蛋白质与非蛋白含氮化合物检验PPT课件

1、第三章蛋白质和非蛋白质含氮化合物的检测、2、蛋白质是机体生命活动的物质基础，许多疾病引起蛋白质代谢紊乱，引起血浆蛋白质种类和含量变化，其监测分析可用于疾病的诊断和病情的监测。3、第一节蛋白质和非蛋白质含氮化合物在人体中的蛋白质种类约有10万种，大部分是细胞和器官的结构蛋白质，少部分是存在于细胞内外液中的可溶性蛋白质。 可溶性蛋白功能十分广泛，在多种疾病状态下体液蛋白出现异常。4、血液的基本组成和相关概念，一、血浆蛋白、5、概念、全血：由液体的血浆和有形的血细胞组成。 是全血中的液体成分，含有多种溶质的黄色水溶液。 占全血容积约50%的血清：血液凝固，血块收缩析出的淡黄色澄清液。 (6)血浆1血

2、浆的组成2血浆中的白蛋白、球蛋白、纤维蛋白、无机盐的作用血浆蛋白(白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原): 白蛋白：主要形成血浆胶体渗透压。 球蛋白：主要参与机体免疫。 纤维蛋白：主要参与血液凝固。 小分子晶体物质(无机盐、葡萄糖、氨基酸等)无机盐：主要形成血浆晶体渗透压，从而维持体液酸碱平衡。 葡萄糖、氨基酸等：供给、营养。7、血浆蛋白是血浆固体成分中含量最高、组成复杂、功能广泛的化合物。 血浆蛋白质功能， 1 .维持将弱水溶性物质输送到直接作用于血液中的血浆中的血浆胶体渗透压的血液pH缓冲系统与血液凝固和纤维蛋白溶解有关的2 .根据需要修补进入组织的作用组织蛋白质的作用血浆固有酶血浆，抑制作用体液免

3、疫防御系统与组织蛋白酶代谢控制有关的作用的激素； (二)血浆蛋白质的分类，1功能分类法复杂，载体凝固与纤溶蛋白免疫蛋白与补体蛋白蛋白酶抑制物蛋白类激素血酶类，10，2 .电泳分类法乙酸纤维素薄膜电泳一般可以将血清蛋白质划分为白蛋白，1，2，糖蛋白5个主要区域。11、正常血清蛋白电泳动图像的增加模式图及其扫描曲线、血清蛋白电泳的正常成分、12、2、血清总蛋白和主要成分正常和异常电泳，人血浆总蛋白(total protein，TP )浓度为6080g/L临床静脉采血时止血带压迫静脉的时间超过3min 激烈运动后立即采血，TP最大上升12%。 (13 )异常电泳图像的临床意义，1 )异常血清蛋白电泳

4、图像分类2 .典型的异常血清蛋白电泳图像3浆细胞病和m蛋白， 14，异常血清蛋白电泳图像的分类及其特征， 15，2典型的异常血清蛋白电泳图像d肝硬化(非典型桥) e多发性骨髓瘤IgA型f多发性骨髓瘤IgG型，16，血浆蛋白质的性质功能与电泳区带的关系，17，(1)前白蛋白(prealbumin，PA )， 由分子量55kD的肝脏细胞合成的四亚基蛋白电泳时的转移是以Alb前半寿命2.5d和视黄醇结合蛋白组成的复合体作为组织修补材料和载体蛋白.18，2 .现在免疫透过率浊法3 .临床意义，(1)前白蛋白， PA: 200400mg/L正常PA: 100150mg/L轻度缺乏PA: 50100mg/

5、L中度缺乏PA50mg/L严重缺乏作为多采用PA的肝功能衰竭的指标的负急性时相反应蛋白质靶细胞中，TTR-RBP分解后，维甲酸被细胞吸收。 RBP被肾小球过滤，肾近端小管细胞被吸收和分解。、20、【临床意义】血浆RBP升高见于肾小球损伤血浆RBP降低：急性时相反应、肝脏疾病和蛋白质营养不良尿液RBP排泄量的增加可反映肾小管功能障碍.21、(3)白蛋白(Albumin，alb )。 半寿期18-20 d，22，最重要的血浆营养蛋白，最重要的血浆载体蛋白维持血浆胶体渗透压： 75%的血浆渗透压通过Alb维持血浆中的主要载体蛋白，有结合各种配体分子的能力维持酸碱平衡的作用被水强烈溶解每分子200个负

