疑难血型的实验室及临床处理

疑难血型的实验室及临床处理疑难血型的实验室及临床处理 四川大学华西医院输血科 秦莉 Dng/Qr mvZ- 血型定义：血液系统遗传多太性。但是一般来说，血型指红细胞 ABO 及 Bh 血型。 :t0 7）未按试剂供应商的要求进行操作。 t/mqs 8）离心机有问题。 hA1Ma 9）试剂污染。 h* | 10）离心时加热。 0eRh 某些疾病状态可能使红细胞抗原减弱或产生假抗原，如白血病，何杰金病，10 号染色体转 位，红细胞系统极度增生如海洋性贫血。可能出现如下反应格局： lEeGX.! C 正定型 反定型 /jeygH 表现型 抗-A 抗-B 抗 AB A1 细胞 B 细胞 3Ap9iAOs A +mf +mf + U,jA“.2gC B + + ?hxJXf 红细胞 ABO 抗原减弱与病程有关，病情缓解时抗原性会增强。 ao*7M/-Q 此外，血液中凝集素效价可由于低丙种球蛋白血病而降低，如慢淋、淋巴瘤、免疫缺陷性 疾病如先天性低丙种球蛋白血病。老年人及婴儿凝集素效价也低。 tAe$= 肠梗阻、结肠、直肠癌或其他下消化道疾病时肠壁通盘性啬，细菌多糖入血，使 A 节型患 者出现获性 B 现象。胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中可能含有过多的可溶性血型物质，这些 物质中和抗血清从而影响正定型结果。 Q#hTAt4i 如出现 ABO 正反定型不符，不能轻易发血。首先应重复试验，如仍不符合，应再抽标本并 进一步了解病人情况，如诊断、年龄、妊娠史、输血史、用药史、免疫球蛋白平等。 Rj 处理方法：增强反定型反应-将患者血清与 A1 或 B 细胞在室温下孵育 15-30 分钟，如 仍无反应，将混合物质 4下孵育，注意做自身及 O 型细胞对照。 i Fo 正定型 反定型 W%Gp ;k 抗-A 抗-B 抗-AB A 细胞 B 细胞 Q?!q2#x 病人标本 + + + + KN t 7Vq“ 制造商不可能将试剂标准血清与所有已知红细胞抗原进行抗体筛查，如标准血清中恰巧含 有针对某种红细胞低频抗原的抗体，而病人红细胞上有该抗原，可能出现微弱凝集，类似 于红细胞 A 或 B 抗原性减弱。处理方法是换另一批号的抗血清。 CW;Cw25o 正定型 反定型 uikGy*Z 抗-A 抗-B 抗-AB A 细胞 B 细胞 s(8(1 Bs 病人标本 + + + + Wt9 Nw 第三类 )NDIK 多凝集红细胞是由遗传、细菌或病毒感染等引起红细胞膜结构改变，从而使红细胞多数相 合的血清发生凝集反应。 =!k?u*U#6 细菌性多凝集 x OD Py:5 T 多凝集：细菌（肺炎球菌、产气荚膜杆菌、霍乱弧菌）产生的唾液酸分解红细胞膜糖蛋 白或糖脂末端的 N 乙酰唾液酸，使细胞膜上的隐蔽抗原 T 抗原暴露出来。 c2sKn Th 多凝集机理类似于 T 多凝集 oJ-s9oBP Tk 多凝集：见于败血症、胃肠道损伤、伤口感染，脆弱拟杆菌、粘质沙雷菌、白色念珠菌、 曲霉菌产生的 半乳糖苷酶切断血型糖链前体末端的半乳糖，使 N 乙酰葡萄糖胺（Tk）暴 露出来。 