（微生物学专业论文）杀虫剂吡虫啉的微生物转化研究——微生物转化法制备杀虫剂吡虫啉衍生物及活性研究.pdf

南京师范走擘博士擘住论文杀虫荆吡虫琳的微生物转化研究 杀虫剂吡虫啉( i m i d a c l o p r i d ) 的微生物转化研究 中文摘要 生物催化和转化技术因其高效性，多样性，底物专一性、区域选择性、化学选 择性对映选择性以及温和的反应条件等特点，被誉为继医药生物技术和农业生物 技术之后的“第三次生物技术浪潮”本文采用微生物转化技术进行新农药的创制。 选择了高效，对温血动物低毒的烟碱类杀虫剂吡虫啉( i m i d a c l o p r i d ，i m i ) 为底物， 从自然界和菌种库中筛选可转化i m i 的菌株，采用静息细胞转化法羟基化i m i ，获得 了一种i m i 羟基化的转化产物5 - 羟基吡虫啉( 5 - h y d r o x yi m i ) ，5 - h y d r o x yi m i 经酸，热 水解可得到文献报道的杀虫活性提高l o 1 6 倍的烯式吡虫啉( o l e f i n i m i ) 以i m i 为唯一氮源进行富集培养，从土壤中筛选到了7 株可将i m i 转化为一种 极性更大的化合物的菌株其中一株命名为n j i 的菌株具有较高的转化i m i 的能力， 转化样品经h p l c m s 分析，证明该极性更大的转化产物为i m i 的羟基化衍生物 采用b i o m e r i e u xv i t e k 自动微生物分析仪鉴定，n j l 菌株被鉴定为s t e n o t r o p h o m o n a s m a l t o p h i l i a ；1 6 sr d n a 结果分析进一步证明了n j l 菌株与在系统发育地位上属于 sm a l t o p h i l i a 从菌种库中筛选结果表明，与n j l 菌株属于同一个种的s m a l t o p h i l i a c o m c c1 1 7 8 8 菌株的转化能力高于n j l 菌株s m a l t o p h i l i a c g m c c l 1 7 8 8 被选为 进一步研究用菌种 s m a l t o p h i l i ac g m c c1 1 7 8 8 菌株发酵条件研究结果表明，培养温度介于2 0 至 3 5 0 c 之间，羟基化酶活性几乎没有变化，而最适生长温度为3 0 。c ；最高羟基化酶 活性出现在对数生长期中期之后；苹果酸和麦芽糖为最适生长碳j ! 暮，琥珀酸和乙酸 钠为羟基化酶活性碳源，乙酸钠为最适比酶活力碳源；牛肉膏为最适生长氮源，酵 母膏和玉米浆分别为最适羟基化酶活性和比酶活力氮源；各种吡啶类化合物和咪唑 烷类化合物作为诱导剂添加到培养基中，测试结果表明酶形成不需要诱导剂诱导 5 - h y d r o x yi v i i 合成条件研究结果表明，酶活性受通气量影响较大，摇瓶装液量 越少，酶活性越大，摇瓶转速越高，转化活力越高；最适转化温度为2 5 0 c ；在转化 液中添加蔗糖、葡萄糖和苹果酸等促进剂可显著提高酶活性，添加5 * , ( w v ) 蔗糖的 转活性较对照组提高了近9 倍；最适羟基化酶活性p h 为6 5 ；底物最适浓度为0 0 1 v 玎 南京师范夫擘博4 r 住e e 丈 杀虫剂吡虫啉的截生物转化研究 采用5 l 发酵罐进行sm a l t o p h e i ac g m c c1 1 7 8 8 的发酵和转化研究，实验结 果表明，转化7 0h 后，转化液中转化产物的含量可达到2 6 0m g l 转化液。采用二 氯甲烷苹取两次后，约9 7 的未转化的底物被去除，9 3 的产物仍保留在水相中； 含有转化产物的水相部分再用等体积的乙酸乙酯萃取，8 7 的产物可被萃取到乙酸 乙酯相中萃取液经浓缩，有机相膜过滤，结晶后，可得到纯度为9 8 的产物晶体 晶体经质谱、元素分析、核磁共振光谱和单晶体x 一射线衍射法分析，确认其结构 为5 - h y d r o x yi m i ，且羟基所在的碳原子具有顺式构。 采用酸热水解法将5 - h y d r o x yi m i 转变成o l e f i ni m i 实验结果表明，o 1 m 盐酸， 8 0o c 加热2 5m i n 后，5 - h y d r o x yi m i 可完全被水擗；酸热水解产物经h p l c m s 和 n m r 分析确认为o l e f mi m i 5 - h y d r o x yi m i 转变为o l e f i ni l v l i 的摩尔转变系数为 8 6 - 9 7 生物活性测试结果表明，o l e f mi m i 和5 - h y d r o x yi v i i 均有杀蚕豆蚜活性 经以i m i 为对照，三者的杀虫活性排序为o l e f i n i m i i m i 5 - h y d r o x y i m i 相对毒 力指数测定表明，o l e f i n i m i 对蚕豆蚜成虫的活性是i m i 的1 9 倍，是蚕豆蚜若蚜的 2 2 5 倍，o l e f i ni m i 对褐飞虱成虫的活性是i m ! 的1 4 3 倍，但对褐飞虱若虫的活性 只有i m i 的o 5 倍盆栽试验验证了室内生物活性结果，并证明o l e f i ni m i 对蚕豆 苗安全 。 。 