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DB12DB12/T521—2014牛结核病噬菌体检测技术规范ThetechnicalstandardfordetectionofbovinetuberculosisbyMycobacteriophage2014-04-22发布2014-07-20实施天津市质量技术监督局发布1在人工培养基上，细菌在噬菌体的作用下裂解形成的f有盖离心管（50mL）g无菌试管（10mL）j平皿（90mm）2试管中。取2mL牛口鼻分泌物（或2mL保存液中的牛口鼻分泌物棉拭子样品）于50mL有盖离心管中，处理6.3.1阴性对照：吸取1mL灭菌完全培养基于10mL无菌试管中，为“浴锅中孵育2h；6.3.5上述反应管中分别加100μL杀病毒剂，充分混匀，置于室温10min；6.3.6上述反应管中分别加8mL完全培养基，混匀；6.3.7上述反应管中分别加1mL指示细胞溶液，混匀；6.3.8快速将反应管中所有的内容物分别倒入相应的空的90mm的无菌平皿中；立即加8mL冷却至互融合成透明状判定为阳性；平皿中无噬菌斑出现或噬菌斑数量＜20个判8.4检测结束后，实验用品和废弃物，应进行高温高3培养基和试剂配制方法

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