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文档简介
1、细菌室尿路感染病原体检验操作规程1、尿液培养常见病原菌革兰革兰阴性菌金黄色淋病奈瑟菌肠大肠埃希菌阳性菌葡萄球菌球菌A群链球菌变形杆菌腐生葡萄球菌肺炎克雷伯菌表皮葡萄球菌产气肠杆菌结核分支杆菌沙门菌种铜绿假单胞菌沙雷菌2、标本收集2.1、尿液标本的采集可采用多种方法:有中段尿采集法、膀胱穿刺法、肾盂尿采集法,而常规是取中段尿作细菌培养。2.2、取中段尿作培养时先要进行前尿道的清洗消毒,以免前尿道寄生菌群污染标本。2.3、如采用其他方法收集标本,必须由临床医生根据临床诊断需要而执行收集术, 并在检验单上写明。3、检验步骤3.1、涂片检查3.1.1、一般细菌及淋病奈瑟菌涂片:以无菌操作吸取尿液 10
2、ml,3000r/min 离心 15min,去上清液,取沉淀涂片,革兰氏染色镜检,作初步报告。如查见革兰氏阴性双球菌,呈肾形位于细胞内或细胞外,报告“找到革兰阴性双球菌,存在于细胞内外,形似淋病奈瑟菌”。如未查见上述细菌可报告 “未发现革兰阴性双球菌”。3.1.2、念珠菌涂片:取尿液沉淀物放于清洁玻片上,覆以盖玻片,制成涂片,用高倍镜检查。革兰染色后,如发现发亮的芽生孢子和假菌丝, 就可报告“霉菌孢子及菌丝”。3.1.3、结核分枝杆菌:取尿液 10ml,4000r/min离心 30min,取沉淀物涂片,抗酸染色,镜检。如找到红色杆菌,可报告“查到抗酸杆菌” 。3.2、一般细菌培养 (细菌计数
3、):用定量接种环取尿液 10 u l 接种血平板, 35培养 1824 小时,观察有无细菌生长,并计数菌落数,乘以 1000,求出每毫升尿液的菌落数。根据菌落特征、涂片染色结果,进行鉴定和药敏试验, 如培养 48 小时无菌生长, 即报告“无细菌生长”。3.3、特殊菌培养:淋病奈瑟菌培养,选用专用巧克力琼脂平板,接种后放入二氧化碳环境中培养。4、检验程序尿标本离心、沉淀涂片染色分离培养淋病奈瑟菌培养(革兰及抗酸染色)血平板、麦康凯平板专用巧克力培养基( 5% 10%CO 2,35 ,18 24h)初步报告涂片染色镜检鉴定、药敏试验报告5、结果报告:5.1、尿液细菌培养检查必须报告细菌的种属、菌落计数 (cfu/m1)及药敏结果。5.2、革兰氏阴性菌落计数大于105cfu/ml ,革兰氏阳性菌计数大于104cfu/ml ,真菌大于103cfu/ml 有诊断意义。5.3、一般常规结核培养要 8 周方能报告。阳性结果可提前报告。但不做菌落计数只报告“抗酸杆菌生长”的报告,如做了进一步的分型和鉴定,才能报告“有型结核杆菌生长” 。5.4、用专用培养基培养淋球菌经鉴定可直接报告“有淋球菌生长”但不做菌落计数,如涂片发现细胞内或外有革兰氏
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