水库渔业资源调查规范

水库渔业资源调查规范STANDARDFORTHEINVESTIGATIONOFRESERVOIRFISHERYRESOURCESICS93160P55SL中华人民共和国水利行业标准SL16720发布实施中华人民共和国水利部发布前言根据水利部2011年水利技术标准修订计划安排，依据GB/T112009标准化工作导则第1部分标准的结构和编写规则修编。本标准主要包括以下内容范围规范性引用文件术语和定义总则水库形态与自然环境调查水库污染状况调查水库沉积物调查水的理化性质调查浮游植物和浮游动物调查浮游植物叶绿素的测定浮游植物初级生产力的测定微生物调查底栖动物调查着生生物调查大型水生维管束植物调查鱼类调查经济鱼类产卵场调查其它水生经济动物调查本标准由水利部综合事业局提出并归口管理。本标准主编单位水利部综合事业局本标准主要起草人本标准审查会议技术负责人本标准体例格式审查人目次前言I1范围12规范性引用文件13术语和定义24总则25水库形态与自然环境调查56水库污染状况调查57水库沉积物调查78水的理化性质调查109浮游植物和浮游动物调查1310浮游植物叶绿素的测定1611浮游植物初级生产力的测定1712微生物调查1913底栖动物调查2414着生生物调查2615大型水生维管束植物调查2816鱼类调查3017经济鱼类产卵场调查3418其它水生经济动物调查36附录A记录表38附录B可溶性磷酸盐分光光度法50附录C菌落总数报告方式51附录D卵苗密度断面系数计算方法52附录E非采集时间卵苗径流量计算方法531范围本规范规定了水库渔业资源调查的主要内容、方法及技术要求。本规范适用于各种类型水库渔业资源调查，其他水体渔业资源调查亦可参照使用。2规范性引用文件下列文件对于本规范的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB6920水质PH值的测定（玻璃电极法）GB7476水质钙的测定（EDTA滴定法）GB7477水质钙和镁总量的测定（EDTA滴定法）GB7479水质铵的测定（纳氏试剂比色法）GB7480水质硝酸盐氮的测定酚二磺酸分光光度法GB7489水质溶解氧的测定碘量法GB7493水质亚硝酸盐氮的测定分光光度法GB/T8588渔业资源基本术语GB/T11891水质凯氏氮的测定GB/T11893水质总磷的测定（钼酸铵分光光度法）GB/T11896水质氯化物的测定（硝酸银滴定法）GB/T11899水质硫酸盐的测定（重量法）GB/T11904水质钾和钠的测定（火焰原子吸收分光光度法）GB11914水质化学需氧量重铬酸钾法GB/T13195水质水温的测定（温度计或颠倒温度计测定法）GB/T13898水质铁II、III氰络合物的测定（原子吸收分光光度法）GB1737842007海洋监测规范第4部分海水分析GB1737852007海洋监测规范第5部分沉积物分析GB1737862007海洋监测规范第6部分生物体分析GB/T25173水域纳污能力计算规程SL78电导率的测定电导仪法SL83碱度（总碱度、重碳酸盐和碳酸盐）的测定（酸滴定法）SL87透明度的测定（透明度计法、圆盘法）SL88叶绿素的测定（分光光度法）HJ/T23环境影响评价技术导则地面水环境HJ/T92水污染物排放总量监测技术规范HJ/T192生态环境状况评价技术规范（试行）3术语和定义GB/T8588界定的以及下列术语和定义适用于本文件。31调查时期SURVEYPHASE调查计划现场采样的始终时段。32水库长度RESERVOIRLENGTH连接库面外围两个彼此间最远点的最短距离。根据库形，可能是直线，也可能是折线。33水库最大宽度THEMAXIMUMWIDTHOFRESERVOIR垂直于水库长度线方向，相对两岸间的最大距离。34水库平均宽度THEAVERAGEWIDTHOFRESERVOIR水库水面面积除以水库长度。35水库最大深度THEMAXIMUMDEPTHOFRESERVOIR水库最高水位减去库底最低点的高程。36水库平均深度THEAVERAGEDEPTHOFRESERVOIR水库总库容除以相应的水面面积。37水库岸线发展系数RESERVOIRSHORELINEDEVELOPMENT水库岸线长度与同面积圆周长之比。38水库补给系数SUPPLYRATEOFRESERVOIR水库集雨区面积与水库水面面积之比。39水库岛屿率INSULOSITYOFRESERVOIR水库内岛屿总面积与水库水面面积之比。4总则41目的客观调查水库渔业资源状况，建立水库渔业资源数据库，对水库渔业生产性能作出科学评价和预测，为科学开展水库渔业资源管理工作提供依据，促进水利渔业健康持续发展。42调查内容水库渔业资源调查主要内容如表42所示。