紫外吸收光谱法

1、第五章 紫外可见分光光度法 -1 -1 概述概述 利用被测物质的分子对利用被测物质的分子对紫外紫外- -可见光可见光(200-750nm)(200-750nm)选择性吸收的选择性吸收的特性而建特性而建立起来的方法。立起来的方法。 200-400nm:200-400nm:近紫外线近紫外线 400-750nm:400-750nm:可见光可见光光吸收定律和紫外吸收光谱光吸收定律和紫外吸收光谱 1.BeerLambert定律定律 是说明物质对单色光吸收的强度与吸是说明物质对单色光吸收的强度与吸光物质的浓度和吸光厚度间关系的定律光物质的浓度和吸光厚度间关系的定律 当强度为当强度为I0的一定波长的单色入射

2、光束的一定波长的单色入射光束通过装有均匀待测溶液时，该光束将被部通过装有均匀待测溶液时，该光束将被部分吸收分吸收Ia，部分反射，部分反射I r ，通过待测溶液，通过待测溶液It ，即有：即有： I0=Ia + It +Ir 反射光强度一般很小。可忽略反射光强度一般很小。可忽略, 则则: Io=Ia+It 待测溶液对此波长的光的吸收程度可待测溶液对此波长的光的吸收程度可以透光率以透光率T和和 吸光度吸光度A来表示。来表示。 透光率透光率表示透过光强度与入射光强度表示透过光强度与入射光强度的比值，用的比值，用T来表示，计算式为：来表示，计算式为： T= It /Io T常用百分比（常用百分比（T%

3、）表示。）表示。 吸光度吸光度透光率的倒数的对数叫吸光度。透光率的倒数的对数叫吸光度。用用A表示：表示： A=-lgT 定律内容：定律内容： 当用一束强度为当用一束强度为Io的单色光垂直通过的单色光垂直通过厚度为厚度为b、吸光物质浓度为、吸光物质浓度为c的溶液时，溶的溶液时，溶液的吸光度正比于溶液的厚度液的吸光度正比于溶液的厚度b和溶液中吸和溶液中吸光物质的浓度光物质的浓度c的乘积。数学表达式为：的乘积。数学表达式为：A=-lgT=Kbc 百分吸光系数：百分吸光系数：在一定波长下：在一定波长下：c1%(w/v), b1cm时时的吸光度，用的吸光度，用E1%1cm表示，称百分吸光系表示，称百分吸

4、光系数数A= E1%1cm A= E1%1cmcb 摩尔吸光系数：摩尔吸光系数： 在一定波长下：在一定波长下： Cmol/L，bcm时，时，A= 用用表示，叫表示，叫“摩尔吸光系数摩尔吸光系数”，单位为，单位为L/molcm，A=bc两种表示方法之间的关系为：两种表示方法之间的关系为： =M/10* E1%1cm M:吸光物质的摩尔质量吸光物质的摩尔质量 摩尔吸光系数和吸光强度的关系：摩尔吸光系数和吸光强度的关系： = 104105 强吸收强吸收 = 102104中强吸收中强吸收 102弱吸收弱吸收例题例题 ：已知某化合物的相对分子量为已知某化合物的相对分子量为251，将此，将此化合物用已醇作

5、溶剂配成浓度为化合物用已醇作溶剂配成浓度为0.150 m mol L-1溶液，在溶液，在480nm处用处用2.00cm吸收吸收池测得透光率为池测得透光率为39.8%，求该化合物在上述，求该化合物在上述条件下的摩尔吸光系数。条件下的摩尔吸光系数。解：已知溶剂浓度解：已知溶剂浓度c=0.150mmo l.L-1，b=2.00cm, T=0.398, 由由Lambert-Beer定律定律得：得： （480nm）=A/ cb A = -lgT = -lg0.398/0.15010-3 2.00 =1.33 103 ( L mol-1 cm-1) 吸收定律的适用条件：吸收定律的适用条件： 1)必须是使用

