2动物细胞培养和核移植技术精品学案

1、课题：动物细胞培养和核移植技术看书划下以下内容并记忆1、动物细胞工程常用的技术手段有哪些？最基础的技术手段是？2、阅读“动物细胞培养”的相关内容，思考回答以下问题：（1 ）动物细胞培养的概念？实质？ （ 2）总结动物细胞培养的过程。（3）进行细胞培养时，为什么首先将组织分散成许多单个细胞？ （4）什么是细胞贴壁？培养贴附性细胞时，要求培养瓶或培养皿具备什么条件？ （ 5）什么是细胞的接触抑制？如何打破接触抑制？ （6）什么是原代培养？什么是传代培养？传代培养的细胞有什么特点？（7）进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ （8）体外培养细胞时需

2、要提供哪些物质？（9）体外培养细胞时需要什么样的环境条件？如何保证这样的环境条件？ （10）动物细胞培养技术有哪些用途？3、阅读“动物体细胞核移植技术和克隆动物”的相关内容，思考回答以下问题：（1）为什么不能直接利用动物细胞培育动物体？（2）什么是动物核移植？什么是克隆动物？（3）哺乳动物核移植可以分为哪两种类型？（ 4）为什么动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植？（ 5）以克隆高产奶牛为例，来说明体细胞核移植的大致过程。（6 ）在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？（7） 用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？（8

3、） 你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么？（ 9）体细胞核移植技术的应用有哪些方面？ （10）体细胞核移植技术存在的问题？填出以下内容检查预习情况一、动物细胞工程包括： 、等。二、 动物细胞培养：（一）意义：是其它动物细胞工程的基础。（二）概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成 ，然后在适宜的培养基上，让这些细胞和。2、 分散成单个细胞的方法：剪碎、用 或处理。3、 分散成单个细胞的目的：使细胞与培养液充分接触，便于吸收02和营养物质，排出代谢废物。4、 原代培养：将动物组织消化后的 。（ 10代以内或分瓶之前）5、 传代培养： 的

4、细胞继续培养。（10代以后或分瓶之后）6、两次停止期：（1） 10代左右有些细胞不能传代，有些细胞继续传代。（2） 50代左右绝大多数细胞死亡， 部分细胞 发生变化，获得，朝着等同于的方向发展，无限增殖。7、细胞株：50代以内原代培养和传代培养的细胞群。&细胞系：50代以后传代培养的细胞群。（五）动物细胞培养的条件：1、环境。（培养液和培养用具无菌处理、添加抗生素；定期更换培养液，以便清除细胞代谢产物）2、营养：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素。添加动物血清（补充合成培养基中缺乏的物质）。培养基： ，添加、等一些天然成分。3、温度、PH。温度：36.5 0.5C, PH=7.2 744

5、、 气体环境：（1 ） :细胞呼吸（2） :维持培养液的PH.培养装置：用或，置于95%空气加5%CO2的混合气体的 中培养。（六）动物细胞培养技术的应用：1、大规模生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体。2、用于基因工程受体细胞的培养。3、检测有毒物质。4、用于生理、病理、药理方面的研究。5、培养皮肤细胞用于植皮。（七）植物组织培养与动物细胞培养的比较：（三）理论基础:动物组织块说明：O剪碎（四）过程*单个细胞-加培养液制成- 细胞悬液1、动物细胞培养特点：生长时 、。细胞贴壁：在培养瓶中，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面 时，细胞就

6、会停止分裂增殖， 这种现象叫做接触抑制。植物组织培养动物细胞培养原理培养基过程略略结果用途快速繁殖培养无病毒植物、转基因植物生产细胞产品 生产生物制品如疫苗、干扰素、单克隆抗体 检测有毒物质研究药理病理。相同点三、动物体细胞核移植技术和克隆动物:5、人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织、器官后，用于组织、器官的移植。6、研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程，用克隆动物做疾病模型，能 使人们更好的追踪研究疾病的发展经过和治疗疾病。（七）体细胞核移植技术存在的问题：1、存活率低。2、技术环节有待改进。3、克隆动物存在健康问题。 4、克隆动物食品安全性存在争议。（一

7、）动物核移植：是将动物的一个细胞的 ，移入一个已经去掉 的卵细胞中，使其重组并发育成一个，这个新的胚胎最终发育为 。（二）动物核移植的种类： 、。（三）克隆动物：用核移植的方法得到的动物。（四）理论基础：。（五）体细胞核移植的过程：例l有关动物细胞培养的叙述中正确的是（A.动物细胞培养前要用胃蛋白酶使细胞分散C 细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中例2动物细胞工程技术的基础是（A .动物细胞融合动物细胞培养的主要目的是获得大量的细胞分泌蛋白D .动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散B .胚胎移植C.动物细胞培养D .核移植例3 一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后,这个卵细胞经过多次分

8、裂，再植入第三只羊的供体_细胞 细胞培养说明： 卵巢细胞减H-体细胞注入细胞肝 一无核卵/融合母细胞胚胎- 代孕_ 生出与供体遗传 移植母体物质相同的个体子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能（A .有选择的繁殖某一性别的家畜B .繁殖家畜中的优良个体C.用于保存物种 D .改变动物的基因型例4动物细胞培养和植物组织培养的重要区别在于（1、 供体：注入去核卵母细胞中的不是供体细胞核，而是 。2、 受体：受体细胞为减数第二次分裂中期的 ，此时在透明带内包含着第一极体， 在去核的同时连同第一极体一并去掉。3、 重组细胞发育成一个新个体，体现了 的全能性而非动物细胞的全能性

