2025年粤教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年粤教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷440考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、“治疗性克隆”可用胚胎干细胞克隆出人体不同的组织、细胞，以用于医学研究和治疗。下列相关叙述错误的是（）A.该技术有望解决临床上供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题B.人类治疗性克隆可达到治疗疾病的目的C.胚胎干细胞可克隆出不同组织、细胞的根本原因是基因的选择性表达D.中国政府既反对克隆人或动物，反对治疗性克隆2、下列有关酶制剂应用的叙述，正确的是（）A.加酶洗衣粉因为添加了酶制剂，所以比普通洗衣粉更易污染环境B.固定化葡萄糖异构酶只能催化一种化学反应C.加酶洗衣粉的洗涤效果总比普通洗衣粉的好D.腐乳发酵前期主要依赖毛霉产生的淀粉酶3、目前实验室培养的小鼠干细胞经过定向诱导分化，可成功地修复小鼠损伤的心脏，下列相关叙述正确的是（）A.此项研究体现了细胞的全能性B.在培养干细胞时需通入O2，不需通入CO2C.干细胞具有免疫力，不需要在无菌环境中培养D.此成果的应用可避免器官移植出现的免疫排斥4、生物学问题的解决依赖于一定的研究方法。下列研究方法与研究问题不匹配的组合是（）。选项研究方法研究问题A同位素标记法细胞内物质变化的一系列过程B抗源-抗体杂交棉花的染色体DNA上是否插入Bt基因C荧光标记技术证明细胞膜具有流动性D建构模型法达尔文对生物进化和适应形成的解释A.AB.BC.CD.D5、下列关于高中生物学实验的叙述，正确的是（）A.提取绿叶中光合色素时，加入碳酸钙以帮助迅速、充分研磨B.观察洋葱根尖制作的临时装片，仅部分细胞中可观察到染色体C.培养离体菊花组织，再分化使细胞形成不定形的薄壁组织团块D.家庭制作果酒、果醋前，必须对所有的发酵原料进行湿热灭菌评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)6、运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是（）A.对小动物注射特定抗原B.融合并筛选杂交瘤细胞C.原代培养效应B细胞D.将胰蛋白酶注入小动物腹腔7、下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述，正确的是（）A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数C.在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同D.在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染8、利用PCR技术扩增目的基因；其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的是（）

A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连C.退火温度过高可能导致PCR得不到任何扩增产物D.每一循环都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充9、MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。某研究小组将含有相同浓度抗生素I~IV的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上，进行药敏试验以了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，用于指导临床合理选用抗生素。图1为实验器材，图2为实验结果。下列叙述正确的是（）

A.为获得长满测试菌的琼脂平板，需要使用图1中工具①②③B.据图2可知抗生素I的MIC大于抗生素皿的MICC.图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素IV的突变株D.图2抑菌圈中离纸片越近的菌落对抗生素IV的抗性越强10、基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）

A.若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列B.扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成C.导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞D.利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上11、下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（）A.制备培养基过程中，需要在灭菌后进行pH的调节B.制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长C.现代发酵工程选育出性状优良的菌种后即可进行发酵罐内的发酵D.醋酸菌能将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，故夏天开瓶后的红酒容易变酸12、如图是单克隆抗体制备过程示意图，1～3代表相关过程，a～e代表相关细胞，其中c是两两融合的细胞。以下叙述错误的是（）

