生物专题细胞工程之动物细胞工程题库详解

生物专题细胞工程之动物细胞工程题库详解一、选择题

1.动物细胞培养的理论基础是（）A.细胞增殖B.细胞分化C.细胞全能性D.细胞衰老答案：A解析：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其理论基础是细胞增殖。细胞分化是指细胞在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程；细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能；细胞衰老是细胞的生理状态和化学反应发生复杂变化的过程，最终表现为细胞的形态、结构和功能发生变化。所以答案选A。

2.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（）A.培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体B.培养中的人B淋巴细胞能够无限地增殖C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞答案：D解析：单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的，效应T细胞不能产生单克隆抗体，A错误；B淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖，B错误；人的成熟红细胞没有细胞核，不能进行细胞分裂，经过培养不能形成细胞株，C错误；用胰蛋白酶处理肝组织可使细胞分散成单个肝细胞，D正确。

3.动物细胞培养过程的顺序是（）①原代培养②传代培养③用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液A.①②③B.①③②C.②①③D.③①②答案：D解析：动物细胞培养时，首先要用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液，然后进行原代培养，当细胞贴满瓶壁后，需要用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离下来，进行传代培养。所以顺序是③①②，答案选D。

4.在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是（）A.使动物组织分散为单个细胞B.去掉细胞壁，使其成为原生质体C.促进蛋白质水解为多肽D.去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合答案：A解析：胰蛋白酶能将动物组织分散成单个细胞，这样有利于细胞与培养液充分接触，便于细胞的生长和增殖，A正确；动物细胞没有细胞壁，B错误；促进蛋白质水解为多肽不是使用胰蛋白酶处理动物组织的目的，C错误；动物细胞培养不需要去掉细胞膜暴露出原生质体，D错误。

5.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于（）A.培养基不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株答案：A解析：动物细胞培养的培养基是液体培养基，植物组织培养的培养基是固体培养基，这是两者的重要区别之一，A正确；动物细胞培养和植物组织培养都需要在无菌条件下进行，B错误；动物细胞和植物细胞都可以传代培养，C错误；植物细胞也可以通过细胞培养获得大量细胞产物等，不只是培养成植株，D错误。

6.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（）A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细胞都会衰老死亡答案：D解析：用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织，因为这些细胞的分裂能力较强，A正确；将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞，便于细胞培养，B正确；在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液，防止细胞贴壁生长出现接触抑制现象，C正确；动物细胞培养到50代左右时，部分细胞的细胞核型可能会发生改变，获得不死性，成为癌细胞，D错误。

7.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是（）①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A.①②③④B.①③⑤C.②④D.①③答案：A解析：特定培养基筛选出的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生专一性抗体。B淋巴细胞、小鼠骨髓瘤细胞、B淋巴细胞自身融合细胞、小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞都不能在该特定培养基上存活、增殖，只有杂交瘤细胞能，所以答案选A。

8.单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处在于（）A.单克隆抗体能够制成"生物导弹"B.单克隆抗体可以在体外制备C.单克隆抗体的特异性强、灵敏度高，产量也大大高于血清抗体D.单克隆抗体的制备过程简单答案：C解析：单克隆抗体的特异性强、灵敏度高，产量也大大高于血清抗体，这是单克隆抗体相比血清抗体的优越之处，C正确；制成"生物导弹"是单克隆抗体的应用，不是与血清抗体相比的优越之处，A错误；单克隆抗体可以在体外制备，但这不是其最主要的优越之处，B错误；单克隆抗体的制备过程并不简单，D错误。

9.动物细胞融合技术最重要的用途是（）A.克服远缘杂交不亲和性B.制备单克隆抗体C.培育新品种D.生产杂种细胞答案：B解析：动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体，B正确；克服远缘杂交不亲和性是植物体细胞杂交技术的重要意义，A错误；培育新品种不是动物细胞融合技术最重要的用途，C错误；生产杂种细胞是动物细胞融合的结果，不是最重要的用途，D错误。