综上所述，本论文采用微生物转化法获得了5 - h y d r o x yi m i ，5 - h y d r o x yi m i 经酸 水解后得到了对蚜虫成虫生物活性高于i m i1 9 倍的o l e f i n i m i 并首次证明了一些 纯培养微生物如细菌，真菌可将i m i 羟基化生成5 h y d r o x yi m i sm a l t o p h i l i a c g m c c1 1 7 8 8 静息细胞催化i m i 羟基化发生在i m i 咪唑烷环上的5 位碳原子( i m l 分子c 1 2 位) 上，并具有顺式构型在转化液中添加蔗糖、葡萄槠麦芽糖和苹果 酸等促进剂可显著提高转化酶的活性 关键词： 吡虫啉；微生物转化；羟基化；5 - 羟基吡虫啉；烯武吡虫啉；生物活性；嗜麦芽糖 寡养单胞菌 v l 南京师范大学博士学位论文杀虫荆吡虫啉的擞生物转化研究 a b s t r a c t b i o t r a n s f o r m a t i o na n db i o c a t a l y s i st e c h n o l o g yh a st h ec h a r a c t e ro fh i g he f f i c i e n c y ， d i v e r s i t y , s p e c i a l t yo fs u b s t r a t e ，r e g i o s e l e c t i v i t y , c h e m i c a ls e l e c t i v i t y , e n a n t i o m o r p h s e l e c t i v i t y s oi ti sp r a i s e dw i t h t h e “r dw a v eo fb i o t e c h n o l o g y 鹊f o l l o w e dm e d i c i n e b i o t e c h n o l o g y a n d a g r i c u l t u r eb i o t e c h n o l o g y i n t h i s p a p e r , w eu s e d m i c r o b i a l t r a n s f o r m a t i o nm e t h o dt od e v e l o pt h ep r o c e s sf o rc r e a t i o no fn e wp e s t i c i d e t h e n e o n i c o t i n o i di n s e c t i c i d ei m i d a c l o p r i d ( i m i ) w h i c hh a so u t s t a n d i n gb i o l o g i c a le f f i c a c y , l o wt o x i c i t yt ow a h n - b l o o d e da n i m a l sw a ss e l e c t e da sb i o t r a n s f o r m a t i o ns u b s t r a t e w e h a di s o l a t e da n ds c r e e n e dm i c r o o r g a n i s m s 、i mt h ea b i l i t yo f t r a n s f o r m i n gi m if r o ms o i l s a n ds t o c kc u l t u r e s w eo b t a i n e dt h eh y d r o x y l a t e dp r o d u c t5 - h y d r o x yi m ip r o d u c e db y u s i n gr e s t i n gc e l lt r a n s f o r m a t i o no fi m i ，t h e n5 - h y d r o x yi m iw a sf u r t h e th y d r o l y z e d u n d e ra c i da n dh e a t i n gc o n d i t i o n st op r o d u c eo l e f i ni m lw h i c hh a sh i g h e rb i o l o g i c a l e f f i c a c yt h a ni m i ， t h r o u g he n r i c h m e mc u l t u r eu s i n gi m ia ss o l en i t r o g e ns o u r c e s c v e l ls 1 t 咖so f b a c t e r i af r o ms o i l ss h o w e dt h ea b i l i t yo ft r a n s f o r m a t i o no fi m it oam o r ep o l a r c o m p o u n d a m o n gt h e m ，n j is t r a i nf r o ms o i le x h i b i t e dh i g h e ri m it r a n s f o r m a t i o n a c t i v i t y t h i ss t r a i nw a si d e n t i f i e da ss t e n o t r o p h o m o n a sm a l t o p h i l i ao nt h eb a s i so ft h e p h y s i o l o g i c a lt e s t s 、i t l la t be x p r e s s i o ns y s t e m ( i d 3 2s t r e p ) ( b i o m e r i e u xv i t e k ) a n d p a r t i a l1 6 sr i b o s o m er n ag e n es e q u e n c e m e a n w h i l e ，w es e l e c t e ds o m eb a c t e r i a , y e a s t s a n df u n g is t r a i n sf r o ms t o c kc u l t u r e si n0 1 1 1 l a bf o re x a m i n a t i o no ft h e i ri m i t r a n s f o r m a t i o na c t i v i t y t h er e s u l ts h o w e ds o m em i c r o o r g a n i s m si n v o l v e db a c t e r i aa n d f u n g ia l s oh a dt h ea b i l i t yo ft