6、单色光为入射光；必须是使用单色光为入射光； 2)溶液为稀溶液；溶液为稀溶液；3)吸收定律能够用于彼此不相互作用的多吸收定律能够用于彼此不相互作用的多组分溶液。它们的吸光度具有加合性，组分溶液。它们的吸光度具有加合性，且对每一组分分别适用，即：且对每一组分分别适用，即： A总总= A1+ A2+ A3+ An =1bc1+2bc2+3bc3+nbcn 4)吸收定律对紫外光、可见光、红外光都吸收定律对紫外光、可见光、红外光都适用适用 吸收系数吸收系数 有机化合物的紫外有机化合物的紫外-可见吸收光谱可见吸收光谱1.电子跃迁类型电子跃迁类型与紫外吸收光谱有关的电子有三种与紫外吸收光谱有关的电子有三种:

7、(1)形成单键的形成单键的电子电子(2)形成双键的形成双键的电子电子(3)未成键的未成键的n电子电子跃迁类型跃迁类型: *、n*、n* 、*跃迁类型跃迁类型:*、n*、n* 、* * n* n* *n * * * 跃迁吸收的波长较短，孤立的跃迁吸收的波长较短，孤立的* *跃迁一般在跃迁一般在200nm200nm（近（近紫外区）紫外区）。* * 跃迁跃迁吸收的波长更短，波长小于吸收的波长更短，波长小于150nm(真空紫外区真空紫外区) )。 n* 跃迁吸收的波长较长，跃迁吸收的波长较长，波长波长200 400 nm(近紫外区近紫外区)，吸光强度较小，吸光强度较小 n* 跃迁吸收波长在跃迁吸收波长

8、在150 250 nm范围，因此范围，因此在紫外区不易观察到这类跃迁。在紫外区不易观察到这类跃迁。 以上几种跃迁中，只有以上几种跃迁中，只有 - *和和n- *两两种跃迁的能量小，相应波长出现在近紫种跃迁的能量小，相应波长出现在近紫外区至可见光区，且对光的吸收强度大，外区至可见光区，且对光的吸收强度大，是研究的重点。是研究的重点。 2、相关概念：、相关概念： (1).生色团生色团: 能导致化合物紫外及可见光区产生能导致化合物紫外及可见光区产生吸收的基团吸收的基团.即有机物结构中有即有机物结构中有n * 或或* 跃迁的基团；如跃迁的基团；如:C=C C=O -N=N- (2).助色团助色团: 是

9、指带有是指带有非键电子对非键电子对的基团；可使生的基团；可使生色团吸收峰向长波方向移动并提高吸收色团吸收峰向长波方向移动并提高吸收强度的一些官能团强度的一些官能团.常见助色团助色顺序常见助色团助色顺序为：为： -F-CH3-Br-OH-OCH3-NH2-NHCH3-NH(CH3)2-NHC6H5-O- (3).红移红移(长移长移) 某些有机化合物经取代反应引入含某些有机化合物经取代反应引入含有未共享电子对的基团之后，吸收峰的有未共享电子对的基团之后，吸收峰的波长将向长波方向移动，这种效应称为波长将向长波方向移动，这种效应称为红移效应。红移效应。(4)蓝移蓝移(短移短移): 在某些生色团如羰基的

10、碳原子一端引在某些生色团如羰基的碳原子一端引入一些取代基之后，吸收峰的波长会向入一些取代基之后，吸收峰的波长会向短波方向短波方向移动，这种效应称为移动，这种效应称为蓝移（紫蓝移（紫移）移）效应。效应。如如-R，-OCOR， 3.吸收带吸收带吸收带吸收带: 吸收峰在光谱中的波带位置吸收峰在光谱中的波带位置.(1)R吸收带：吸收带：由由n *跃迁引起的吸收带是跃迁引起的吸收带是R带带(2)K吸收带：吸收带： 是共轭双键中是共轭双键中*跃迁引起的吸收带是跃迁引起的吸收带是K带是共轭双键的特征吸收带带是共轭双键的特征吸收带(3)B吸收带：吸收带： 是芳香族化合物的特征吸收带是由苯是芳香族化合物的特征吸

