藿香正气滴丸对动物小肠运动的影响.doc

第17 页 黄河科技学院毕业论文藿香正气滴丸对动物小肠运动的影响1前言藿香正气方剂由广霍香油、苍术、陈皮、厚朴、白芷、茯苓、大腹皮、半夏、甘草浸膏、紫苏叶油等成分组成，有解表化湿，理气和中之功效，中医用于治疗外感风寒，内伤湿滞，夏伤暑湿，头痛昏重，脘腹胀痛，呕吐泄泻等病症。现有藿香正气丸、藿香正气片、藿香正气散、藿香正气胶囊、藿香正气滴丸、藿香正气水、藿香正气口服液等七种剂型。藿香正气滴丸在中医传统理论的基础上，经过多年科学实验研制开发而成的新药剂型，克服了以往剂型内在质量不可控的缺陷，提高了疗效。质量稳定，剂量准确，生物利用度高，起效快，口感舒适，对胃肠道无刺激，全面符合现代中药标准，确保产品之疗效。藿香正气软胶囊对胃肠运动的双向调节作用已见报道，但藿香正气滴丸对胃肠运动的影响的研究尚未见报道。一般认为二者药物作用和药理效应该相似，但具体文献尚未见报道，为证实藿香正气滴丸对动物胃肠运动的影响特提出该题目。2 在体实验2.1实验材料： 2.1.1药品：藿香正气滴丸，由天士力制药股份有限公司提供，2.6g*9袋/盒，国药准字Z20000048，产品批号100710，生产日期2011.07.13；硫酸阿托品注射液，郑州羚锐制药股份有限公司，产品批号120102，生产日期2012.01.05，有效期2013.12；甲硫酸新斯的明注射液，上海信谊金朱药品有限公司，产品批号110401，生产日期2011.04.16，有效期2014.04.15；配药：1、0.002%甲硫酸新斯的明：取规格2mL：1mg硫酸新斯的明（上海信谊金朱药业有限公司）1支，加生理盐水至50mL即得。2、0.01%硫酸阿托品：取规格1mL：0.5mg硫酸阿托品（郑州羚锐制药股份有限公司）10支，加生理盐水至50mL即得。3、 藿香正气滴丸（天士力制药股份有限公司,产品批号100710）藿香正气滴丸原液（5.2% g/mL）：取藿香正气滴丸1袋，粉碎加水约50mL，煮沸，保温过夜，加水至50mL即得。20%藿香正气滴丸原液：取藿香正气滴丸原液10mL加生理盐水至50mL即得。40%藿香正气滴丸原液：取藿香正气滴丸原液20mL加生理盐水至50mL即得。80%藿香正气滴丸原液：取藿香正气滴丸原液40mL加生理盐水至50mL即得。4、10%亚甲蓝：取亚甲蓝10g加生理盐水至100mL溶解即得。 2.1.2器械： 台秤一架、1mL注射器10支，4号针头10支、9号钝头灌胃针头3支、手术镊、手术剪、直尺等。 2.1.3动物：昆明种小白鼠，1822g，雌雄各半。 2.1.4统计方法： 实验数据以“xS”表示，用Excel、SPSS对数据进行统计，采用t检验。2.2在体实验 2.2.1在体实验方法： 取昆明种小白鼠60只，18-22g，雌雄各半随机分成六组每组10只，分别命名为：空白组（生理盐水组）、阿托品组、新斯的明组、藿香正气滴丸原液组、阿托品藿香正气滴丸原液组、新斯的明藿香正气滴丸原液组。各组处理如下：1 空白组，以10mL/kg的量腹腔注射生理盐水，10分钟后，10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃。 2 藿香正气滴丸原液组，藿香正气滴丸原液以10mL/kg的量，10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃。 3 新斯的明组，0.002%甲硫酸新斯的明以10mL/kg的量腹腔注射，10分钟后，10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃。 4 新斯的明藿香正气滴丸原液组，0.002%甲硫酸新斯的明以10mL/kg的量腹腔注射，10分钟后，藿香正气滴丸原液以10mL/kg的量，10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃4，5。 5 阿托品组，0.01%硫酸阿托品以10mL/kg的量腹腔注射，10分钟后，10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃。 6 阿托品藿香正气滴丸原液组，0.01%硫酸阿托品以10mL/kg的量腹腔注射，10分钟后，藿香正气滴丸原液以10mL/kg的量，10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃4，5。 各组小鼠用亚甲蓝灌胃20分钟后，分别颈椎脱臼处死，立即打开腹腔， 自幽门至回盲部摘出肠管， 不加牵引平铺于玻璃板上，用直尺量取肠管总长度和亚甲蓝推进长度，并算出各组推进百分率。 