临床医学检验技术课件

临床医学检验技术11临床医学检验技术临床医学检验技术12前言

“工欲善其事，必先利其器”

临床医学检验技术13第一章概述技术和仪器在检验医学中的重要作用

项目、方法和仪器的评估指标

检验技术基本知识

临床医学检验技术14第一节技术和仪器在检验医学中的重要作用技术和仪器的重要作用：技术和仪器是实验室工作人员的主要工具技术和方法

仪器实验室工作者临床检验诊断临床医学检验技术15临床医学检验技术16选择合适的技术和项目是实验室的重要工作：疾病诊断项目检测方法选择:WHY?临床医学检验技术17HOW?疾病项目方法选择原则:项目选择:方法选择:实用性与可靠性①利用项目评估指标，了解项目的特性，优、缺点；②参考国内外项目应用资料，特别注意权威学术团体制订的指南、准则，如有国家标准更好；③现有的仪器是否适合该项测试；④临床需要。临床医学检验技术18选择合适的仪器是确保实验室水平和质量的保证：仪器类型选择和型号的选择

首先要收集多方面资料，了解各种相似机器的特性和原理、应用范围，仪器的敏感性、特异性、重复性，运用速度应和实际工作相适应(保留一定的潜在能力，如比当前工作能力多20％)；

其次从公司和其他用户处了解故障率，维修工程师的水平和最短维修期，机器价格，培训情况，试剂是否开放等临床医学检验技术19了解实验室和现代医学的最新发展动态，使实验室始终处于先进水平实验医学的发展:：

l．从技术角度看实验医学发展的基本趋势是能测定的物质越来越多，由宏观到微观，由宏量到微量，更准确、更本质地反映生命科学的规律。２．从仪器角度看随着生物物理技术、光电信号转化技术的发展，特别是计算机的运用，大量新型仪器进入了实验室，检测自动化、微量化、多样化。临床医学检验技术110

自动化的优点:①提高工作效率20％～50％②减少人为的差错③改进方法④降低试剂用量、成本⑤加快检测周期(TAT)⑥试验方法标准化、规范化⑦可以使用一些手工方法无法做到的精密试验，如连续监测法等临床医学检验技术111第二节项目、方法和仪器的评估指标评估指标分三个层次：评价项目的指标确定项目后选择具体方法和仪器的指标常规工作的质量控制指标临床医学检验技术112一、项目的评估指标:

评估对象：临床应用价值，即检验项目对临床某种疾病或临床异常情况的诊断、病程监测、疗效评估、预后判断的能力。1．金标准2．敏感性(sensitivity，灵敏度)3．特异性(specificity)4．预测值(predictivevalue，PV)5．准确度(accuracy6．受试者工作曲线(receiveroperatingcharacteristiccurve，ROC)临床医学检验技术113金标准与诊断试验定义:

金标准：通过活检、尸检、外科手术、随访等所作出的决定性诊断，公认最可靠，即确诊试验。诊断试验：指一般临床实验检查方法，费用低、操作简单，对病人无损害，快速等优点。

临床医学检验技术114诊断试验和金标准的应用：诊断试验金标准临床上诊断：提供病人患病或不患病的可能性金标准诊断试验诊断结果为患者和非患者诊断试验的性能评价：诊断结果为患者和非患者测得其阴性或阳性结果拿不准进行各种分析临床医学检验技术115临床医学检验技术116临床医学检验技术117ROC的作用:

1．用于确定医学决定值

2．比较项目的优劣，ROC的右侧面积越大，该标志诊断价值越大临床医学检验技术118二、方法、仪器和试剂的评估指标评估对象：方法（仪器和试剂）本身稳定性和可靠性1．精密度2．准确度3．分析灵敏度(最低检测限)4．分析范围5．分析干扰(方法的特异性)6．受试者工作曲线和医学决定值7．性价比临床医学检验技术1191．精密度定义：通过重复性试验计算测定结果间的一致性，强调的是随机误差1、按正态分布的计量资料的不精密度通常用标准差(s)和变异系数(CV％)来表示2、计数资料的精密度往往用观察符合率和卡帕(Kappa)值来表示表示：临床医学检验技术1202(ad－bc)(a＋b)(b＋d)＋(a＋c)(c＋b)Kappa指数＝

真阳性＋真阴性符合率＝————————————————×100%

真阳性＋假阳性＋真阴性＋假阴性计量资料计数资料临床医学检验技术121批内是将评价样品随机插入患者标本中被检测，在一批内连做20次；收集试验数据，计算均值、标准差和变异系数。批间是每天做一次评价样品，累积20次结果。收集试验数据，计算均值、标准差和变异系数。测定：临床医学检验技术1222．准确度定义：待测物的测定值与其真值的一致性程度，强调的也是误差不准确度＝总误差＝分析过程的随机误差＋分析过程的系统误差