r a n s f o r m a t i o ni m i a m o n gt h e m ，sm a l t o p h i l i ac g m c c 1 1 7 8 8s h o w e dt h eh i g h e s ta c t i v i t yo f t r a n s f o r m a t i o ni v l l ，w h i c hw a sh i g h e rt h a nt h a to f & m a l t o p h i l i an j ls t r a i n t h u s m a l t o p h i l i ac g m c c1 1 7 8 8w a sc h o s e nf o rf l l r t h e r s t u d y t h ee f f e c t so fc u l t i v a t i o nt e m p e r a t u r e , c u l t i v a t i o nt i m ea n di n d u c e ro nt h ei m i t r a n s f o r m a t i o na c t i v i t yb y & m a l t o p h i l i ac g m c c1 1 7 8 8s t r a i nw g “t - ee x a m i n e d w h a n c u l t i v a t i o nt e m p e r a m 坤c h a n g e df r o m2 0 。ct o3 5 0 c t h et o t a lt r a n s f o r m a t i o na c t i v i t yo f i x 南京师范大擘博士擘位论文 蒂虫荆吡虫啉的微生物转化研克 r e s t i n gc e l l sf r o mt h es a m ev o l u m eo f c u l t i v a t i o nb r o t ha l m o s td i d n o tv a r y , w h e r e a sc e l l s n u m b e r sa n dd r yc e l lw e i g h ta p p e a r e dg r e a tc h a n g e s ，a n dt h eo p t i m a lt e m p e r a t u r ef o rc e l l s g r o w t hw a s3 0 。c t h eo p t i m a lc u l t u r et i m ef o rt h et r a n s f o r m a t i o na c t i v i t yw a sa f t e rt h e m i d d l eo f e x p o n e n t i a lp h a s e v a r i o u sp y r i d i n ec o m p o u n d s ，i m i d a z o l i d i n ec o m p o u n d sa n d s o m eo t h e rc o m p o u n d sw e r et e s t e da si n d u c e r s ，a n dn o n eo ft h e mw a sm o r ee f f e c t i v ef o r t h ef o r m a t i o no ft h et r a n s f o r m a t i o ne n z y m e ，t h e r e f o r ei m it r a n s f o r m a t i o na c t i v i t yo ft h e b a c t e r i u mw a sn o n - i n d u c e d o p t i m i z a t i o no fc a r b o ns o u r c e ss h o w e dm a l i ea c i da n d m a l t o s ew e r et h eo p t i m a lc a r b o ns o b i c e sf o rg r o w t h ，a n ds u c c i n a t ea n da c e t i ca c i dw e r e t h eo p t i m a lc a r b o ns o b r c c sf o rt h et r a n s f o r m a t i o na c t i v i t y ，a c e t i ca c i dw a st h eo p t i m a l c a r b o ns o u s ef o rs p e c i f i ca c t i v i t y o p t i m i z a t i o no fn i t r o g e n $ o l r c e ss h o w e dt h a tb e e f e x t r a c tw a st h eo p t i m a ln i t r o g e ns o u r c ef o rg r o w t h , y e a s te x t r a c ta n dc o r ns t e e pw e r et h e o p t i m a ln i t r o g e ns o u r c ef o rt h et r a n s f o r m a t i o na c t i v i t ya n ds p e c i f i ca c t i v i t yr e s p e c t i v e l y t h ee f f e c t so f p h ，t e m p e r a t u r ea n do x y g e no nt h es y n t h e s i so f 5 - h y d r o x yi m ib yr e s t i n g c e l l so f s m a l t o p h i l i ac g m c c1 1 7 8 8 、j l 眦e x a m i n e d t h eo p t i m a lp hw a sa ta r o u n d6 5 、i 也0 2mp o t a z s i u m - p h o s p h a t eb u f f e r t h eo p t i m a lt e m p e r a t u r ew a sa t2 5 。