9、。4、 用卵母细胞做受体细胞原因：a.卵母细胞体积大，便于操作；b.卵黄多，营养物质丰富；c.易激发细胞核全能性的表达。5、克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。6、融合方法：电刺激（或用灭活的病毒）7、应用的技术：动物细胞培养技术、核移植技术、胚胎移植技术。（六）体细胞核移植技术的前景：1、 在畜牧生产中，可以加速家畜遗传改良进程，促进优良 。2、 在保护濒危物种方面，增加动物的 。3、 在医疗卫生领域，作为 ，生产许多珍贵的医用蛋白。4、 治疗人类疾病时，转基因克隆动物的细胞、组织、器官，可以作为的供体。A .培养基不同B .动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C

10、.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株例5下列关于植物组织培养与动物细胞培养的叙述正确的是（）A .二者基本原理是相同的B. 二者所需要的培养基是相同的C .二者所需要的目的和结果是相同的D. 二者的培养过程中都必须添加有机物例6用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确妁是（）A.都需要用CO2培养箱B.都需要用液体培养基 C.都要在无菌条件下进行 D.都可体现细胞的全能性 例7回答下列有关动物细胞培养的问题：（1） 在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数

11、是。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是。（2） 随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，该种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。（3） 检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。（4）在细胞培养过程中，通常在条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中的活11. （多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应器，成功地在实验室里培育出新的动脉血管这种血管的外形和功能都与真的血管一样，这一

12、研究成果是生物组织培养领域的重大进展下列关于以上技术的叙述中，正确的是：性降低，细胞的速率降低。A 属于克隆B 可能要利用去核卵细胞C .关键是激发血管细胞的全能性D .关键是激发血管细胞发育成血管的潜能A（5）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当做进行攻击。拓展延伸：1下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（）A 培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清B 原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞C 动物细胞培养一般能够传到 4050代，但其遗传物质发生了改变D .动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞2

13、生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功复生”野驴的方法是（）A 将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B .将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C 取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体D 将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体3. 下列哪一项属于克隆（）A 将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的 DNA分子中 B 将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C .将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D 将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系4. 有关全能性的叙述，

14、不正确的是（）A 受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高B 生物体内细胞由于分化全能性不能表达C.卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高D 植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性5. 动物细胞培养液和植物组织培养液的共有成分是（）A 葡萄糖B 蔗糖C 动物血清D 维生素6关于动物细胞培养的叙述错误的是A 用于培养的细胞最好取自健康动物体内的组织细胞B 将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理其分散成单个细胞，再稀释制成细胞悬液培养C 在培养瓶中要定期用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖D .传代培养的细胞在传至1050代左右时，增殖会

15、逐渐减慢，以至于完全停止，所培养的细胞全部衰老死亡7 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（）A.动物细胞培养B .动物细胞融合 C.单克隆杭体 D .胚胎、核移植&细胞株的特点是（）A 遗传物质没有改变，可以无限传代B 遗传物质发生改变，不可无限传代C 遗传物质没有改变，不可无限传代D 遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代9. 在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为12. 一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（） 无毒的环境无菌的环境合成培养基需加血浆温度与动物体温相近需要02,不需要CO2CO2能调培养液pHA .B .C .D .

16、13右图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：（1） 容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自 。（2） 容器 A中的动物器官或组织首先要进行的处理是，然后用酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是 。（3） 培养首先在 B瓶中进行，瓶中的培养基成分有 等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到第代，到这时的培养称为（4）为了把B瓶中的细胞分装到 C瓶中，用处理，然后配制成再分装。（5）在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，原因是14. CCTV 一 2于2005年4月7日报道，卫生部4月6日发布了苏丹红危险性报告评估，报道中提到苏丹红一号是一种人工色素

17、（工业染料），它在人体内代谢生成相应的胺类。科研人员欲采用一定的技术手段探究苏丹红是否对人体有危害。请回答：（1）根据所学的动物细胞工程知识，你认为采取下列哪种技术手段最合适：A .动物细胞融合B .动物细胞培养C.胚胎移植D .核移植（2）根据上述选择，请你设计一个实验来探究苏丹红一号”是否对人体有危害。1该实验的原理是：许多致畸、致癌物质加入动物细胞培养液后，培养细胞会发生染色体结构 和数目的变异。根据变异细胞占观察培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性。2实验方法步骤： 材料准备：从医院妇产科获取所需要的原材料组织，浓度为0.09%苏丹红一号”试剂，高倍显微镜，培养瓶若干，配制好的培养

18、液，剪刀，培养箱，所需要的酶。 制备检测细胞：a.配制细胞悬浮液： b 将悬浮液分装到两个以上的培养瓶中，置于培养箱中培养一段时间。 检测过程：第一步：取两只培养瓶，标号为1、2，分别往其中加入 ，再往1中滴加几滴0.09%“苏丹红一号”试剂，摇匀。第二步：将上述某一个培养状况较好的培养瓶的 分成两份，分别加入1、2培养瓶中，进行培养；第三步：一段时间后，分别从1、2培养瓶中取样作多次镜检，计算出变异细胞占观察培养细胞的百分数 实验结果观察、分析得出结论。（略）A .原代培养B .传代培养C .细胞株D .细胞系10. 如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是D、囊胚时期的胚胎细胞的A、乳腺细胞的B、卵细胞的C、胃腺细胞的2.2.1动物细胞培养和核移植技术参考答案例 1 6 DCDADC例7 （1）相互接触 接触抑制 单层（