天女木兰组织培养抗褐化探究

1、天女木兰组织培养抗褐化探究摘要：从外植体类型、外植体预处理方法、培养基类型、 抗褐化剂类型及培养条件等方面研究了天女木兰(m a g n o 1 i a s i e b o 1 d i i k. koch)组织培养 过程中的褐化问题。结果表明，b5培养基对防止外植体褐 化效果好，外植体在ms培养基中褐化严重。外植体的取材 部位与天女木兰的褐化程度密切相关，侧芽褐化率相对较 低，其次是顶芽，带芽的茎段褐化率最髙。在b 5 + 0 . 5 m g / l 6 b a + 0 . 3 m g / l i b a 培养基中添 加适宜浓度的抗氧化剂、吸附剂有利于抑制天女木兰的褐 化，抗褐化效果是聚乙烯基

2、毗咯烷酮(pvp) 维生素c (vc ) 活性炭(ac)。用1 g / l v c浸泡外植体4 h可有效减轻褐化。培养初期一定的低温和暗培养可以减轻 天女木兰的褐化。关键词：天女木兰(ma g n o 1 i a s i e b o 1 d i i k. koch)；组织培养；抗褐化中图分类号：s 7 9 2 . 9 9 ； q 9 4 3 .1文献标识码：a 文章编号：0439- 8 114 ( 2 0 12) 14-3107-03study on browning controlling of magnolia sieboldii in tissue culturewang huanl,

3、2, du feng guo2,zhang zh ix i angl, q i c u i c u i 2(1. col lege o f biological s c i e n c e and biotechnology, b e i j i n g fores try u n i v e r s ity, b e i j i n g 100083, china； 2jili n province key lab of fores try and ecological e n v i r o n m ent forestry col lege, b e i h u a u n i v e

4、r s ity, jilin 132013, j i 1 i n , china)abstract： factors a f f e c t i n g browning p rob 1 em of magno 1 i a s i e b o 1 d i i k koch i n c 1 u d i n g type o f e x p 1 a n t s , p r e t r e a t m e n t o f e x p 1 a n t s , med i u m, ant ibrowning subs tances a n d c u 1 t u r e conditions were

5、 studied the results showed that b 5 medium could p r e v e n t the e x p 1 a n t s f rom brownin g well while browning was s er i o u s on ms medium. the typeo f e x p 1 a n t playeda n important role i n b r o w n in g the b rowning rate o f 1 a te r a 1 buda s theowes t , followed b ybud； and the

6、 b r o w n if the s t e m w i t h bud i g h e s t soaking exp1 g / l vc for 4 h c o uv i a t e browning e f f e cbrowning could b e r etrained b y adding ant i o x i d n t and absorbent a t a p p r o p i a t e concent rat ionn i n t h medium b 5 + 0. 5 m g / l 6 b a + 0 .m g / l i b a the antibrowni

7、ngfeet ranked a spvp>vc>aclow temperatureand darkt i v a t i o n a t theearly s to f culti vationcould r ei e v e the browning problem key words： magnolia s i e b1 d i i k koch； tissue c u 1 t u r e ； anti browning天女木兰(m a g n o 1 i a s i e b o 1 d i i k. koch)又名天女花、小花木兰，为木兰科木兰属 落叶小乔木，是第四纪冰川时期

8、幸存的珍稀植物，是国家重 点保护的易危植物和吉林省一级保护植物1 ,也是中国 惟一分布于东北地区的木兰科植物2。它集观叶、观花、 观果于一身，同时全株含有芳香油，可以被用于提取高级香 料并具有很高的药用价值。目前，主要通过种子繁殖和抒插繁殖培育苗木，但种子 繁殖存在采种难、生理休眠的问题，抒插繁殖存在生根慢及 生根率低等问题3 6。运用组织培养技术是建立天女 木兰无性繁殖的重要手段，不仅能有效解决种源欠缺的问 题，而且还能保留母树的优良性状，快速繁育良种。已有一 些学者开展了天女木兰的组织培养研究工作，但存在繁殖系 数低、褐化及生根难等问题7 9。因此如何克服褐化 成为天女木兰组织培养快速繁殖

9、成功与否的关键之一，而关 于天女木兰组织培养快速繁殖中的褐化问题研究较少。基于 此，研究了外植体类型、外植体预处理方法、培养基类型、 培养条件及抗褐化剂类型等对天女木兰组织培养过程中外 植体褐化的影响，以期为天女木兰组织培养快速繁殖提供参 考，对挽救和保护这个珍稀濒危树种也具有重要意义。1材料与方法1. 1材料试验材料为取自吉林市龙潭区江密峰苗圃的8年生的 长势良好的天女木兰实生苗，分别在3、4月初剪取天女木 兰当年生健壮的休眠枝条，在室内水培71 0 d,待芽 萌动膨大时再接种；在57月剪取天女木兰新萌发的幼嫩 枝条做试验。1 . 2方法采用单因素试验，每个处理接1 0瓶，重复3次。剪取 带芽的茎段、顶芽和侧芽，放入洗洁精溶液中浸泡2 0 m i n,再用流水冲洗2 h ,然后在超净工作台上用体积分 数为7 5 %的乙醇对其表面消毒3 0 s ,用无菌水冲洗 23次，然后用1 g / l h g c 1 2处理78 m i n,用无菌水冲洗56次。将0. 51. 0 cm的芽 或带芽的茎段分别接种到相应的培养基中。如无特殊说