A.过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠产生特异性免疫反应B.过程2的促融方法可采用电融合技术，该技术能击穿核膜促使核融合C.c细胞有三种，每种细胞染色体组数不相等，e细胞是杂交瘤细胞D.过程3是进行抗体检测，并克隆产生阳性细胞的过程13、为保障公共健康；需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌B.完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在25℃下培养观察C.为减少实验误差，应按照上述实验步骤多次取样重复进行检测D.可用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量14、下列有关菊花组织培养的叙述，正确的是（）A.实验中使用的培养基、器械和外植体都要灭菌B.外植体用酒精消毒30s后，再用流水充分冲洗C.诱导愈伤组织期间不需要光照，后续培养需要适当的光照D.一般先诱导根的形成，再转接到诱导生芽的培养基上评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)15、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。16、一般包括______、______等技术17、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。18、来源：主要是从______中分离纯化出来的。19、___________（简称PCR）是一种____________迅速_______________的技术，它能以极少数的DNA为模板，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝。20、现代的腐乳生产是在严格的____________条件下，将优良__________菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免__________________的污染，保证产品的质量。21、将DNA粗提取液在____________℃的恒温水浴箱中保温10—15分钟。22、我国中科院神经科学研究所团队率先攻克了体细胞克隆灵长类动物这一世界难题｡他们首次成功培育出体细胞克隆猴，分别叫中中和华华（下图）｡猴子与人类同属灵长类，此前克隆灵长类动物在技术上存在着不可逾越的障碍｡克隆猴的诞生打破了这个障碍，也再次引起人们对于克隆人的担忧和猜测｡

从1997年宣布克隆羊多莉（上图）的出生，到2018年克隆猴中中､华华的诞生，这期间一些科学家试图克隆人｡举例说出克隆人面临哪些伦理问题｡_____评卷人得分四、判断题(共3题，共24分)23、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误24、利用基因工程技术建立移植器官工厂是目前基因工程取得实际应用成果非常多的领域。（选择性必修3P90）()A.正确B.错误25、蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共18分)26、如图是从土壤中筛选纤维素分解菌的流程图；回答下列问题：

（1）土壤取样时，一般选择__________________丰富的环境。选择培养的目的是________________________。

（2）若测得稀释一定倍数的0.1mL稀释液中纤维素分解菌的菌落数平均值为51，通过计算得知每毫升样品中有5.1×107个纤维素分解菌，则该稀释液的稀释倍数为_________。

（3）鉴别纤维素分解菌的培养基中应加入CR染料，它可以与纤维素形成_________色复合物。若在鉴别培养基上得到部分有透明圈的菌落（如图），则降解纤维素能力最强的是菌落__________。

27、豆豉是中国传统特色发酵豆制品调味料。豆豉以黑豆或黄豆为主要原料；利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，经复杂工序制作而成。程序如下：黑豆→筛选→洗涤→浸泡→沥干→蒸煮→冷却→接种→制曲→洗豉→浸→拌盐→发酵→晾干→成品（干豆豉）。请回答下列问题：

（1）蒸煮目的是_________，冷却后再接种的原因是_____________。

（2）观察发现发酵容器中上层豆类的发酵效果比底层的好，说明该菌是________。

（3）制作过程中要加入适量的盐，盐能______________；避免变质。

（4）从黑豆到豆豉。它的成分会发生一定的变化。其中最显著的变化是________。

（5）豆豉制作过程中用到的菌种与课本上_________________________制作的菌种最接近，从细胞结构看，它们属于___________生物。评卷人得分六、综合题(共4题，共28分)28、由西班牙研究团队在《Science》杂志上刊登的一项最新研究成果表明；当T淋巴细胞的代谢能力发生变化时，体内积累的炎症会让动物未老先衰，出现各种“老年病”。这一成果表明了T淋巴细胞在动物体衰老进程中的重要作用。回答下列问题：