11、收带是由苯环本身振动及闭合环状共轭双键中环本身振动及闭合环状共轭双键中*跃跃迁引起的吸收带迁引起的吸收带 苯蒸气在苯蒸气在230-270nm处出现吸收光谱，称处出现吸收光谱，称苯的多重吸收带苯的多重吸收带=255nm =200(4)E吸收带吸收带: 是由苯环结构中三个乙烯的环状共轭系统是由苯环结构中三个乙烯的环状共轭系统的的*跃迁产生的，分跃迁产生的，分E1和和E2带带1：=180nm =4.7104 E2 : =200nm =7.0103紫外吸收光谱与分子结构的关系紫外吸收光谱与分子结构的关系.各类有机化合物的紫外吸收光谱各类有机化合物的紫外吸收光谱（）饱和烃及其取代衍生物（）饱和烃及其取代

12、衍生物 含有含有C-C C-H单键单键: 产生产生* 跃迁跃迁 当有助色团相连饱和烃时：当有助色团相连饱和烃时： 产生产生* n *跃迁跃迁（）不饱和烃及共轭稀烃（）不饱和烃及共轭稀烃碳碳双键：碳碳双键： 产生产生* * 跃迁，含有杂原子时跃迁，含有杂原子时还有：还有： n* n* 跃迁跃迁共轭双键：共轭双键： 由于共轭降低了由于共轭降低了*跃迁需要的能量，跃迁需要的能量，故吸收峰波长长移，吸收带强度增加故吸收峰波长长移，吸收带强度增加（）醛和酮（）醛和酮 有有n* n* *跃迁，跃迁， n* （R带带)是醛和酮的特征吸收带是醛和酮的特征吸收带（）芳香族化合物（）芳香族化合物 苯：由苯：由*跃

13、迁引起的三个吸收带跃迁引起的三个吸收带（B带带E1和和E2带），其中带），其中B带是苯环精细吸带是苯环精细吸收带收带取代苯：取代苯：当取代基团中有当取代基团中有n电子或电子或电子时，使电子时，使B带向长波长方向移动，并吸收增强带向长波长方向移动，并吸收增强稠环芳香族化合物：稠环芳香族化合物：当共轭体系增加时，波长长移，并吸收当共轭体系增加时，波长长移，并吸收增强增强溶剂对紫外吸收光谱的影响溶剂对紫外吸收光谱的影响（）（）溶剂极性对最大吸收波长的影响溶剂极性对最大吸收波长的影响:改变溶剂的极性，改变溶剂的极性，会引起会引起吸收带形状吸收带形状的变化。改变溶剂的极性，还会使吸收带的变化。改变溶剂的

14、极性，还会使吸收带的的最大吸收波长发生变化最大吸收波长发生变化。下列为溶剂对丙酮最大吸收波长的影响下列为溶剂对丙酮最大吸收波长的影响: 正己烷正己烷 CHCl3 CH3OH H2O* 230nm 238nm 237nm 243nmn * 329nm 315nm 309nm 305nm（）溶剂极性对吸收光谱精细结构的影响（）溶剂极性对吸收光谱精细结构的影响 在极性溶剂中，由于溶剂化作用，限在极性溶剂中，由于溶剂化作用，限制了分子的振动和转动，使精细结构完全制了分子的振动和转动，使精细结构完全消失参见教材消失参见教材240页（苯的页（苯的B吸收带）吸收带）（）正确选择溶剂（）正确选择溶剂 要有良好

15、的化学和光化学稳定性；要有良好的化学和光化学稳定性； 尽量选择极性小的溶剂；尽量选择极性小的溶剂； 溶剂在测定范围内无明显吸收溶剂在测定范围内无明显吸收 注：在吸收光谱图上或数据表中必须注注：在吸收光谱图上或数据表中必须注明所用的溶剂。与已知化合物紫外光谱明所用的溶剂。与已知化合物紫外光谱作对照时也应注明所用的溶剂是否相同。作对照时也应注明所用的溶剂是否相同。在进行紫外光谱法分析时，必须正确选在进行紫外光谱法分析时，必须正确选择溶剂。择溶剂。 例：丙酮例：丙酮 max = 279nm ( =15)3691215200 220 260 280 320 340 nm300400500600700

16、/nm350525 545Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2Absorbance350CrCr2 2O O7 72-2-、MnOMnO4 4- -的吸收光谱的吸收光谱吸收峰和最大吸收波长吸收峰和最大吸收波长 max 吸收曲线表明了某种物质对不同波吸收曲线表明了某种物质对不同波长光的吸收能力分布。曲线上的各个峰长光的吸收能力分布。曲线上的各个峰叫吸收峰。峰越高，表示物质对相应波叫吸收峰。峰越高，表示物质对相应波长的光的吸收程度越大。其中最高的那长的光的吸收程度越大。其中最高的那个峰叫最大吸收峰，它的最高点所对应个峰叫最大吸收峰，它的最高点所对应的波长叫最大吸收波长，用的波长叫

