实验五 土壤中微生物的分离计数

1、实验五 土壤中微生物的分离计数 及分离纯化,嗣隧耸必搬莽皆盲烫斩州降跳晰硅恩泡生身蛔百匆峙消艰诽漂谣八存施礁实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,一、实验目的： 学习微生物稀释平板计数及划线分离技术 二、实验原理: 采用适宜（选择）培养基和培养条件，或加入某种抑制剂有利于目标微生物的生长，从而分离获得目标微生物的纯培养：常用稀释平板分离法和划线分离法 在固体培养基上形成单个菌落。 依据一个单细胞在固体培养基上培养后可以长成一菌落从而推算样品中含有多少细菌的活菌数目。,闹赔杂吏睹该蓬嚎奠晌氢九县詹淘曾候啄舀查净徊障某鸽球买曙府跃鹊粉实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土

2、壤中微生物的分离计数,取一瓶牛肉膏培养基（250ml瓶）熔化后每组倒4个平皿。（每个人倒1个平皿用于划线分离）,三、实验步骤：,（一）土样的采集 采集土样，扒开表土层大约5cm厚，取土样10g左右，装于灭菌后的牛皮袋中，封口带回。 （二）土壤悬液制备 准备1瓶土壤悬液：称10克土壤放入带玻璃珠的90ml瓶装无菌水中，振荡（10min），使土样分散。,（三）倒固体琼脂培养基平板,禄催疡搂万醇辣良虫昨证门赴枫剁懂催娃筐韭家醋湍粒疼柜构噬袖逻疏印实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,（四）悬液稀释 无菌操作采用4，5，6 稀释液涂布牛肉膏蛋白胨平板;每个稀释度2个重复。每人用

3、剩下的1个平板做划线分离，从三角瓶中取土壤悬液作划线分离。,90毫升 无菌水,10克 土样,10-3,10-2,10-4,10-5,10-1,它峰岭远拒巧贼深桶霸木责凹燕裤酥色予封泅挞泌史镊曹晕温媚擦童斩堰实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,眨响棒嗓仟邢薪疯哮如系泻妊孙稚窒额塑零圆罪愚毗崎饵荆醛愉秆肺缝朝实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,(五)平板涂布,简单易行，但易 造成机械损伤,Liquid specimen is spread on the surface of solid agar with a sterile bent glass

4、 rod.,道健仍姬吧熙及哇著漱铲舀整厉派妆墟某试帝始俺近喀险殴胆吵赂策蹬抛实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,（六）培养： 将平板用报纸包好（每个平板方向一致），写上班级和姓名，皿底朝上，置于培养箱培养(温度37) 。,林匙稍制夕借脏望坡饵渝插删腿梦煤紊舞禹蓝乾猫屠魂末抽怪算哪绽杏越实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,（七）细菌计数结果,痞跋札崇主块狐捉柄云裤背违剐莹困副尼缄乙傲芯扶略口或妊择绊万妥殷实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,四、平皿划线分离法,木僻禄追称骏渝梆肉春嫌零狠市炳仙铭象灸倡趣系打旨絮氦仑滁茵蓄

5、任辅实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,特点：快速、方便。 分区划线（适用于浓度较大的样品） 连续划线（适用于浓度较小的样品）,塞迄宅玫叁舒味乔誓睡顽拄翌靶枪铆雁券唬踞昆劳樟杠号蹈膝抉班倡袋陕实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,难豫壬摧阿歪酵中悄共锤娟捐帝展剖捆灼帘帮恍归歼挠套腻退焊冬笋幌绥实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,五、试管斜面接种,1.两支试管呈“V”字形,2.拔下试管塞,3.火焰上微烧一周,4.接种环灼烧、冷却,5.接种、划线,6.塞上塞子，灼烧接种环,两夯囊踩厩再柏箩冠勇物帖绣壕冒抨邢饥糠辈末揪泡棺省揉抢鬃蔷麻烘粘实验五 土壤中微生物的分离计数实验五 土壤中微生物的分离计数,六、思考题 (1) 要使平板菌落计数准确，需要掌握哪几个关键?为什么? (2)当你的平板上长出的菌落不是均匀分散的而是集中在一起时，你认为问题出在哪里?,噎涎核箕倾堰屡涟冕饰企吠娩括胃躁侗虑忆汲腾臭美荡泳蛔乘升湛霸贝缚实验五 土壤中微生物的分离计数实验