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文档简介

Amoeba and flagella 阿米巴和鞭毛虫,. Entamoeba histolytica (E. histolytica) 溶组织内阿米巴 . Giardia lamblia (G. lamblia)兰氏贾第鞭毛虫 . Trichomonas vaginalis (T. vaginalis)阴道毛滴毛虫 . Leishmania donovani (L. donovani)杜氏利什曼原虫,Purpose and Requirements,.Master morphological features of trophozoite and cyst of Entamoeba histolytica and Giardia lamblia; Master movement characteristics of trophozoites; .Master morphological features and movement characteristics of Trichomonas vaginalis; .Familiar with differtiations of E. histolytica cyst and other non-pathogenic amoebae cyst; .Familiar with iodine stain for cyst; .Understanding Balantidium coli; .Understanding morphological features of amastigote of Leishmania donovani and sandfly. .,1.独立观察玻片标本 No.原-1至No.原-4:2.示教内容学习: 1)图片及视频示教: 2)镜下示教标本: 3.完成实验操作:直接涂片法观察活动的阿米巴滋养体;直接涂片法观察活动的阴道毛滴虫;碘染色法观察包囊 4.完成实验报告:,本次课学习任务,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,拿到玻片标本后请马上检查核对是否有漏、重复或破损,有问题的请马上举手报告老师!,No.原-1: 溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetschliiNo. 原-2: 蓝氏贾第鞭毛虫滋养体 G. lamblia trophozoite (仅双号同学有,2个同学共用1张)No. 原-3: 蓝氏贾第鞭毛虫包囊 G. lamblia cystNo. 原-4: 阴道毛滴虫滋养体 T. vaginalis trophozoite,注意:在观察玻片标本前,先将显微镜光线调到最强!本次课只使用10倍镜和油镜;,No. 原-4:阴道毛滴虫滋养体T. vaginalis trophozoite,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,先10倍镜下调出焦距平面,然后转油镜下观察细微结构,要求拍照,姬姆萨染色法(Giemsa staining method),No. 原-3:蓝氏贾第鞭毛虫包囊 G. lamblia cyst,Steined with iron-hematoxylin,. Cyst wall : . Axostyle : . Median body : . Nucleus :,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,先10倍镜下调出焦距平面,然后转油镜下观察细微结构,要求拍照,No. 原-2:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体 G. lamblia trophozoite,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,先10倍镜下调出焦距平面,然后转油镜下观察细微结构,要求拍照,姬姆萨染色法(Giemsa staining method),No. 原-2:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体 G. lamblia trophozoite,Steined with iron-hematoxylin,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,先10倍镜下调出焦距平面,然后转油镜下观察细微结构,要求拍照,No. 原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetschlii (铁苏木素染色),E. histolytica cyst溶组织内阿米巴包囊,要求拍照:未成熟包囊,先10倍镜下找出焦距平面,然后转油镜下观察细微结构,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,E. coli cyst 结肠内阿米巴包囊,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,No. 原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetschlii,E. nana cyst 微小内蜒阿米巴,Very small, 6-12um, oval, only 4 nuclei,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,No. 原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetschlii,I. buetschlii cyst 布氏嗜碘阿米巴,Stained with Iron-hematoxylin,Stained with Iodine,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,No. 原-1:溶组织内阿米巴包囊、结肠内阿米巴包囊、微小内蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetschlii,2. 示教内容学习:,1)图片及视频示教:,Stained with Iron-hematoxylin,E. histolytica trophozoite,2. 