6、电荷输送胆红素、长链脂肪酸、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、无机离子(例如Ca2、Cu2、Ni2 )、药物(例如阿司匹林、青霉素)结合型激素和药物为非活性，当ALB含量和pH变化时，其活性发生变化电泳法只能测定其含量，以TP浓度得到其浓度用于ALB定量不方便，精度比直接定量免疫化学法免疫比浊法和放射免疫法等特异性好，灵敏度高，ALB精制容易，抗血清容易调制，适合尿液和脑脊髓液等低浓度ALB测定的血清ALB测定可以采用染料结合法。 04日： 2844 g/L 4日14岁： 3854 g/L，其后下降成人： 3552 g/L，60岁为3246 g/L行人比卧床者平均高3 g/L【医学决定水平】:

7、35gL时正常2834gL临床意义(1)血浆Alb的上升仅在严重脱水时可见Alb合成下降：2)Alb缺损3)Alb分解代谢增加4)Alb的分布异常5 )无白蛋白血症(analbuminaemia ) (3)根据Alb含量推定其配体的存在形态和作用(4) (4)1-抗胰蛋白酶(1-AT或AAT )、 394个氨基酸残基组成分子量51.8kD pI，含4.8糖的10%占1区带蛋白的90%，主要由肝细胞合成，单核细胞、肺泡巨噬细胞和上皮细胞也可以合成蛋白酶抑制剂。 有几种基因表达型，目前至少75种基因突变体主要按电泳迁移率分类最常见的是PiMM型，占人的90%以上，还有两种蛋白：Z型和s型，、【临床

8、意义】AAT缺陷和肺气肿PiZZ型， PiSZ型个体年轻时肺气肿低血浆AAT也出现在胎儿呼吸窘迫综合征AAT缺陷和肝病中：新生儿PiZZ型和PiSZ型与胆汁淤积、肝硬化和肝细胞癌的发生相关的PiZZ表型的一部分成年人也发生肝损伤.29、AAT的检查对AAT下降者进一步等电夫、30、(5)1-酸性糖蛋白(AAG )、181个氨基酸残基组成分子量约40kD属血浆中糖度最高(45% )、酸性最强的糖蛋白pI为2.74.0的典型急性时相反应蛋白主要在肝脏内发生。 AAG升高是活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一。 AAG升高：糖皮质激素的激素增加，包括内因性库欣综合征和外因性强松、地塞米松等药物治疗，可

9、以引起AAG的升高。 AAG降低：在营养不良、严重肝损伤、肾病综合征及胃肠疾病引起的蛋白质严重丢失等情况下AAG降低。雌激素还能降低AAG。 32，31酸性糖蛋白的检测，在高氯酸和磷钨酸分级沉淀AAG后，对蛋白质或糖度进行测定重新计算。 免疫扩散免疫比浊法，33，(5)结合珠蛋白(haptoglobin，Hp )，急性时相蛋白和转运蛋白在电泳中位于2区，1性质和遗传表型，34，2功能，向血管内运送游离血红蛋白的Hp-Hb复合体是可逆的、35、3临床意义、Hp浓度的降低可见于溶血性贫血、输血反应、疟疾等溶血性疾病。 Hp的参考值范围较广，需要连续观察以监测溶血是否处于进展状态。 适用于溶血性疾病