17、最大吸收波长，用max表示。表示。 物质的吸收曲线和最大吸收波长的特物质的吸收曲线和最大吸收波长的特点：点： 1）不同的物质，吸收曲线的形状不同，）不同的物质，吸收曲线的形状不同，最大吸收波长不同。最大吸收波长不同。2）对同一物质，其浓度不同时，吸收曲线）对同一物质，其浓度不同时，吸收曲线形状和最大吸收波长不变，只是吸收程形状和最大吸收波长不变，只是吸收程度要发生变化，表现在曲线上就是曲线度要发生变化，表现在曲线上就是曲线的高低发生变化。的高低发生变化。紫外紫外-可见分光光度计可见分光光度计 分光光度计的主要部件和工作原理：分光光度计的主要部件和工作原理：0.575光源光源单色单色器器吸收吸收

18、池池检测检测器器显显示示）分光光度计的主要部件分光光度计的主要部件（）光源：（）光源： 要求：能发射强度足够，稳定的，具有要求：能发射强度足够，稳定的，具有连续光谱且发光面积小的光源连续光谱且发光面积小的光源 用于提供足够强度和稳定的连续光用于提供足够强度和稳定的连续光谱。分光光度计中常用的光源有热辐射谱。分光光度计中常用的光源有热辐射光源和气体放电光源两类。光源和气体放电光源两类。 热辐射光源用于可见光区，如钨丝热辐射光源用于可见光区，如钨丝灯和卤钨灯；灯和卤钨灯； 气体放电光源用于紫外光区，如氢气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。灯和氘灯。 钨灯和碘钨灯：在钨灯和碘钨灯：在360 25

19、00nm。 氢灯和氘灯：在氢灯和氘灯：在150 400nm范围内产范围内产生连续光源。生连续光源。 （2）分光系统：）分光系统：分光系统也叫单色器。单色器是能从分光系统也叫单色器。单色器是能从光源辐射的复合光中分出单色光的光学光源辐射的复合光中分出单色光的光学装置，装置， 功能：功能： 产生光谱纯度高的光波且波长在紫产生光谱纯度高的光波且波长在紫外可见区域内任意可调。外可见区域内任意可调。 单色器一般由入射狭缝、准光器（透单色器一般由入射狭缝、准光器（透镜或凹面反射镜使入射光成平行光）、色镜或凹面反射镜使入射光成平行光）、色散元件、聚焦元件和出射狭缝等几部分组散元件、聚焦元件和出射狭缝等几部分

20、组成。其核心部分是色散元件，起分光的作成。其核心部分是色散元件，起分光的作用。用。能起分光作用的色散元件主要是棱镜和能起分光作用的色散元件主要是棱镜和光栅。光栅。 棱镜：棱镜：玻璃棱镜可吸收紫外光，用于玻璃棱镜可吸收紫外光，用于350 3200 nm的波长范围可见光域内。的波长范围可见光域内。石英棱镜可使用的波长范围较宽，可从石英棱镜可使用的波长范围较宽，可从185 4000nm，即可用于紫外、可见和，即可用于紫外、可见和近红外三近红外三 个光域。个光域。色散原理是依据不同的波长光通过棱镜色散原理是依据不同的波长光通过棱镜时有不同的折射率而将不同波长的光分时有不同的折射率而将不同波长的光分开。

21、开。入射狭缝入射狭缝 准直透准直透镜镜棱棱镜镜聚焦透聚焦透镜镜出射狭缝出射狭缝白光白光红红紫紫1 12 2800 600 500400光栅：光栅：是利用光的衍射与干涉作用制成的，它是利用光的衍射与干涉作用制成的，它可用于紫外、可见及红外光域，而且在整可用于紫外、可见及红外光域，而且在整个波长区具有良好的、几乎均匀一致的分个波长区具有良好的、几乎均匀一致的分辨能力。辨能力。 （）吸收池（比色皿）：）吸收池（比色皿）： 在紫外可见分光光度法中，一般都在紫外可见分光光度法中，一般都是用溶液进行测定的，用于盛放试液的是用溶液进行测定的，用于盛放试液的器皿就是吸收池或比色皿。有玻璃和石器皿就是吸收池或比