（1）对于多细胞生物而言个体的衰老意味着体内大多数细胞的衰老，生物体内衰老细胞的及时清除体现了免疫系统的___________功能。

（2）有科学家提出可利用人体细胞培养出T淋巴细胞；再通过向人体内适当输入T淋巴细胞来延缓衰老。下面是该设想的流程图。

过程①的培养液中除合成培养基的成分外，还需添加___________等天然成分，同时要保证被培养的细胞处于___________的环境中。进行过程②时，需要先利用___________技术将四种目的基因扩增。iPS细胞是一类具有胚胎干细胞特性的细胞。哺乳动物的胚胎干细胞是由___________中分离出来的一类细胞，在功能上具有发育的___________。过程③的实质是___________。29、丽轮枝菌（一种丝状真菌）是引起棉花黄萎病的主要病原菌。为观察大丽轮枝菌对棉花根侵染路径，研究人员利用绿色荧光蛋白基因（sGFP）转染大丽轮枝菌，培育出表达绿色荧光蛋白的转基因菌株，主要过程如下（图中a链和b链分别是相应基因转录模板链）。分析回答：

（1）过程①中，PCR扩增sGFP的原理是________，该过程除需要根据________设计特异性引物序列外，为保证sCFP正确插入到质粒中，还需要在引物的5ˊ端添加限制酶识别序列，图中b链的黏性末端碱基序列（5ˊ→3ˊ）为________。

（2）过程①中，除了要添加模板、引物、原料外，还需添加_____酶。若1个sGFP片段连续扩增4次，则会形成_____个两条链等长的sGFP片段，消耗_____个引物1。

（3）过程②需要的工具酶是________。研究中将sGFP插入到构巢曲霉启动子和终止子之间的目的是_________。

（4）将重组质粒导入农杆菌时，需要用_______处理农杆菌；使其转化为感受态细胞。

（5）过程③中需要配制细菌培养基，配制时要在培养基灭菌并冷却到80℃左右后，再加入用潮霉素溶液，潮霉素不能与培养基一同灭菌的原因是_________。

（6）选择过程③筛选培养得到的不同农杆菌菌落，分别提取细菌质粒DNA，并用BamHI和HindIII完全酶切可以得到________种长度不同的DNA片段。

（7）将导入重组质粒的农杆菌加入大丽轮枝菌的孢子细胞悬液中，在适宜条件完成转染后利用滤膜过滤得到孢子细胞，再在真菌培养基上培养获得菌落，最终通过检测_______筛选出绿色荧光蛋白旺盛表达的大丽轮枝菌。30、苯丙酮尿症是由PKU基因突变引起的，基因定点整合可以将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上，替换突变基因，用于研究该病的治疗。基因定点整合的过程是：从染色体DNA的突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2，根据其碱基序列分别合成HB1和HB2，再将两者分别与基因K1、K2连接，中间插入正常PKU基因和标记基因neor；构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换，导致两者之间区域发生互换（如下图）。

(1)构建重组载体时，需采用PCR技术对PKU基因进行扩增，PCR扩增的原理是_______。扩增时，需要先加热至90~95℃使DNA解链后，后冷却至55～60℃的目的是___________。

(2)重组载体中的HB1和HB2之间除了插入正常的PKU基因和neor基因以外，还必须含有_____。neor基因的作用是_________。

(3)用图中重组载体转化时，会出现一些PKU基因错误整合的胚胎干细胞。错误整合时，载体的两个K基因中至少会有一个与neor基因一起整合到染色体DNA上，已知含有neor基因的细胞具有G418的抗性。Kl、K2的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。根据上述信息，设计简要的实验方案从转化的胚胎干细胞中筛选出正确整合的胚胎干细胞_____。31、下图为试管牛及牛胚胎分割示意图。请据图回答：

(1)为了获得足够多的细胞1，需要给供体母牛注射相关激素进行______________处理，采集到1后要培养到减数第二次分裂的____________期才具备与获能精子受精的能力。

(2)判断1是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带之间出现两个____________。

(3)进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的发育到____________或____________时期胚胎进行操作。在分割得到3、4时应注意对____________均等分割，以免影响胚胎的恢复和进一步发育。要鉴定分割胚胎的性别，可取_____________的细胞做DNA分析性别鉴定。胚胎分割可能是_______________的一种生殖方式。

