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文档简介
1、固定化酶,吴海强,深圳大学,1,1,概述,生物催化剂的示意作用模式,固定化酶的发展历史,2,什么是固定化酶?水溶性酶,水不溶性载体酶载体,水不溶性酶(固定化酶),固定化技术,3,酶固定化技术和固定化酶,4,固定化酶的优点和缺点可以重复使用,并可以放入塔中进行连续反应。优点:纯化简单,产物易分离,应用范围广,固定化过程中酶容易失活:初始投资成本高,大分子底物难、5、第二,固定化酶的性质及其影响因素,(1)固定化酶的性质,(2)固定化酶性质变化的原因,(3)评价固定化酶的指标,(4)测定固定化酶活性的方法,(1)固定化酶的性质,(1)固定化对酶活性的影响:酶活性降低,反应速度降低。原因:酶结构的变
2、化受到空间位阻,7,2固定化对酶稳定性的影响(1)操作稳定性提高;(2)贮藏稳定性远高于游离酶。(3)热稳定性方面,大部分增加,但部分减少;(4)提高分解酶的稳定性;(5)对变性剂的耐受性增加。8。提高固定化酶稳定性的原因:a .固定化后,酶分子与载体在多个点上连接。抑制自身降解,提高酶的稳定性。酶活性释放缓慢。最适酸碱度的变化及酸碱度对酶活性的影响:(1)改变酶的空间构象(2)影响酶催化基团的解离(3)影响酶结合基团的解离(4)改变底物的解离状态,酶不能与底物结合或结合后产生产物。10、载体对固定化酶系统酸碱度的影响,载体带负电,酸碱度向碱性方向移动。微环境是指固定化酶附近的局部环境,而主要溶液称为宏观环境。载体带正电,酸碱度向酸性移动。11、产物性质对固定化酶系统酸碱度的影响当催化反应产物呈酸性时,固定化酶的酸碱度高于游离酶的酸碱度;相反,它是低的,并且在12和4的最适温度变化通常与游离酶的相似,但是一些会有明显的变化。5.底物特异性的变化作用于低分子底物的酶特异性没有明显变化,同时作用于低分子底物和高分子低分子物质的酶特异性经常发生变化。13,6米氏常数Km,Km值随载体性质的变化而变化,载体和底物具有相同的电荷,静电排斥,固定化酶降低
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