22、色皿。有玻璃和石英两种。英两种。 （）光检测系统：（）光检测系统： 利用光电效应将光强度信号转换成利用光电效应将光强度信号转换成电信号的装置，也叫光电器件。电信号的装置，也叫光电器件。 分光光度法中，得到的是一定强度分光光度法中，得到的是一定强度的光信号，这个信号需要用一定的部件的光信号，这个信号需要用一定的部件检测出来。检测时，需要将光信号转换检测出来。检测时，需要将光信号转换成电信号才能测量得到。光检测系统的成电信号才能测量得到。光检测系统的作用就是进行这个转换。作用就是进行这个转换。 常用的光检测系统主要有光电池、常用的光检测系统主要有光电池、光电管和光电倍增管。光电管和光电倍增管。 光

23、电池：光电池： 用半导体材料制成的光电转换器。用半导体材料制成的光电转换器。用得最多的是硒光电池。其结构和作用用得最多的是硒光电池。其结构和作用原理为：原理为： 硒光电池硒光电池 光电管：光电管：它是在抽成真空或充有惰性气体的玻它是在抽成真空或充有惰性气体的玻璃或石英泡内装上璃或石英泡内装上2个电极构成，其结构个电极构成，其结构如图：如图：1234 1是光电管的阳极，它由一个镍环或镍片是光电管的阳极，它由一个镍环或镍片组成；组成； 2是光电管的阴极，它由一个金属片上涂是光电管的阴极，它由一个金属片上涂一层光敏物质构成，如涂上一层氧化铯。一层光敏物质构成，如涂上一层氧化铯。涂上的光敏物质具有这样

24、一个特性：当涂上的光敏物质具有这样一个特性：当光照射到光敏物质上时，它能够放出电光照射到光敏物质上时，它能够放出电子；子； 3为电池，其作用是在阴、阳极之间加上为电池，其作用是在阴、阳极之间加上一电压；一电压； 4为放大器，放大由光电管产生的电信号为放大器，放大由光电管产生的电信号.光电管产生光电效应的原理：光电管产生光电效应的原理：当一定强度的光照射到阴极上时，光当一定强度的光照射到阴极上时，光敏物质放出电子，放出电子的多少与照敏物质放出电子，放出电子的多少与照射的光的大小成正比，而放出的电子在射的光的大小成正比，而放出的电子在电场的作用下要流向阳极，从而造成在电场的作用下要流向阳极，从而造

25、成在整个回路中有电流通过。此电流的大小整个回路中有电流通过。此电流的大小与照射到光敏物质上的光的强度的大小与照射到光敏物质上的光的强度的大小成正比。成正比。红敏管红敏管 625-1000 nm蓝敏管蓝敏管 200-625 nm光电管光电管光电倍增管：光电倍增管：是一个非常灵敏的光电器件，可以把是一个非常灵敏的光电器件，可以把微弱的光转换成电流。其灵敏度比光电微弱的光转换成电流。其灵敏度比光电池、光电管都要高得多。它是利用二次池、光电管都要高得多。它是利用二次电子发射以放大光电流，放大倍数可达电子发射以放大光电流，放大倍数可达到到108倍。倍。 光光电电倍倍增增管管1个光电子可产生个光电子可产生

26、106107个电子个电子（）信号指示系统（）信号指示系统 作用：作用：放大信号并以适当方式指示或记录下放大信号并以适当方式指示或记录下来。来。常用的信号指示装置有直读检流计、常用的信号指示装置有直读检流计、电位调节指零装置以及数字显示或自动电位调节指零装置以及数字显示或自动记录装置等。很多型号的分光光度计装记录装置等。很多型号的分光光度计装配有微处理机，一方面可对分光光度计配有微处理机，一方面可对分光光度计进行操作控制，另一方面可进行数据处进行操作控制，另一方面可进行数据处理。理。）分光光度计的类型：）分光光度计的类型：（）单光束分光光度计：（）单光束分光光度计：0.575光源光源单色单色器器

