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文档简介

1、 C、H、O 三种元素所组成,是一类多羟基醛或多羟基酮,20 种氨基酸的化学结构(除甘氨酸外,均属 非极性 R 基氨基酸: Ala Leu Ile Pro Phe Trp Met必需氨基酸: Val Leu Ile Thr Met Lys Phe Trp脯氨酸:没有自由的 氨基,它是一种 亚氨基胱氨酸:是关半胱氨酸在蛋白质中的主要存在形式pH 条件下的泳动情况常在试题中出现。氨基酸自动分析仪的使用要了解。Ehrlish );酪氨酸米伦氏Pauly)(也可以检验酪氨酸)等。常常在选择题和氨基酸的序构包括二级结构(包括 螺旋结构, 折叠片层以及 转角和无规则卷曲,以氢键维持其稳定性) 、三级结构的

2、化学方法, 后者是基于分子克隆的分子生物学方法。 重组 DNA 测序法首先需要得到编码某种蛋白质的基因片段) ,然后测定 DNA 分子中核苷酸的排列顺序。 再根据三个核苷酸编码一个氨基酸的原则扒演出氨基酸的排列(DNA顺序。不必首先纯化该种蛋白质。这一复杂的过程借助于计算机的帮助可变得比较简单并高效。而解法则比较复杂。这首先需要纯化一定量的待测蛋白质裂解成大小不同的肽段;将每一肽段作序列分析,再连接起来。两种方法各有其特点。可以相互印证和补充。在Edman 化学降解中,常用肽羰与异硫氰酸苯酯反应,再用次序稀酸处理, 成为异硫氰酸苯酯衍生物, 用层析进行鉴定。 可作为 N 末羰鉴定的化学试剂还有

3、 FDNB 、DNS-CL(pI) 溶液中带电并在电场中向一极移动原理来分离蛋白质。 酶这一部分很重要, 近几年来生物化学的热点由核酸转向蛋白质, 而人体各效用的实现,最终还需依靠酶来完成,有关酶的概念和化学本质经常在各地的研究生入学考试题中出现,主要有以下一些考点:(2) 度特异性:酶的专一性主要是由酶特定的结构决定的,(3) 酶促反应没有副作用;果糖二磷酸醛缩酶 EC4.1.2.13磷酸葡萄糖异构酶 EC5.3.1.9pH、最适温度、酶的比km 的意义用及其求法是出现最频繁的考点。S。km 为酶的特征常数, 单位为 mmol/L 。不同酶有不同的 km 值,同一酶催化不同底物则有不同的km

4、 值 。各同工酶的 km 值也不同, 可借 km 值 作用物亲和力大; km 大则反映酶与作用物亲和力小。双倒数作图法是求 km 和 Vmax 最常用的作图法。 它将米氏方程作倒数处理, 得下式: 以 1/V 对 1/S 作图,可得一直线,从纵轴处的截距1/Vmax 及横轴上的截距 -1/km ,可准确求得 km 值和 Vmax 。pH 不是酶的特征常数,而且并不是所有的最适 pH 都近中性,如胃蛋白酶的最c. 当温度继续升高,酶蛋白变性增加,反应速度开始下降。d. 酶活性随温度而,但低温一般不使酶毁坏。e. 若酶捉反应进行时间短暂,其最适温度可相应提高。 VmaxKm/Vmax1/ Vmax

5、-1/ Vmax 腺苷酸 (AMP) 鸟苷酸 (GMP)胞苷酸 (AMP) 尿苷酸 (UMP)脱氧腺苷酸 (dAMP) 脱氧鸟苷酸 (dGMP)脱氧胞苷酸 (dAMP) 胸苷酸 (dTMP)(1)DNA 的一级结构: 指 DNA 分子中核苷酸的排列顺序及连接方式。 核苷酸的排列顺序代表了遗传信息。 四种核苷酸是通过 3,5磷酸二酯键连接在一起的。(2)DNA 的二级结构: 双螺旋结构中的碱基组成规则: A=T ,G=C ,且 A+G=T+C ;双螺旋结构模型的具体内容, Z-DNA(3)DNA 的三级结构: 主要形式为超螺旋, 生物体中最常见的超螺旋为负超螺旋。 负超螺旋的存在可以使基对打开所