2.2.2在体实验结果：表2.1 空白组动物号性别体重（g）肠管总长（cm）推进长度（cm）推进率（%）1（头）1856 3562.50 2（背）1842 2047.62 3（尾）1840 2255.00 4（白）2060 3151.67 5（头背）2047 3268.09 6（头尾）2145 2044.44 7（左前）2149 2755.10 8（左后）2248 2450.00 9（右前）2251 2752.94 10（右后）2249 2857.14 总487 26654.62 表2.2 藿香正气滴丸原液组动物号性别体重（g）肠管总长（cm）推进长度（cm）推进率（%）1（头背）1851 3670.59 2（头尾）1845 2862.22 3（头）1942 3788.10 4（背）2058 3153.45 5（白）1841 3278.05 6（尾）2251 3874.51 7（左前）2232 2887.50 8（左后）1948 3266.67 9（右前）1852 3669.23 10（右后）1948 3675.00 总468 33471.37 表2.3 甲硫酸新斯的明组动物号性别体重（g）肠管总长（cm）推进长度（cm）推进率（%）1（头）1854 4481.48 2（背）1849 4795.92 3（白）1951 4588.24 4（尾）2042 3788.10 5（左前）1945 4088.89 6（左后）2156 5598.21 7（右前）2152 4994.23 8（右后）2258 4984.48 9（头背）2249 4897.96 10（头尾）2256 5191.07 总512 46590.82 表2.4 甲硫酸新斯的明藿香正气滴丸原液组动物号性别体重（g）肠管总长（cm）推进长度（cm）推进率（%）1（头）1848 3368.75 2（背）1851 3670.59 3（尾）1857 4070.18 4（白）2046 3269.57 5（头背）2053 4177.36 6（头尾）2242 2457.14 7（左前）2255 3970.91 8（左后）1941 2970.73 9（右前）1952 3771.15 10（右后）2049 3673.47 总494 34770.24 表2.5 硫酸阿托品组动物号性别体重（g）肠管总长（cm）推进长度（cm）推进率（%）1（头）1856 2951.79 2（背）1951 1121.57 3（尾）2048 1531.25 4（白）1845 1635.56 5（头背）1853 1833.96 6（头尾）2241 1331.71 7（背尾）2249 1632.65 8（左前）2258 1729.31 9（右后）2142 1945.24 10（右前）2054 2138.89 总497 17535.21 表2.6 硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组动物号性别体重（g）肠管总长（cm）推进长度（cm）推进率（%）1（头）1848 2960.42 2（背）1846 3678.26 3（尾）1959 2542.37 4（白）1952 3363.46 5（头背）2046 3065.22 6（头尾）2251 3466.67 7（左前）2242 2457.14 8（左后）2057 3663.16 9（右前）1949 3163.27 10（右后）2153 3566.04 总503 31362.23 表2.7 在体实验结果汇总：组别剂量mL/kg小肠全长/cm推进距离/cm推进率/%空白组48.706.0026.605.1354.456.95HD组1046.807.2233.43.6972.5310.68XA组1051.205.0946.505.2590.865.66XA.HD组10,1049.405.2734.705.2969.985.12AT组1049.705.7717.504.9535.198.47AT.HD组10,1050.305.2131.304.3262.608.98注：HD:藿香正气滴丸，XA:甲硫酸新斯的明，AT:硫酸阿托品 对在体实验结果进行t检验，检验结果显示，藿香正气滴丸原液组与空白组比，推进率有显著性差别（P0.001）；硫酸新斯的明藿香正气滴丸原液组与空白组比，推进率有显著性差别（P0.001）；硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组与空白组比，推进率有显著性差别（P0.001）。