表42水库渔业资源调查主要内容调查主要内容调查项目必做选做水库形态与自然环境调查工程概况；水库形态特征；集雨区、淹没区和消落区概况；气候气象和水文条件水库污染状况调查点源、面源污染种类及主要污染物排放数量；生物体监测水库沉积物调查氧化还原电位；含水量；总磷；总氮；有机碳；总汞；铜；铅；镉；锌；铬；砷；硒；油类；666、DDT；多氯联苯（PCBS）；狄氏剂；硫化物水的理化性质调查水温；透明度；电导率；PH值；溶解氧；化学耗氧量；总碱度；总硬度；氨氮；硝酸盐氮；亚硝酸盐氮；总氮；总磷；可溶性磷酸盐重碳酸盐；碳酸盐；钙；镁；氯化物；硫酸盐；总铁；钠；钾；总汞；铜；铅；镉；锌；铬；砷；硒；油类；有机磷农药；总有机碳浮游植物和浮游动物调查种类组成；数量；生物量浮游植物叶绿素测定叶绿素A、B、C的含量浮游植物初级生产力测定初级生产力微生物调查异养细菌数量细菌总数；生物量底栖动物调查种类组成；数量；生物量着生生物调查种类组成；数量大型水生植物调查种类组成；生物量鱼类调查种类组成；渔获物分析；主要经济鱼类年龄与生长；渔产量统计经济鱼类产卵场调查位置；规模其它水生经济动物调查虾、蟹等经济甲壳类与龟、鳖等经济爬行类种类组成；渔获物分析；渔产量统计43工作程序水库渔业资源调查工作程序见图43。确定调查目标选定调查对象确定调查方案了解调查对象的特征准备预调查现场观测与采样样品处理与分析结果整理与分析调查报告图43水库渔业资源调查工作程序44调查方法441应对水库地形图、平面位置图和水位、库容、面积、流量关系表等基础图表以及该水库及其相关水体以往调查研究成果等资料进行收集和分析研究，相关结果记入附表A1中，供调查使用。442应在水库水位比较稳定时开展调查工作。反映水库渔业资源基本状况的调查时期应为1个水文年；反映水库渔业资源年际变化规律的调查时期一般为23个水文年。443调查期间，水的理化性质和水生生物的调查，至少应每季度采样一次。444在保证达到必要的精度和满足生物统计学样品数的前提下，兼顾技术指标和经费，决定采样点的数量。在采样点所采集的样品应对整个调查水体或多项指标有较好的代表性。各调查项目采样点的布设位置应基本一致，以便于调查结果的分析比较。445采样宜在上午810时进行。如难以做到，也应尽可能计划好各采样点的采样时间，使每次采样时间基本一致，并记录各次的实际采样时间。采样时间内，水的理化性质和水生生物调查的采样应同步进行。446在各采样点采样时，应同时测定采样点水域状况，并填写采样记录表，见表A2。447存放样品的样品瓶等容器，必须贴有标签。标签的内容应包括水库名称、采样点编号、样品名称、采样时间和采样人等。448调查结果的整理应采用生物统计学方法。各项目的调查结果可分别填入附录A的各表中，并写出调查报告。调查结束后，应及时组织有关技术人员对调查结果进行验收鉴定，并将验收报告、鉴定意见及调查成果报水库主管单位备案。449调查测定用水、调查器具、采样层次等应符合以下规定1在调查测定过程中，除另有说明外，均使用符合国家标准或行业标准的分析纯试剂和蒸馏水或等同纯度的水。2调查中所用的器具，除另有特殊要求外，均指一般实验室或野外调查器具。3采样层次中的表层是指水面下05M处，底层是指距库底05M处。4调查水库渔业资源时，还应调查水库渔业生产概况。5水库形态与自然环境调查51水库形态与自然环境调查的主要内容见表A1。52表A1中各项目的资料、数据，可从水库工程管理单位和当地水利、农业、林业、水产、气象、水文等部门取得，亦可通过召开研论会或进行独立观测等方式取得。6水库污染状况调查61一般规定611应查明污染源的类型、空间分布特征，主要污染物种类、排放方式、排放强度和污染物接纳场所的地质环境条件等。612污染源调查以收集有关部门资料，进行内部整理为主。对重要污染源或潜在污染源应进行野外核实和监测。62调查内容621工业污染源调查包括工矿企业名称、位置，污水、废渣（尾矿）排放量、排放方式、规模、途径和排放口位置，污染物种类、数量、成分及危害；在收集资料的基础上，选择重点工矿企业污染源进行核查；主要了解排污者的工艺、设备及生产状况；核查污染物来源、产生规模、排污去向；调查排污口（源）排放污染物种类、数量、浓度和排放方式。622生活污染源调查包括人口数量及密度、城镇面积；垃圾场的分布、规模、垃圾处理方式与效果、淋滤液产生量及主要污染组分、存放场地的地质结构情况等；生活污水集中排放口、排放量、主要污染物及其浓度和危害等。623农业污染源调查包括土地利用历史与现状；农田施用化肥和农药的品种、数量、方式、时间等；污灌区范围、灌溉污水主要污染物及浓度、污灌次数和污灌量；养殖场及规模，乡镇企业污染源情况等。624地表排污水体调查排污水体的分布、规模、利用情况及水质状况等。63监测方法对重要污染源或潜在污染源进行水污染物排放总量监测，监测方法按照HJ/T92规定执行。64生物体分析对受到重金属或农药等污染物重度污染的水库，须进行生物体监测；监测样品为鱼类、虾、贝类。分析项目和监测方法见表64。表64生物体测定项目和测定方法项目测定方法依据原子荧光法GB1737862007总汞冷原子吸收光度法GB1737862007无火焰原子吸收分光光度法GB1737862007阳极溶出伏安法GB1737862007铜火焰原子吸收分光光度法GB1737862007无火焰原子吸收分光光度法GB1737862007阳极溶出伏安法GB1737862007铅火焰原子吸收分光光度法GB1737862007无火焰原子吸收分光光度法GB1737862007阳极溶出伏安法GB1737862007镉火焰原子吸收分光光度法GB1737862007火焰原子吸收分光光度法GB1737862007锌阳极溶出伏安法GB1737862007无火焰原子吸收分光光度法GB1737862007铬二苯碳酰二肼分光光度法GB1737862007原子荧光法GB1737862007砷钼酸结晶紫分光光度法GB1737862007氢化物原子吸收分光光度法GB1737862007砷催化极谱法GB1737862007荧光分光光度法GB1737862007二氨基联苯胺四盐酸盐分光光度法GB1737862007硒催化极谱法GB1737862007油类烃荧光分光光度法GB1737862007666、DDD气相色谱法GB1737862007多氯联苯（PCBS）气相色谱法GB1737862007狄氏剂气相色谱法GB173786200765污染评价按照GB/T25173规定的方法，计算水库的纳污能力；并参照HJ/T192及HJT23相关规定对水库污染状况进行评价。