课件：AD转基因模型研究进展.ppt

AD转基因模型研究进展,目录,1、AD简介 2、转APP基因小鼠 3、转早老蛋白基因小鼠 4、转载脂蛋白E（ApoE）基因小鼠 5、双转基因小鼠 7、小结与展望,AD简介,AD转基因动物模型具有明确的AD病因,并具有AD的病理与功能变化，可望成为研究AD发病机制及治疗药物的理想模型。 AD转基因鼠的诞生为AD发病机制及治疗的研究带来了新的曙光。,转APP基因小鼠,PDAPP小鼠、APP23小鼠、TGCRND8小鼠,APP23小鼠,这类小鼠的突变基因的启动子及表达调控元件是鼠类Thy-1.2，来源于C57BL6小鼠。APP23小鼠比正常小鼠脑内多7倍的APP，并且在6个月时已有A沉积。24个月时出现炎性反应：神经炎、突触损伤及tau过度磷酸化。,空间记忆障碍开始出现在3个月时，到6、8、25个月时进行性加重1。有研究发现2，在探针实验中低剂量加兰他敏能够改善小鼠的空间精确度，美金刚胺能够提高此种转基因小鼠工作能力的获得与空问精确度，呈剂量依赖关系。,转早老蛋白（PS）基因小鼠,PS基因位于14号染色体，中枢神经系统PS主要集中在海马和皮层内。PS是一种跨膜蛋白，可在细胞中与APP形成复合物，参与APP转运 及合成后加工。已发现至少有35种PS基因突变与AD有关，野生型PS有抗凋亡作用；突变型PS易裂解，可诱导神经元内A增多。,为了弄清PS的正常功能，Jackson实验室在转PS基因鼠类同系物制造了一种定向的无效突变，将断裂的外显子2和3以新霉素为载体注入B6129S小鼠的胚胎干细胞，繁殖出的下一代与C57BL6J交配得到该种小鼠。,2019/8/5,10,可编辑,其纯合子在自然分娩或剖腹产后立即死亡，并伴骨骼严重畸形，发病初期即出现中枢神经系统广泛严重出血，神经发生亦受到损伤，存在大量神经元丢失，提示PS对于小鼠骨骼轴的形成、正常神经发生、神经元存活都是必需的3。,转载脂蛋白E（ApoE）基因小鼠,ApoE基因位于19号染色体，具有多态性，有3种等位基因2、3、4，分别表达ApoE2、ApoE3、ApoE4，以ApoE3最常见，占78。ApoE4是AD相关联的危险因素，对含有APP突变的FAD有促进作用，但对具有PS突变的FAD没有作用4。,在认为65岁以后发病的AD主要与ApoE4有关并且ApoE4参与了淀粉样斑的形成。含有ApoE4表型的AD患者大脑中A40和A42免疫反应斑的水平都比不含ApoE4表型的AD患者水平要高。缺乏ApoE4的小鼠与PDAPP小鼠杂交的后代表现出A沉积显著减少。,ApoE4与A亲和力强，体外混合可产生沉淀，它不能与tau蛋白结合，但能使tau蛋白磷酸化增加，干扰微管的装配和完整性，导致NFT。ApoE2和ApoE3使AD发病率降低、发病年龄推迟。,双转基因小鼠,APPswePSl小鼠 Wengennck等5制作了APPswePS转基因小鼠，表达人突变的PS基因和APP基因，12周后在转基因鼠皮质和海马发现A沉积，此后到第54周，A沉积明显增加。此模型用于研究PS在A沉积中的作用。,小结与展望,研究认为理想的AD动物模型应具备以下3个方面的特征： 具有AD的主要神经病理学特征SP和NFT 出现大脑神经元死亡、突触丢失和反应性胶质细胞增生等AD的重要病理变化 出现认知和记忆功能障碍,参考文献,1 ELLY PH，BONDOLFI L，HUNZIKER D，et a1Progressive Age-related Impairment of Cognitive Behavior in APP23 TransgeKnic MiceJNeurobiol Aging(S01974580)，2003，24(2)：365378 2 VANDAMD，DEDEYN PPCognitive Evaluation of Disease-modifying Efficacy of Galantamine and Memantine in the APP23 ModelJEur Neuropsychopharmacol(S0924977X)，2006，16(1)：5969 3 SHENJ，BRONSON RT，CHEN DF，et a1Skeletaland CNS Defects in Presenilin-1一deficient MiceJ.Cell(S00928674)，1997，89(4)：629639 4 HWANGDY，CHAE KR，KANG TS，et a1Alterations in Behavior，Amyloid Beta一42，Caspase-3，and Cox-2 in Mutant PS2 Transgenic Mouse Model of Alzheimers DiseaseJFASEB J(S08926638)，2002，16(8)：805813 5 WENGENACK TM，WHELAN S，CURRAN GL，eta1Quantitative Histological Analysis of Amyloid Deposition i