含量测定--兽药检测常用方法

板蓝根注射液（兽药规范，1978 年版，一部，p144） 性状：棕色澄明灭菌溶液 pH 值：5.0-6.5 含量测定： 精密量取样品 2mL，加 N/20 硫酸溶液（0.1mol/L）20mL，置沸水浴中加 热 15min，冷却，加 N/10 氢氧化钠溶液（0.1mol/L）20mL 中和后，精密加入 N/10 碘溶液（0.1mol/L）20mL 和 N/10 氢氧化钠溶液（0.1mol/L）40mL，放置 10min，加稀硫酸溶液 3mL，用 N/10 硫代硫酸钠溶液（0.1mol/L）滴定，至近 终点，加淀粉指示剂 2mL，继续滴至蓝色消失。 另取样品 2mL，加水 40mL，照上法自“精密加入 N/10 碘溶液” 起，同样操 作，作为空白，二者消耗的 N/10 硫代硫酸钠溶液的 mL 数应不少于 4mL。 安乃近注射液（兽药典 05 年版，一部，p83） 性状：为无色至微黄色的澄明液体 pH 值：5.0-7.0 含量测定：含安乃近应为标示量的 95.0%-105.0% 精密量取本品 10mL，置 100mL 量瓶中，加乙醇 80mL，再加水稀释至刻 度，摇匀，立即精密量取 10mL，置锥形瓶中，加乙醇 2mL、水 6.5mL 与甲醛 溶液 0.5mL，放置 1min，加盐酸溶液(91000)1.0mL，摇匀，用碘滴定液 (0.05mol/L)滴定（控制滴定速度为每分钟 3-5mL） ， 至溶液所显的淡黄色在 30sec 内不褪。每 1mL 碘滴定液 (0.05mol/L)相当于 17.57mg 的 C13H16N3NaO4S.H2O。 公式： (mL17.570.1014) 10(10/100) 30%0.11000 鉴别： 1、取本品适量，加乙醇制成每 1mL 中含 1.5mg 的溶液，作为供试品溶液； 另取安乃近对照品，加乙醇制成每 1mL 中含 1. 5mg 的溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法实验，吸取上述两种溶液各 2L，分别点于同一硅胶 GF254 薄层 板上，以乙醇- 苯（7.5：5）为展开剂（先饱和 30min） ，展开（直至离上边沿 1- 2cm 时止） ，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。 供试品溶液所显主斑点的颜 色和位置应与对照品的主斑点相同。 2、取本品约 20mg，加稀盐酸 1mL 溶解后，加次氯酸钠试验 2 滴，产生瞬 即消失的蓝色，加热煮沸后变成黄色。 颜色：不得比黄色 3 号标准比色液深。 鱼腥草注射液（兽药典，2005 年版，二部，p456） 性状：为无色或微黄色的澄明液体，有鱼腥味 100% pH 值：4.5-6.5 鉴别： 取本品 5mL，置分液漏斗中，加稀盐酸 1mL，用三氯甲烷提取两次，每次 5mL，分取三氯甲烷液（即下层液） ，置水浴上蒸干，残渣加氢氧化钠试液 3mL 使溶解，加二硝基苯肼试液 1mL，振摇，即生成橙红色沉淀。 甲磺酸培氟沙星注射液（兽药质量标准，2003 版，p38） 性状：淡黄色澄明液体 pH：3.5-5.5 含量测定： 对照品溶液的制备：取甲磺酸培氟沙星对照品 48mg，精密称定，置 200mL 量瓶中，加盐酸液（0.1mol/L）振荡，使溶解，用盐酸液（0.1mol/L）稀 释至刻度，摇匀。 供试品溶液的制备：精密量取本品 3mL，置 250mL 量瓶中，加盐酸液 （0.1mol/L）稀释至刻度，摇匀。 测定法：精密度取对照品溶液与供试品溶液各 2mL，置 100mL 量瓶中，用 盐酸液（0.1mol/L）稀释至刻度，摇匀。照分光光度法，在 276nm 波长处分别 测定吸收度，计算，即得。 分光光度法测定：在 276nm、318nm 波长处有最大吸收，在 332nm 波长 处有一肩峰。 鉴别： （1） 取本品 1mL，加碘化铋钾试液 5 滴，生成橙黄色沉淀。 （2） 取含量测定项下的溶液，用 TU-1901 型紫外分光光度仪照分光光度法 在 250nm-350nm 扫描，结果在 276nm 和 318nm 波长处有最大吸收， 在 332nm 波长处有一肩峰。 （3） 供试品溶液所显主斑点的颜色和位置与对照品溶液的主斑点相同。 （254nm） 颜色：不比黄色 4 号标准比色液深。 有关物质：供试品所显杂质斑点不得比对照溶液主斑点深。 永停滴定法（兽药典，2005 年版，一部，附录 52） 原理： 采用两支相同的铂电极，当在电极间加一低电压（例如 50mV）时，若电 极在溶液中极化，则在未到滴定终点时，仅有很小或无电流通过；但当到达终 点时，滴定略有过剩，使电极去极化，溶液中即有电流通过，电流计指针突然 偏转，不再回复。反之，若电极由去极化变为极化，则电流计指针从有偏转回 到零点，也不再变动。 方法： 用作重氮化法的终点指示时，调节 R1 使加于电极上得电压约为 50mV，取 供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水 40mL 与盐酸溶液 （12）15mL ，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾 2g，插入铂- 铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约 2/3 处，用亚硝酸钠滴定液（ 0.1mol/L 或 0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面， 用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转， 并不再回复，即为滴定终点。 