7水库沉积物调查71目的调查研究水库沉积物中各种污染物的沉积、迁移转化规律，为评价水体污染对水生生物特别是对底栖生物的影响提供基础资料；采集有代表性的沉积物样品是实施沉积物监测，反映水库环境的沉积现状和污染历史的重要环节。72样品的采集、预处理、制备及保存721采样点布设应符合下列要求1采样站点布设应遵循以下原则1）沉积物采样断面的设置应与水质断面一致，以便将沉积物的物理组成、理化性质和受污染状况与水质污染状况进行对比研究；2）沉积物采样点应与水质采样点在同一垂线上，如沉积物采样点有障碍物影响采样可适当偏移；3）站点应具有代表性，其沉积条件要稳定；4）选择性布设根据监测对象及监测项目的不同，在局部地带有选择性地布设沉积物采样点。如排污口监测以污染源为中心，顺污染物扩散带按一定距离布设采样点；5）综合性布设根据区域或监测目的不同，进行对照、控制、消减断面的布设。如在某库湾进行污染排放总量控制监测中，可按区域功能的不同进行对照、控制、消减性断面的布设。布设方法可以是单点、断面、多断面、网格式布点。2监测时间和频率采样频率依各采样点时空变异和所要求的精密度而定。一般说来，由于沉积物相对稳定，受水文、气象条件变化的影响较小，污染物含量随时间变化的差异不大，采样频次比水质采样相比较少，通常每年采样一次，与水质采样同步进行。722样品的采集应符合下列要求1采样使用的设备和工具如下1）表层沉积物采样器，一般选择彼得逊采泥器等抓斗式（掘式）采泥器或锥式采泥器等；2）柱状采样器；3）接样盘或接样板；用硬木或聚乙烯板制成；4）样品箱，样品瓶125ML，500ML磨口广口瓶和聚乙烯袋；5）塑料刀，勺；6）烧杯50ML，100ML；7）其他记录表格、塑料标签卡、铅笔、记号笔、钢卷尺、橡皮筋、工作日记等。2表层沉积物样品的采取按以下步骤进行1）用塑料刀或勺从采泥器耳盖中仔细取上部0CM1CM和1CM2CM的沉积物，分别代表表层和亚表层。如遇砂砾层可在0CM3CM层内混合取样；2）通常情况下，每层各取3份4份分析样品，取样量视分析项目而定。如一次采样量不足，应再采一次；3）取刚采集的沉积物样品，迅速装入100ML烧杯中（约半杯，力求保持样品原状，避免空气进入）供现场测定氧化还原电位用（也可在采泥器中直接测定）；4）取约5G新鲜湿样盛于50ML烧杯中，供现场测定硫化物（离子选择电极法）用。若用比色法或碘量法测定硫化物，则取20G30G新鲜湿样，盛于125ML磨口广口瓶中，充氮气后塞紧磨口塞；5）取500G600G湿样，放入已洗净的聚乙烯袋中，扎紧袋口。供测定铜、铅、镉、锌、铬、砷及硒用；6）取500600G湿样，盛入500ML磨口广口瓶中，密封瓶口。供测定含水率、粒度、总汞、油类、有机碳、有机氯农药及多氯联苯用。3柱状沉积物样品采取步骤如下1）样柱上部30CM内按5CM间隔，下部按10CM间隔（超过1M时酌定）用塑料刀切成小段，小心将样柱表面刮去，沿纵向剖开三份（三份比例为112）；2）2份量少的分别盛入50ML烧杯（离子选择电极法测定硫化物，如用比色法或碘量法测定硫化物时，则盛于125ML磨口广口瓶中，充氮气后，密封保存）和聚乙烯袋中；3）另一份装入125ML磨口广口瓶中。723样品登记、保存与运输步骤如下1样品瓶及聚乙烯袋预先用硝酸溶液（13）浸泡2D3D，用去离子水淋洗干净，晾干，贴上样品标签，用记号笔把样站号、层次及采样日期写在标签上；2样品装入聚乙烯袋，并将填写好样站名称及层次的标签工人外袋，用橡皮筋扎紧袋口。装箱保存在阴凉处；3所有样品均应将采样区域、站号、层次、数量、现场描述情况填写入表A3中；4需携带回实验的样品，均应保存在阴冷处，有条件的最好保存在4环境中；5样品应及时送往实验室。724分析样品的制备应符合下列规定1供测定重金属（铜、铅、镉、锌、铬、砷及硒）的分析样品的制备步骤如下1）将聚乙烯袋中的湿样转到干净编号的瓷蒸发皿中，置于80100烘箱内，烘干过程中用玻璃棒经常翻动样品并把大块压碎，以加速干燥；2）将烘干样品摊放在干净的聚乙烯板上，剔除砾石和颗粒较大的动植物残骸。将样品装入玛瑙钵中，每500ML玛瑙钵中装入约100G干样；3）放入玛瑙球，在球磨机上研磨至全部通过160目（96M）（事先经试验确定大小玛瑙球的个数及研磨时间等条件，研磨后不再过筛）。也可用玛瑙研钵手工粉碎，用160目尼龙筛，盖上塑料盖过筛，严防样品逸出。将研磨后的样品充分混匀；4）四分法缩分分取10G20G制备好的样品，放入样品袋（已填写样品站号、层次等），送各实验室进行分析测定。其余样品盛入玻璃磨口广口瓶或有密封内盖的塑料广口瓶中，盖紧瓶盖，留作副样保存。5）操作人员应带口罩并在通风良好的条件下进行操作。