OL1%K= Tx 多凝集：可能与细菌或病毒感染有关 ; 非细菌性多凝集 XTVh2eCB Tn 多凝集 可能由于造干细胞突变，突变细胞缺乏 -3-D 半乳糖基转移酶，使细胞膜上 MN-SGP（唾液酸糖蛋白）、Ss-SGP 上的四糖不能合成，致使隐蔽 Tn 抗原（-N-乙酰 半乳糖胺）暴露。除红细胞外，Tn 抗原还可出现于白细胞、血小板及组织细胞上，可能与 白血病前期有关。由于 Tn 抗原与 A 抗原决定簇相同，抗-A 血清有时可能与 Tn 抗原发生 交叉反应，这种情况被称遗传性多凝集 Xza2*p Cad 多凝集 常染色体显性遗传，与红细胞高频抗原 Sda 有关。Cad 多凝集几乎没有临床 意义。 ,C joIs 与血红蛋白 M-Hyde Park 相关的多凝集：首先发现于南非一混合种族大家庭中，有的成 员有罕见的变异血红蛋白，同时有红细胞多凝集现象。 Jh()|uD HEMPAS 遗传性多核幼红细胞伴酸化血清溶血试验阳性，又被称为先天性红细胞生成异常 性贫血型。 n 7*NK NOR 多凝集：抗原决定簇不详，可与 P 血型系统有关，首先发现于 Norfolk,Virginia,NOR 红细胞与脐血清不发生凝集。 Kx4KPZFB-l 过去用人血清做试剂时多凝集红细胞可发生正反定型不符合，交叉配血次侧可出现凝集， 抗球蛋白试验可出现假阳性。随着单克隆抗球蛋白试剂的使用，现在常规配血中已很少见 多凝集现象。 8HG YJSb; a+“iRM7 怀疑多凝集红细胞时，应将红细胞与多份脐血清、多份正常成年人 AB 型血清进行凝集试 验，还可采用测定红细胞唾液水平、或用凝聚胺及植物凝集素进行确认。根据酶处理红细 胞后凝集反应的变化及红细胞对不同的植物集素的反应，可将多凝集红细胞进行分类。 6h:3u 多凝集红细胞的定型用单克隆抗血清一般不困难。如红细胞凝集性很强而又只有人多克隆 抗血清做试剂时，可采用吸收、酶处理、脐血清、过期血清、稀释抗血清、巯基化合物 （2-巯基乙醇，二硫苏木素）、吸收放散等方法进行定型。 G$Bt4h 多凝集红细胞的临床意义： 9YF- lP 提示严惩感染 *) 多凝集现象出现于多种细菌或病毒感染中，如黑曲霉菌、脆弱拟杆菌、白色念珠菌、产气 荚膜菌、破伤风杆菌、大肠杆菌、肺炎球菌、奇异变形杆菌、粘质沙雷菌、霍乱弧菌、流 感病毒等。病人红细胞出现多凝集现象可能提示严惩感染。 jDVN 怀疑坏死性肠炎的婴幼儿，红细胞隐蔽抗原的暴露（即出现多凝集）可提示诊断及病情严 重程度。 oI6X 1CX 溶血性贫血 94mTIY 病人红细胞隐蔽抗原暴露后，血液中多凝集素可与转化红细胞结合并激活补体，从而引起 血管内溶血，输入含凝集素的正常血浆会加重溶血，甚至引起 DIC。新生儿血液没有多凝 集素，因此，除非输入血浆制品，新生儿坏死性肠炎患者不会出现溶血。 Z#!bR( 案例：一 7 月女婴，因急性肠梗阻入院。因贫血输压积红细胞 90ml，输血后立即出现血 红蛋白血症及血红蛋白尿症，在坏死肠段切除手术中，输入全血 250ml，输血后病人发烧， 溶血，输血前后标本抗体筛查及交叉配血均阴性，输血前 DAT 阴性，输血后 DAT 提示病 人红细胞表面包被补体，用植物凝集素与病人红细胞进行反应，提示病人红细胞上 T 抗原 暴露。 P f(- 肿瘤 bdUarv 据报道，白血病患者可能现出 Tn 多凝集并随着病情缓解而消失。