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1、1.(2017年全国卷I)38 生物选修3:现代生物科技专题(15分)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题:(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是 。(2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用 作为载体,其原因是 。(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比,大肠杆菌具有 (答出两点即可)等优点。(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可

2、用的检测物质是 (填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是 。38.(15分)(1)基因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出蛋白A(2)噬菌体 噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕(3)繁殖快、容易培养(4)蛋白A的抗体(5)DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体 1. (2017年全国卷II)38生物选修3:现代生物科技专题(15分)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催

3、化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题:(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是 。提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是 。(2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是 。(3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是 (答出两点即可)。(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是 。(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分

4、析,其可能的原因是 。38.生物选修3:现代生物科技专题(1)嫩叶组织细胞易破碎 防止RNA降解(2)在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA(3)目的基因无复制原点:目的基因无表达所需启动子(4)磷酸二酯键(5)目的基因的转录或翻译异常2. (2017年全国卷)38生物选修3:现代生物科技专题(15分)编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。回答下列问题:(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCTCAGGAAGGA

5、),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是 。(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为 ,加入了 作为合成DNA的原料。(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。由图2 可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是

6、 。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是 。仅根据图、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少 (填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。38. 生物选修3:现代生物科技专题(1)编码乙的DNA序列起始端无ATG,转录出的mRNA无起始密码子(2)模板 dNTP(3)进行细胞传代培养 维持培养液是的pH C(2016全国卷1)40生物选修3:现代生物科技专题(15分)某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将

7、此质粒载体用BamHI酶切后,与用BamHI酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有 (答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是 ;并且 和 的细胞也是不能区分的,其原因是 。在

8、上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有原因是 的固体培养基。(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自于 【解析】(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有具有一个或多个限制酶酶切位点、具有标记基因、能够在宿主细胞中复制表达等。(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是两者都不含氨苄青霉素抗性基因,在氨苄青霉素的培养基上都不能生长,含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是两者都含有氨苄青

9、霉素抗性基因,在氨苄青霉素的培养基上都能生长。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有四环素的固体培养基,因为重组质粒上四环素抗性基因功能丧失,而质粒载体上的四环素基因功能完好,因此含有质粒载体的细胞可以在含四环素的培养基上生长,而含有插入了目的基因的重组质粒的细胞不能在含四环素的培养基上生长。(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自于受体细胞,例如该道题中重组质粒导入大肠杆菌,大肠杆菌在这里就是受体细胞。考点:基因工程(2016全国卷III)40图(a)中的三个DNA片段上以此表示出了EcoR I、BamH

10、I和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体示意图(载体上的EcoR I、Sau3A I的切点是唯一的)。根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)经BamH I酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被 酶切后的产物连接,理由是 。(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子,如图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有 ,不能表达的原因是 。(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有 和 ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是 。【参考答案】(1)Sau3A 限制酶Sau3A与Ba

11、mH切割后形成的黏性末端相同(2)甲、丙 在基因表达载体中,启动子应位于目的基因的首端,终止子应位于目的基因的尾端,这样目的基因才能表达。图中甲、丙均不符合,所以不能表达目的基因的产物(3)EcoliDNA连接酶 T4DNA连接酶 T4DNA连接酶【解析】(1)由于限制酶Sau3A与BamH切割后形成的黏性末端相同,所以经BamH酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被Sau3A酶切后的产物连接。(2)在基因表达载体中,启动子应位于目的基因的首端,终止子应位于目的基因的尾端,这样的目的基因才能表达。图中甲、丙均不符合,所以不能表达目的基因的产物。(3)常见DNA连接酶的有EcoliDNA连接酶

12、和T4DNA连接酶,其中即能连接黏性末端又能连接平末端的是EcoliDNA连接酶(2015新课标卷,40,15分)40.生物选修3:现代生物科技专题 HIV属于逆转录病毒,是艾滋病的病原体。回答下列问题:(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HIV中的 ,以其作为模板,在 的作用下合成 。获取该目的蛋白的基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞。(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白,该蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是 。该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV,检测的原理是 。(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见,但是在艾滋病患