3 离体实验3.1实验材料： 3.1.1药品：藿香正气滴丸，由天士力制药股份有限公司提供，2.6g*9袋/盒，国药准字Z20000048，产品批号100710，生产日期2011.07.13；硫酸阿托品注射液，郑州羚锐制药股份有限公司，产品批号120102，生产日期2012.01.05，有效期2015.12；甲硫酸新斯的明注射液，上海信谊金朱药品有限公司，产品批号110401，生产日期2011.04.16有效期2014.04.15；生理盐水、台式液（NaCl、KCl 、MgSO4.7H2O、NaH2PO4.2H2O、NaHCO3、CaCl2、G.S）。配药：1、 台氏液的配置：称取NaCl 8.0g,KCl 0.28g, MgSO4.7H2O 0.26g,NaH2PO4.2H2O, 0.065g ,NaHCO3 1.0g,CaCl2 0.2g,G.S 1.0g。边加蒸馏水边搅拌，待溶解后加入10%CaCl2 0.2mL，混匀，用时加入G.S 1.0g，最后加水至1000mL。2、 0.01%硫酸阿托品：取0.5mg/mL硫酸阿托品（郑州羚锐制药股份有限公司）10支（5mg）加生理盐水至50mL即得。3、0.002%甲硫酸新斯的明：取1mg/2mL甲硫酸新斯的明（上海信谊金朱药业有限公司）1支，加生理盐水至50mL即得。 3.1.2器械： BL-420E+生物机能实验系统，CW-3G型恒温平滑肌槽（振华教学仪器厂），1mL注射器、4号针头、100mL烧杯。 3.1.3动物：家兔（2-3kg） 3.1.4 统计方法： 实验数据以“xS”表示，用Excel、SPSS对数据进行统计，采用t检验。3.2离体实验 3.2.1离体实验方法： 取家兔一只，用木槌猛击后脑处死，剖开腹腔取回肠约20cm左右，放入盛有台氏液的平皿中，用注射器冲洗肠内容物，干净后剪成1.5cm左右肠段，放台氏液中待用。向麦氏槽中加入20mL台氏液，加热恒温370.5，调节通入麦氏槽中气泡的量，使每分钟通20个左右空气泡。稳定后将肠管一端固定于麦氏槽底部，另一端固定于拉力换能器上，调整负荷1-2g,待蠕动稳定后分别加入藿香正气滴丸、硫酸阿托品、甲硫酸新斯的明等刺激肠管，观察现象进行记录。 3.2.2离体实验结果：1、 藿香正气滴丸原液组待肠管收缩稳定后，向麦氏槽中加0.05mL藿香正气滴丸原液（2.5l/mL），观察并记录曲线变化。表3.1 藿香正气滴丸原液组序号给药前曲线（g）给药后曲线（g）差值最低最高最低最高(g)1 1.1 2.33.4 4.9 2.45 2 0.81.9 2.73.91.95 3 1.0 2.1 2.94.11.95 4 0.62.3 2.8 5.22.55 5 1.32.23.2 4.62.15 2、 甲硫酸新斯的明藿香正气滴丸原液组待肠管收缩稳定后，先向麦氏槽中加0.002%甲硫酸新斯的明0.05mL即0.05mg/mL台氏液，肠管收缩达最高峰时加0.05mL藿香正气滴丸原液即2.5l/mL台氏液，观察并记录曲线变化。表3.2 甲硫酸新斯的明藿香正气滴丸组序号加XA前（g）加XA后（g）差值加HD后差值最低最高最低最高（g）最低最高（g）1 0.9 2.38.18.96.90 3.56.1-3.70 2 1.22.47.68.36.154.25.3-3.20 3 1.02.37.48.56.304.36.3-2.65 4 2.12.98.29.16.153.47.1-3.40 5 1.32.67.48.76.103.14.2-4.40 注：XA:甲硫酸新斯的明，HD藿香正气滴丸3、 硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组待肠管收缩稳定后，先向麦氏槽中加0.01%硫酸阿托品0.05mL即0.05mg/mL台氏液。肠管收缩达最高峰时，加0.05mL藿香正气滴丸原液即2.5l/mL得台氏液，观察并记录曲线变化。表3.3 硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组序号加AT前（g）加AT后（g）差值加HD后差值最低最高最低最高(g)最低最高(g)1 1.4 2.80.81.9-0.75 1.42.10.40 2 0.92.40.61.3-0.70 1.11.90.55 3 1.12.10.71.6-0.50 1.52.30.754 0.83.10.71.5 -0.85 0.92.90.805 1.42.80.91.6-0.85 1.23.10.90 注：AT:硫酸阿托品，HD:藿香正气滴丸表3.4 离体实验结果汇总组别加药前一次加药后最高值差值二次加药后最高值差值（g）（g）（g）（g）（g）HD组1.560.163.770.362.210.28XA.HD组1.900.368.220.336.320.334.750.663.470.65AT.HD组1.890.221.160.150.730.141.840.230.680.20 注：HD:藿香正气滴丸，XA:甲硫酸新斯的明，AT:硫酸阿托品对离体实验结果进行t检验，检验结果显示，藿香正气滴丸原液组给药前后比较，其对肠管收缩力影响有显著性差异（P0.001）；甲硫酸新斯的明藿香正气滴丸原液组给药前后比较，其对肠管收缩力影响有显著性差别（P0.001）；硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组给药前后比较，其对肠管收缩力影响有显著性差别（P=0.002藿香正气口服液藿香正气水藿香正气丸（水）。