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贵阳中医学院硕士学位论文相关声明丫i l i l l l l 1 1 8 l l l l l 3 l l l l 1 1 7 i i l l i 。l l l t i l 7 l l l 1 9 l l l 原创性声明 本文声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含 其他人已经发表论文中撰写过的研究成果,也不包含为获得贵阳中医学院或其他 单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均 已在论文中作了明确说明。 作者: 黄嘲嘲 日期:刃。年j - 月尉r 关于学位论文使用授权说明 本文了解贵阳中医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留 学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内 容,可以采用复印、缩印或其他手段保存学位论文;学校可根据国家或贵州省有 关部门规定送交学位论文。 作者签名:捌嘲翩签名:批 吼羽卢年。月时同 目录 中文摘要1 英文摘要3 谪 。言5刚舌b 课题总设计6 j f 文7 第一部分:基源鉴定7 第二部分:性状鉴定8 新鲜药材性状鉴别8 干燥药材性状鉴别9 第三部分:显微鉴定1 1 光学显微鉴别l l 电镜超微鉴别2 5 第四部分:理化鉴定2 7 一般理化鉴别2 7 色谱法鉴别2 9 第五部分:结果与讨论3 5 第六部分:全文总结4 l 参考文献4 4 附录一:英汉缩略语名词对照4 9 附录二:文献研究5 0 附录三:显微鉴定图片6 1 致谢8 1 个人简历8 2 贵l ;兀中仄学院坝i j 研究生学位论义 中文摘要 目的:对山豆根s o p h o r at o n k i n e n s i sg a g n e p 及其四种混淆品种包氏木蓝 i n d i g o f e r ab a l f o u r i a n ac r a i b 、茸毛木蓝l n d i g o e r as t a c h y o i d e sl i n d l e b a k e r 、西南木蓝 n d i g o f e r am o n b e i g i ic r a i b 、西南槐s o p h o r ap r a z e r ip r a i n 进行较为系统的生药学研究,通过比较得出不同种药材形态组织学特征的异同和 化学成分的差异,为准确、全面地鉴别山豆根药材提供新的鉴别依据,进一步确 保临床用药安全。 方法:品种整理方面,通过采用原植物形态鉴别、药材性状鉴别、光学显微 镜鉴别和电镜超微鉴别( s e m ) 方法,比较得出不同品种的形态组织学特征和差 异:质量研究方面:以山豆根对照药材及苦参碱、氧化苦参碱为对照品,对五种 药材中生物碱类成分进行了薄层色谱( t l c ) 的分析研究;采用薄层色谱法( t l c ) 制作黄酮类成分的薄层色谱系统特征图谱,比较得出其黄酮类成分的异同。 结果:1 形态组织学方面:来源于同科不同属的五种药材在原植物形态方 面有较大差别。药材性状方面,五者均为根及根茎入药,但在颜色、形状等方面 都存在差异:山豆根根茎呈不规则结节状,根呈长圆柱形,表面灰棕色至棕褐色, 有纵皱纹及横长皮孔;包氏木蓝根茎短,根圆柱形,表面红棕色至黑棕色,具不 规则纵皱纹和细密点状或横长皮孔;茸毛木蓝根茎膨大呈不规则结节状,根圆柱 形,表面灰棕色,具不规则浅纵皱纹和点状或横长皮孑l ;西南木蓝根茎不规则结 节状,根圆柱形,表面灰褐色至黑褐色,具细纵皱纹及突起明显的点状皮孔;西 南槐根茎圆柱形,根呈圆柱形,表面暗褐色至黑褐色,具细密不规则深纵皱纹和 凸起的横长皮孔。光学显微研究表明:五种药材在组织构造和内含物方面有基本 相同之处,横切面观基本组织一致,由外至内都由木栓层、栓内层、韧皮部、形 成层、木质部组成;五种药材栓内层和韧皮部多散有晶鞘纤维,导管内含有色块, 射线细胞和薄壁细胞内含有淀粉粒,但各种之间又有不同之外,比如射线细胞的 列数不同,且只有西南槐的射线细胞中含多数草酸钙方晶,茸毛木蓝和西南木蓝 有梨形半复粒淀粉粒等。对此我们首次建立了性状检索表和显微特征检索表( 见 表5 、6 ) 。电镜超微研究表明:在横切面整体观基本组织一致,由外向内依次为 木栓层、栓内层、韧皮部、形成层及木质部,但在细微结构上却有明显差异,尤 贵阳中医学院硕i :研究生学位论文 其在射线细胞、草酸钙方晶和石细胞等方面,射线细胞的形状,壁上纹孔清晰与 否,纹孔的形状和大小;是否具有草酸钙方晶,其位于何处;石细胞是否可见等, 在此基础上建立了四种药材的电镜超微特征比较表( 见表7 ) 。以上特征均可作 为五者的鉴别依据。 