常用缓冲溶液配制方法

1、1.甘氨酸-盐酸缓冲液（L） X毫升mol/L甘氨酸+Y毫升mol/L HCI，再加水稀释至 200毫升 pH X Y pH X Y 50 50 50 50 50 50 50 50 甘氨酸分子量=,mol/L 甘氨酸溶液含 15.01 克 / 升。 2.邻苯二甲酸- -盐酸缓冲液（ mol/L ) X毫升mol/L 邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl，再加水稀释到20毫升 pH(20 C) X Y pH(20 C) X Y 5 5 5 5 5 5 5 5 5 邻苯二甲酸氢钾分子量=,mol/L邻苯二甲酸氢溶液含 40.85克/升 3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 pH L NazHPQ (毫升

2、) L 柠檬酸 （毫升） pH L NazHPQ (毫升) L 柠檬酸 （毫升） Na2HPO分子量=,mol/L溶液为28.40克/升。 NazHPQ 2H2O分子量=,mol/L 溶液含35.01克/升。 C4H2O7 - HO分子量=,mol/L 溶液为21.01克/升。 4 柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 （mol/L） 柠檬酸（克） CH8G - H2O 210 210 210 210 245 285 266 氢氧化钠 盐酸（毫升） 最终体积 （克） HCl （浓） （刑 NaOH 97% 84 160 10 83 116 10 83 106 10 83 45 10

3、144 68 10 186 105 10 156 126 10 使用时可以每升中加入 1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化 钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（mol/L ） pH mol/L 柠檬酸 （毫升） mol/L 柠檬酸钠 （毫升） pH mol/L 柠檬酸 （毫升） mol/L 柠檬酸钠 （毫升） 柠檬酸GHO HO分子量，mol/L溶液为21.01克/升。 柠檬酸钠N NqHPQ： pKal =,pKa2= 配酸性缓冲液：用 NaHPQ, pH= 14, 配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH= 68, 配碱性缓冲液：用 NazHPQ, pH

4、= 1012。 用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电 泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难 溶的十二烷基硫酸钾。 磷酸盐缓冲液的优点为：容易配制成各种浓度的缓冲液；适用的pH范围宽；pH 受温度的影响小；缓冲液稀释后pH变化小，如稀释10倍后pH的变化小于。 其缺点为：易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg24离子以及重金属离子缔合生成沉淀； 会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。 (2)磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液(1/15 mol/L ) pH mol/L/15Na 2HPO

5、（毫升） mol/L 15M11.876 克 15M9.078 克 0.05M0.2M 20 C 20 C 18C 0.04M 0.04M 0.04M8.25 克 0.05M25 C 0.1M 1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 11.硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根） pH 0.05M硼砂 （毫升） 0.2M硼酸（毫 升） pH 0.05M硼砂 （毫升） 0.2M硼酸（毫 升） 硼砂NstBQ 10HO,分子量=;溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。 硼酸H3BO,分子量=,溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶

6、中保存。 12甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05M） X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 甘氨酸分子量=；0.2M溶液含15.01克/升。 13硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根） X毫升0.05M硼砂+Y毫升加水稀释至 200毫升 pH X Y pH X Y 50 50 50 50 50 50 硼砂NstB4O 10HO,分子量=;0.05M溶液为19.07克/升。 14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M） CsT、Mg+存在时不得使用 pH （毫升） （毫升） 20 C 37 C 1 9

7、 2 8 3 7 4 6 5 5 6 4 7 3 8 2 9 1 NaCO- 10H2O分子量=;0.1M溶液为28.62克/升。 N2HCO分子量=;0.1M溶液为8.40克/升。 15.“PBS缓冲液 pH H2O 1000 1000 1000 100ml NaCl 8.5g NHPO 2.2g NaHPQ 0.4g pH标准缓冲溶液 Standard pH Buffer Solutions 名称 配制 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) (Name) (Compounding way) 0 C 5C 10C 15C 20 C 25 C 30

8、 C 35 C 40 C 草酸盐 cKH3(C2O4)2 -2H2O 标准缓 为L。称取12.71g 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) 冲溶液 四草酸钾 45 C 50 C 55 C 60 C 70 C 80 C 90 C 95 C - KH3（C2d） 2 2H2O 溶于无二氧化碳的 水中，稀释至 1000ml - 酒石酸 在25C时，用无二 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) 盐标准 氧化碳的水溶解外 0 C 5C 10C 15C 20 C 25 C 30 C 35 C 40 C 缓冲溶 消旋