对在体实验结果进行t检验，检验结果显示：藿香正气丸（水）组与藿香正气滴丸组相比，推进率有显著差异（P=0.0170.05）；藿香正气滴丸组与藿香正气水组相比，推进率有显著差异（P=0.0210.05）；藿香正气丸（水）和藿香正气口服液组相比，推进率有显著差异（P=0.034藿香正气液藿香正气水藿香正气滴丸，即其抑制作用大小为：藿香正气滴丸藿香正气水藿香正气液藿香正气丸（水）。对在体实验结果进行t检验，检验结果显示：藿香正气丸（水）组与藿香正气滴丸组相比，推进率有显著差异（P0.001）；藿香正气丸（水）和藿香正气水组相比，推进率有显著差异（P=0.003藿香正气水藿香正气液藿香正气丸（水）。对在体实验结果进行t检验，检验结果显示：藿香正气丸（水）组与藿香正气滴丸组相比，推进率有显著差异（P=0.0070.05）；藿香正气丸（水）和藿香正气口服液组相比，推进率有显著差异（P=0.041藿香正气口服液藿香正气滴丸藿香正气丸（水），从而得出藿香正气水对小肠的促进作用最强。对在体实验结果进行t检验，检验结果显示：藿香正气丸（水）组与藿香正气口服液组相比，推进率有显著差异（P=0.037藿香正气液藿香正气水藿香正气滴丸；对新斯的明引起的小肠兴奋抑制作用大小顺序：藿香正气滴丸藿香正气口服液藿香正气水藿香正气丸（水），从而得出藿香正气滴丸对兴奋小肠的抑制作用最强。对在体实验结果进行t检验，检验结果显示：藿香正气丸（水）组与藿香正气滴丸组相比，推进率有显著差异（P=0.001藿香正气口服液藿香正气滴丸藿香正气丸（水），从而得出藿香正气水对抑制小肠的兴奋作用最强。对在体实验结果进行t检验，检验结果显示：藿香正气丸（水）和藿香正气口服液组相比，推进率有显著差异（P=0.0140.05）；藿香正气丸（水）组与藿香正气水组相比，推进率有显著差异（P=0.0220.05）；藿香正气滴丸组与藿香正气水组相比，推进率有显著差异（P=0.0410.05）；其他各组之间，推进率均无显著差异。6 讨论 本次实验，给我印象最深的就是实验数据非常多、数据处理比较复杂，所以实验中要特别注意，对每次实验数据都要做详细认真的记录。我还注意到，在体实验部分对小鼠进行染色编号，每只小鼠灌胃后20分钟要准时处死；离体实验部分，不能用手触及肠管，固定肠管时要特别小心，以免对肠管造成损坏，还要注意选用蠕动平稳的肠管进行实验。 在体实验过程中，在用实验剂量五倍的藿香正气滴丸，即藿香正气滴丸13mL/kg（正常成人用量的50倍）的量，做小鼠肠管推进实验时，藿香正气滴丸组小鼠均未发现有异常。实验中我们只是选用小白鼠和家兔进行初步研究，得到以上结论，但是由于时间和精力有限，此类药物对其他动物胃肠道的影响情况如何，以及具有理气作用的中药对胃肠道是否都具有双向调节作用，未能对此进行试验研究，希望感兴趣的老师和同学能够进行进一步的研究，对这一推断进行验证。7 致谢 经过几个月的努力，我的毕业论文终于顺利完成。论文的顺利完成跟老师和同学们对我的帮助是分不开的。 首先感谢我的导师张启堂。论文准备初期，张老师帮助我搜集相关参考文献和资料，如果没有他的帮助，我甚至不可能在时间紧、任务重的情况下做出实验设计。在做实验期间，张启堂经常抽出时间对我进行指导，特别是离体实验部分，由于之前没有做过类似实验，在张老师的反复演示后，我才能最终顺利的完成实验。在实验过程中，张老师渊博的知识、开阔的视野和敏锐的思维给了我深深的启迪。同时我还要感谢尚曙玉、牛美兰老师。她们在我做实验期间不厌其烦地为我提供实验仪器和试剂，详细的向我讲解实验仪器以及数据统计系统SPSS的使用，并指导我完成离体实验。非常感谢她们给予我的帮助和支持。最后感谢药学系和母校对我的培养！ 8 参考文献1袁晔蓉 藿香正气水对大鼠胃肠道影响的研究J. 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Experimental study on protecting intestinal barrier function of Huo