13、者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分 细胞,降低了患者免疫系统的防卫功能。(4)人的免疫系统有 癌细胞的功能,艾滋病患者由于免疫功能缺陷,易发生恶性肿瘤。【答案】(1)RNA 逆转录酶 cDNA(或DNA)(2)抗体 抗原抗体特异性结合(3)T(或T淋巴)(4)监控和清除【解析】(1)HIV属于逆转录病毒,它的遗传物质是RNA,在逆转录酶的作用下可以逆转录为cDNA,用于构建基因表达载体,从而制备HIV的某蛋白。(2)HIV的某蛋白作为抗原进入机体后,能刺激人体产生针对该抗原的一种特殊的分泌蛋白抗体;可用该抗体进行抗原抗体进行杂交来检测血清中是否含有HIV。(3

14、)HIV病毒营寄生生活,寄生在T淋巴细胞内,T细胞参与体液免疫和细胞免疫,因此少了T细胞,特异性免疫几乎全部丧失,降低了机体的免疫功能。(4)人体的免疫系统具有防卫、监控和清除的功能,可及时清除体内产生的癌细胞,艾滋病患者的整个免疫功能缺陷,机体会发生一系列顽固性机会感染和肿瘤的发生。(2015新课标卷,40,15分)40.【生物选修3:现代生物科技专题】(15分)已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是一种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题:从

15、上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的 进行改造。以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰 基因或合成 基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包括 的复制;以及遗传信息在不同分子之间的流动,即: 。蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过 和 ,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物 进行鉴定。【答案】(1)氨基酸序列(或结构)(1分,其他答案合理也给分) (2)P P1 (每空2分,共4分) DNA和RNA(或遗传物质)(2分) DNARNA、 RNADNARN

16、A蛋白质(或转录、逆转录、翻译)(3分) (3)设计蛋白质的结构 推测氨基酸序列(每空2分,共4分) 功能(1分)【解析】本题考查蛋白质工程相关知识,难度较小。(1) 对蛋白质的氨基酸序列(或结构)进行改造,可达到改变蛋白质的功能的目的。(2)以P基因序列为基础,获得P1基因,可以对P基因进行修饰改造,也可以用人工方法合成P1基因;中心法则的全部内容包括DNA的复制、 DNA RNA、RNADNA、RNA蛋白质(或转录、逆转录、翻译)。(3)蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过设计蛋白质结构和推测氨基酸序列,推测相应的核苷酸序列,并获取基因。经表达的蛋白质,要对其进行生物功能鉴定。

17、(2014课标卷)40生物选修3:现代生物科技专题(15分)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题:(1)理论上,基因组文库含有生物的 基因;而cDNA文库中含有生物的 基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中 出所需的耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物 的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的 ,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的 是否得到

18、提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时,则可推测该耐旱基因整合到了 (填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。【答案】(1)全部 部分(2)筛选(3)乙 表达产物 耐旱性(4)同源染色体的一条上【解析】(1)基因文库包括基因组文库和cDNA文库,基因组文库包含生物基因组的所全部基因,cDNA文库是以mRNA反转录后构建的,只含有已经表达的基因(并不是所有基因都会表达),即部分基因。(2)从基因文库中获取目的基因需要进行筛选。(3)要提高植物乙的耐旱性,需要要利用农杆菌转化法将耐旱基因导入植物乙的体细胞中。要检测目的基因(耐旱基因)是

19、否表达应该用抗原抗体杂交检测目的基因(耐旱基因)的表达产物(即耐旱的相关蛋白质);个体水平检测可以通过田间实验,观察检测其耐旱性情况。(4)如果耐旱基因整合到同源染色体的两条上,则子代将全部表现耐旱,不会出现性状分离。或“如果耐旱基因整合到同源染色体的一条上,则转基因植株的基因型可以用A_表示(A表示耐旱基因,_表示另一条染色体上没有相应的基因),A_自交后代基因型为AAA_ _=121,所以耐旱不耐旱=31,与题意相符2. (2013新课标I卷)40【生物选修 3 现代生物科技专题】(15 分) 阅读如下材料: 材料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科