碎样及取样等工具及器皿均要先净化处理以避免样品被沾污。2供测定油类，有机碳，有机氯农药及多氯联苯的分析样品的制备按以下步骤进行1）将已测定过含水率，粒度及总汞后的样品摊放在已洗净并编号的搪瓷盘内，置于室内阴凉通风处，不时地翻动样品并把大块压碎。以加速干燥，制成风干样品；2）将风干样品摊放在聚乙烯板上，剔除砾石和颗粒较大的动植物残骸；3）在球磨机上研磨至全部通过80目（180M）（事先经条件试验，研磨后不再过筛）。也可用瓷研钵手工粉碎，用80目（180M）金属筛，盖上金属盖过筛，严防样品逸出。将研磨后的样品充分混匀；4）四分法缩分分取40G50G制备好的样品，放入样品袋（已填写样品站号、层次等），送各实验室进行分析测定。其余样品盛入玻璃磨口广口瓶中，盖紧瓶盖，留作副样保存。73测定项目及方法项目及其监测方法见表73。表73沉积物测定项目和测定方法项目测定方法依据原子荧光法GB1737852007总汞冷原子吸收光度法GB1737852007无火焰原子吸收分光光度法GB1737852007铜火焰原子吸收分光光度法GB1737852007无火焰原子吸收分光光度法GB1737852007铅火焰原子吸收分光光度法GB1737852007无火焰原子吸收分光光度法GB1737852007镉火焰原子吸收分光光度法GB1737852007锌火焰原子吸收分光光度法GB1737852007铬无火焰原子吸收分光光度法GB1737852007二苯碳酰二肼分光光度法GB1737852007原子荧光法GB1737852007砷钼酸结晶紫分光光度法GB1737852007氢化物原子吸收分光光度法GB1737852007砷催化极谱法GB1737852007荧光分光光度法GB1737852007二氨基联苯胺四盐酸盐分光光度法GB1737852007硒催化极谱法GB1737852007荧光分光光度法GB1737852007紫外分光光度法GB1737852007油类重量法GB1737852007666、DDD气相色谱法GB1737852007多氯联苯（PCBS）气相色谱法GB1737852007狄氏剂气相色谱法GB1737852007亚甲基蓝分光光度法GB1737852007离子选择电极法GB1737852007硫化物碘量法GB1737852007重铬酸钾氧化还原容量法GB1737852007有机碳热导法GB1737852007含水率重量法GB1737852007氧化还原电位电位计法GB173785200774结果整理上述项目的调查结果逐项记入表A4中。8水的理化性质调查81水样的采集和保存811试剂应符合下列要求1硫酸锰溶液按GB7489的规定配制；2碱性碘化钾溶液按GB7489的规定配制；3氯仿；431硫酸溶液取3份体积硫酸加到1份体积水中相混合。812主要器具应符合下列要求1采水器1000ML；2水样瓶；3刻度吸管。813采样应符合下列要求1采样点布设采样站点的布设，应在较大的采样范围进行详尽的预调查，在获得足够信息的基础上，应用统计方法合理确定。采样站点的布设应充分考虑水体的水动力学条件、水库面积及库盆形态、进出水与取水等补给状况、排污设施位置和规模、污染物在水体中的循环及迁移转化等因素。许多水库具有复杂的岸线，或由几个不同的水面组成，由于形态的不规则可能出现水质特性在水平方向上的明显差异。按环境条件的异同将水库分为若干个区域，然后确定能代表该区域特点的地方作为采样点。一般可在水库的上游、中游、下游的中心区和出、入水口区以及库湾中心区和主要排污口等水域布设采样点。采样点的控制数量见表813。所有采样点应编号标在水库地形图或平面位置图上，并按编号顺序进行采样。表813采样点的控制数量水面面积（HM2）10000采样点数量（个）243546576采样点的标志要明显，采样标志可采用浮标法、GPS座标法、六分仪法或岸标法等方法。采样方案一旦确定，应严格执行。对出现异常现象的地点，通常应增加采样点，并进行一次或几次采样。新增的采样地点应在报告中清楚表明，并用图示标明具体位置。2采样层次由于分层现象，水库水质沿水深方向可能出现很大的不均匀性。在非均匀水体采样时，同一站点的水样应采不同层次的样品。采样层次的合理布设决定于水库局部环境、历史相关资料和预调查结果。预调查可使用水质分析仪等探测器，通过比较不同深度水层的温度、溶解氧、PH值、电导率、浊度和叶绿素等指标差异，为采样层次的确定提供依据。错开采样深度可显示出全部垂直的不均匀性。当水库沿水深方向水质变化很大时，可使用一组采样器同时进行采样。一般情况下，采样层次可按下述方法确定水深小于3M时，可只在表层采样；水深为36M时，至少应在表层和底层采样；水深为610M时，至少应在表层、中层和底层采样；水深大于10M时，10M以下处除特殊需要外一般不采样，10M以上处至少应在表层、5M和10M水深层采样。3采样方法水样用采水器采集。每个采样点应采水样2L。分层采样时，可将各层所采水样等量混合后取2L，但水库下游中心区采样点的各层水样宜分别处理，以便分析垂直分布。4水样灌瓶水样瓶应事先洗净。水样灌瓶前，应用水样冲洗水样瓶23次。测定溶解氧的水样，应立即通过导管自瓶底注入250ML磨口细口玻璃瓶中，并溢出23倍所灌瓶容积的水。除测定溶解氧的水样外，其他水样不宜灌满。水样灌瓶后，应立即加入固定液。