c o x y g e n w a sn e c e s s a r yf o rt h et r a n s f o r m a t i o nr e a c t i o n , t r a n s f o r m a t i o na c t i v i t yi n c r e a s e di n p r o p o r t i o nt ot h ef r e q u e n c yo fs h a k i n gb u ti ni n v e r s ep r o p o r t i o nt ob r o t hv o l u m ei nt h e s h a k i n gf l a s k t h em a x i m u mc o n c e n t r a t i o no fi m ii n t h e r e a c t i o nm i x t u r eu n d e r e x p e r i m e n tc o n d i t i o n sw a sa b o u to 1 i nw h i c hc o n c e n t r a t i o nt r a n s f o r m a t i o na c t i v i t yw a s t h eh i 曲e s t av e r yr e m a r k a b l ef e a t u r ew a st h a tt r a n s f o r m a t i o no fi m ib y & m a l t o p h i l i a c g m c c1 1 7 8 8w a sp r o m o t e db ys o m ec a r b o h y d r a t e sa n do r g a n i ca c i d ss u c ha sg l u c o s e ， m a l t o s e ，s u c r o s e ，s o l u b l es t a r c h , m a l i ca c i d , a m o n gw h i c hs u c r o s ew e l et h em o s te f f e c t i v e e f f e c t o r sf o rt h ea c t i v i t yi nr e s t i n gc e l l st r a n s f o r m a t i o n , a n dt h et r a n s f o r m a t i o na c t i v i t y r e a c h e dt h eh i g h e s ta t5 c o n c e n t r a t i o no f s u c r o s e t oc h a r a c t e r i z et h ep r o d u c tt r a n s f o r m e df r o mi m ib ysm a l t o p h i l i ac g m c c1 1 7 8 8 。 al a r g es c a l eo f5l i t e r sf e r m e n t e rw a su s e d t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h ec o n t e n to f p r o d u c tw a sc o n t a i n e d2 6 0m e d li nt r a n s f o r m a t i o nm i x t u r ea f t e rt r a n s f o r m e df o r7 0h t h et r a n s f o r m a t i o nm i x t u r em o v e do u to fc e l l sb ye e u t r i f u g a t i o nw a sf i r s te x t r a c t e dt w i c e w i t he q u a lv o l u m eo fd i c h l o r o m e t h a n et oe l i m i n a t ea b o u t9 7 o fr e m a i n i n gi m l ， x 南京师范太擘博士学位论文杀虫剜吡土琳的微生物转化研克 w h e r e a s9 3 o fp r o d u c tw a ss t i l lr e m a i n e di nt h ea q u e o u sp h a s e t h ea q u e o u sf r a c t i o n c o n t a i n e dp r o d u c tw a st h e ne x t r a c t e dw i t l le q u a lv o l u m eo fe t h y la c e t a t ei nw h i c ha b o u t 8 7 o fp r o d u c tw a se x t r a c t e d t h ee t h y la c e t a t ee x t r a c t i o nw i t ht r a n s f o r m e dp r o d u c tw a s d e h y d r a t e dw i ma n h y d r o u ss o d i u ms u l f a t e a n df i l t e r e d 谢t hu l t r a f i l t r a t i o nm e m b r a n e s t h ef i l t e r e ds o l u t i o nw a se v a p o r a t e da g a i nu n t i lw h i t ec r y s t a l sw e t p r o d u