2 质量研究方面:生物碱类采用硅胶g 薄层板,以三氯甲烷一甲醇一 浓氨试液( 5 :0 6 :0 3 ) 1 0 以下放置分层后的下层溶液为展_ 丌剂,稀碘化铋 钾溶液为显色剂,双波长锯齿扫描,参比波长6 5 0 n m ,检测波长5 2 0 n m ,结果表 明山豆根和对照药材均含有生物碱,而四种混淆品种中不含或者含有微量生物 碱,其薄层图谱显示了一定的相似性和差异性。黄酮类成分,采用硅胶g 薄层板, 以正己烷一乙酸乙酯一冰乙酸( 8 :5 :1 ) 为展开剂,3 三氯化铝乙醇溶液为显色剂, 结果表明:对照药材和山豆根药材在相同位置有颜色基本相同的7 个清晰的斑 点,包氏木蓝有3 个不太清晰的斑点,茸毛木蓝有3 个较清晰的斑点,西南槐有 7 个清晰的斑点,西南木蓝有4 个较模糊的斑点,五种药材含有两种共有的黄酮 类成分,木蓝属药材所含的总黄酮比槐属药材的要少得多,两种槐属药材所含的 成分极为相似,木蓝属药材之间的差异则较为明显,并首次建立了五种药材黄酮 类成分薄层色谱特征图谱( 见图5 7 ) 。 结论:l 、首次对山豆根及其四种混淆品种的形态组织学特征进行了较为系 统地研究,除了采用传统的基源、性状和显微鉴别方法外,还采用了电镜扫描新 技术来研究其超微结构,充分明确了其形态组织学的异同,全面报道了其电镜超 微结构,并给出了电镜超微特征图谱,同时还首次建立了五种药材的性状检索表、 显微特征检索表和电镜超微特征比较表,为准确、全面地鉴别山豆根、包氏木蓝、 茸毛木蓝、西南木蓝及西南槐药材提供了新的依据。 2 、首次对山豆根及其四种混淆品种进行了理化鉴别,初步摸索出五种药材 的简便快捷的理化鉴定方法,并建立了理化鉴别特征比较表。 3 、首次对山豆根及其四种混淆品种中生物碱类成分和黄酮类成分进行了薄 层色谱分析研究,确认了五种药材生物碱类成分和黄酮类成分的类别差异和含量 差异,并建立了黄酮类成分薄层色谱系统特征图谱。 关键词:山豆根;混淆品种;生药学;显微鉴别;电镜超微鉴别;薄层色谱 2 贵l ;n 中医学院硕l :o f 究生学位论义 a b s t r a c t o b j e c t i v e - i no r d e rt op r o v i d eas c i e n t i f i cb a s i sf o rq u a i t yc o n t r o l a n dd e v e l o p m e n tr e s e a r c ho fr a d i xs o p h o r a et o n k i n e n s i s ,t h ist h e s i sh a s s y s t e m a t i c a l l ys t u d i e dt h ep h a r m a c o g n o s ya n d t h eq u a l i t yo f s o p h o r a t o n k i n e n s i sg a g n e p 、 n d i g o f e r ab a l f o u r i a n ac r aib 、i n d i g o f e r a s t a c h y o i d e s l i n d l e b a k e r 、i n d i g o f e r a m o n b e i g i i c r a i b 、s o p h o r a p r a z e r i p r a i n i ts h o u dp r o v i dat h e o r i c a lb a s i sf o rd r a w i n gt h eq u a l i t ys t a n d a r d o fr a d i xs o p h o r a et o n k i n e n s i s m e t h o d s :i np h a r m m a c o g n o s yr e s e a r c h ,t r a d i t i o n a lm a c r o s c o p i c a l 、 m i c r o s c o p i c a la n ds c a n n i n ge l e c t r o lm i c r o s c o p em e t h o d sa r eu s e d f o r i n d e n t i f i c a t i o no fr a d i xs o p h o r a et o n k i n e n s i s ;i nq u a l i t yc o n t r o l r e s e a r c h ,t l cc h a r a c t e r i s ti c sa n a l y s i so ft h ea l k a l o i d sa n df l a v o n e sw a s a d o p t e d r e s u l t s :1 o nm o r p h o l o g ya n dh i s t o l o g ys t u d y :t h ed i f f e r e n c e so ft h e f i v es p e c i e sw e r eo b v i o u si no