10.动物细胞融合的原理是（）A.动物细胞的细胞膜无识别异物的能力B.动物细胞容易被病毒感染C.细胞膜具有一定的流动性D.动物细胞的细胞膜薄，易被击穿答案：C解析：动物细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性，C正确；动物细胞的细胞膜有识别异物的能力，A错误；动物细胞容易被病毒感染不是动物细胞融合的原理，B错误；动物细胞的细胞膜薄，易被击穿不是动物细胞融合的原理，D错误。

二、填空题

1.动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行________处理，通常还要在培养液中添加一定量的________，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止________对细胞自身造成危害。（2）营养：合成培养基成分包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入________等天然成分。（3）温度和pH：适宜温度为________℃；pH为________。（4）气体环境：主要有________和________，其中________是细胞代谢所必需的，________的主要作用是维持培养液的pH。答案：（1）灭菌；抗生素；代谢产物积累（2）血清、血浆（3）36.5±0.5；7.27.4（4）O₂；CO₂；O₂；CO₂解析：（1）动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，对培养液和所有培养用具进行灭菌处理，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。定期更换培养液，能防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。（2）合成培养基成分包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常需加入血清、血浆等天然成分，以满足细胞生长的需要。（3）动物细胞培养适宜温度为36.5±0.5℃，pH为7.27.4。（4）气体环境主要有O₂和CO₂，其中O₂是细胞代谢所必需的，CO₂的主要作用是维持培养液的pH。

2.单克隆抗体制备过程：（1）免疫动物：向小鼠体内注射特定的________，使小鼠产生________。（2）细胞融合：将小鼠的________细胞与________细胞在________诱导下融合，形成________细胞。（3）筛选：用特定的________培养基筛选出________细胞。（4）克隆化培养和抗体检测：对筛选出的细胞进行________培养和________检测，以获得足够数量的能产生所需抗体的细胞。（5）体内培养或体外培养：将获得的细胞在________内或________中进行培养，以获取大量的单克隆抗体。答案：（1）抗原；免疫B淋巴细胞（2）骨髓瘤；免疫B淋巴；聚乙二醇（PEG）等；杂交瘤（3）选择；杂交瘤（4）克隆化；抗体（5）小鼠腹腔；体外培养液解析：（1）免疫动物时，向小鼠体内注射特定的抗原，使小鼠产生免疫B淋巴细胞。（2）细胞融合是将小鼠的骨髓瘤细胞与免疫B淋巴细胞在聚乙二醇（PEG）等诱导下融合，形成杂交瘤细胞。（3）用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该培养基中只有杂交瘤细胞能生长。（4）对筛选出的细胞进行克隆化培养和抗体检测，以获得足够数量的能产生所需抗体的细胞。（5）将获得的细胞在小鼠腹腔内或体外培养液中进行培养，以获取大量的单克隆抗体。

3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：|比较项目|动物细胞融合|植物体细胞杂交||||||原理|细胞膜的流动性、细胞增殖|细胞膜的流动性、细胞全能性||融合前处理|使细胞分散开，如用胰蛋白酶处理|去除细胞壁，如用纤维素酶和果胶酶处理||诱导方法|物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇等）、生物法（灭活的病毒）|物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇等）||结果|形成杂交细胞|形成杂种植株||用途|制备单克隆抗体等|培育新品种等|答案：|比较项目|动物细胞融合|植物体细胞杂交||||||原理|细胞膜的流动性、细胞增殖|细胞膜的流动性、细胞全能性||融合前处理|使细胞分散开，如用胰蛋白酶处理|去除细胞壁，如用纤维素酶和果胶酶处理||诱导方法|物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇等）、生物法（灭活的病毒）|物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇等）||结果|形成杂交细胞|形成杂种植株||用途|制备单克隆抗体等|培育新品种等|解析：动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性和细胞增殖，融合前要使细胞分散开，常用胰蛋白酶处理；诱导方法有物理法、化学法和生物法（灭活的病毒），结果是形成杂交细胞，主要用途是制备单克隆抗体等。植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞全能性，融合前要去除细胞壁，常用纤维素酶和果胶酶处理；诱导方法主要有物理法和化学法，结果是形成杂种植株，用途是培育新品种等。