c e d t h e c r y s t a l sw e r ew a s h e dt w i c ew i t hd i c h l o r o m e t h a n e ，t h e nr e c r y s t a l l i z e dw i t he t h y la c e t a t e a n dd r i e di nv a c u u m t h eb i o t r a n s f o r m a t i o np r o d u c tw a si d e n t i f i e dw i t hh y d r o x y l a t i o na t t h ec 1 2p o s i t i o ni nt h ei m i d a z o l i d i n er i n ga n dh a sr s p a t i a lc o n f i g u r a t i o nb yu s i n g l c m s ，e l e m e n t a la n a l y s i s , n m rs p e c t r u ma n dx m yc r y s t a l l o g r a p h i ca n a l y s i s t h i s c o m p o u n du s u a l l yn a m e d a s5 - 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h y d r o x yi v i ib yu s i n gm i c r o b i a lt r a n s f o r m a t i o n m e t h o d ，5 - h y d r o x yi m iw a sf u r t h e rh y d r o l y z e du n d e ra c i da n dh e a t i n gc o n d i t i o n st o p r o d u c eo l e f mi v 1 1w h i c hh a s1 9t i m e sb i o l o g i c a le f f i c a c ya g a i n s ta p h i di m a g ot h a ni v l i x 1 南京师范走擘博士学位论文毋虫荆吡虫琳的擞生物转化研克 o u re x p e r i m e n t sc o n f i r m e df i r s tt h a tt h e r eh a dh y d r o x y l a t i o np a t h w a yo fi m im e t a b o l i z e d b ys o m eb a c t e r i aa n df u n g i t h er e s t i n gc e l l so fs m a l t o p h i l i ac g m c c1 17 8 8c o n v e n e d i m ii n t ot h e p r o d u c t5 - h y d r o x yi m i a n dt h ec h i r a lc e n t e rh a sr s t e r e o c h e m i c a l c o n f i g u r a t i o nb a s e do nx r a yc r y s t a l l o g r a p h i ca n a l y s i s 1 1 1 er e a c t i o nm e d i u mw i t h5 s u c r o s er e s u l t e di n8 3t i m e sg r e a t e rb i o t r a n s f o r m a t i o ny i e l da sc o m p a r e dt ot h a tw i t h o u t m l c m s e k e yw o r d s ： i m i d a c l o p r i d ；m i c r o b i a lt r a n s f o r m a t i o n ；h y d r o x y l a t i o n ；5 - h y d r o x yi m i d a c l o p r i d ；o l e f i n i m i d a c l o p r i d ；b i o l o g i c a le f f i c a c y ；s t e n o t r o p h o m o n a sm a l t o p h i l i a x n 南京师范大学博士学位论文杀虫剂吡虫啉的微生物转化研究 c g m c c 2 d c o s y d e p t d m s o e s i m s h p l c 5 h y d r o x yi m i i ( i m i d a c l o p r i m l bm e d i u m l c ，m s n a c h r n m r 1 1 1 t r o s i m i n e 姒1 0 d o l e f mr m i y e p d 缩写 ( a b b r e v i a t i o n ) c h i n ag e n e r a lm i c r o b i o l o g yc u l t u r ec e n t e r ，中国普通微生物菌种保 藏中心 2 dc o r r e l a t e ds p e c t r o s c o p y , 二维化学位移相关谱 d i s t o r s i o n l e s se n h a n c e m e n tb yp o l a r i z a t i o nt r a n s f e r ，无畸变极化转移 增强技术 d i m e t h y ls u l f o x i d e 。