的活性高，检测酶活性高低的指标可以是 。从天然菌株中提取降解酶的含量低，成本高，难以大量应用，科学家通过基因工程解决了这一难

40、题。他们在获得降解酶基因后，通过 技术对该基因进行大量扩增，再利用 酶、 酶和运载体等作为基本工具，通过一定的手段构建_，并将其导入大肠杆菌体内，从而实现了高效表达。天然的降解酶对有机磷农药的降解率比较低，不能达到预期效果，科学家对降解酶特定部位的氨基酸序列进行重新设计、改造，显著提高了其降解能力，这项技术称为 。专题3 植物的组织培养技术 专题4 酶的研究与应用（2013江苏卷）1. 下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（ ）A. 可用包埋法制备固定化酵母细胞 B. 反应产物对固定化酶的活性没有影响C. 葡萄糖异构酶固定前后专一性不同 D. 固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应

41、2.下列关于果胶酶的作用叙述错误的是（ ）A果胶酶是一种催化剂，可以改变反应速度B果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层C在果汁中加入果胶酶后可使果汁变得澄清D果胶酶能将乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸3 水稻的花药通过无菌操作，接入试管，经过如下过程培育试管苗。据图分析下列叙述正确的是（ ）Aa、b、c、d中的植物细胞都具有全能性，且全能性的表达程度相同Ba、b、c的培养基中都有琼脂、有机物、水、植物生长调节剂等物质C水稻花药经ad发育成试管苗的过程涉及有丝分裂、减数分裂等细胞分裂方式D只要调节培养基中各种营养物质的比例就能诱导b中的愈伤组织分化成试管苗4.(双选)酵母菌是许多生物实验的材料，

42、以下叙述正确的是（ ） A在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌 B果汁发酵后是否产生酒精，可以用溴麝香草酚蓝试剂来检验C果酒发酵成功后，只需添加足够糖源，可以继续发酵果醋D将酵母细胞固定化后进行酒精发酵，固定化酵母细胞可以反复使用5. （18分）请回答：（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ，繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部 。（2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 的污染。（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导

43、试管苗 ，而与 配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需尊使用的生长调节剂是 (脱落酸、2，4-D)。（4）用四倍体和二倍体西瓜，获得三倍体西瓜的植株，给其雌蕊柱头授以二倍体西瓜花粉，子房发育成无籽西瓜。现有某地方来年需种植大批无籽西瓜，请用最经济快捷方式为其解决秧苗问题 。专题5 DNA和蛋白质技术1.下列有关生物工程(技术)的叙述中，错误的是（ ）A利用PCR技术进行DNA扩增时不需要加入解旋酶B进行胚胎分割时应选用发育及形态正常的桑椹胚或囊胚C稀释涂布平板法可以纯化微生物，也可以用于微生物计数D凝胶色谱法主要根据分子带电性质的差异实现分子分离2.关于DNA的复制，下列叙述正确的是（ ）ADNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5端延伸DNA链BDNA复制不需要引物 C引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合DDNA的合成方向总是从子链的3端向5端延伸3.关于高中生物学实验的基本原理，叙述不正确的是（ ）A.噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统B.提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异C.成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透（过