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文档简介
1、南方医科大学实验教学管理中心机能实验学实验报告机能实验学 实验报告日期:实验项目名 称小鼠基本操作技术、乏氧性缺氧、血液性缺氧成绩实验人员撰写报告人 : 小组成员 :专业年级信 息* 年级* 专业第 *实验室第 * 组1. 实验目的(务必简洁) (1)了解缺氧的分类 (2)复制不同类型缺氧模型 (3)观察不同类型缺氧时呼吸节律和皮肤黏膜颜色的变化规律,了解不同类 型缺氧的表现特征2. 材料与方法2.1 材料或/ 和动物动物:成年小白鼠,雌雄不拘材料:药品:钠石灰、甲酸、浓硫酸、 5%亚销酸钠、 1%亚甲蓝 器材:密封广口瓶、一氧化碳发生装置、酒精灯、注射器及针头、 粗剪刀、组织镊等2.2 方法
2、(即实验步骤)(1)乏氧性缺氧1)观察记录小白鼠正常呼吸频率、深度和皮肤、黏膜颜色等指标; 2)将小白鼠放入装有钠石灰的密封广口瓶中,塞紧瓶塞;3)每 3 分钟重复观察上述指标 1次,如有其它变化,随时记录,直至动物死亡。( 2) 血液性缺氧1) 一氧化碳中毒性缺氧 准备一氧化碳发生装置; 将一只小鼠放入广口瓶中,观察其正常表现后与一氧化碳发生装置连 接; 用量杯先取甲酸 3ml 放于试管中,再沿试管壁缓慢加入浓硫酸 2ml ,塞 紧瓶塞; 观察并记录呼吸频率、深度和皮肤、黏膜颜色各项指标的改变。2) 亚硝酸钠中毒性缺氧 选取体重相近的小鼠 2 只,观察正常指标; 分别通过腹腔注射 5亚硝酸钠
3、 0.3 ml/ 只; 随后立即取其中 1 只小白鼠腹腔内注入 1亚甲蓝溶液 0.3 ml ;另 1 只立即注入生理盐水 0.3 ml ; 观察并记录呼吸频率、深度和皮肤、黏膜颜色各项指标,比较 2 只小白鼠 的表现及死亡时间。3. 结果与讨论3.1 正常情况下的小鼠: 状况良好,呼吸频率大约在 *次/min, 呼吸幅度适中, 此时皮肤黏膜呈健康的粉红色。3.2 在乏氧性缺氧实验中, 放在钠石灰的小鼠一开始呈平静的状态, 后面逐 渐狂躁,后抽搐,最后死亡。狂躁时呼吸频率约为 *次/min ,在后期呼吸频率 减慢,大约*次/min ;呼吸幅度加深,此时皮肤黏膜呈青紫色。 死亡时间:*min 。
4、具体结果如表 13.3 在CO中毒性缺氧实验中,小鼠 * ,呼吸频率 * ;呼吸频率 * ,皮肤黏 膜呈樱桃红。死亡时间: *min 。具体结果如表 23.4 亚硝酸钠中毒性缺氧3.4.1 亚硝酸盐 +亚甲蓝组:刚注射亚甲基蓝后小鼠状态正常,随后表现安 静,死亡时四肢颤动3.4.2 亚硝酸盐 +生理盐水组: 注射生理盐水后伤口有血流出,死亡过程 与亚硝酸盐 +亚甲蓝组相似,但是存活时间减半。皮肤黏膜呈淡棕褐色。具体 结果如表 3表1乏氧性缺氧呼吸频缺氧类观测指呼吸幅皮肤黏存活时状况率(次型标度膜颜色间/min )正常良好 *适中粉红/一开始呈平静缺氧( *min )的状态, *加深青紫色*mi