5水样的固定和保存测定溶解氧的水样，应加入2ML硫酸锰溶液和2ML碱性碘化钾溶液固定。测定总碱度、总硬度、氮量、磷量、氯化物、硫酸盐、总铁、钠、钾等项目的水样，每升水样中加入24ML氯仿固定。测定化学耗氧量的水样，每升水样中缓慢加入1ML31硫酸溶液固定。固定后的水样，应尽快置于低温下（04）避光保存，并带回实验室后立即进行测定。82测定项目及方法项目及其监测方法见表82。表82水的理化性质测定项目和测定方法项目测定方法依据水温温度计或颠倒温度计测定法GB/T13195透明度透明度计法、圆盘法SL87电导率电导仪法SL78PH值玻璃电极法GB6920溶解氧碘量法GB7489化学耗氧量重铬酸钾法GB11914总碱度、重碳酸盐和碳酸盐酸滴定法SL83总硬度、钙和镁EDTA滴定法GB7477钙EDTA滴定法GB7476氨氮纳氏试剂比色法GB7479硝酸盐氮酚二磺酸分光光度法GB7480总氮凯氏定氮法GB/T11891总磷分光光度法GB/T11893可溶性磷酸盐分光光度法附录B氯化物硝酸银滴定法GB/T11896硫酸盐重量法GB/T11899亚硝盐氮分光光度法GB7493总铁原子吸收分光光度法GB/T13898钠和钾火焰原子吸收分光光度法GB/T11904原子荧光法GB1737842007冷原子吸收分光光度法GB1737842007总汞金捕集冷原子吸收光度法GB1737842007无火焰原子吸收分光光度法GB1737842007阳极溶出伏安法GB1737842007铜火焰原子吸收分光光度法GB1737842007无火焰原子吸收分光光度法GB1737842007阳极溶出伏安法GB1737842007铅火焰原子吸收分光光度法GB1737842007无火焰原子吸收分光光度法GB1737842007阳极溶出伏安法GB1737842007镉火焰原子吸收分光光度法GB1737842007火焰原子吸收分光光度法GB1737842007锌阳极溶出伏安法GB1737842007铬无火焰原子吸收分光光度法GB1737842007二苯碳酰二肼分光光度法GB1737842007原子荧光法GB1737842007砷钼酸结晶紫分光光度法GB1737842007氢化物发生原子吸收分光光度法GB1737842007砷催化极谱法GB1737842007荧光分光光度法GB1737842007二氨基联苯胺四盐酸盐分光光度法GB1737842007硒催化极谱法GB1737842007荧光分光光度法GB1737842007紫外分光光度法GB1737842007油类重量法GB1737842007666、DDD气相色谱法GB1737842007多氯联苯（PCBS）气相色谱法GB1737842007狄氏剂气相色谱法GB1737842007总有机碳仪器法GB1737842007总有机碳过硫酸钾氧化法GB173784200783结果整理上述项目的调查结果应逐项记入表A5中。9浮游植物和浮游动物调查91试剂911鲁哥氏液称取6G碘化钾溶于20ML蒸馏水中，待完全溶解后，加入4G碘，摇动，至碘完全溶解，加入80ML蒸馏水，贮存于磨口棕色试剂瓶中。91240甲醛溶液体积分数为40。913波恩氏液在100ML蒸馏水中加入苦味酸结晶体，边加边摇动，至饱和液后静置。取75ML上清液注入试剂瓶中，加入25ML40甲醛溶液和3ML冰醋酸即成。92主要器具921采水器1000，5000ML。922浮游生物网分别用25号（孔径0064MM）和13号（孔径0112MM）筛绢制成。923水样瓶1000ML。924样品瓶定量样品瓶采用刻有30ML或50ML刻度线的玻璃试剂瓶；定性样品瓶采用3050ML玻璃或聚乙烯瓶。925沉淀器1000ML圆筒形玻璃沉淀器或1000ML圆筒形分液漏斗。926乳胶管或U形玻璃管内径2MM。927洗耳球。928刻度吸管01、10、50ML929计数框01、10、50ML9210盖玻片。9211显微镜具推进器和测微尺。9212解剖镜。93采样931采样点布设同8131。932采样层次同8132。933浮游植物采样。定量样品应在定性采样之前用采水器采集。每个采样点应采水样1000ML。分层采样时，可将各层所采水样等量混匀后取1000ML。定性样品应用25号浮游生物网在表层缓慢拖曳采集。934浮游动物采样。枝角类和桡足类定量样品应在定性采样之前用采水器采集，每个采样点应采水样1050L，再用25号浮游生物网过滤浓缩；定性样品应用13号浮游生物网在表层缓慢拖曳采集。原生动物、轮虫和无节幼体定量可用浮游植物定量样品；定性样品应用25号浮游生物网在表层缓慢拖曳采集。94样品的固定941浮游植物样品的固定。样品应立即用鲁哥氏液固定，用量为水样体积的115。如样品需较长时间保存，则应再加入40甲醛溶液，用量为水样体积的4。942浮游动物样品的固定。枝角类和桡足类定量、定性样品应立即用40甲醛溶液固定，用量为水样体积的4。原生动物和轮虫定性样品，除留一瓶供活体观察不固定外，应立即用波恩氏液固定，用量为水样体积的50以上；或用鲁哥氏液固定，用量为水样体积的115，如样品需较长时间保存，则应再加入40甲醛溶液，用量为水样体积的4。95浮游植物水样的沉淀和浓缩951水样带回室内，应用沉淀器浓缩，定容到30（或50）ML。