二甲基亚砜 e l e c t r o s p r a yi n t e r f a c em a s ss p e c t r o s c o p y , 电离喷雾质谱 h i g h - p e r f o r a m n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y ，高效液相色谱 l ( 6 - e h l o r o 3 - p y r i d y l m e t h y l ) 5 - h y d r o x y l - n - n i t r o i m i d a z o l i d i n - 2 - y l i d e n e a m i n e ，l - 6 氯- 3 吡啶甲基5 一羟基- n 硝基咪唑啉2 亚胺 i - ( 6 一c h l o r o - 3 一p y r i d y l m e t h y l ) - n n i t r o i m i d a z o l i d i n - 2 - y l i d e n e a m i n e 1 - 6 氯- 3 毗啶甲基- n 硝基咪唑啉- 2 亚胺 l u r i a - b e r t a n im e d i u m ，l b 培养基 l i q u i dc h r o m a t o g r a p h y m a s ss p e c t r o s c o p y , 液相色谱一质谱联用 n i c o t i n i ca c e t y l c h o l i n er e c e p t o r ，烟碱乙酰胆碱受体 n u c l e a rm a g n e t i cr e s o n a n e e ，核磁共振 1 一( 6 一c h l o r o 3 一p y r i d y l m e t h y l ) n n i t r o s o i m i d a z o l i d i n - 2 y l i d e n e a m i n e ， 1 - 6 氯3 吡啶甲基- n 亚硝基咪唑啉2 亚胺 o p t i c a ld e n s i t y , 光密度 1 - ( 6 - e h l o r o 3 一p y r i d y l m e t h y l ) - n - n i t r o i m i d a z o l - 2 - y l i d e n e a m i n e ，1 - 6 - 氯，3 毗啶甲基n 硝基咪唑2 亚胺 y e a s te x t r a c tp e p t o n ed e x t r o s e , 酵母浸膏蛋白胨葡萄糖培养基 v i 学位论文独创性声明 本人郑重声明： 1 、坚持以“求实、创新”的科学精神从事研究工作 2 、本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成 果。 3 、本论文中除引文外，所有实验、数据和有关材料均是真实的。 4 、本论文中除引文和致谢的内容外，不包含其他人或其它机构已经 发表或撰写过的研究成果 5 、其他同志对本研究所做的贡献均已在论文中作了声明并表示了谢 意 作者签名： 日期： 瓤这译 y “加 学位论文使用授权声明 本人完全了解南京师范大学有关保留、使用学位论文的规定，学校 有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版 和纸质版；有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入 学校图书馆被查阅；有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索； 有权将学位论文的标题和摘要汇编出版保密的学位论文在解密后适用 本规定 作者签名： 日期： 贰弼 沙了f l 2 ，o 南京师范走擘博士学住论文杀虫荆吡虫啉的微生物转化研究 第一章前言 农药是农业生产的重要保障物资，在国民经济发展中具有重要的作用。改革开 放以来，我国农药工业有了长足的进步，全国农药原药生产能力已经超过7 0 万吨。 生产企业近2 0 0 0 家，可生产品种2 5 0 多个其中常年生产2 1 0 个品种，基本能够 满足国内市场防治病、虫、草、鼠害的需要，并有一定量的出口。虽然目前我国农 药产量己位居世界第二，是农药生产大国，但不是农药创新强国，如生产品种比较 落后，且以有机磷为主( 占杀虫刹7 0 ) ，其中在不少国家已被禁用或限用的农药又 占相当比重，并且在已经生产的农药中几乎都是无知识产权的仿制品种。随着世界 经济一体化的发展，以及我国已加入w t o ，对农药的专利保护和行政保护力度加 大，可供仿制的品种越来越少，仿制难度越来越大。另外，长期使用某种农药都会 产生不同程度的抗性的规律，不可避免地要求农药工业要不断地进行更新换代。因 此，为满足我国农业生产的需要，保证我国农药工业的可持续发展，我国农药行业 必须要开展刨制具有自主知识产权的农药新品种的研究开发。“九五”以来，国家 投资建立了“国家南方新农药创制中心”( 南方中心) 和“农药国家工程研究中心” ( 北方中心) 两个基地。通过国家“八五”、“九五”和“十五”科技攻关计划的 实施，新农药创制取得了初步成效，已有十多个创制品种进入产业化开发阶段，并 将逐步进入市场。这些品种绝大部分将在“十五”期间进行商品化开发，并形成生 产能力。“十五”期间，国家将“新农药创制研究和产业化技术开发”列入国家“十 五”科技攻关重大项目，旨在全面提高我国农药行业技术创新水平为目标，通过新 农药创制研究和产业化关键技术开发，使农药工业技术创新能力和市场竞争力得到 显著提高( 王龙根等，2 0 0 1 ) 建立在分子生物学、分子遗传学、生物化学、微生物学、细胞生物学以及化工 和计算机技术等基础上的现代生物技术，是2 0 世纪后半期国际上突飞猛进的技术 领域之一，它为人类保健、农牧业、食品工业，环境保护以及精细化工等产业的发 展提供了前所未有的动力。 现代生物技术也深刻地影响到了新农药创制过程。一是“基因组创制农药” 人类基因组的解读已完成：在植物中，对拟南芥菜的全部基因组已解读，对水稻基 因组已公开；另外，对鳞翅目害虫一桑蚕棉铃虫、病原菌中的水稻稻瘟病病菌等的 南京师范走擘博士擘住论文杀土刺吡虫啉的微生物转化研究 基因组亦已解读。这些生物的基囡组信息，对今后的“基因组创制农药”的发展将 会带来很大的影响( 张一宾，2 0 0 4 ) 。二是“组合生物技