6、需要的能量降低41KJ/mol ,因而,有利于 DNA 的双链分开。许多 DNA 旋转酶的抑制剂,如萘啶酮酸,香豆霉素和新生霉毒等均可以抑制大肠杆菌的DNA 复制。(二氢尿嘧啶环、反密码子环、mRNA 的三联体密码形成碱基互补配对,解读遗传密码, 称为反密码子, 次黄嘌呤 (I) 常出现于反密码子中。 氨基酸臂 3末端的 CCA-OH 单链用于连接该 tRNATRNA 的三级结构呈倒 L 型,其中反密码环和氨基酸臂分别位于倒4核酸的性质:主要是 DNA 的变性及复性。涉及到一些基本的概念,如:变性、复性、杂交、紫外吸收等,其中Tm 值、增色效应、减色效应是经常出现的考点;此外,还有变性及复性

7、DNA 理化性质的改变。许多试剂或一些物理因素,例如酸、碱、热、低离子强度的影响,将使氢键断裂,使DNA 由起初坚固的、螺旋(3)粘度下降: 天然 DNA 溶液具有很高的粘度, 这是由于 DNA 相当坚固的双螺旋结构及其长棒状的性质所决定的。当 DNA 变性双螺旋解型 粘度急剧下降,浮力密度升高。DNA 变性在一定条件下是可逆的。变性 260nm 波长处具有最大光吸收。 DNA 变性后,在 260nm 处的紫外吸收增高,称为增色Cytc1复合体 IIIATP复合体 I V :H S COCN 抑制复合体 IV 。4氧化磷酸化的作用机理:主要有化学偶联假立、构象偶联假说和化学渗透假说等几种假说。

8、目前较为普遍公认的学说是“化学渗透学说” (chemiosnotic theory )”。也是考试中出现得较多的一个考点。该学说认为, 电子经呼吸链传递释放的能量, 可将质子 H 从线粒体基质侧泵到内膜外侧, 产生质子电化学梯度而积蓄能量。当质子顺此梯度经 ATP 合酶 F 部分回流时,其 F 部分催化 ADP 和 Pi 生成 A TP。 Na K ATP 酶,使 ATP 加速分解为 ADP 和 Pi,促进由于线粒体内膜对物质的通透性具有严格的选择性,在线粒体外生成的化,需要借助穿梭系统才能使2H 进入线粒体内。体内有两种穿梭机制: 磷酸甘油穿梭( NADH FAD2H ,形NADH NADH

9、 ,形成 3ATP)。ATP 为中心。 磷酸肌酸是肌肉3磷酸甘油酸 1ATP1ATPCoA ,NADH H ,COTPP、硫辛酸、CoA 、 糖酵解和有氧氧化的比较有氧氧化a,b 两种形式,去磷酸化的a 型是有活性的,而磷酸化的能量(指糖原上每生成或降解一个糖原合成酶(连接 1,4糖苷键)分枝酶(连接连接 1,6糖苷键)糖基转移酶 (将 1,6链连接于分枝点的四个残基的葡三糖转移到另一链) 6磷酸酶。(1)乙醛酸循环的关键酶:异柠檬酸裂解酶和苹果酸合成酶。脂肪分解代谢首先是脂肪的动员,在胞液内进行。脂肪的动员是以甘油三酯脂肪酶起关键性作用,它是脂肪分解的限速酶,也是激素敏感性脂肪酶,受多种激素