20、学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。 材料乙:T4 溶菌酶在翁度较高时易失去活性,科学家对编码 T4 溶菌酶的基因进行改造,使其表达的 T4 溶菌酶的第 3 位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第 97 为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了 T4 溶菌酶的耐热性。 材料丙:兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎课在不同个体的体内发育。 回答下列问题:(1)材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用 法。构建基因表达载体常用的工具酶有 和 。在培育转基因植物是,常用农杆菌转化发,农杆

21、菌的作用是 。 (2)材料乙属于 工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对 进行改造,或制造制造一种 的技术。在该实例中,引起 T4 溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 序列发生了改变。 (4)材料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到 种的,生理状况相同的另一个雌性动物体内,使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中,兔甲称为 体,兔乙称为 体。 【答案】(1)显微注射法 限制性内切酶 DNA 连接酶 农杆菌可感染植物,将目的基因转移到受体细胞中 (2)蛋白质 现有蛋白质 新蛋白质 氨基酸 (3)同 供体 受体 【解析】(1)将基因

22、表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法,构建基因表达载体常用的工具酶是限制性内切酶和 DNA 连接酶。农杆菌的作用是将目的基因导入到植物(受体)细胞内。 (2)资料乙中的技术属于蛋白质工程的范畴,该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过对基因修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质的技术。在该实例中,引起 T4 溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的氨基酸序列发生了改变。 (3)胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。在资料丙实例中,兔甲称为供体,兔乙称为受体 【试题点评】本题通过基因工程和胚胎工程知识结

23、合,主要考查对基础知识的理解和识记能力。(2012全国卷新课标版)40现代生物科技专题(15分)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:()限制性内切酶切割分子后产生的片段,其末端类型有 和 。()质粒运载体用EcoR切割后产生的片段如下:为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是 。()按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即DNA连接酶和DNA连接酶。()反转录作用的模板是 ,产物是 。若要在体外获得大量反转录产物,常采用 技术。()基因工程中除质粒外,和也可作为运载体。()若用重组质粒转化大肠杆菌,一

24、般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是 。【解析】本题着重考查基因工程方面的知识。限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端,平末端和黏性末端。两种不同酶切割之后便于相连,所产生的黏性末端必须相同。coliDNA连接酶可以连接黏性末端,DNA连接酶可以连接两种末端,反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA,再合成双链DNA,利用技术进行大量扩增。基因工程中可以选用质粒,噬菌体、动植物病毒做载体。当受体细胞是细菌时,为了增大导入的成功率,常用Ca+处理,得到感受态细胞,此时细胞壁和细胞膜的通透性增大,容易吸收重组质粒。【答案】()平末端和粘性末端 ()切割产生的D

25、NA片段末端与EcoR切割产生的相同 ()coli ()mRNA 单链(聚合酶链式反应) ()动植物病毒噬菌体的衍生物 ()未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱(2014课标卷)40.生物选修3:现代生物科技专题(15分)某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测

26、,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题:(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过 次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是 小鼠,理由是 。(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有 ,体系中出现多种类型细胞的原因是 。(3)杂交瘤细胞中有 个细胞核,染色体数目最多是 条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是 。【答案】(1)四 Y Y小鼠的抗体效价最高(2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞,骨髓瘤细胞相互融合形成的细

27、胞 细胞融合是随机的,且融合率达不到100%(3)1 100(4)不能无限增殖【解析】(1)据图分析,第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上,小鼠Y的B淋巴细胞产生抗体效价最高,最适用于制备单克隆抗体。(2)融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外,还有骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的自身融合产物,由于细胞膜具有流动性,且诱导之后的细胞融合不具有特异性,故体系中会出现多种类型的细胞。(3)杂交瘤细胞形成后,小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个细胞核。小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)和骨髓瘤细胞(染色体数目60条)融合后,染色体可达100条。(4)未融合的B淋