r i g i n a lp l a n tm o r p h o l o g y 、a n ds h a p ea n d p r o p e r t i e s o nm i c r o s c o p ys t u d y :t h ec r o s s s e c t i o n so ft h ef i v es p e c i e s h a v ec o m m o no r g a n i z a t i o n a ls t r u c t u r e s ,a sf o l l o w i n g :e p i d e r m i sc o r t e xn p h l o e m 、c a m b i u m 、x y l e ma n dp i t h h o w e v e r ,t h e ya l s oh a v es o m ed i f f e r e n t c h a r a c t e r i s t i c s ,s u c ha st h en u m b e ro fc o l u m n so rr a yc e l l s 、c a l c i u m o x a l a t es a n d yc r y s t a l 、s t a r c hg r a n u l ea n df i b r ee t c a l lt h a tp r o v i d e s an e wi d e n t i f i e dr e f e r e n c ef o rr a d i xs o p h o r a et o n k i n e n s i s a c c o r d i n gt o t h e m ,w es e tu pt w o i d e n t i f i c a t i o nk e y s ( s e et a b l e5 、6 ) f i r s tt i m e o n o p t i c a lm i c r o s c o p y ,s o m ec h a r a c t e r i s c so ft h ef i v es p e c i e sa r es a m e ,s u c h a st h es e q u e n c e so fo r g a n i z a t i o ns t r u c t u r eo ne p i d e r m i sc o r t e x 、p h l o e m 、 c a m b i u m 、x y l e ma n dp i t ha n ds o m ea r ed i f f e r e n t ,s u c ha st h en u m b e r o f c o l u m n so rr a yc e l l s 、c a l c i u mo x a l a t es a n d yc r y s t a la n ds c l e r o t i cc e l l e t c ,o nt h i sb a s i sw es e tu pt h ec o m p a r a t i v et a b l eo ft h ec h a r a c t e r i s t i c s o fo p t i c a lm i c r o s c o p y ( t a b l e 7 ) a l la b o v ec h a r a c t e r i s t i c so ft h ef i v e h e r b sc a nb eu s e da san e wi d e n t i f i e dr e f e r e n c e 3 f 贵i ;r i 中医学院硕i :研究生学位论文 2 t h eq u a li t yr e s e a r c ha s p e c t :t h es c i l a g e l gt h i nl a y e r 、 r i c h l o r o m e t h a n e m e t h y la l c o h o l a m m o n i aw a t e r ( 5 :0 6 :0 3 ) f o r d e v e l o p i n gs o l v e n tw a su s e d ,s p r a yi o d i d ep o s t a s s i u mb is m u t hf o r c o l o r a t i n g ,t h ez i g z a gs c a n n i n gm e t h o do fd u a lv a v e l e n g t bw a su s e df o r a l k a l o i d s a n da tt h es a m et i m et h es c il ag e lgt h i nl a y e r 、n - h e x a n e e t h y l a c e t a t e g l a c i a la c e t i ca c i d ( 