色谱分析.ppt

1、MOE Key Laboratory of Environmental 6-压力表；4-针形阀；5-流量计;6-压力表；9-热导检测器；10-放大器；11-温度控制器；12-记录仪；,载气系统,进样系统,色谱柱,检测系统,温控系统,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,气相色谱仪主要部件 main assembly of gas chromatograph,1. 载气系统 包括气源、净化干燥管和载气流速控制；

2、,常用的载气有：氢气、氮气、氦气； 净化干燥管：去除载气中的水、有机物等杂质（依次通过分子筛、活性炭等）； 载气流速控制：压力表、流量计、针形稳压阀，控制载气流速恒定。,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,2. 进样装置,进样装置：进样器+气化室； 气体进样器（六通阀）：推拉式和旋转式两种。 试样首先充满定量管，切入后，载气携带定量管中的试样气体进入分离柱；,MOE Key Laboratory of En

3、vironmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,液体进样器：,不同规格的专用注射器，填充柱色谱常用10L；毛细管色谱常用1L；新型仪器带有全自动液体进样器，清洗、润冲、取样、进样、换样等过程自动完成，一次可放置100多个样品。,气化室：将液体试样瞬间气化的装置。无催化作用。,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Publ

4、ic Health, HUST,3. 色谱柱（分离柱）,色谱柱：色谱仪的核心部件。 柱材质：不锈钢管或玻璃管，内径3-6毫米。长度可根据需要确定。 柱填料：粒度为60-80或80-100目的色谱固定相。 液-固色谱：固体吸附剂 液-液色谱：担体+固定液 柱制备对柱效有较大影响，填料装填太紧，柱前压力大，流速慢或将 柱堵死，反之空隙体积大，柱效低。,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Labo

5、ratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,4. 检测系统,色谱仪的眼睛， 通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成； 被色谱柱分离后的组分依次进入检测器，按其浓度或质量随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图； 检测器：广普型对所有物质均有响应； 专属型对特定物质有高灵敏响应； 常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器； 有关检测器原理、结构见第三节。,MOE Key Laboratory of Enviro

6、nmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,5. 温度控制系统,温度是色谱分离条件的重要选择参数； 气化室、分离室、检测器三部分在色谱仪操作时均需控制温度； 气化室：保证液体试样瞬间气化； 检测器：保证被分离后的组分通过时不在此冷凝；,分离室：准确控制分离需要的温度。当试样复杂时，分离室温度需要按一定程序控制温度变化，各组分在最佳温度下分离；,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Envir

7、onmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,定量分析实例,MOE Key Laboratory

8、 of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of

9、 Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institu

10、te of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,气相色谱应用实例,工业化学品 环境 生命科学 石化 食品，调味品，香料,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,高效液相色谱仪的系统组成、工作原理,高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动

11、相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。,高效液相色谱,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environment

12、al & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,1高压输液系统,由于高效液相色谱所用固定相颗粒极细，因此对流动相阻力很大，为使流动相较快流动，必须配备有高压输液系统。它是高效液相色谱仪最重要的部件，一般由储液罐、高压输液泵、过滤器、压力脉动阻力器等组成，其中高压输液泵是核心部件。对于一个好的高压输液泵应符合密封性好，输出流量恒定，压力平稳，可调范围宽，便于迅速更换溶剂及耐腐蚀等要求。常用的输液泵分为恒流泵和恒压泵两种。恒流泵特点是在一定操作条件下，输出流量保持恒定而与色谱柱引起阻力变

13、化无关；恒压泵是指能保持输出压力恒定，但其流量则随色谱系统阻力而变化，故保留时间的重现性差，它们各有优缺点。目前恒流泵正逐渐取代恒压泵。恒流泵又称机械泵，它又分机械注射泵和机械往复泵两种，应用最多的是机械往复泵。,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicin

14、e, School of Public Health, HUST,2进样系统,高效液相色谱柱比气相色谱柱短得多（约530cm），所以柱外展宽（又称柱外效应）较突出。柱外展宽是指色谱柱外的因素所引起的峰展宽，主要包括进样系统、连接管道及检测器中存在死体积。柱外展宽可分柱前和柱后展宽。进样系统是引起往前展宽的主要因素，因此高效液相色谱法中对进样技术要求较严。,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key

15、Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,3 分离系统色谱柱,色谱柱是液相色谱的心脏部件，它包括柱管与固定相两部分。柱管材料有玻璃、不锈钢、铝、铜及内衬光滑的聚合材料的其他金属。玻璃管耐压有限，故金属管用得较多。一般色谱柱长530cm，内径为45mm，凝胶色谱柱内径312mm，制备往内径较大，可达25mm 以上。一般在分离前备有一个前置柱，前置柱内填充物和分离柱完全一样，这样可使淋洗溶剂由于经过前置柱为其中的固定相饱和，使它在流

16、过分离柱时不再洗脱其中固定相，保证分离技的性能不受影响。 柱子装填得好坏对柱效影响很大。对于细粒度的填料（20m）一般采用匀浆填充法装柱，先将填料调成匀浆，然后在高压泵作用下，快速将其压入装有洗脱液的色谱柱内，经冲洗后，即可备用。,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,4检测系统,在液相色谱中，有两种基本类型的检测器。一类是溶质性检测器，它仅对被分离组分的物理或化学特性有响应，属于这类检测器的有紫外、荧光、电

17、化学检测器等。另一类是总体检测器，它对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应，属于这类检测器的有示差折光，电导检测器等。现将常用的检测器介绍如下:,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,（l） 紫外检测器 （2）荧光检测器 （3）示差折光率检测器 几乎所有物质都有各自不同的折射率，因此差示折光检测器是一种通用型检测器。灵敏度可达10-7gcm-3。主要缺点是对温度变化敏感，并且不能用于梯度淋洗。 （4）电导检测

18、器 （5）附属系统 它包括脱气、梯度淋洗、恒温、自动进样、馏分收集以及数据处理等装置。其中梯度淋洗装置是高压液相色谱仪中尤为重要的附属装置 .,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,MO

19、E Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,固定相 高效液相色谱固定相以承受高压能力来分类，可分为刚性固体和硬胶两大类。刚性固体以二氧化硅为基质，可承受7.O1081.O109Pa的高压，可制成直径、形状、孔隙度不同的颗粒。如果在二氧化硅表面键合各种官能团，就是键合固定相，可扩大应用范围，它是目前最广泛使用的一种固定相。硬胶主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中，它由聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成。可承受压力上限为3.5108Pa。固定相按孔隙深度分类，可分为表面多孔型和全多孔型固定相两类。,MOE Key Laboratory of Environmental & Health, Institute of Environmental Medicine, School of Public Health, HUST,流动相 由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力，并参与固定相对组分的竞争。因此，正确选择流动相直接影响组分的分离度。对流动相溶剂的要求是： （1）溶剂对于待测样品，必须具有合适的极性和良好的选择性。 （2）溶剂要与检