28、巴细胞经多次传代培养后,仍然不是能恶性增殖的细胞,同时正常细胞的分裂次数是有限的。13. (2013新课标II卷)40.生物选修 3:现代生物科技专题(15 分) 甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分 A,乙含有效成分 B。某研究小组拟培育同时含有 A 和 B 的新型药用植物。 回答下列问题: (1) 为了培育该新型药用植物,可取甲和乙的叶片,先用 酶和 酶去除细胞壁,获得具有活力的 ,再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成 组织,然后经过 形成完整的杂种植株。这种培育技术称为 。 (2) 上述杂种植株属于多倍体,多倍体是指 。假设甲与乙有性杂交的后代是不

29、育的,而上述杂种植株是可育的,造成这种差异的原因是 。 (3) 这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的 等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。 【答案】(1)纤维素酶 果胶酶 原生质体 愈伤 再分化(或分红) 植物体细胞杂交技术 (2) 体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体在减数分裂过程中,前者染色体联会异常,而后者染色体联会正常 (3) 胚状体、不定芽、顶芽、腋芽 【解析】(1)纤维素和果胶是细胞壁的主要成分。去除细胞壁常用的方法是用纤维素酶和果胶酶去除。去除细胞壁后,得到原生质体。诱导融合后,原生质体需要经过脱分化过程形成愈伤组织,然后再经过再分化过程形成

30、完整的杂种植株。 (2) 略 后代不育一般是由于在减数分裂过程中染色体联会紊乱引起的。 (3) 制造人工种子一般采用经植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽或腋芽 【试题点评】本题考查植物细胞工程的相关内容并结合考查了多倍体育种,试题以识记考查为主,难度较低。 (2010年全国新课标卷)40生物选修模块3:现代生物科技专题(15分) 请回答: (1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ,繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养,最终能够形成完整的植株,说明该叶肉细胞具有该植物的全部 。 (2)把试管苗转接到新的培养基上时,需要在超净工作台上进行,其原因是避免

31、 的污染。(3)微型繁殖过程中,适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ,而与 配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长,促使愈伤组织产生和生长,需尊使用的生长调节剂是 (脱落酸、2,4-D)。(4)将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后,单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析,随着培养基中蔗糖浓度的增加,光合作用强度的变化趋势是 ,单株鲜重的变化趋势是 。据图判断,培养基中不含蔗糖时,试管苗光合作用产生的有机物的量 (能、不能)满足自身最佳生长的需要。 (5)据图推测,若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力,应 (降低,增加)培养基中蔗糖浓度,以便提高试管苗的

32、自养能力。40生物选修模块3:现代生物科技专题(15分)(1)遗传特性 快 遗传信息(2)微生物(3)生根 细胞分裂素 2,4-D(4)逐渐减小 先增加后下降 不能(5)降低(2011年全国新课标卷)40生物选修3;现代生物科技专题(15分)现有一生活污水净化处理系统,处理流程为“厌氧沉淀池曝光池兼氧池植物池”,其中植物池中生活着水生植物、昆虫、鱼类、蛙类等生物。污水经净化处理后,可用于浇灌绿地。回答问题: (1)污水流经厌氧沉淀池。曝气池和兼氧池后得到初步净化。在这个过程中,微生物通过 呼吸将有机物分解。 (2)植物池中,水生植物、昆虫、鱼类、蛙类和底泥中的微生物共同组成了 (生态系统、菌落

33、、种群)。在植物池的食物网中,植物位于第 营养级。植物池中所有蛙类获得的能量最终来源于 所固定的 能。 (3)生态工程所遵循的基本原理有整体性、协调与平衡、 和 等原理(4)一般来说,生态工程的主要任务是对 进行修复,对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善,并提高生态系统的生产力。40(1)无氧和有氧(或细胞) (2)群落 一 生产者 太阳 (3)物质循环再生 物种多样性 (4)已被破坏的生态环境(或受损的生态系统)3. (2017年江苏卷)33. (8分)人金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多 聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金