8 :5 :1 ) f o rd e v e l o p i n gs o l v e n tw a s u s e d ,3 a l u m i n i u mc h o r i d ef o rc o l o r a t i n g ,t h ez i g z a gs c a n n i n gm e t h o do f d u a lv a v e l e n g t hw a su s e df o rf l a v o n e s t h er e s u l t se n u n c i a t et h a tt h e c o n t e n to fa l k a l o i d so fr a d i xs o p h o r a et o n k i n e n s i si st h eh i g h e s to f a l l :t h ef l a v o n e so ff i v es p e c i e sa r ev e r yd i f f e r e n te a c ho t h e ra n dw e f i r s t l ys e tu pt h et l cf i n g e r p r i n tg r a p h i c so ff l a v o n e si nt h e s ed r u g s c o n c l u s i o n :1 f i r s t l l yt h i st h e s i sh a ss y s t e m a t i c a l l ys t u d i e dt h e p h a r m a c o g n o s y ,t h et r a d i t i o n a lm a c r o s c o p i c a l ,t h em i c r o s c o p i a la n dt h e s c a n n i n ge l e c t r o lm i c r o s c o p es t r u c t u n e so ft h ef i v ed r u g sa n dt h e yp r o v i d e s o m en e wi d e n t i f i e dr e f e r e n c e s 2 f i r s t l l yw ed i ds o m ep h y s i c o c h e m i c a la u t h e n t i c a t i o n sf o rt h ef i v e s p e cie s ,d is c o v e r e dp h y sic o c h e m ic a la u t h e n tic a tio nm e t h o d sa n dm a d e s e v e r a lc o m p a r a t i v et a b l e s 3 t l cc h a r a c t e r i s t i c sa n a l y s i so ft h ea l k a l o i d sa n df l a v o n e sw a s a d o p t e d f i r s t t i m e ,b e s i d e s ,w ef i r s t l l ys e tu p t h et l cf i n g e r p r i n t g r a p h i c so ff l a v o n e si nt h ef i v ed r u g s k e yw o r d s :r a d i xs o p h o r a et o n k i n e n s i s ;a d u l t e r a t e s ;p h a r m a c o g n o s y ; m i c r o s c o p i ci d e n t i f i c a t i o n ;s c a n n i n ge l e c t r o nm i c r o s c o p e ;t h i nl a y e r c h r o m a t o g r a m p h y 4 贵阿1 中医学院硕i :研究生学位论文 前言 山豆根为常用中药,始载于开宝本草。其性寒,味苦;有毒,具有清热 解毒,消肿利咽的功效,自古用作泻火解毒,杀虫止痛药,现代临床常用其治疗 咽喉肿痛,牙龈肿痛,湿热黄疸、湿热带下等。 由于历代本草记载、地区用语、使用习惯的不同以及代用品、伪品品种混杂 等多种原因,使得山豆根长时间及很大程度上造成用药混乱,据调查,在我国以 “山豆根”为名的药材原植物分属于3 科4 属9 种植物,其中以木蓝属 ( i n d i g o f e r a ) 多种植物如华东木蓝、苏木蓝、花木蓝、多花木蓝、宜昌木蓝、 陕甘木蓝等最为多见,紫金牛科植物朱砂根的根在部分地区亦作山豆根用。中 国药典2 0 0 5 年版规定山豆根为豆科植物越南槐s o p h o r at o n k i n e n s i sg a g n e p 的干燥根及根茎。 