952浓缩方法摇匀水样，倒入固定在架子上的1000ML沉淀器中，经2H后，将沉淀器轻轻旋转一会，使沉淀器壁上尽量少附着浮游植物，再静置24H。充分沉淀后，用虹吸管慢慢吸去上清液。虹吸时，管口应始终低于水面，流速、流量不可大，吸至澄清液的1/3时，应逐渐减缓流速，至留下含沉淀物的水样2025（或3040）ML，放入30（或50）ML的定量样品瓶中。用吸出的少量上清液冲洗沉淀器23次，一并放入样品瓶中，定容到30（或50）ML。如样品的水量超过30（或50）ML，可静置24H后，或到计数前再吸去超过定容刻度的余水量。沉淀和虹吸过程必须避免摇动，不应吸出浮游植物。如搅动了底部应重新沉淀。96种类鉴定优势种类应鉴定到种，其他种类至少应鉴定到属。种类鉴定除应用定性样品进行观察外，微型浮游生物还可吸取定量样品进行观察。如用定量样品先作定性观察，则应在镜检后将样品洗回样品瓶中，且防止样品的混杂污染。97计数971浮游植物计数应符合下列规定1摇匀定量样品。迅速吸出01ML置于。1ML计数框内（面积20MM20MM）。盖上盖玻片后，计数框内应无气泡，也不应有水样溢出。2应用视野法计数首先应用台微尺测量所用显微镜在一定放大倍数下的视野直径，计算出面积。计数的视野应均匀分布在计数框内，视野数目一般为100300个，应保证计数到的浮游植物总数至少达100个以上。每瓶样品计数2次，取平均值，每次结果与平均数之差应不大于15，否则应计数第三次。3计数单位用细胞个数表示。对不易用细胞数表示的群体或丝状体，可求出平均细胞数。41L水样中浮游植物的数量可按式（971）计算（971）NVVFCPNS式中N1L水样中浮游植物的数量，个/L；CS计算框面积，MM2；FS视野面积，MM2；FN每片计数过的视野数；V1L水样经浓缩后的体积，ML；V计数框容积，ML；P计数所获得的个数，个。972浮游动物计数应符合下列规定1原生动物吸出01ML样品，置于01ML计数框内，盖上盖玻片，在中倍显微镜下全片计数。每瓶样品计数两片。2轮虫吸出1ML样品，置于1ML计数框内，全片计数。每瓶样品计数两片。3枝角类、桡足类用5ML计数框将样品分若干次全部计数。如样品中个体数量太多，可将样品稀释至30ML或50ML，用5ML计数框全片计数。每瓶样品计数两片。4无节幼体如样瓶中个体数量少，则在甲壳动物样品中同时全部计数；如数量多，则在轮虫样品中同轮虫一起计数。5计数前，样品应充分摇匀，吸出应迅速、准确。盖上盖玻片后，计数框内应无气泡，也不应有水样溢出。同一样品计数两片的，取平均值，但每片结果与均数之差应不大于15，否则应计数第三片。6单位体积浮游动物的数量可按式（972）计算（972）VCVNN式中N1L水样中浮游动物的数量，个/L；V采样体积，L；V样品浓缩后的体积，M1；C计数样品体积，ML；N计数所获得的个体数，个。98生物量的计算981浮游植物生物量的计算，可采用体积换算为生物量湿重的方法，比重取1。体积的测定应根据浮游植物的体型，按最近似的几何形状测量必要的长度、高度、直径等，每一种类至少随机测定50个，求出平均值，代入相应的求积公式计算出体积。有的种类形状较特殊，可分解为几个部分，分别按相应公式计算后相加。量大或体积大的种类，应尽量实测体积并计算平均重量。982浮游动物生物量的计算，原生动物、轮虫可用体积法求得生物体积，比重取1，再根据体积换算为重量和生物量。甲壳动物可用体长体重回归方程，由体长求得体重（湿重）。无节幼体一个可按0003MG湿重计算。99结果整理应分析浮游植物和浮游动物的种类组成，并按分类系统列出名录表，见表A6；数量和生物量的调查结果应随时记入表A7、表A8中。10浮游植物叶绿素的测定101采样1011采样点布设同8131。1012采样层次同8132。1013采样方法样品应在浮游植物定量采样的同时用采水器采集。每个采样点应采水样051L。分层采样时，可将各层所采水样等量混合后取051L。102原理、仪器、试剂、样品的保存、步骤、结果表示和注意事项按SL88的规定执行。103结果整理浮游植物叶绿素的测定结果应随时记入表A9中。11浮游植物初级生产力的测定本规范规定采用黑白瓶测氧法。111方法原理光合作用使二氧化碳和水结合形成碳水化合物和氧。能量的固定和光合作用方程式（111）为（111）O6HCO12H6C2612817KJ通过测定水体中溶解氧量的变化，可以间接求出初级生产积累能量的速率。112试剂测定溶解氧的全套试剂按GB7489的规定执行。113主要器具1131样品瓶150250ML；具玻塞的磨口细口试剂瓶；白瓶应厚薄均匀、无色透明，黑瓶可用棕色瓶外涂黑漆。1132采水器225L。1133沙克氏盘。1134瓶夹。1135支架和绳子。1136浮子和沉子。1137测定溶解氧的全套器具按GB7489的规定执行。114采样1141采样点布设同8131。1142采样层次应在水表面（00M）和透明度的05、1、2、3、4倍处分层采样，4倍透明度以下处一般不采样。最下面一层不宜超过距库底05M的深度。1143采样方法采样应在晴天进行。样品应在浮游植物定量采样的同时用采水器采集。各层次应采水样225L。115测定步骤1151灌瓶每一层次的三个瓶（黑瓶、白瓶、初始氧瓶）应用同一次采得的水样灌满，并都溢出23倍所灌瓶容积的水。灌瓶时，应将采水器的导管插到瓶底部。初始氧瓶中的水样应立即用2ML硫酸锰溶液和2ML碱性碘化钾溶液固定。