(4)获得试管牛的最后一道工序是________________。

(5)胚胎在受体内能够存活的生理学基础是_______________________________________。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、D【分析】【分析】

1；治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植；

生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体；

2；中国政府：禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

A；治疗性克隆目的是培养出能够用于医学治疗的供体器官；以解决目前临床上存在的供体器官不足和移植后免疫排斥的问题，A正确；

B；治疗性克隆的目的是治疗疾病；B正确；

C；用胚胎干细胞通过基因的选择性表达（细胞分化）能够培养出不同的组织细胞；C正确；

D；中国政府反对生殖性克隆人；但不反对治疗性克隆，D错误。

故选D。2、B【分析】【分析】

1；加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉；目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

2；酶是活细胞产生的具有催化功能的有机物；具有高效性、专一性，酶的作用条件较温和。酶对有机溶剂非常敏感，容易失活。

【详解】

A；加酶洗衣粉中的酶制剂属于有机物；易被分解，不会造成环境污染，A错误；

B；固定化葡萄糖异构酶只能催化一种化学反应；固定化细胞可催化一系列化学反应，B正确；

C；酶发挥作用需要适宜的条件；因此加酶洗衣粉的洗涤效果不一定总比普通洗衣粉好，C错误；

D；腐乳前期发酵主要依赖毛霉产生的蛋白酶将蛋白质水解为小分子的多肽和氨基酸；D错误。

故选B。

【点睛】3、D【分析】【分析】

干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞；胚胎干细胞属于全能干细胞，全能性容易表达；成体干细胞属于多能或专能干细胞，全能性难以表达。

【详解】

A；小鼠干细胞经过定向诱导分化；可成功地修复小鼠损伤的心脏，没有形成完整个体，不能体现细胞的全能性，A错误；

B、在培养干细胞时需通入95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）；B错误；

C；干细胞需要在无菌环境中培养；C错误；

D；患者自身细胞制备的干细胞；在体外分化培养出某种组织细胞，并植入患者体内，此成果的应用可避免器官移植出现的免疫排斥，D正确。

故选D。4、B【分析】【分析】

同位素标记法也叫同位素示踪法；同位素可用于追踪物质的运行和变化规律。在生物学研究中，用于研究分泌蛋白的合成过程；噬菌体侵染细菌的实验、光合作用过程中水的来源和二氧化碳的转移途径等方面。

【详解】

A；同位素可用于追踪物质的运行和变化规律；因此科学家通过追踪同位素标记的化合物，可以弄清化学反应的详细过程，A正确；

B；棉花的染色体DNA上是否插入Bt基因可以采用PCR等技术进行检测；检测Bt基因是否翻译成Bt抗虫蛋白可采用抗原—抗体杂交，B错误；

C；科学家用发绿色荧光的染料标记小鼠细胞表面的蛋白质分子；用发红色荧光的染料标记人细胞表面的蛋白质分子，将小鼠细胞和人细胞融合，最终两种颜色的荧光均匀分布，这一实验表明细胞膜具有流动性，C正确；

D；达尔文建立了生物进化和适应形成的自然选择解释模型；D正确。

故选B。5、B【分析】【分析】

1；色素提取和分离过程中几种化学物质的作用:(1)无水乙醇作为提取液；可溶解绿叶中的色素。(2)层析液用于分离色素。(3)二氧化硅破坏细胞结构，使研磨充分。(4)碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。

2；大多数细胞处于分裂间期；而染色体是分裂前期才出现的，因此只有少数细胞中能观察到染色体。

【详解】

A；提取绿叶中光合色素时；加入二氧化硅以帮助迅速、充分研磨，碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏，A错误；

B；大部分细胞中处于分裂的间期；分裂间期是以染色质形式存在，染色体是分裂期才有的结构，因此观察洋葱根尖制作的临时装片，仅部分细胞（分裂期）中可观察到染色体，B正确；