目前,贵州省内山豆根药材的混淆品种较多,在市场上流通、比较常见的有 包氏木蓝、茸毛木蓝、西南木蓝、西南槐等,除原植物形态研究之外,对这些混 淆品种的研究,如品种鉴定、质量标准、化学活性成分和药理作用的研究几乎处 于空白,因此,本课题通过对山豆根及其四种常见混淆品种的系统的生药学研究 和较简单的质量研究,不仅可以全面、准确地鉴别药材,解决药材品种混乱,辨 识不清的问题,确保临床用药安全有效,还为对其进行更深入的质量研究、化学 成分分析等提供依据,实现生药学在中药基础研究方面的重要作用。 1 利用药材基原鉴别、传统的性状鉴别、光学显微鉴别对山豆根及其四种 混淆品种包氏木蓝、茸毛木蓝、西南木蓝和西南槐进行形态组织学研究,为准确、 全面地鉴别山豆根药材提供新的鉴别依据。 2 通过采用新技术、新方法,如电镜扫描技术( s e m ) 、d n a 分子遗传标记 技术如多聚酶链式反应( p c r ) 等加速中药生药的现代化和标准化进程。 3 通过对山豆根及其混淆品种包氏木蓝、茸毛木蓝、西南木蓝和西南槐的 质量研究,为摸索和开发山豆根药用资源奠定基础,同时也为中药山豆根质量标 准的提高和完善提供科学的新的理论依据,更进一步地为人类的健康事业服务。 5 贵i ;丌中医学院硕卜研究生学位论义 生药学研究 课题总设计 i 性状鉴别 光学显微、电镜超微鉴别 理化鉴别i 1 对山豆根及其混淆品种包氏木蓝、茸毛木蓝、西南木蓝和西南槐进行原 植物、药材性状、光学显微等传统的生药学鉴别,找出五者相同与差别之处,达 到区别五者的目的。 2 对山豆根、包氏木蓝、茸毛木蓝、西南槐进行电镜超微鉴别研究,为中 药鉴定的现代化与标准化提供新的试验数据。 3 对五种药材进行简单的理化鉴别,得出简便有效的理化鉴定方法和可靠 的鉴定结果。 4 以2 0 0 5 年版中国药典正品山豆根s o p h o r ar o n k i n e n s d s ( ;a g n e p 为对照药材,对山豆根及其四种混淆品种进行生物碱的薄层色谱比较研究;采用 薄层色谱法( t l c ) ,对山豆根及其四种混淆品种进行黄酮类成分的比较研究, 并建立五种药材黄酮的薄层色谱系统特征图谱。 6 贵i ;r i 中医学院硕j :研究生学位论文 正文 第一部分基源鉴定 l药材原植物形态鉴别 1 1 山豆根s o p h o r at o n k i n e n s i sg a g n e p 小灌木,高1 2 m 。老茎秃净,新枝密被短毛柔毛。奇数羽状复叶,互生, 小叶片1 1 1 7 ,卵形至卵状披针形,长1 2 5 a m ,宽0 5 - - 1 5 c m ,顶端小叶较 大,上面疏被短毛,下面密被除数灰棕色短柔毛。总状花序,密被短毛;花萼阔 钟状,先端5 齿;花冠蝶形,黄白色,雄蕊1 0 ,离生;子房圆柱形,密被毛柔 毛,具短柄,花柱弯曲,柱头簇生长柔毛。荚果串珠状不开裂。花期5 , - - 6 月, 果期7 8 月。 1 2 包氏木蓝i n d i g o f e r ab a l f o u r i a n ac r a i b 又称丽江木蓝( 豆科贵州植物 志) 灌木,高5 0 c m 以上,幼枝四棱形,绿色,密被褐色卷毛,老枝圆柱形,褐 色,几无毛。复叶,长1 5 - , 3 5 c m ,叶柄、叶轴被褐色毛,互生,叶腋中长有 小芽,部分还长有另- - d , 复叶或小分枝;小叶对生,奇数片,呈矩状卵圆形,有 些叶顶端较圆,两面均被灰白色毛,生长较稀疏,长可达2 c m ,宽可达0 5 c m 。 果为荚果,直,圆柱形,末端翘起,具细尖长喙,成串,互生,较稀疏,长2 4 c m ,直径0 1 o 4 c m ,内含种子数粒;种子小,呈圆柱形,长约0 3 c m ,直径 约0 1 5 c m 。( 见图i - i ) 1 3 茸毛木蓝i n d i g o f e r as t a c h y o i d e s l i n d l e b a k e r 又称血人参( 豆科贵 州植物志) 灌木,高达1 5 m ,枝圆柱形,直径约为0 1 o 5 c m ,灰褐色,表面密生黄 褐色皮孔,有纵棱。奇数羽状复叶,长l o 一- 2 0 c m ,互生;小叶2 1 - - 4 1 ,互生或近 对生,较密,矩圆状披针形或矩圆形,长可达2 c m ,宽可达7 m m ,先端圆形,有 短尖,基部近圆形,两面与叶柄、叶轴密被白色长柔毛,小叶柄短。( 见图1 - 2 ) 1 4 西南槐s o p h o r ap r a z e r ip r a i n 又称西南苦参( 豆科贵州植物志) 灌木,小枝绿色,密生棕色柔毛,老枝生疏毛,皮孔灰白色,圆形。羽状复 叶,互生,长达1 7 c m ,长短不等;小叶互生,奇数片,上面为绿色,下面为灰 7 贵阳中医学院倾i :研究生学位论义 白色,叶柄下着生棕色小刺,上部小叶长椭圆形或倒披针形,长1 5 3 c m ,宽l 1 5 c m ,向下渐小,下部小叶椭圆形或类圆形,长l 1 5 c m ,宽约l c m ,纸质或 近革质,先端钝或钝尖,基部楔形,稍偏斜,上面疏被毛或近无毛,f 面中脉密 生柔毛,叶柄很短。