用作水分测定第一法的终点指示时，可调节 R1 使电流计的初始电流为 5- 10A，待滴定到电流突增至 50-150A，并持续数分钟不退回，即为滴定终点。 磺胺间甲氧嘧啶钠注射液（兽药典，2005 年版，一部，p342） 性状：无色至微黄色澄明液体 pH：9.5-11.0 含量测定：含磺胺间甲氧嘧啶钠应为标示量的 95.0%-105.0% 精密量取本品适量（约相当于磺胺间甲氧嘧啶钠 0.5g） ，照永停滴定法，用 亚硝酸钠滴定液（0.1 mol/L）滴定。每 1mL 亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当 于 30.23mg 的 C11H11N4NaO3S。 公式： (mL30.230.1036) 取样量标示量0.11000 鉴别： 1、取本品 10mL，加水 30mL 稀释后，加醋酸 4mL，即析出白色沉淀，滤 过，沉淀用水洗净，在 105干燥 4h，照磺胺间甲氧嘧啶项下的鉴别反应： （1）取本品约 0.1g，加水与 0.4%氢氧化钠溶液各 3mL，振荡使溶解，滤 过，取滤液，加硫酸铜试验 1 滴，即生成黄绿色沉淀（与磺胺对甲氧嘧啶的区 别） 。 （2）本品显芳香第一胺类的鉴别反应：取供试品约 50mg，加稀盐酸 1mL，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加 0.1 mol/L 亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱 性 -萘酚试验数滴，生成 猩红色沉淀。 2、 （1）取铂丝用盐酸湿润后，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。 （2）取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试验，即生成黄色沉淀。 磺胺嘧啶钠注射液（兽药典，2005 年版，一部，p353） 性状：无色至微黄色澄明液体，遇光易变质 pH：9.5-11.0 含量测定：含磺胺嘧啶钠应为标示量的 95.0%-105.0% 100% 精密量取本品适量（约相当于磺胺嘧啶钠 0.6g） ，照永停滴定法，用亚硝酸 钠滴定液（0.1 mol/L）滴定。每 1mL 亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于 27.23mg 的 C10H9N4NaO2S。 公式： (mL27.230.1036) 取样量标示量0.11000 鉴别： 1、取本品 5mL，加水 20mL 稀释后，加醋酸 2mL，即析出白色沉淀，滤 过，沉淀用水洗净，在 105干燥 1h，照磺胺嘧啶项下的鉴别（1）项试验，显 相同的结果。 （1）取本品 0.1g，加水与 0.4%氢氧化钠溶液各 3mL，振荡使溶解，滤过， 取滤液，加硫酸铜试验 1 滴，即生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色。 复方磺胺间甲氧嘧啶注射液 （兽药国家标准，兽药地方标准上升国家标准，第二册，p40） 性状：无色至微黄色澄明液体 pH：6.0-9.0 含量测定：含磺胺间甲氧嘧啶盒甲氧苄啶均应为标示量的 90.0%-110.0% 磺胺间甲氧嘧啶：精密量取本品适量（约相当于磺胺间甲氧嘧啶 0.5g） ，照 永停滴定法，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每 1mL 的亚硝酸钠滴定液 （0.1 mol/L）相当于 28.03mg 的 C11H12N4O3S。 甲氧苄啶：精密量取本品适量（约相当于甲氧苄啶 0.2g） ，置 100mL 量瓶 中，用水稀释至刻度，摇匀；精密量取 10mL，置分液漏斗中，加 0.1 mol/L 氢 氧化钠溶液 25mL，摇匀，用氯仿提取 2 次（25mL、20mL） ，合并氯仿液置 50mL 量瓶中，用氯仿稀释至刻度，摇匀；精密量取 25mL，置分液漏斗中，精 密加稀醋酸 50mL，振摇 15min，放置使分层，取水层滤过，弃去初滤液；精密 量取续滤液 10mL，置 100mL 量瓶中，加稀醋酸 10mL，用水至刻度，照分光 光度法，在 271nm 波长处测定吸光度，按 C14H18N4O3 的吸光系数为 204 计算， 即得。 复方磺胺对甲氧嘧啶钠注射液（兽药典，2005 年版，一部，p339） 性状：无色至微黄色澄明液体 pH：9.5-11.0 含量测定：含磺胺对甲氧嘧啶钠和甲氧苄啶均应为标示量的 90.0%-110.0% 磺胺对甲氧嘧啶钠：精密量取本品适量（约相当于磺胺对甲氧嘧啶钠 0.5g） ， 照永停滴定法，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每 1m