三、简答题

1.简述动物细胞培养的过程。答案：动物细胞培养过程如下：（1）取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。因为胚胎或幼龄动物的器官、组织细胞分裂能力强。（2）用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织，使其分散成单个细胞。这样有利于细胞与培养液充分接触，便于细胞的生长和增殖。（3）将分散的细胞制成细胞悬液，转入培养瓶中进行原代培养。原代培养是指动物组织消化后的初次培养。（4）当细胞贴满瓶壁后，需要重新用胰蛋白酶等处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，制成细胞悬液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，这称为传代培养。在传代培养过程中，细胞一般能传至1050代左右，部分细胞的细胞核型可能会发生改变，获得不死性，成为癌细胞。解析：动物细胞培养是从动物机体中取出相关组织，经过处理分散成单个细胞，然后在适宜条件下培养的过程。取合适的组织是基础，处理成单个细胞是关键，原代培养和传代培养是细胞生长增殖的过程，了解这些步骤有助于掌握动物细胞培养技术。

2.单克隆抗体的制备过程中，如何筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞？答案：在单克隆抗体的制备过程中，筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞采用特定的选择培养基。首先，将小鼠的骨髓瘤细胞与免疫B淋巴细胞在聚乙二醇（PEG）等诱导剂的作用下融合，会形成多种细胞，包括B淋巴细胞自身融合细胞、小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞以及杂交瘤细胞。然后，利用特定的选择培养基进行筛选。这种培养基的特点是只有杂交瘤细胞能够生长。因为杂交瘤细胞继承了骨髓瘤细胞无限增殖的特性和免疫B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。筛选出杂交瘤细胞后，还需要进行克隆化培养和抗体检测。通过克隆化培养获得足够数量的细胞，再进行抗体检测，最终筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。例如，可以采用抗原抗体杂交的方法，将细胞培养上清液与特定抗原混合，如果出现特异性结合反应，说明该细胞能产生所需抗体。解析：筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞是单克隆抗体制备的关键步骤。利用选择培养基淘汰其他细胞，保留杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体检测进一步确定所需细胞，这样才能获得大量能产生特定抗体的细胞，用于生产单克隆抗体。

3.动物细胞融合技术有哪些应用？答案：动物细胞融合技术有以下重要应用：（1）制备单克隆抗体：这是动物细胞融合技术最重要的用途。通过将骨髓瘤细胞与免疫B淋巴细胞融合，获得杂交瘤细胞，经过筛选、克隆化培养和抗体检测等过程，生产出大量特异性强、灵敏度高的单克隆抗体。单克隆抗体在疾病诊断、治疗和预防等方面有广泛应用，如作为诊断试剂、用于肿瘤的靶向治疗等。（2）培育新品种：动物细胞融合可以使不同种动物的细胞融合在一起，有可能培育出具有优良性状的新品种。例如，将不同品种动物的体细胞融合，有可能获得具有双亲优良性状的杂种动物。（3）研究细胞遗传、细胞免疫等：利用动物细胞融合技术可以研究细胞之间的相互作用、基因定位等。例如，将含有不同标记染色体的细胞融合，通过观察杂种细胞中染色体的行为，可以进行基因定位研究。（4）生产生物制品：动物细胞融合后的杂种细胞可以大量生产一些生物制品，如某些蛋白质类药物等。通过对杂种细胞进行培养和诱导表达，可以获得所需的生物制品。解析：动物细胞融合技术在多个领域发挥着重要作用。制备单克隆抗体是其最突出的应用，为医学诊断和治疗提供了有力工具；培育新品种为动物育种提供了新途径；在细胞遗传和免疫研究方面有独特价值；生产生物制品也满足了医药等行业的需