课件：FK作用机理刘志红.ppt

普乐可复作用机制的临床及实验研究,南京军区总医院 解放军肾脏病研究所 全军医学研究重点实验室,Molecular structure of tacrolimus,Molecular formula: C44H69NO12H2O,HO,H3CO,CH3,OH,O,CH3H2O,CH3,H3CO,OCH3,N,O,O,O,O,H3C,HC3,O,OH,Cyclophilin,Cyclophilin,Cyclophilin,Cs,Cs,Cs,CnB,CaM,CnA,CnB,CaM,CnA,Antigen,NF-AT,IL-2 production,Ca2+,Ca2+,*,FKBP,FKBP,FKBP,Prograf,Prograf,Prograf,CnB,CaM,Ca2+ Ca2+,CnA,*,Molecular mechanism of action of tacrolimus,Antigen presenting cell,Helper T cell,Peptide + MHC-II class,Activated TCR/CD3,B7,CD28,ZAP70,PLCg1,IP3,Ca2+,Calcineurin,Activation,NF-AT c/p,Inhibition,FKBP12,Tacrolimus,DAG,PKC,Ras/GAP?,Raf/MEK?,MAPK,Jun,Fos,Jun,Fos,NF-AT c/p,NF-AT c/p,NF-AT,CD28RE,CD28RC,IL-2,P,P,P,(Nucleus),FK506的免疫抑制作用,*除IL2之外可以抑制IL1，IL3，IL4， IL6 ，IL7， IL8，IL10 及IFN-的表达。 *抑制T淋巴细胞的活化 *抑制细胞毒性T淋巴细胞的产生,包括“Naive” 及“Primed”细胞。 *抑制特异性T辅助细胞增生的诱导。,FK506的临床应用,* FK506用于肾移植排异反应的治疗 急性排异反应 难治性急性排异反应 CsA中毒的切换 慢性排异反应（慢性移植性肾病） * FK506用于非移植性肾病的治疗 狼疮性肾炎 膜性肾病,T cell,Recipient APC,Donor APC,Shed donor antigens,indirect,MHC+ peptide,Second signal,MHC+ peptide,Second signal,direct,TCR,FK506抑制急性和慢性排异反应的机制,Direct rejection,Acute rejection,Indirect rejection,Chronic rejection,Naive T cells,Primed T cells,（+）,（+）,FK506对细胞因子产生的影响,Afferent Phase,APC,T cell,HLA,TCR,Efferent Phase,Regulatory Phase,Cytokine production T cell proliferation CTL generation Macrophage activation NK cell activation Alloantibody production,Cell cycle arrest T cell apoptosis,Immunologic Memory,Rejection,肾移急性排异肾组织中细胞因子mRNA表达谱的变化,n 急性排异 无排异 p IL-2 10 100% 0 0.014 IFNr 56 71.4% 28.5% 0.185 IL-10 55 83.6% 16.3% 0.0001 TGF- 58 67.2% 32.7% 0.58,Suthanthiran M. Kidney Int,1997;58:S15,肾移慢性排异肾组织中细胞因子mRNA表达谱的变化,n 慢性排异 无排异 p IL-2 10 20% 80% 0.72 IFNr 56 26.7% 73.2% 0.82 IL-10 55 21.8% 78.1% 0. 16 TGF- 58 87.7% 17.2% 0.01,Suthanthiran M. Kidney Int,1997;58:S15,IL-10 急性排异反应 TGF- 慢性排异反应,FK506 vs. CsA,* FK506能更有效地抑制IL-10的产生。 * CsA刺激TGF-的产生,FK506抑制 TGF-的产生。,IL-10免疫刺激作用,*活化IL-2非依赖性T细胞的活性。 *提高B细胞的功能,使抗体产生增加。 *增加CD8+ T细胞和NK细胞的活性。,IL-10在急性排异反应中的作用,*急性排异肾组织中IL10表达增加。 *给予外源性IL10可以加重移植物排异反应，而用IL10抗体则能明显延长移植物的存活时间。,IL-10 在狼疮性肾炎中的作用,SLE 患者外周血 IL-10 分泌细胞数明显较正常人多 SLE 活动时，血清中 IL-10 水平明显增高 动物实验发现给予外源性 IL-10 能诱发SLE NZB/W 小鼠给予抗 IL-10 抗体能预防SLE的发生,FK506具有拟激素样作用,Corticosteroid therapy: mechanism of action,The effects of corticosteroid therapy are largely anti-inflammatory; but many adverse effects include fluid retention, weight gain, diabetes, bone mineral loss, and thinning of the skin. Usually corticosteroids are administered in combination with other drugs to keep the toxic side effects at a minimum.,FK506的拟激素效应,不仅可以使激素在较低剂量发挥其作用,也为采用不含激素的免疫抑制治疗方案提供了依据。