27、吸收吸收池池检测检测器器显显示示特点：特点：结构简单，价格便宜。主要适用结构简单，价格便宜。主要适用于定量分析，而不适用于作定性分析。于定量分析，而不适用于作定性分析。另外，结果受电源的波动影响较大。另外，结果受电源的波动影响较大。 （）双光束分光光度计：（）双光束分光光度计：是自动比较透过参比溶液和样品溶液是自动比较透过参比溶液和样品溶液的光的强度，它不受光源（电源）变化的光的强度，它不受光源（电源）变化的影响。的影响。还能进行波长扫描，并自动记录下各还能进行波长扫描，并自动记录下各波长下的吸光度，很快就可得到试液的波长下的吸光度，很快就可得到试液的吸收光谱。所以能用于定性分析。吸收光谱。所

28、以能用于定性分析。光光源源单色单色器器单色单色器器检测检测器器切切光光器器狭狭缝缝吸吸收收池池（）双光束双波长分光光度计：（）双光束双波长分光光度计：）分光光度计的校正）分光光度计的校正校正：校正：镨铷玻璃或钬玻璃都有若干特征的吸镨铷玻璃或钬玻璃都有若干特征的吸收峰，可用来校正分光光度计的波长标收峰，可用来校正分光光度计的波长标尺，前者用于可见光区，后者则对紫外尺，前者用于可见光区，后者则对紫外和可见光区都适用。也可用和可见光区都适用。也可用K2CrO4标准标准溶液来校正吸光度标度。溶液来校正吸光度标度。测量条件的选择：测量条件的选择：（1）测量波长的选择：）测量波长的选择： 选用待测物质的最

29、大吸收波长作为选用待测物质的最大吸收波长作为测量波长（入射光）测量波长（入射光）. 当在最大吸收波长处有干扰时，则当在最大吸收波长处有干扰时，则应根据应根据“吸收最大干扰最小吸收最大干扰最小”的原则来的原则来选择波长。选择波长。 （2）控制适当的吸光度范围：）控制适当的吸光度范围： 由测量误差可知，当吸光度在由测量误差可知，当吸光度在0.20.8之间时，测量误差最小，所以之间时，测量误差最小，所以应尽量控制吸光度在此范围进行测定。应尽量控制吸光度在此范围进行测定。 控制的方法为：控制的方法为：控制溶液的浓度；控制溶液的浓度；选用适当厚度的比色皿；选用适当厚度的比色皿； （3）选择适当的参比溶液

30、：）选择适当的参比溶液：如果仅有显色剂与被测组分反应的如果仅有显色剂与被测组分反应的产物有吸收，则可以用纯溶剂作参产物有吸收，则可以用纯溶剂作参比溶液；比溶液；如果显色剂和其他试剂有颜色，则如果显色剂和其他试剂有颜色，则用试剂溶液作参比液；用试剂溶液作参比液； 如果显色剂与试剂中干扰组分反应，其反如果显色剂与试剂中干扰组分反应，其反应产物有吸收，则按如下方式配置参比液：应产物有吸收，则按如下方式配置参比液：吸收较弱时，直接用试剂溶液作参比液；吸收较弱时，直接用试剂溶液作参比液； 吸收较强时，可选用合适的掩蔽剂将被测组吸收较强时，可选用合适的掩蔽剂将被测组分掩蔽后再加显色剂和其他试剂，以此配制分

31、掩蔽后再加显色剂和其他试剂，以此配制的溶液作参比液。的溶液作参比液。 紫外光谱法的应用紫外光谱法的应用定性分析：定性分析： 应用应用: (1)测定有色化合物或反应生成的有色化合测定有色化合物或反应生成的有色化合物物; (2)测定含有不饱和键的无色化合物测定含有不饱和键的无色化合物.紫外定性紫外定性:(1)判断有机化合物中发色团和助色团的种类判断有机化合物中发色团和助色团的种类,位置及数目位置及数目;(2)区别饱和与不饱和化合物区别饱和与不饱和化合物;(3)确定未知物的结构骨架确定未知物的结构骨架.定性主要步骤定性主要步骤;(1)提纯样品提纯样品;(2)绘制纯样品吸收曲线绘制纯样品吸收曲线;(3