表示（实际工作中）：不精密度不正确度临床医学检验技术123测定：

对一分析物重复多次测定，所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏倚即为测定的不正确度．回收试验、干扰试验、线性范围试验系统误差：总误差：对比试验临床医学检验技术1243．分析灵敏度(最低检测限)灵敏度（sensitivity，S）定义：是指检测信号变化量（Δy）与被测物变化量（Δx）的比值，又称为敏感度检测限（DL、D或LOD）定义：在给定的置信水平上能够检出被测物的最小浓度或最小质量，又称检出限、检测低限、检出低限。临床医学检验技术1254．分析范围分析测量范围(AMR)，分析方法能直接测定样本中的待测物质而不需稀释或浓缩或其他的预处理临床可报告范围(CRR)，样本可通过稀释或浓缩或其他的预处理，以扩展其准确测定的范围5．分析干扰(方法的特异性)干扰试验临床医学检验技术126干扰试验实例原理：

将可能引起干扰的物质配成一系列浓度的溶液加到病人样品中成为若干个干扰样本，在原样品中加入相同量的无干扰物质的溶剂作为基础样品，均用候选方法测定，各干扰样本与基础样品结果之差表示一定浓度下该干扰物质产生的干扰值（偏差）。

临床医学检验技术127试剂：

1.样品收集无肝炎病毒污染、无溶血、无脂浊的人（或动物）血清，采用候选方法测定其浓度，并用生理盐水稀释至3.0mmol/L2.尿酸校准液

浓度为：4.5mmol/L和9.0mmol/L。3.其他试剂

GOD-POD法测定血糖试剂

临床医学检验技术128操作步骤：1.样本制备：

原样品：混合血清

基础样品：混合血清0.9ml+蒸馏水0.1ml

干扰样本1：混合血清0.9ml+4.5mmol/L尿酸0.1ml

干扰样本2：混合血清0.9ml+9.0mmol/L尿酸0.1ml2.血糖浓度测定对以上各样品按GOD-POD法双份测定，结果取平均吸光度值、平均浓度值。临床医学检验技术129计算：临床医学检验技术130干扰试验习题

某血糖测定样本浓度为6.5mmol/L，通过干扰试验求得每mmol/L的尿酸的平均干扰值为-0.7，求当尿酸浓度为0.4mmol/L时，该法测得的恒定系统误差值以及血糖标本的实际浓度。临床医学检验技术131回收试验目的：

用来考察候选方法对加入到常规分析样品中的纯分析物含量进行准确测定的能力，其目的是检测候选方法的比例系统误差（PE），以恒量该方法的准确度。意义：测得的比例系统误差（PE）值随被测物浓度的增加而增加。实验内容临床医学检验技术132原理：

将浓度已知的含被测物的各校准液加入至病人样品（原样品）中成为一系列分析样品（回收样品），在原样品中加入相同体积的无被测物的溶剂作为基础样品，用候选方法对这些样品进行同步测定，计算回收率、平均回收率，考察候选方法的比例系统误差。一般项目的平均回收率应在95％～105％之间。临床医学检验技术133试剂：

1.样品收集无肝炎病毒污染、无溶血、无脂浊的人（或动物）血清，采用候选方法测定其浓度，并用生理盐水稀释至3.0mmol/L。2.葡萄糖校准液浓度分别为：36.0mmol/L、70.0mmol/L。3.其他试剂GOD-POD法测定血糖试剂临床医学检验技术134操作步骤：1.样品制备：

原样品：混合血清

基础样品：混合血清0.9ml+蒸馏水0.1ml

回收样品1：混合血清0.9ml+36.0mmol/L葡萄糖校准液0.1ml

回收样品2：混合血清0.9ml+70.0mmol/L葡萄糖校准液0.1ml2.血糖浓度测定按照GOD-POD法对以上各样品进行双份检测，结果取平均吸光度值、平均浓度值。临床医学检验技术135计算：1.计算公式：临床医学检验技术136

如果某回收率为98％，原样本的测定值为10.0mmol/L，求该法的比例系统误差，比例系统误差值，用该法测得原样本的准确值。

回收试验习题临床医学检验技术1376．受试者工作曲线和医学决定值医学决定水平，就是临床按照不同病情给予不同处理的指标阈值医学决定值,根据不同的目的，研究健康(或称非病理的)与病理的分界水平受试者工作曲线临床医学检验技术138三、常规工作中的质量监控指标质量监控的目的：