肉质荚果,长3 6 c m ,直径0 5 l c m ,柄长1 2 2 2 c m , 果呈串珠状,有单果、截节果、合节果之分,果实半透明,顶端有褐色至黑色残 基,不开裂;每个荚果有1 2 粒种子,有时3 粒,长圆形,暗红色。具豆腥气。 ( 见图1 - 3 ) 图卜1 包氏木蓝i n d i g o f e r a图卜2 茸毛木蓝i n d i g o f e r a图卜3 西南槐s o p h o r a b a l f o u r i a n ac r a i b 原植物 s t a c h y o i d e sl i n d l e b a k e r p r a z e r ip r a i n 原植物 原植物 第二部分性状鉴定 l 新鲜药材性状鉴别( 清洗前) 1 1 包氏木蓝i n d f g o f e r ab a l f o u r i a n ac r a i b 根及根茎 根茎短,中央有黄色髓部;根圆柱形,头部略膨大,下面着生6 8 细长条 根,多扭曲,有1 - 一2 分支和多数须根:长2 0 9 0 c m ,直径0 5 4 o c m 。表面红 褐色至棕褐色,有细密纵皱纹和凸起的少数点状和多数横长皮孔,有的可见栓皮 脱落或开裂,脱落处色较深,呈黑褐色。质韧,不易折断,断面纤维状,皮部类 白色,木部黄白色,有放射状纹理。气微,味微苦。 贵阳中医学院硕f :研究生学位论文 1 2 茸毛木蓝i n d i g o f e r as t a c h y o i d e sl i n d l e b a k e r 根及根茎 根茎膨大呈不规则结节状,上端常有茎基残留,下端着生数条细根;根呈圆 柱形,有分支和须根,略扭曲;长l o l o o c m ,直径0 3 1 5 c m 。表面狄褐色, 具不规则纵皱纹及点状或横长皮孔,皮孔微凸,有的可见栓皮脱落,脱落处颜色 较深,呈棕褐色。质韧,难折断,断面纤维状,皮部红棕色,木部红棕色至灰白 色,有放射状纹理。气微,味微苦。 1 3 西南槐s o p h o r ap r a z e r ip r a i n 根及根茎 根茎呈圆柱形,略扭曲,直径0 7 - - , 1 6 c m ,表面暗褐色,下端膨大,着生 细根数条:根呈圆柱形,有分支和多数须根,略弯曲;长5 3 5 c m ,直径0 1 0 9 c m 。表面暗褐色至黑褐色,有细密不规则纵皱纹和略凸起的点状或横长皮孔, 有的可见栓皮脱落或皱缩开裂,脱落处呈黑褐色。质韧,难折断,断面纤维状, 皮部黄白色,木部类白色,有放射状纹理。气较浓,味苦。 2 干燥药材性状鉴别 :o 2 1 山豆根s o p h o r at o n k i n e n m sg a g n e p 干燥根及根茎 根茎呈不规则结节状,顶端常残留茎基,其下生根数条。根呈长圆柱形,略 弯曲,常有分枝,长短不等,直径0 7 1 5 c m 。表面灰棕色至棕褐色,有纵皱 纹及横长皮孔。质坚硬,不易折断,断面略平坦,淡黄棕色。有豆腥气,昧极苦。 ( 见图2 - 1 ) 2 2 包氏木蓝i n d i g o f e r ab a l f o u r i a n ac r a i b 干燥根及根茎 h 根茎短;根圆柱形,头部略膨大,下面着生6 8 细长根,多扭曲,有l 2 分支和多数须根;长2 0 一- 9 0 c m ,直径0 2 - - 0 5 c m ;表面红棕色至黑棕色,具不 规则纵皱纹和细密点状或横长皮孔,皮孔微凸,有的可见栓皮脱落或开裂,脱落 处色呈黄白色至棕色,去栓皮后呈黄白色。质硬而脆,易折断,断面纤维状,呈 黄白色,皮部窄,木部宽广,皮部与木部常分离,有放射状纹理。气微,味极苦。 ( 见图2 - 2 ) 2 3 茸毛木蓝i n d i g o f e r as t a c h y o i d e sl i n d le b a k e r 干燥根及根茎 根茎膨大呈不规则结节状,上端常有茎基残留,长约l 6 c m ;根圆柱形, 有分支和须根,略扭曲:长l o - - 一l o o c m ,直径0 3 1 5 c m 。表面灰棕色,具不规 则浅纵皱纹和点状或横长皮孔,皮孔凸起呈环状紧密排列,栓皮多皱缩开裂,有 9 贵阳中仄学院顾i j 研究生学位论文 的可见栓皮脱落,脱落处呈红棕色至黑色。质峰硬,有韧性,不易折断,断面纤 维状,皮部红棕色,木部外缘类白色,内部红棕色,皮、木部比例约为l :2 , 常分离,有放射状纹理。气微,味微苦而涩。( 见图2 - 3 ) 2 4 西南木蓝i n d i g o f e r am o n b e i g i ic r a i b 干燥根及根茎 根茎不规则结节状,略扭曲;根圆柱形,有少量分支及须根;表面狄褐色至 黑褐色,具细纵皱纹及突起明显的点状皮孔,皮孔较大,圆形或椭圆形,部分栓 皮已脱落,栓皮脱落处显黄白色。质坚脆,不易折断,断面纤维状,皮部类白色, 木部类白色至黄白色,具放射状纹理。气较浓,味苦。 