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文档简介
1、丙二酸对琥珀酸的竞争性抑制,1,PPT学习交流,实验目的,实验原理,实验材料与仪器,实验步骤,实验结果记录,注意事项,实验讨论,2,PPT学习交流,实验目的:,1、学习和掌握竞争性抑制作用的特点。 2、观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。,PPT模板下载: 行业PPT模板: 节日PPT模板: PPT素材下载: PPT背景图片: PPT图表下载: 优秀PPT下载: PPT教程: Word教程: Excel教程: 资料下载: PPT课件下载: 范文下载: 试卷下载: 教案下载:,3,PPT学习交流,实验原理,化学结构与酶作用的底物结构相似的物质,可与底物竞争结合酶的活性中心,使酶的活性降低甚
2、至丧失,这种抑制作用称为竞争性抑制作用。,4,PPT学习交流,琥珀酸脱氢酶: 是机体内参与三羧酸循环的一种重要的脱氢酶,其辅基为FAD,如心肌中的琥珀酸脱氢酶在缺氧的情况下,可使琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢可将蓝色的甲烯蓝还原成无色的甲烯白。这样,便可以显示琥珀酸脱氢酶的作用,5,PPT学习交流,实验材料与仪器:,器材 : 大白鼠、 手术剪、滴管 镊子、纱布、 漏斗、量筒、 烧杯、研钵 刻度吸量管 试管及试管架、 恒温水箱、,试剂: 0.2mol/L琥珀酸溶液、 0.02mol/L琥珀酸溶液 0.2mol/L丙二酸溶液 0.02mol/L丙二酸溶液、 1/15mol/LPH=7.4磷酸盐缓
3、冲液、 0.02%甲烯蓝,6,PPT学习交流,1、酶提取液的制备:取大白鼠的骨骼肌,用冷水洗3次,加入1/15mol/L磷酸缓冲液pH 在7.4。在研钵中碾碎,然后用纱布过滤,用干净的烧杯收集过滤的备用。,实验步骤:,7,PPT学习交流,2、取试管6支,编号,在按图步骤操作,试管6:酶提取液在100 水浴中保温,8,PPT学习交流,3.各管溶液立即混均匀,沿试管壁加入液 体石蜡,约0.5cm,各管置于37的水 浴中保温,切勿摇动试管,随时 观察比较各试管颜色的变化, 记录褪色时间。,9,PPT学习交流,实验结果记录:,10,PPT学习交流,【注意事项】 :,1、酶提取液的制备应操作迅速,以防止
4、酶活性降低。 2、加入液体石蜡的作用是隔绝空气,以避免空气中的氧气对实验造成影响,因此加石蜡时试管壁要倾斜,注意不要产生气泡。 3、37水浴保温过程中,不能摇动试管,避免空气中的氧气接触反应溶液,使得还原型的甲烯白重新氧化成蓝色。 4.、37水浴保温过程中,要注意随时观察各试管的褪色情况。 5、实验结果结束后,一定要洗干净试管内的液体石蜡。,11,PPT学习交流,实验讨论:,1、酶提取液中有琥珀酸脱氢酶活性,表1所示,在试管1中没有抑制剂,但琥珀酸依然能脱氢,使得甲烯蓝反应得甲烯白。 2、各管的褪色有明显的时间差别,褪色时间随I/S逐渐增大,而增大。 3、丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型是竞争性抑制,其特点:最大反应速率Vmax不变,米氏常数Km增大,竞争性抑制可以通过增大底物浓度来减轻抑制程度。 4、本实验中5号、6号试管的作用是做对照,5号试管和1号试管做对照,说明酶提取液中有琥珀酸脱氢酶的
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