质量控制方法的核心：由检出随机误差和系统误差的质量控制规则组成

为了监测和评估实验室的工作质量，排除检测过程中导致不满意的原因质量监控的内容：

分析前、分析中、分析后质量控制临床医学检验技术139

图全面质量控制实验保证体系分析后质量评估分析中质量控制

病人准备检查病人申请检验标本采集标本运送标本处理人员素质工作环境实验用水实验室管理仪器质量保证方法选择与评价试剂选择与评价建立操作规程室内质控及分析标本分析测定临床医师反馈信息室内复查保留标本随时复查运送报告病人投诉室间质评登记填发报告分析前质量保证分析中质量控制临床医学检验技术1401．室内质控指标(Internalqualifycontrol，IQC)

由实验室工作人员采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室工作的可靠性程度，监测和控制本室常规工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性。首先，选择好质控物其次，室内质控要求每天至少检测一次质控物，然后把结果绘制在质控图上。最后,根据质控规则判断分析结果在控或失控Ｌevey-Ｊennings质控Westgard多规则质控法临床医学检验技术141Ｌevey-Ｊennings质控d均数+2S-2S+3S-3S正常分布Ｌevey-Ｊennings质控图临床医学检验技术142趋势性变化漂移精度变化-S质控图的常见的几种常见的失控表现-3S+3S+2S-2Sd均数临床医学检验技术143Westgard多规则质控①12S警告规则：当同一批两个水平的质控血清中的任意1份测定值超出±2S范围，为“警报”信号。②13S失控规则：当同一批两个水平的质控血清中的任意1份测定值超过±3S界限，为“失控”。提示存在随机误差。③22S失控规则：同一批两个水平的质控品结果同方向超出±2S限值，或同一质控品连续两次质控结果超出±2S限值为“失控”，多由系统误差造成。④R4S失控规则：同一批中两个水平的质控结果之差超出4S范围，其中一个超出＋2S限值，另一个超出－2S限值，为“失控”，属随机误差过大。⑤41S规则：当1份质控血清的测定结果连续4次同方向超过＋1S或－1S界限，或同一批两个水平的质控血清的测定结果同时连续2次同方向超过＋1S或－1S界限时，为“失控”，一般由系统误差所至。⑥10规则：当1份质控血清测定结果连续10次偏于均值一侧时，或同一批两个水平的质控血清的测定结果同时连续5次偏于一侧时，为“失控”，是系统误差所至。临床医学检验技术144临床医学检验技术1453．注意临床反馈意见2．室间质控(exmnalqualifyassessment，EQA)

由第三方机构，采取一定的方法，连续、客观地评价实验室的结果，发现实验室本身不易发现的不准确性，了解各实验室之间结果的差异，帮助其校正，使其结果具有可比性。PT方案VIS评分法临床医学检验技术146第三节检验技术基本知识化学物质的基本要求标准品实验室基本用品临床医学检验技术147一、化学物质的基本要求1、纯水天然水自来水实验用纯水经简单的物理、化学方法处理，除去悬浮物质和部分无机盐经蒸馏、离子交换、活性炭吸附、超滤等处理，除去杂质(悬浮物,胶体物质,溶解物质)临床医学检验技术148表2-1美国NCCLS等级纯水的规定及用途(1985)级别Ⅰ级Ⅱ级Ⅲ级pH未定未定5.0～8.0电阻率(MΩ·cm,25℃,最大量)102.01.0硅(mgSiO2/L,最大量)0.050.11.0微生物含量（每毫升最大菌落数）10103未定硅（mgSiO2/L，最大量）0.050.11.0微粒0.2µm微孔膜过滤未定未定有机物质活性碳过滤未定未定用途原子吸收，火焰光度，荧光，电解质，酶，高效层析，电泳，参比液，缓冲液。一般实验室检验，器皿冲洗。器皿洗涤，要求不高的定性试验。临床医学检验技术1492．试剂的纯度要求临床医学检验技术150

1.一级优级纯（G.R）又称保证试剂，绿色标签，该级别纯度最高、杂质含量最低，适用于科研和配制校准溶液

.

2.二级分析纯（A.R）又称分析试剂，红色标签，该级别纯度较高、杂质含量较低，适用于定性和定量分析.

3.三级化学纯（C.P），蓝色标签，该级别质量略低于二级品，适用于一般定量分析和定性试验

.4.四级实验试剂（L.R），黄色标签，该级别试剂质量较低、但比工业用高，适用于一般定性实验

.普通生化检验准确的定量分析或配制校准溶液

临床医学检验技术151二、标准品1．原始参考品

是一种可以直接称量、检测、配制成任何浓度溶液的物质，可用以定标，国际理论应用化学联合会(IntematlonalUnionofPureandAppliedChemistry，IUPAC)认为其纯度达99．98％2．二级参考品

由原始标准品在特定的方法下标定的