2 5 西南槐s o p h o r ap r a z e r ip r a i n 干燥根及根茎 根茎圆柱形,略扭曲,下端膨大,长约l c m ,直径0 7 1 6 c m ,表面灰褐色: 根呈圆柱形,有分支和多数须根,略扭曲,长5 - - - - 3 5 c m ,直径0 1 - 0 9 c m 。表面 暗褐色至黑褐色,具细密不规则深纵皱纹和凸起的横长皮孔,纵皱纹略扭曲,有 的皱缩开裂。质坚硬,不易折断,断面纤维状,皮部类白色,木部黄白色,比例 约为l :l ,常分离,有放射状纹理。气较浓,味苦。( 见图2 - 4 ) g a g n e p 干燥根及根茎 1 0 图2 - 2 包氏木蓝i n d i g o f e r a l m l f o u r i a n ac r a i b 干燥根及根茎 资i ;兀中医学院硕l :研究生学位论文 雾彰臀7 。蚴。一罗_ ”:霸秒镱黟锈 图2 3 茸毛木蓝i n d i g o f e r as t a c h y o i d e s l i n d l e b a k e r 干燥根及根茎 图2 - 4 西南槐s o p h o r ap r a z e r ip r a i n 干燥根及根茎 第三部分显微鉴定 l 光学显微鉴别 t 1 1 材料、仪器及方法 1 1 1 实验材料 乞 山豆根药材购于贵阳中医学院第一附属医院中药房,四种混淆品包氏木蓝、 茸毛木蓝、西南木蓝和西南槐皆采于贵州省的黔东南地区,经贵阳中医学院药学 系生药教研室刘艽教授鉴定。 1 1 2 实验仪器 y d - 2 0 2 c 型旋转切片机( 浙江金华益迪医疗设备厂) 、x s z - 0 9 0 0 型生物显微 镜、s o n y 数码相机、f w l 0 0 高速万能粉碎机( 天津市泰斯特仪器有限公司) ,实 验所用试剂均为分析纯。 1 1 3 实验方法 1 1 3 1 横切片 分别取山豆根、包氏木蓝、茸毛木蓝、西南木蓝及西南槐的根作石蜡切片, 经软化、脱水、透明、浸蜡、包埋、固着、切片、粘片、脱蜡、染色、透明和封 藏后,置生物显微镜下观察、拍照并绘图。 贵阳中医学院坝i j 研究生学位论文 1 1 3 2 解离组织片 取山豆根、包氏木蓝、茸毛木蓝、西南木蓝及西南槐的干燥根及根茎,分别 置于坩埚中,加1 5 氢氧化钾溶液适量,加热至药材能被压成小块后,更换1 次 1 5 氢氧化钾溶液,再加热至药材挤压离散为止,倾去碱液,用自来水洗至中性, 制水合氯醛一稀甘油透化片,置生物显微镜下观察、拍照并绘图。 1 1 3 3 粉末片 取山豆根、包氏木蓝、茸毛木蓝、西南木蓝及西南槐的干燥根及根茎,分别 粉碎成粉末过8 0 目筛后制蒸馏水片、水合氯醛透化片( 间苯三酚、浓盐酸染色) , 封片后置生物显微镜下观察,拍照并绘图。 1 2 实验结果 1 2 1 横切面显微特征 1 2 1 1 山豆根s o p h o r at o n k i n e n s i sg a g n e p 根的横切面 木栓细胞数列至1 0 数列,扁长方形,排列整齐、致密,外侧数层细胞常 破裂反卷,内侧数层细胞中有的可见细胞核。栓内层外侧数列薄壁细胞多含类 多角形草酸钙方晶,断续环绕形成含晶细胞环,每个含晶细胞中含单个或2 一- , 3 个方晶,有隔膜将每个方晶隔开,细胞壁不均匀木化增厚。栓内层和韧皮部散 有众多纤维,单个散在或十几个成束,横切面类圆形或类多角形,有的周围伴有 含晶细胞而形成品鞘纤维;韧皮射线宽1 - ,8 列细胞,稍弯曲。形成层成环, 束间形成层不明显。木质部发达,导管单个散在或2 至数个聚集,数目多,分 布较密集,类圆形或长圆形,主为具缘纹孔导管,直径1 7 6 0 帅,壁厚2 5 - - - 9 埘n , 单穿孔,有的含黄棕色物;木纤维多,常十几个至数十个成束散在,横切面类圆 形或类多角形;木质射线宽1 8 列细胞,稍弯曲,长方形或方形,壁增厚,孔 沟明显,含多数淀粉粒,偶有含草酸钙方晶;木薄壁细胞多类圆形或类长圆形, 壁增厚,含有淀粉粒,淀粉粒多为裂缝状脐点,少数含草酸钙方晶。无髓。( 见 图3 - 1 、3 - 2 ) 1 2 1 2 包氏木蓝i n d i g o f e r ab a l f o u r i a n ac r a i b 根的横切面 木栓层十数列细胞,扁长方形,排列整齐、致密,外侧数层细胞常破裂反 卷,部分细胞中充满红棕色至黑棕色物,内侧数层细胞常稍弯曲,并散有少数石 细胞。栓内层薄壁细胞数十列,类圆形、长圆形或不规则长条形,较大,排 1 2 贵阳中医学院顺i j 研究生学位论义 列不整齐,有部分纤维散在,单个或几个成束,横切面类圆形或类多角形。 韧皮部外侧数列至十数列细胞中散有众多纤维,单个散在或十几个成束;韧皮射 线宽l 3 列细胞,偶见1 2 列,较长,稍弯曲;形成层不连续成环。木质部 发达,导管单个散在或2 至十数个聚集,数目多,分布较密,类圆形或长圆形, 主为网纹和具缘纹孔导管,直径2 2 l o g ) a m ,壁厚2 - - 8 p m ,部分导管壁呈念珠状 增厚,单穿孔,有的含黄棕色至红棕色物;木纤维众多,常十几个至数十个成束 散在,横切面类圆形或类多角形;木质射线宽l 3 列细胞,偶见1 2 列,略弯曲, 长方形、方形、长条形,壁增厚,孔沟明显,含淀粉粒。