10、的组合检测项目包括血浆Hp、LD和游离Hb。 血管外溶血不改变Hp。 重症肝病患者Hp合成减少。 Hp浓度上升是一种急性时相反应蛋白，在烧伤和肾病综合征的情况下，血中Hp常常明显上升。 36，4 Hp的检测，放射免疫扩散法免疫比浊法，定量检测，HP亚型，聚丙烯酰胺凝胶电泳等电聚焦电泳，37，(6)2巨球蛋白(2-macroglobulin，)由肝细胞，单核细胞和星形细胞合成的半寿命期约5d补体CCD 主要特性是能与多种离子和分子结合，特别是能与蛋白水解酶结合抑制酶活性是主要蛋白酶抑制剂，能选择性保护某些蛋白酶活性、1性质、38、2的临床意义，而非急性时相反应蛋白。 低白蛋白血症，特别是肾病综合

11、征的情况下，2mg含量显着升高的2mg水平的降低，在重症急性胰腺炎和进行型前列腺癌治疗前，免疫比浊法，32-MG的检查方法，39，(7)铜蓝蛋白(ceruloppy ) 中所见的肝实质细胞合成是由1046个氨基酸残基组成的糖质约8%-9.5%每分子结合68个铜原子，因为含有铜，所以在Cp中存在呈蓝色95%的血清铜，其5%呈可扩散状态的血循环中的Cp被认为是铜的无毒性代谢库具有抑制膜脂质氧化的作用血浆铜的运输有铁氧化酶作用，将Fe2氧化为Fe3，调节铁的运输、利用和氧化还原反应的抗氧化作用，抑制膜脂质金属离子的过氧化作用，2功能，41，与Cp浓度减少相关的疾病： Wilson病，营养性铜缺乏和M

12、enkes病(属于遗传性急性时相反应蛋白： ) 但在营养不良、重症肝病及肾病综合征时常降低。 3临床意义、42、一种常染色体隐性遗传病由于血浆Cp减少、血浆游离铜增加、铜沉积肝脏可引起肝硬化，沉积脑基底节的豆状核可引起豆状核变性，该病因Cp对大部分患者肝功能损害减少，神经系统症状不能及时治疗， 该病进行性和致命，立即诊断应采用铜驱动的方法治疗Wilson病的诊断标准： Cp降低，血清总铜浓度降低，游离铜增加，尿铜排泄增加，作为Wilson病的辅助诊断指标，43，放射免疫扩散法散射免疫比浊法透射免疫比浊法，4. Cp检测， 44分子量约79.6kD是单链糖蛋白，糖度约6%的电泳位置主要在肝细胞合

13、成半寿期10.5d可以可逆地结合多价阳离子，在可以结合1分子TRF的2个Fe3血浆中TRF的浓度受到食物铁供给的影响，1性质、45、每个细胞表面都有TRF受体，与TRF的载体蛋白亲和性相比，trffe3将大部分的Fe3输送到骨髓合成Hb的小部分，然后输送到各组织细胞，形成铁蛋白、合成肌红蛋白和细胞色素等结合TRF的铁少，铁饱和度降低(正常参考值为3038 )，血浆再生障碍性贫血，TRF正常或降低红血球的铁利用障碍，提高铁饱和度，47，3检查，免疫比浊测定法，多采用总铁结合力(totalirri )的铁饱和度()血清铁/TIBC两者， 特别是后者对贫血诊断和鉴别诊断更好，48，(10 )位于微球

14、蛋白(2 Microglobulin，2 m，BMG，2区，单链多肽存在于各种有核细胞表面。 从细胞表面，特别是淋巴细胞和肿瘤细胞表面脱落到血浆中，从肾小球滤过，被肾近端小管再吸收和分解，49，临床意义血浆BMG升高：肾功能衰竭、炎症、肿瘤，尤其是与b淋巴细胞相关的肿瘤尿BMG排泄量增加：可反映肾小球功能障碍。 由肝细胞合成的典型急性时相反应蛋白由5个同一亚基非共价键组成为圆盘状多聚体分子量115kD的电泳分布，有时在钙离子存在下，多种细菌、真菌及原虫等体内多糖及磷酸胆碱结合，卵磷脂和核酸缺乏钙离子(9)c反应蛋白(C-reactive protein，CRP )，1性质，可引起侵入微生物对细胞的免疫调理作用和吞噬作用，识别、结