1152曝光黑、白瓶塞紧瓶塞后（瓶内不得有气泡），应倒过来用瓶夹夹牢，并立即悬挂于原采样的水层进行曝光。瓶塞应用橡皮筋缚住，以防倒挂脱落。曝光时间一般为24H，如需缩短，应根据当时当地的日照特征，通过实验确定日生产量的推算方法。1153溶解氧的测定曝光结束后，取出黑、白瓶，立即固定溶解氧，固定液的用量同初始氧瓶。固定时，如白瓶中有因氧过饱和而产生的气泡，则应将白瓶略微倾斜，以防止氧气泡逸出，小心打开瓶塞加入固定液，再塞紧瓶塞并充分摇动，使气泡中的氧气固定下来。溶解氧的测定按GB7489的规定执行。116计算首先计算出各挂瓶层的日生产量。如果挂瓶曝光时间为24H，可按式（1161）计算（1161）21DPG3R21GN式中PG、R、PN挂瓶层浮游植物日毛生产量、日呼吸量、日净生产量，MGO2/LD；D1、D2、D3挂瓶层白瓶、黑瓶、初始氧瓶的溶解氧量，MG/L。然后计算出1M2面积下的水柱日生产量，可按式（1162）计算（1162）INIPGAEI,GI,121INIRAI121INIPNAEI,NI,121式中PGA、RA、PNA1M2面积下的水柱日毛生产量、水柱日呼吸量、水柱日净生产量，GO2/M2D；PG,I、RI、PN,II水层每升水的平均日毛生产量、平均日呼吸量、平均日净生产量，MGO2/LD；EI第I与I1水层间的厚度，M；N挂瓶的层次数。注式（4）至式（9）均为简化公式。117结果整理1171浮游植物初级生产力的测定结果应随时记入表A10中。将测定结果的氧单位换算成其他单位时，可采用下列换算关系11MGO2相当于1470J；21MGO2相当于09375MG葡萄糖；31MGO2相当于0300MG碳；41MGO2相当于61MG浮游植物鲜重。12微生物调查121试剂1211蛋白胨。1212牛肉浸膏。1213氯化钠（NACL）。1214琼脂。1215氢氧化钠溶液LMOL/L。1216盐酸溶液1MOL/L。1217美蓝染色液或吖叮橙染色液。1218SYBRGREENI或SYBRGREENII或SYBRGOLD染色液。1219PI染色液。12110甘油。12111对苯二胺。12112PBS缓冲液8GNACL、02GKCL、144GNA2HPO4和024GKH2PO4,溶于800ML蒸馏水中，用HCL调节溶液的PH值至74，最后加蒸馏水定容至1L即可。121高压下蒸气灭菌20分钟，保存存于室温或4冰箱中。122主要器具1221采祥器200500ML。1222水样瓶200500ML。1223高压蒸汽灭菌锅。1224冰箱。1225锥形瓶250ML。1226落射式荧光显微镜。1227循环水真空泵。1228玻璃抽滤瓶。1229抽滤漏斗。12210载玻片。12211刻度吸管或1ML移液器。12212试管。12213培养皿直径9CM。12214恒温培养箱。12215放大镜。12216菌落计数器。12217酸度计或PH精密试纸。12218超净工作台。12219孔径02MAL2O3无机滤膜或经黑墨水染色干燥的醋酸纤维滤膜。123采样1231采样点布设同813。1232采样层次水深小于5M时，可只采表层水样；水深5L0M时，应采表层和底层水样，水深大于10M时，应采表层、中层和底层水样。1233采样方法采样器和水样瓶应事先洗涤干净，用牛皮纸包扎好，经121高压蒸汽灭菌20MIN后，置于半无菌室保存，超过10D未使用时均应重新灭菌。在同一采样点上同时采集几个用于不同调查项目的水样时，应首先采集细菌水样。表层可直接用水样瓶采集，其他层次应用采样器采集。水样瓶内应留有足够的空间，以便在检验前充分摇匀。采样器提升至水面时，应立即将瓶塞上的进水管与排气管接通，恢复密闭状态，用牛皮纸包扎好，或将水样注入水样瓶中。124水样的保存从采样到检验宜在2H以内进行。如果超过2H，气温在10以下时，水样可不必冷藏；气温在10以上时，水样应置于盛有冰块或制冷剂的容器中冷藏，保存时间不得超过6H。水样到达实验室后，如果不能立即进行检验，必须马上转移到冰箱内（4）保存。从采样到检验最长不得超过24H。125细菌数量的测定1251水样的处理无菌吸取50100ML水样，注入已灭菌盛有玻璃珠的锥形瓶中，旋转振荡10MIN，不得弄湿瓶口无菌棉塞，充分使细菌成单细胞分散。此水样用于下述各项检测。1252本规范规定采用荧光显微计数法直接计数总菌数，细菌总数的测定应符合下列规定1单一荧光染料荧光显微计数法将等体积PBS缓冲液和甘油混匀，再按1质量比例溶入对苯二胺，制成抗褪色剂，每次使用须为新鲜配制。用移液器取1ML玻璃珠振荡过的水样，加入SYBRGREENI染液，使SYBRGREENI终浓度为1，避光染色10MIN，加入1ML抗褪色剂。利用真空抽滤泵将细菌过滤到02M孔径的滤膜上，并迅速将膜转移到载玻片上，使滤有细菌的一面朝上，加盖玻片。将所制染色玻片置荧光显微镜载物台上，以290497NM波长激发，40倍物镜下观察计数细菌数量，随机计数10个视野，以其平均数作为每个视野中细菌的数量，按式（125）计算出每毫升水样中细菌的总数，每个水样至少重复计数2次，取均值作为最终结果。计数结果以每视野细菌数量在50100左右最佳，可根据观察的结果增加水样体积或对水样进行适当稀释。来不及计数的染色滤膜待完全干燥后置载玻片盒中20保藏，保藏时间不超过6个月。