32、)用对比法鉴定用对比法鉴定;(4)结合其它方法对照和验证结合其它方法对照和验证;(5)做结论做结论.对比法有对比法有:(1)对比吸收光谱特征数据对比吸收光谱特征数据 (2)对比吸收光谱的一致性对比吸收光谱的一致性鉴别方法鉴别方法:比较比较 :试样试样-谱图谱图 标样标样-谱图谱图检验检验:比较比较 试样试样+标样标样-谱图谱图 标样标样-谱图谱图结论确定如下结论确定如下:(1)在在200400nm 无吸收无吸收,确定是确定是:饱和直链烃饱和直链烃,脂环烃脂环烃,含一个双键的烯烃含一个双键的烯烃.(2)在在270350nm 弱吸收弱吸收,则有则有:羰基羰基,硝基等硝基等n * 跃迁产生跃迁产生.

33、(3)在在210250nm 强吸收强吸收,是是K 带带,有共轭双键有共轭双键.在在260300nm强吸收，有三个或以上共轭强吸收，有三个或以上共轭双键双键(4)在在250300nm有中强吸收，是苯环有中强吸收，是苯环B带，带，证明有苯环证明有苯环2.有机化合物构型，构象的测定有机化合物构型，构象的测定（）顺反异构体的判断（）顺反异构体的判断（）互变异构体的判断（）互变异构体的判断（）构象的判别（）构象的判别化合物中杂质的检查化合物中杂质的检查（）化合物在紫外可见光区没有明显吸收（）化合物在紫外可见光区没有明显吸收峰而所杂质含有吸收峰；峰而所杂质含有吸收峰；（）化合物在紫外可见光区有较强吸收可（

34、）化合物在紫外可见光区有较强吸收可用吸收强度值来检查纯度用吸收强度值来检查纯度定量分析定量分析（）一般定量分析（）一般定量分析单一组分的测定：单一组分的测定：直接比较法直接比较法（对照法）：（对照法）：相同条件下：相同条件下：AS = ECSL Ai = ECiL EL = AS/CS = Ai / Ci Ci = Ai CS/AS标准曲线法：标准曲线法：）配制标准溶液；）配制标准溶液；）测参比（空白）溶液吸光度；）测参比（空白）溶液吸光度；）测定标准溶液的吸光度；）测定标准溶液的吸光度；）并绘制吸光度）并绘制吸光度浓度曲线，得到标准曲线浓度曲线，得到标准曲线（工作曲线）；（工作曲线）；）在相

35、同条件下测定试样溶液的吸光度。）在相同条件下测定试样溶液的吸光度。在工作曲线上查得待测组分的浓度，最后计在工作曲线上查得待测组分的浓度，最后计算试样中待测组分的含量。算试样中待测组分的含量。2增量法：增量法： 把未知试样溶液分成体积相同的若干把未知试样溶液分成体积相同的若干份，除其中的一份不加入待测组分的标份，除其中的一份不加入待测组分的标准物质外，在其它几份中都分别加入不准物质外，在其它几份中都分别加入不同量的标准物质。然后测定各份试液试同量的标准物质。然后测定各份试液试液的吸光度并绘制吸光度对加入的标准液的吸光度并绘制吸光度对加入的标准物质的浓度（增量）作图，得一标准曲物质的浓度（增量）作

36、图，得一标准曲线：线： 由于每份溶液中都含有待测组分，因由于每份溶液中都含有待测组分，因此，标准曲线不经过原点。将标准曲线此，标准曲线不经过原点。将标准曲线外推延长至与横坐标交于一点，则此点外推延长至与横坐标交于一点，则此点到原点的长度所对应的浓度值就是待测到原点的长度所对应的浓度值就是待测组分的浓度。组分的浓度。双波长分光光度法双波长分光光度法 2 1XA Y21AAA）（yxyxAAAA2211)(yyAA21xxAAA21xxxbCA）（21Y 的存在不干的存在不干扰扰 X 的测定的测定多组分的测定：多组分的测定：1)若吸收曲线互相不重叠若吸收曲线互相不重叠,则可在各自则可在各自max下分别测定下分别测定,方法同单一组分测定方法同单一组分测定.2)若吸收曲线互相重叠若吸收曲线互相重叠,可根据具有加和可根据具有加和性特点性特点,通过联立方程进行测定通过联立方程进行测定.