5、n乏氧性后面逐缺氧渐狂躁。呼吸逐缺氧渐减弱,*变浅青紫色*min( *min )后抽搐,最后死表 2 CO 中毒性缺氧呼吸频 缺 氧 类 观 测 指 呼 吸 幅 皮 肤 黏 存 活 时 状况 率 ( 次型 标 度 膜颜色 间/min )适中粉红/*樱桃红*min正常 良好一开始 很平静,缺氧 酒 精 灯 (*min ) 加热后,CO 中 毒出现明 性显躁动缺氧接近死缺氧亡 时 小 * 樱桃红 *min ( *min )鼠剧烈抽搐表 3 亚硝酸钠中毒性缺氧呼吸频 缺 氧 类 观 测 指 呼 吸 幅 皮 肤 黏 存 活 时 状况 率 ( 次型 标 度 膜颜色 间/min )亚硝酸 亚甲蓝 较 注
6、射 * 暗红色 *min钠中毒(*min ) 前安静性缺氧活跃度亚甲蓝恢复正暗红色*min( *min )常较注射前安静,生理盐且注射淡棕褐水部位有色*min( *min )血液流出。生理盐剧烈抽水搐,后死/棕褐色*min( *min )亡3.2 讨论氧在体内代谢必须通过四个环节,即肺从外界环境摄取,与红细胞中血 红蛋白结合,通过血液循环的运输,以及细胞线粒体的利用。任何一个环节 出现异常,都有可能导致机体氧的供应减少或利用障碍而发生缺氧。3.2.1 乏氧性缺氧小鼠进入瓶中,随着活动,瓶中氧气被消耗,小鼠吸入气体氧分压下降, 致使肺泡氧分压降低,动脉血和静脉血中氧合血红蛋白含量降低,脱氧血红蛋
7、白数量增多,细 胞呼吸作用减弱,小鼠进入平静状态,加大呼吸频率以试图获取更多氧气, 减少活动以优先提供氧气给重要生命器官。随着气体氧分压进一步减少,小 鼠进入应急状态,肾上腺素大量分泌,小鼠开始躁动不安,试图逃离。最后 随着供氧不足,小鼠死亡。由于毛细管内氧合血红蛋白含量较低,脱氧血红 蛋白数量较多,皮肤黏膜呈紫绀。3.2.2 一氧化碳中毒性缺氧 实验中小鼠呼吸频率先变快后减慢至消失,皮肤黏膜由红润变为樱桃红, 是因为 CO中毒型缺氧属于血液性缺氧, 是由于血红蛋白数量减少或性质改变, 导致血液携带氧的能力降低或血红蛋白结合的氧不容易释放所引起的缺氧。 CO是含碳物质未完全燃烧而产生的一种窒息
8、性气体,可与血红蛋白结合而使 血红蛋白失去携氧能力,抑制红细胞的糖酵解,增加与氧的亲和力,致使小 鼠皮肤黏膜呈樱桃红色;因为 CO中毒型缺氧属于等张性缺氧,呼吸系统的代 偿不明显,小鼠的呼吸应该为逐渐减弱直至死亡,而实验中小鼠呼吸逐渐加 快之后逐渐减慢直至死亡, 推测原因是因为广口瓶与大气相通, CO浓度较低, 小鼠产生应激反应导致,当使用酒精灯加热后小鼠很快出现呼吸减慢而死亡;3.2.3 亚硝酸钠中毒性缺氧 亚硝酸钠中毒性缺氧为血液性缺氧。血红蛋白中的二价铁( Fe2+)可在亚 硝酸盐等氧化剂作用下被氧化而形成高铁血红蛋白。二价铁变成三价铁因与 羟基牢固结合而失去携氧能力,加之血红蛋白分子的四个二价铁中有一部分 氧化为三价铁后还能使剩余的二价铁与氧的亲和力增高,即通过变构效应使 氧离曲线左移,血红蛋白结合和释放的氧量都减少,导致组织缺氧。高铁血 红蛋白呈棕褐色,小鼠
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