（125）SVANC式中C水样中的细菌总数，个/ML；A滤膜面积，CM2；S每个视野的面积，CM2；N计数10个视野获得的每视野细菌平均数，个；V染色过滤的水样体积，ML。注意事项SYBRGREENI为一种直接与DNA结合的染料，具有潜在的致突变性，因此尽量避免直接接触；对苯二胺为有毒物质，避免接触皮肤和眼睛；尽量避免水样的反复冻融，冻融将影响计数结果。2双染色荧光显微计数活菌用移液器取1ML玻璃珠振荡过的水样，加入SYBRGREENI染液，使SYBRGREENI终浓度为1，同时加入PI染液，使PI终浓度为60M，避光染色10MIN，加入1ML抗褪色剂（同单一荧光染料荧光显微计数法）。利用真空抽滤泵将细菌过滤到02M孔径的滤膜上，并迅速将膜转移到载玻片上，使滤有细菌的一面朝上，加盖玻片。将所制染色玻片置荧光显微镜载物台上，以290497波长激发，40倍物镜下观察计数细菌数量，活菌呈绿色荧光，死菌呈红色荧光。随机计数10个视野，以其平均数作为每个视野中活细菌的数量，按式（10）计算出每毫升水样中细菌的总数，每个水样至少重复计数2次，取均值作为最终结果。计数结果以每视野总细菌数量在50100左右最佳，可根据观察的结果增加水样体积或对水样进行适当稀释。来不及计数的染色滤膜待完全干燥后置载玻片盒中20保藏，保藏时间不超过6个月。注意事项SYBRGREEN为一种直接与DNA结合的染料，具有潜在的致突变性，因此尽量避免直接接触；PI为一种直接与DNA和RNA结合的染料，具有潜在的致突变性，对皮肤具有刺激性，避免直接接触；对苯二胺为有毒物质，避免接触皮肤和眼睛。1253异养细菌数量的测定1营养琼脂培养基的制备依次称取蛋白脉L0G、牛肉浸膏3G、氯化钠5G、琼脂1518G，溶于900ML蒸馏水中，置于水浴锅中加热，搅拌至完全溶解，加蒸馏水至1000ML。以1MOL/L氢氧化钠溶液或LMOL/L盐酸溶液调节PH值至7072。用多层纱布或脱脂棉过滤去杂质，分装于试管中，每管装15ML，塞上试管棉塞，用牛皮纸包扎好试管上部，经121高压蒸汽灭菌20MIN后，贮存于冷暗处备用。2水样的稀释用无菌刻度吸管吸取10ML上述振荡过的水样，注入盛有90ML无菌燕馏水的锥形瓶中，充分混匀成110水样稀释液。再取110稀释液1ML，注入盛有9ML无菌蒸馏水的试管中，充分混匀成1100稀释液。按此法再依次稀释成11000、110000等稀释液备用。吸取不同稀释度的稀释液时，应更换吸管。整个操作过程要求在超净工作台或酒精灯火焰上完成，保证操作过程的无菌状态，避免环境细菌的污染。3细菌的培养吸取23个适宜稀释度的稀释液1ML，分别注入无菌培养皿中，再倾注15ML已融化并冷却至45左右的营养琼脂培养基，并立即旋转培养皿，使水样与培养基充分混匀。每个稀释度水样应同时倾注三个培养皿，另用三个培养皿仅倾注培养基作空白对照。整个倾倒过程要求无菌操作，同12532。待培养皿内培养基冷却凝固后，翻转培养皿，使底面向上，置于37恒温培养箱中培养48H。4菌落计数培养皿细菌菌落计数时，可用肉眼观察，必要时可采用放大镜与菌落计数器。各培养皿菌落计数后，应求出同稀释度的三个培养皿的平均菌落数。如培养皿中有较大片状菌落生长时，则不宜采用；如片状菌落不到培养皿面积的一半，而片状菌落以外的单菌落分布又很均匀，则可将单菌落部分计数后加倍作为该培养皿的菌落数。5菌落总数报告方式见附录C。126细菌生物量的测算在测数法（10521）获得细菌数量后，应根据测算不同形态群球菌、杆菌、酵母菌等细胞的平均体积计算出细菌生物量。计算时，细菌的比重取1。计算细菌体积的常用公式（126）如下球菌（126）34RV杆菌、孤菌241AB酵母菌或其他椭圆形菌体6R式中V体积，M3；R半径，M；A长度，M；B宽度，M；R直径，M；圆周率，取314。127结果整理细菌总数、异养细菌数量和细菌生物量的调查结果应随时记入表A11中。13底栖动物调查131试剂13115甲醛溶液体积分数为5。1312乙醇溶液体积分数为5，75。1313甘油。1314普氏胶用8G阿拉伯胶，10ML蒸馏水，30ML水合氯醛，7ML甘油，3ML冰醋酸配制而成。配制时，先在烧杯中用蒸馏水溶解阿拉伯胶，置于80恒温水浴，用玻璃棒搅动，胶溶后，依次加入其他各物，用玻璃棒搅拌均匀，然后以薄棉过滤即成。132主要器具1321带网夹泥器开口面积61M2。1322改良彼得生采泥器开口面积1M2。1323人工基质采样器为高20CM、直径18CM的圆柱形铁笼，用8号和14号铁丝编织而成，网孔面积46CM2。使用时，笼底先铺一层40目（孔径0635MM）尼龙筛绢，再放上长约8CM的卵石。1324三角拖网。1325手抄网。1326分样筛40目（孔径0635MM）。1327塑料桶或盆。1328塑料袋。1329样品瓶。13210白色解剖盘。13211细吸管。13212尖嘴镊。13213解剖针。13214解剖镜。13215显微镜。13216电子天平。133采样1331采样点布设大型水库的采样断面一般为35个，中型水库的采样断面一般为23个，小型水库的采祥断面一般为12个。采样断面上采样点的间距一般为100500M。除采样断面上的采样点外，还应根据实际情况在水库的入水口区、出水口区、中心区、最深水区、沿岸带、库湾、污染区及相对清洁区等水域设置采样点。1332定量采样应符