有人认为 Tn 提示白血病 前期。乳腺、结肠、膀胱恶性肿瘤组织及转移肿瘤组织中也发现过隐蔽抗原 T 及 Tn，抗原 表达强度与肿瘤的恶性程度及侵润性有关。 p?)qCom 输血 -!-!)4eQ 红细胞多凝集现象非常少见，而隐蔽抗原暴露并不少见，用特殊植物凝集素在红细胞出现 多凝集前就可发现隐蔽抗原的暴露，对可能发生隐蔽抗原暴露及多凝集红细胞的患者，可 用植物凝集素筛查有无隐蔽抗原暴露，如筛查阳性，应定量测定以指导输血，如隐蔽抗原 活性明显（3+、4+），则输洗涤红细胞以避免血管内溶血，如隐蔽抗原活性较弱 （1+、2+）可以选择含血浆的血制品，并做次侧交叉配血。 %aS3-!r0 2）冷抗体（自身及同种抗体） mzd!rBq1% 3）温自身抗体 ?U-klN 4）其他抗原抗体复合物吸附到红细胞上引起红细胞凝集（如丫啶黄-抗丫啶黄抗体复合物） F_5#+Q 5）顺式 AB 3xc:Xf 处理方法 ,#l/JW?* 高效价冷凝集素可使病人红细胞发生自发性凝集，DAT 阳性，如血清中抗体与所有成年人 红细胞均反应（如含抗-），则同样会凝集反定型红细胞。反应格局 d1.MrQ,k0J ;17KK eJ 正定型 反定型 5%8wJ 抗-A 抗-B 抗-AB A 细胞 B 细胞 u;7“vU4 病人标本 + + + + + s Cq （病人可能血型 B） -lf26DMhl 可将红细胞 37孵育，再用 37盐水洗涤后做正定型，如仍不能正确定型，可用二硫苏 木素处理红细胞后再定型。做反定型时，将病人血清或血浆及试剂红细胞均加热到 37， 混合、测定并在 37下读结果。也可将病人血清用自身红细胞吸收后再做反定型。 .KiIenM)“n 温自身抗体一般不影响 ABO 血型检查，但抗体数量很多时可能引起红细胞自凝。一般情况 下，温抗体在室温下较 37下反应弱。如怀疑温抗体影响了正定型录，可将红细胞 45 放散以除去大部分包被抗体，再进行 ABO 正定型。 0E8yXT. 2 意外 ABO 异凝集素可引起 ABO 正反定型不符，如某些 A 少、A2B 患者天然产生的抗- A1，或个别 A1 及 A1B 患者天然产生的抗-H，处理方法是用几种（A1、A2、B、O 细胞， 自身红细胞）细胞进行反定型，根据反应格局可判断抗体的特异性。 v bQ Od7= 如病人血清中含有其他同种抗体，而反定型红细胞上恰有该抗原，可能会出现正反定型不 符，此时应对病人血清或血浆做抗体鉴定，确定抗体性持后再用相应抗原阴性的红细胞做 反正型。 |L ZnTU 如病人血液中有抗某种染料的抗体，抗原抗体复合物可吸附在红细胞上引起正定型错误， 可用盐水洗涤红细胞后重复定型。 gM/9 顺式 AB 指从父母的一方同时得到 A 和 B 基因，在一条染色体上，而另一条染色体上是从 父母中另一方来的 O 基因。顺式 AB 细胞的 B 抗原较弱，类似 B3 亚型。顺式 AB 者血清 中常有弱抗-B，与所有正常 B 细胞反应，但不与顺式 AB 细胞反应。血清中 A 及 B 糖基转 移酶活性低于正常 AB 血清。 Ol“ |8 多数情况下，ABO 血型正反定型是符合的。但由于疾病改变了红细胞表面结构，或血浆蛋 白发生变化，临床上不时遇到正反定型不符合。应该根据