C；培养离体菊花组织；脱分化产生的愈伤组织通过再分化使细胞重新分化根或芽等器官，C错误；

D；家庭制作果酒时；不需要进行灭菌处理，原因是在缺氧、酸性的发酵液中，绝大多数的其他微生物都无法正常生活，但酵母菌可以生长、繁殖，另外菌种的来源是发酵材料的表面，因此不需要对发酵原料灭菌，D错误。

故选B。二、多选题(共9题，共18分)6、A:B【分析】【分析】

在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞；在诱导细胞融合时，除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞；效应B细胞不能分裂；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时，可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体。

【详解】

A；在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞，A正确；

B；在诱导细胞融合时；除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；效应B细胞不能分裂；C错误；

D；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时；可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体，而不需要将胰蛋白酶注入小动物腹腔，D错误。

故选AB。7、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中；需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。

【详解】

A；倒置培养的原因是可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染；经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置，以防止杂菌污染，A正确；

B；为使实验结果更准确；同一稀释度下可以多涂布几个平板，至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数，求平均值，B正确；

C；细菌在分裂生殖中也会产生基因突变；虽然一个菌落是由一个活菌繁殖而来，但是个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同，C错误；

D；证明选择培养基没有被杂菌污染的方法是对培养基进行空白培养；即选取未接种的培养皿与接种样品的培养皿同时培养，在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染，D正确。

故选ABD。8、A:B:C【分析】【分析】

PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性；低温复性、中温延伸。

【详解】

A；用PCR方法扩增目的基因时；只要知道目的基因前后的序列用以设计引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正确；

B；PCR过程中需要两种引物分子；不同引物能靠碱基互补配对而形成（部分）双链的话会造成引物不能同模板DNA结合，也就不能发生进一步的链式反应，这一点需要避免，B正确；

C；若退火温度过高；则引物与模板DNA无法形成部分双链，PCR也就不能发生，C正确；

D；PCR技术中的引物和原料是一次性添加的；不需要补充，D错误。

故选ABC。

【点睛】9、A:B:C【分析】【分析】

1；平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

2；稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后形成单个菌落。

【详解】

A；为获得长满测试菌的琼脂平板；需要用到的接种方法是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法需要用到酒精灯、涂布器和培养基，A正确；

B；MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。含有相同浓度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上；抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的抑菌圈小。说明抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC。即想要达到和抗生素Ⅲ相同的抑菌效果抗生素Ⅰ要增加浓度才行，B正确；

C；图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株；这些突变株在抗生素的环境下能够存活并繁殖形成菌落。细菌是原核生物，发生变异最可能是基因突变，C正确；

D；在抑菌圈中出现的菌落都是对该种抗生素具有抗性的菌株；它们之间抗性的强弱无法根据题干信息进行判断。如果要判断它们之间抗性的强弱还需进一步实验才能确定，D错误。

故选ABC。

【点睛】

本题考查的知识点包括：微生物接种，微生物培养及微生物的应用。10、C:D【分析】【分析】

将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因；启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

【详解】

A；启动子是位于DNA上RNA聚合酶的结合部位；mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的，若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，A正确；

B、引物的延伸方向为3'端，扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成；B正确；

C；导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞；而是受精卵或早期胚胎细胞，C错误；

D；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物细胞中染色体的DNA上，D错误。

故选CD。11、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；醋酸菌在糖源；氧气充足时；直接将葡萄糖氧化为醋酸；在糖源不足、氧气充足时，可利用酒精，即乙醇作为呼吸底物，先将乙醇变成乙醛而后变为乙酸（醋酸）。

【详解】

A；制备培养基过程中；pH的调节应在灭菌前进行，A错误；

B；制作果酒时适当加大接种量；酵母菌菌体的基数增大，可使其快速形成优势菌群，抑制杂菌生长，提高发酵速率，B正确；

C；现代发酵工程选育出性状优良的菌种后；为满足发酵过程的需要，还要对菌种进行扩大培养，之后才可进行发酵罐内的发酵，C错误；

D；醋酸菌能够氧化酒精产生醋酸；造成葡萄酒的败坏。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天开瓶后的红酒容易变酸，D正确。