34、属废水的净 化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题: (1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过 获得 _用于PCR扩增。 (2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重 组质粒,在引物中需要增加适当的 位点。设计引物 时需要避免引物之间形成 ,而造成引物自连。 (3)图中步骤1代表_,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤 组成一轮循环。 (4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破 的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长 度相同但 的引物需要设定更高的退火温度。 (5)如果PCR反应得不到任何扩增产

35、物,则可以采取的改进措施有_(填 序号:升高退火温度 降低退火温度 重新设计引物)。33. (8分) (1)逆转录 cDNA (2)限制性核酸内切酶 碱基互补配对 (3)变性 (4)引物与模板 GC含量高 (5)4. (2017年天津卷)9(20分)玉米自交系(遗传稳定的育种材料)B具有高产、抗病等优良性质,但难以直接培育成转基因植株,为使其获得抗除草剂性状,需依次进行步骤I、II试验。获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如下图。(1)为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是_(单选)。Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一

36、个切割位点酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同A B C D(2)下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知,细胞脱分化时使用的激素是_,自交系_的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。(3)农杆菌转化愈伤组织时,T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织,需使用含_的选择培养基。(4)转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织,出现蓝色的是_(多选)。A无农杆菌附着的未转

37、化愈伤组织B无农杆菌附着的转化愈伤组织C农杆菌附着的未转化愈伤组织D农杆菌附着的转化愈伤组织(5)组织培养获得的转基因植株(核DNA中仅插入一个G基因)进行自交,在子代含G基因的植株中,纯合子占_。继续筛选,最终选育出抗除草剂纯合自交系A。9(20分)(1)A(2)2,4D 乙(3)除草剂(4)BD(5)1/3(2016年江苏卷)33.(9分)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题: (1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用_两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过_酶作用后获得重组质粒。为了扩

38、增重组质粒,需将其转入处于_态的大肠杆菌。(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加_,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中_。(3)若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为 ,对于该部位,这两种酶 (填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开。(4)若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得 种大小不同的DNA片段。【答案】(1)BclI和Hind 连接 感受 (2)四环素 引物甲和引物丙(3) 都不能 (4)7【解析】(1)选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点,但BamH I可能使质粒中启动丢

39、失,因此可能选Bcl I和Hind。酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于感受态的大肠杆菌。(2)为了筛选出转入重组质粒的大肠杆菌,根据质粒上的抗性基因,应在筛选平板培养基中添加四环素。PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合,沿相反的方向合成子链。(3)根据BamHI和Bcl I的酶切点,BamHI酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为 ,与两种酶的酶切位点均不同。(4)根据BamH I、Bcl I和Sau3A I的酶切位点,Sau3A I在质粒上有三个酶切位点,完全酶切可得到记为A、B

40、、C三种片段,若部分位点被切开,可得到AB、AC、BC、ABC四种片段,所以用Sau3A I切图1质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段。考点:基因工程。(2015年海南,31【生物选修3:现代生物科技专题】(15分)在体内,人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链,此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原,进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后,产生A、B两条肽链,再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。目前,利用基因工程技术可大量生产胰岛素。回答下列问题:(1)人体内合成前胰岛素原的细胞是 ,合成胰高血糖素的细胞是 。(2)可根据胰岛素原的氨基酸

41、序列,设计并合成编码胰岛素原的 序列,用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体。再经过细菌转化、筛选及鉴定,即可建立能稳定合成 的基因工程菌。(3)用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时,培养液无抗原抗体反应,菌体有抗原抗体反应,则用该工程菌进行工业发酵时,应从 中分离、纯化胰岛素原。胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。【答案】(1)胰岛B细胞 胰岛A细胞 (2)DNA序列 胰岛素原 (3)菌体【解析】(1)由题意可知,前胰岛素原在细胞内经加工后成为胰岛素,人体合成胰岛素的细胞是胰岛B细胞,所以合成前胰岛素原的细胞也是胰岛B细胞;合成胰高血糖素的细胞是胰岛A细胞。(2)根据胰岛素原的氨基