木薄壁细胞类圆形或 类长圆形,壁增厚,含有淀粉粒,少数淀粉粒可见裂缝状脐点。无髓。( 见图 3 - 3 、3 - 4 ) 1 2 1 3 茸毛木蓝i n d i g o t e r as t a c h y o i d e sl i n d l e b a k e r 根的横切面 木栓层细胞十数列至数十列,细长条形或扁长方形,排列整齐、致密,外 侧数层至数十层细胞多填充有红棕色至黑棕色物,并散有少数石细胞,石细胞壁 增厚明显,内侧数层细胞多稍弯曲,少数可见细胞核。栓内层和韧皮部较窄, 散有众多纤维,单个散在或几个至十几个成束,有的周围伴有含晶细胞而形成晶 鞘纤维;韧皮射线宽1 - - 3 列细胞,较长,略弯曲;薄壁细胞含有极多淀粉粒, 并散有少数草酸钙方晶,方晶不规则多角形,较大。形成层4 5 列细胞,不 连续成环。木质部发达,导管单个散在或2 至l o 个聚集,数目较多,分布较 密,规则或不规则多角形,主为具缘纹孔导管,直径1 0 8 7 m ,壁厚2 7 啪, 部分导管壁呈念珠状增厚,单穿孔,有的含黄棕色或红棕色物;木纤维常十几个 至数十个成束散在,横切面类圆形或类多角形,壁增厚;木质射线宽1 - - 3 列细 胞,长方形或方形,壁增厚,孔沟明显,含有淀粉粒,部分细胞还填充有红棕色 至黑棕色物。木薄壁细胞多长圆形或稍呈类多角形,壁增厚,每个细胞含1 至数粒淀粉粒,部分还填充有红棕色至黑棕色物,含有色物的木薄壁细胞与木纤 维夹杂形成不连续的同心环,6 - - - 1 4 环。无髓。( 见图3 5 、3 6 ) 1 2 1 4 西南木蓝i n d i g o f e r am o n b e i g i ic r a i b 根的横切面 木栓层窄,细胞数列至十数列,扁长方形,排列整齐致密,外侧数层细胞 部分破裂反卷,内侧数层细胞有的弯曲。栓内层由数列薄壁细胞组成,细胞由 外向内渐大,扁长方形或两端渐尖的长条形,内侧数列细胞有的稍弯曲,并散有 1 3 贵m 中医学院顺j j 研究生学位论义 少数草酸钙方品。韧皮部较窄,细胞形状不规则,排列致密,内含淀粉粒,部 分含有草酸钙方晶而形成含晶细胞,含晶细胞不含淀粉粒;韧皮纤维常十数个至 数十个成束,分布于韧皮部外侧,断续成坏,纤维横切面类圆形、扁圆形或类多 角形,直径8 1 5 帅,壁非木化,有的周围伴有含晶细胞而形成品鞘纤维;韧皮 射线1 2 列细胞,窄而短。形成层成环,束间形成层不明显。木质部发达, 导管分布密集,常数个至十数个成群,横切面类圆形或扁圆形,直径1 2 8 2 帅, 壁木化增厚,3 l o 胁,单穿孔,近形成层处有极少数导管内含有盒黄色或红棕 色块状物;木纤维常数十个成束,横切面类圆形、长圆形或类多角形,直径5 ll p m ,壁增厚;木射线1 - - - 2 列细胞,细胞较小,扁长方形或方形,壁增厚,部 分具明显孔沟,内含淀粉粒;木薄壁细胞小,扁长方形或类多角形,排列致密, 细胞壁木化增厚,有时可见纹孔。无髓。( 见图3 7 、3 - 8 ) 1 2 1 5 西南槐s o p h o r ap r a z e r ip r a i n 根的横切面 木栓层细胞8 至2 0 余列,不规则扁长方形,排列整齐、致密,夕l f l o 数层 细胞常剥落,有时破裂反卷,并填充有红棕色至黑棕色物,内侧数层细胞细胞壁 多呈波浪状弯曲。皮层和韧皮部较宽广,散有众多纤维,单个散在或几个至十 几个成束,几乎所有纤维周围都伴有l 至数个含晶细胞而形成晶鞘纤维;韧皮射 线宽1 - - 2 列细胞,偶有3 列,较长,稍弯曲;薄壁细胞较大,类圆形、长圆形、 类多角形或不规则形,含有众多淀粉粒,淀粉粒单粒为主,复粒多为2 4 分粒, 并散有草酸钙方晶。形成层1 - 5 列细胞,不连续成环。木质部较发达,导 管单个散在或2 至数个聚集,多为2 - - - 3 个聚集,数目较少,分布稀,类圆形或 类多角形,直径1 2 - - - 9 0 m ,壁厚1 5 - 2 5 胁,少数导管壁呈念珠状增厚,单穿 孔;木纤维众多,常十几个至数十个成束散在,横切面类多角形,壁增厚,周围 常伴有含晶细胞而形成晶鞘纤维;木质射线宽1 2 列细胞,偶有3 列,分布较 密,略弯曲,长方形或方形,壁增厚,孔沟不明显,含有淀粉粒和成行排列的草 酸钙方晶。木薄壁细胞多类圆形,少数类多角形,壁增厚明显,含淀粉粒和极 多草酸钙方晶。无髓。( 见图3 9 、3 1 0 ) l - 2 2 解离组织显微特征 1 2 2 1 山豆根s o p h o r at o n k i n e n s i s6 a g n e p 解离组织 ( 1 ) 薄壁细胞棕黄色,类圆形、类方形、长条形、类多角形或矩状椭圆形,常 1 4 贵l ;n 中医学院坝i j 研究生学位论文 单个散在或成群出现,多数细胞壁未木化,少数微木化或木化增

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