,FK506具有保护内皮细胞抗血栓形成的作用,TGF-,Soluble or vitronectin-bound active PAI-1,U-PA activity Plasmin formation Fibrinolysis ,MMP activation ECM degradation ,Fibroblasts invation of the fibrin matrix,ECM protein accumulation,Collagen deposition,Fibrosis Thrombosis,+,FK506具有促进肝细胞再生的功能,2019/8/5,29,可编辑,肝细胞再生 （Hepatic regeneration） 抑制作用:Azathioprine, cortical steroid 促进作用：FK506,CsA FK506CsA,Effect of CyA and FK506 on Hepatocyte DNA Synthesis,Addition to the Incubation Medium(MEM+Insulin),NRS 11015 889 7114 535 NRS+CyA 9210 8210 568 577 NRS+FK506 8611 834 599 526 Vehicle-treated rat serum 13018 12410 1066 82 10 CyA-treated rat serum 1407 16711* 19612* 17011* FK506-treated rat serum 15416 30628 + 28626+ 24417+,% serum 5 10 20 30,(3H)-Thymidine Incorporation (cpm 10-3/mg DNA),* Significantly different from group no . 4(P0.05) + Significantly different from group no . 4(P0.02) and 5(P0.01),Vehicle No 2,930 650 Vehicle Unilateral nephrectomy 5,012559* FK506 Unilateral nephrectomy 4,971 702* Vehicle No 13,420 16,216 40% small intestine Vehicle resection 73,711 17,071+ 40% small intestine FK506 resection 78,823 30,973+,(3H)- Thymidine Incorporation (cpm/mg DNA),(3H)- Thymidine Incorporation in kidney and Small Intestine From Normal, Nephrectomized, or Small Intesine-Resected Rats Treated or Nor with FK506,Treatment(IM) Surgey,* Significantly different from thymidine incorporation in kidneys from non-operated animals(P0.05) + Significantly different from thymidine incorporation in the small inntestine from non-operated animals(P0.05),FK506促进肝细胞再生机制,FK506促进细胞再生作用为器官特异性。FK506对肝细胞并无直接促进再生作用，其作用的产生需借助相关调节因子，如肝细胞生长调节因子。,FK506促进肝细胞再生机制（2）,FK506促进细胞再生的作用能被IL2，IL12所阻断，提示FK506该作用与其免疫调节作用有关。,FK506在慢性排异反应中的作用,免疫性因素 HLA配型（DRBA） 急性排异（早期，反复发作） CMV感染 持续低水平排异反应,非免疫性因素 供肾 （年龄，肾单位） 缺血再灌注损伤 高血压，高血脂 肥胖，糖尿病,炎症反应,内皮细胞受损,平滑肌细胞增殖,血管腔狭窄、缺血损伤、纤维化,慢性移植肾功能衰竭,移植后肾病,缺 血,排异反应,药物,移植物损伤,PDGF FGFA,细胞外基质聚积 组织纤维化,细胞增殖,慢性排异 慢性移植性肾病,内皮细胞损伤,凝血,高血压,TGF-1,FK506能抑制供者特异性抗体(DSA)的产生,Th0,Th0,Th2,B,Th1,Mac,T cells Macrophages,IL-12,IL-4,IL-4 IL-10,IFN-,Antibody formation,抗体介导的排异反应 （Antibody mediated rejection）,体液性排异反应(Humoral rejection) * 循环中存在抗供者特异性抗体 *肾组织管周毛细胞血管C4d染色阳性,急性排异反应,I型： II型： III型：抗体介导的排异反应 （体液性排异反应）,细胞介导的排异反应,体液性排异反应（Humoral rejection）不仅介导急性排异的发生，它在慢性排异的发生中同样起着重要的作用,直接关系到病人的远期预后。,0 2 6 9 12 moths,100 80 60 40 20 0,DSA titers(In % of initial value),Pat 1 Pat 2 Pat 3 Pat 4,Kinetics of circulating donor-specific antibodies (DSA) in four patients with chronic humoral rejection after the rescue therapy with tacrolimus,FK506抑制急性排异反应,* 抑制Naive T淋巴细胞活性, 阻断直接排异反应 * 抑制IL-10产生 * 抑制血管内血栓形成 * 抑制抗体介导的体液免疫反应,FK506抑制慢性排异反应,* 抑制Primed T淋巴细胞活性，阻断间接 排异反应(Indirect rejection)。 * 抑制TGF-产生,减轻间质纤维化和硬 化病变。 * 抑制抗供者特异性抗体(DSA)的产生， 保护血管内膜，防止血管硬化的发生。,FK506的其它特点,* FK506具有拟激素样作用， 减少激素的用量 。 * FK506具有促进肝细胞再生 的作用，短期内提升血浆 白蛋白水平。,FK506的合理用药,CsA与 FK的异同,CsA FK IL2抑制作用 防止器官移植急排 对CD4的作用 对CD8的作用 （naive） (primed) 对IL10的作用 - 副作用: 多毛、齿龈增生 - 高血压、高脂血症 - 肾毒性 高血糖 - 神经系统 - 对TGF的作用 提高TGF - 抑