42、酸序列,可设计并合成编码胰岛素原的DNA序列(即目的基因);用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体,再经过细菌转化、筛选及鉴定,即可建立能稳定合成人胰岛素原的基因工程菌。(3)根据题意,培养液无抗原抗体反应,菌体有抗原抗体反应,所以用该工程菌进行工业发酵时,应从菌体中分离、纯化胰岛素原,经酶处理便可转变为胰岛素。(2015安徽卷,31,9分)(9分)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如图。(1) 由过程获得的A为_。(2) 在核移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核,目的是_。受体应选用_期卵母细胞。(3) 进

43、行胚胎移植时,代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生_,这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆,理论上可获得无限个转基因绵羊,这是因为_。31、答案(1) 含目的基因的表达载体。(2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞 M (3)免疫排斥反应(4)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养 解析(1)根据题意可知,要将人凝血因子IX基因导入绵羊胎儿成纤维细胞,必须构建基因表达载体,所以由过程获得的A为基因表达载体。(2)为保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞,在核移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核。受体应选用减数第二次分裂中(M中)

44、期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时,代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆,理论上可获得无限个转基因绵羊,这是因为整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养。(2015年天津,8)纤维素分子不能进入酵母细胞,为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精,构建了含3种不同基因片段的重组质粒,下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。据图回答:(1)本研究构建重组质粒时看选用四种限制酶,其识别序列如下图,为防止酶切片段的自身环接,可选用的限制酶组合是_或_(2) 设置菌株为对照,是

45、为了验证_不携带纤维素酶基因。(3) 纤维素酶基因的表达包括_和_过程,与菌株相比,在菌株、中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有_。(4)在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株、,菌株_不能存活,原因是_。(5)酵母菌生产酒精的细胞部位是_,产生酒精时细胞的呼吸方式是_,在利用纤维素生产酒精时,菌株更具有优势,因为导入的中重组质粒含有_。使分泌的纤维素酶固定于细胞壁,减少因培养液更新二造成的酶的流失,提高酶的利用率。【答案】(1)B (或C) C (或B) (2)质粒DNA和酵母菌基因组(3) 转录 翻译 内质网、高尔基体 II 缺少信号肽编码序列,合成的纤维素酶不能分泌到胞外,细胞无可利

46、用的碳源(5)细胞质基质 无氧呼吸 A基因片段(2015年江苏,32.9分)胰岛素A、B链分别表达法是生产胰 岛素的方法之一。 图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工 程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白 A、B分别表示-半乳糖苷酶与胰岛素A、B 链融合的蛋白)。请回答下列问题: (1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 _ 。 (2)图1中启动子是 _ 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是 _ 。 (3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 _ 。 (4)-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐

47、藏在内部,其意义在于 _ 。 (5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为 _ 。 (6)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是 _ ,理由是 _ 。 (2015年四川,9,11分)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中,可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如下图所示(注:农杆菌中Ti质拉上只有TDNA片段能转移到植物细胞中)。(1)过程需用同种酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来,应使用培养基。(2)过程中将棉花细胞与

48、农杆菌混合后共同培养,旨在让进入棉花细胞;除尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是。(3)若过程仅获得大量的根,则应在培养基中增加以获得芽;部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,原因是。(4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是。种植转基因抗虫棉能减少的使用,以减轻环境污染。答案:(1)限制选择(2)TDNA片段筛选出含目的基因的受体细胞(3)细胞分裂素部分细胞也能产生生长素(4)接种害虫农药解析:(1)过程需用同种限制性核酸内切酶(限制酶)对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切.为14过程获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来,应使用选择培养基.(2)过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让重组质粒中的T-DNA片段进入棉花细胞;除抽尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是筛选出含目的基因的受体细胞.(3)若过程仅获得大量的根,则应在培养基中增加细胞分裂素以

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