示教内容学习:,1)图片及视频示教:,Amastigote (Leishman-Donovan body ) 无鞭毛体(利杜体),Amastigotes parasitize in mononuclear cell-macrophage (单核-巨噬细胞)of human,2. 示教内容学习:,Sandfly(白蛉),驼背、眼大、多毛、翅竖,1)图片及视频示教:,2. 示教内容学习:,1)图片及视频示教:,Balantidium coli trophozoite 结肠小袋纤毛虫滋养体,2. 示教内容学习:,1)图片及视频示教:,Balantidium coli trophozoite 结肠小袋纤毛虫包囊,Round or near-round, diameter 40-60um,知识花絮: 染色方法,1 铁苏木素染色(Iron-hematoxylin staining method) 主要用于各种阿米巴和蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊的鉴定,具有操作简单,现象明显的特点,呈墨蓝色。2 碘液染色(Iodine staining method) 可以使真核细胞的细胞核呈黄褐色,所以,加碘液可以用来观察细胞核。 3 姬姆萨染色法(Giemsa staining method) 姬姆萨染液(天青色素、伊红、次甲蓝的混合液)的染色法。 最适于血液涂抹标本,用以染血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等的染色,呈祡红色。4 瑞氏染色法(Wrights staining method) 用瑞氏染色液对细菌进行染色以便进行显微镜检查的染色法。瑞氏染色液是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。5 瑞氏-姬姆萨染色法(Wright-Giemsa staining method) 主要应用于血液和骨髓涂片染色,它是利用Romanowwsky Stain技术原理改良而成的。标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后,各类细胞呈现不同的着色,红细胞呈浅红色,白细胞的核着色非常明显,易于对白细胞进行分类。6 苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)染色方法 简称HE染色方法,是生物学和医学的细胞与组织学最广泛应用的染色方法。教学和研究都是用HE染色方法观察正常和病变组织的形态结构。,2. 示教内容学习:,1)图片及视频示教:,Iodine stain 碘液染色法,2. 示教内容学习:,1)图片及视频示教:,Iron-hematoxylin stain 铁苏木素染色法,2)镜下示教:请拿上实验指导移步到示教显微镜,观察时请勿移动视野!,.溶组织内阿米巴滋养体和包囊 E. histolytica trophozoite and cyst.结肠内阿米巴包囊 E. coli cyst .微小内蜒阿米巴包囊 E. nana cyst .布氏嗜碘阿米巴包囊 I. buetschlii cyst .蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊 G. lamblia trophozoite and cyst .阴道毛滴虫 T. vaginalis trophozoite .杜氏利什曼原虫利杜体 Amastigote (Leishman-Donovan body) .白蛉 Sandfly .结肠小袋纤毛虫滋养体 Balantidium coli trophozoite .结肠小袋纤毛虫包囊 Balantidium coli trophozoite,2. 示教内容学习:,3.Operation and observation 操作和观察,.直接涂片法观察活动阿米巴滋养体和碘染色法观察包囊:操作前先看“碘液染色法”视频;取1张载玻片,先用吸管吸取阿米巴培养基,在载玻片左右各滴1滴,然后在其中1滴另滴加1滴碘液(如右图),加盖玻片,先10镜下观察,然后转40倍镜观察;用过的载玻片请放到指定的铝锅内!,3.Operation and observation 操作和观察,.直接涂片法观察活动的阴道毛滴虫:用吸管吸取阴道毛滴虫培养基,滴1滴玻片上,加盖玻片即可,先10镜下观察,光线稍弱,然后转40倍镜观察;用过的载玻片请放到指定的铝锅内!,3)提交实验报告方法: 双击“教师机”图标打开文件夹“上传” 打开你本人所在组别对应的文件夹,如“1组”粘贴实验报告。,2)实验报告命名格式:学号姓名-4,例如 20070001张三-4,3.实验报告要求及提交:,1)本次实验报告内容: 要求 4 张图片溶组织内阿米巴未成熟包囊 E. histolyticaI mmature cyst 蓝氏贾第鞭毛虫滋养体 G. lamblia trophozoite 蓝氏贾第鞭毛虫包囊 G. lamblia cyst 阴道毛滴虫滋养体 T. vaginalis trophozoite,离开实验室前做好以下工作:,1. 清点玻片标本,按顺序摆放整齐并放到指定地方;2. 清理桌面,包括清理垃圾、将油瓶、擦镜液和擦镜纸归位,摆放整齐;3. 本次课特别强调用擦镜纸沾擦镜液擦干净油镜头和高倍镜头! 4. 整理好显微镜、电脑关机;5. 将凳子收入桌子下面;5. 值日生留下做实验室清洁工作。,1.简述溶组织内阿米巴的致病机制。 2.如何用病原学方法诊断急性阿米巴痢疾病人?检查时应注意什么? 3.阴道毛滴虫是怎样传播的,如何进行防治? 4.蓝氏贾第鞭毛虫滋养体引起腹泻的原因? 5.简述黑热病的贫血机制。,课后思考:,患者,女,28岁,浙江宁波人,已婚,患者自农村来沪做保姆已有2年,自觉劳累后腰酸,白带多,有时伴黄色带有泡沫伴黏液,阴道经常瘙痒,时闻腥臭味,月经正常,但经量较大。妇科检查:外阴部有红肿,子宫颈糜烂度,阴道涂片查到大量阴道毛滴虫,还有红细胞、白细胞和上皮细胞,遵医嘱服灭滴灵并外用栓剂后,症状好转,但年终探亲返回后症状又出现,再次服药后得以痊愈。,问题:1阴道毛滴虫传播的因素有哪些? 2. 患者后来为何又有症状出现?患者应如何防治?,课后讨论 Case 1,患者,女,6岁,因“腹泻9天,发烧、腹痛及脓血便7天”入院,发病前8天有跌入

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