9、的酒石酸氢钾 - - - - - 液 （KHGHQ），并剧烈 振摇至成饱和溶液 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) 45 C 50 C 55 C 60 C 70 C 80 C 90 C 95 C - - 苯二甲 cGHCOHCOK)为 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) 酸氢盐 L,称取于士 C干燥 0 C 5C 10C 15C 20 C 25 C 30 C 35 C 40 C 标准缓 23h的邻苯二甲 冲溶液 酸氢钾（KHCHOk） 10.21g ,溶于无CO 的蒸馏水，并稀释 至 1000ml

10、（注：可用于酸度 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) 45 C 50 C 55 C 60 C 70 C 80 C 90 C 95 C - - 计校准) 磷酸盐 标准缓 冲溶液 分别称取在士C干 燥23h的磷酸氢 二钠(N&HPQ) (3 . 53 士 0 . 01)g 和磷酸二氢钾 0 C 5C 10C 15C 20 C 25 C 30 C 35 C 40 C 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) 硼酸盐 标准缓 冲溶

11、液 (KHPQ) (3 . 39 士 0. 0i)g，溶于预 先煮沸过15 30min并迅速冷却 的蒸馏水中，并稀 释至1000ml (注： 可用于酸度计校 准) 45 C 50 C 55 C 60 C 70 C 80 C 90 C 95 C - - 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) c(Na2B4O 10H2O)称 取硼砂 (NqBQ 10H2O) (3 . 80 士 0 . 01)g (注意：不能烘！), 溶于预先煮沸过 1530min并迅速 冷却的蒸馏水中， 并稀释至 1000ml。 置聚乙烯塑料瓶中 密闭保存。存放时 0 C 5C 10

12、C 15C 20 C 25 C 30 C 35 C 40 C 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) 45 C 50 C 55 C 60 C 70 C 80 C 90 C95 C 要防止空气中的 CQ的进入(注：可 用于酸度计校准) 氢氧化 钙标准 缓冲溶 液 在25 C，用无二氧 化碳的蒸馏水制备 氢氧化钙的饱和溶 液。氢氧化钙溶液 的浓度 c1/2Ca(0H) 2应在 () mol/L。氢氧 化钙溶液的浓度可 以酚红为指示剂， 用盐酸标准溶液 C(HCI)=L滴定测 岀。存放时要防止 空气中的二氧化碳 的进入。出现混浊 应弃去重新配制 不同温度时

13、的pH 值(pH in differe nt temperatures) 0 C 5C 10C 15C 20 C 25 C 30 C 35 C 40 C 不同温度时的pH 值(pH in differe nt temperatures) 45 C 50 C 55 C 60 C 70 C 80 C 90 C 95 C - - - - - - 注：为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制 常用pH缓冲溶液的配制和 pH值 Preparati on and pH Values of Com mon pH Buffer Soluti ons 序号 (No.) 溶液名称 (Solu

14、tio n n ame) 配制方法 (Preparati on) pH值 (pH value) 1 氯化钾-盐酸 ml mol/L HCl 与 ml mol/LKCl 混合均 匀后，加水稀释至100 ml 2 氨基乙酸-盐酸 在500 ml水中溶解氨基乙酸150 g,加480 ml 浓盐酸，再加水稀释至1L 3 一氯乙酸-氢氧化钠 在200 ml水中溶解2 g 一氯乙酸后，加 40 gNaOH,溶解完全后再加水稀释至1 L 4 邻苯二甲酸氢钾-盐 把ml mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与ml 酸 mol/L HCl混合均匀，加水稀释至100 ml 5 邻苯二甲酸氢钾-氢 氧化钠 把ml mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液 与 ml mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至 100 ml 6 六亚甲基四胺-盐酸 在200 ml水中溶解六亚甲基四胺40 g，加浓 HCl 10 ml，再加水稀释至 1 L 7 磷酸二氢钾-氢氧化 把ml mol/L的磷酸二氢钾与ml mol/L 钠 NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml 8 硼酸-氯化钾-氢氧 把ml mol/L 的硼酸-氯化钾与 ml mol/L 化钠 NaO H混合均匀，加水稀释至100 ml 9 氯化铵-氨水 把mol/L氯化铵与mol/L 氨水以2： 1比例 混合均匀 10 硼酸-氯化钾-