10、调节。脂肪酸分解代谢过程:主要是脂肪酸的 氧化,包括:(1)脂肪酸的活化脂酰辅酶 A 的生成 (在胞液)在胞液中脂酰辅酶 A 合成酶(存在于内质网及线粒体外膜上) 的作用下, 由 ATP 提供能量, 在有 CoASH 存在下,可将脂肪酸活化生成脂酰CoA。I 和内侧的肉碱脂酰基转移酶I 是 氧化的限速酶。A 生成 1 分子乙酰 CoA 和 1 分子比原来少了 2 个碳原子的 CoA 脂酰。后者可再进行脱氢、加水、再脱氢和硫解,如A 分解成若干乙酰 CoA 、FADH 和 NADH H 。FADH 和 NADH H 通过呼吸链经氧化磷酸化后产生能量。 氧化HMGCoA 羟丁酸都先被转化成乙酰 A

11、CP)。在胞液内进行。 酮脂酰 ACP 合成酶CoA 参加的那步反应。(3)合成原料:乙酰 CoA 、NADPH H ,它是葡萄糖、氨基酸及脂肪酸在线粒体内的分解代谢的产物,需经柠檬7脱氢胆固醇、胆固醇酯、维生素PRPP,作为重要中间产物,可参与哪些反应考题中出现过多次) (1) 一般是在二磷酸核苷的水平上生成, 此特点既适于脱氧嘌呤核苷酸, 也适于脱氧嘧啶核苷酸 (dUDP 和 dCDP)。PRPP反应生成嘧啶核苷酸。CO 。基中胞嘧啶和尿嘧啶分解主要考察基本概念、复制方式、复制的基本过程、复制的酶、知识点。 NAD6 种蛋白结合形成引发体。(1) 起始:过程较复杂,把DNA 解成单链和生成

12、引物,包括在拓扑酶和解链酶的作用下把原核生物: 催化酶是 DNA 聚合酶 III ,是多亚基的不对称二聚体, 各有核心酶组分, 在连续和不吉分别执行效用。DNA 采取的特殊复制形式。5逆转录:依赖 RNA 的 DNA 合成作用,以 RNA 为模板,由 dNTP 聚合成 DNA 分子。其过程包括三步:以为模板合成 DNA ,杂化双链上 RNA 的水解,再以单链 DNA 为模板合成双链 DNA 。方向也是从 5 3RNA逆转录酶:依赖 RNA 的 DNA 聚合酶。具有三种酶活性:RNA 指导的 DNA 合成反应RNA 的水解反应(1)转录的模板: DNA 双链中按碱基配对能指引转录生成(2)酶:

13、RNA 聚合酶。起始过程和终止过程中起作用的因子或序列,原核生物中录终止信号。另外,在转录终止部位有特殊的碱基序列,即一段因子能辨认启动子部位,起始转录 因子可识别转GC 富集区,随后是一段 AT 富集区。在 GC 富集区内组成一段反向重得序列, 转录至此生成的 RNA 在相应序列中形成了发卡结构, 使 RNA 聚合酶脱离模板而终止转录。 RNA ,其前体是非均一 RNA (hnRNA )。HnRNA 需要经垞复杂的加工过程才剪接: 去除内含子部分, 再将外显子连接起来, 此过程中有多种酶和其他活性物质参与 (如 snRNA、UsnRNA ;第十一章 蛋白质代谢FAD )和 D氨基酸氧化酶。基

14、酸,如谷丙转氨酶( GPT)、谷草转氨酶( GOT )。(1) 关键酶:氨基酸脱羧酶(2) 辅酶:为磷酸吡哆醛 氨基甲酰磷酸合成酶 II涉及基本概念较多,翻译、 ribozyme(核酶)、翻译的起始因子、延长因子、释放因子、氨基酸密码的简并性、摆动性、 SD 序列、信号肽、酶的诱导、端粒酶等。合成原料氨基酸,以 mRNA 为模板, tRNA 为运载体,核蛋白体为装配场所。此外,还有有关的酶蛋白质因子、tRNA 从“给位”上脱落,并促进移动。 RF 使大亚基转肽酶将“给位”上已合成的肽链水解释放。2遗传密码的特点:连续性;简并性;摆动性;通用性GTP,真核还需 ATP。(2)肽链延长阶段: 每增加一个氨基酸, 就按进位、 转肽、脱落和移位这四个步骤重复进行。 进位除需延

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