故选AC。12、B:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备涉及细胞融合；细胞培养和细胞筛选；从题干信息图可看出，过程1代表的是注射特异性抗原使小鼠免疫，从而获得能产生相应抗体的B淋巴细胞；过程2是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程；过程3是克隆培养筛选后的阳性细胞，一共需要进行两次，最终获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，此后在培养基或小鼠腹腔中培养。

【详解】

A；图中过程1是通过注射抗原或抗原蛋白来获得产生相应抗体的B淋巴细胞；A正确；

B；过程2是促进细胞融合的过程；其中电融合技术是用低压电流击穿细胞膜促使细胞融合，B错误；

C；c细胞为杂交瘤细胞；有三种，分别是骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞-B淋巴细胞、B淋巴细胞-B淋巴细胞，其中骨髓瘤细胞和B淋巴细胞都有两个染色体组，融合后的细胞都含有4个染色体组，其中e细胞是杂交瘤细胞，C错误；

D；过程3是专一抗体检测及克隆培养筛选后获得阳性细胞；该过程需要多次进行，D正确。

故选BC。13、B:D【分析】【分析】

细菌的数目可以通过滤膜法来测定。将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，根据黑色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌的数量。微生物接种时，为了避免其它杂菌的污染，接种过程要进行无菌操作。灼烧灭菌常适用于接种环；接种针；干热灭菌常适用于玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具；高压蒸汽灭菌常适用于无菌水、培养基。

【详解】

A；检测前需要对水样收集瓶、滤膜、培养基、镊子灭菌；防止杂菌干扰，A正确；

B；完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上；在37℃下培养观察，B错误；

C；为减少实验误差；按照上述实验步骤多次取样重复进行检测，取平均值作为实验数据，C正确；

D；大肠杆菌较小；不能用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测，D错误。

故选BD。14、B:C【分析】【分析】

植物组织培养的过程为：离体的植物组织；器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。

【详解】

A；无菌技术包括消毒和灭菌；植物组织培养需要无菌操作，防止杂菌污染，所用器械需灭菌，实验人员和外植体需消毒操作，A错误；

B；菊花茎段在洗涤灵稀释液浸泡2min；用流水冲洗干净后，在70%酒精中消毒30s，再用流水冲洗后置于10%次氯酸钠溶液中消毒10min，然后用无菌水多次冲洗，B正确；

C；诱导培养愈伤组织期间一般不需要照光；在后续培养过程中，每日需要给予光照，目的是诱导叶绿素的形成，进一步形成叶绿体进行光合作用，C正确；

D；诱导愈伤组织形成试管苗的过程；需要将生长良好的愈份组织先转接到诱导生芽的培养基上，长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导生根，D错误。

故选BC。三、填空题(共8题，共16分)15、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用16、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】多聚酶链式反应体外扩增DNA片段20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】无菌毛霉其他菌种21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】60—7522、略

【分析】【详解】

①克隆人是对人权和人的尊严的挑战：

人不仅是自然人；在生物进化中人自从脱离了动物界，还成为有价值观念的社会的人，因此人是具有双重属性的，是生物；心理和社会的集合体。克隆人也就是人工无性生殖的人，只在遗传性状上与原型人一致，而人的心理、行为、社会特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一个丧失自我的人，严重违反了人权，危害人类尊严；

②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念：

克隆人的出现将彻底搅乱代际关系和家庭伦理定位；克隆人过程中可以出现体细胞核供者；卵细胞供者以及孕育者三位生物学父母，以及抚养者的社会学父母的多种选择，被克隆者只是生物学上复制，人类世代的传承也将被打破，家庭伦理关系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；

④克隆人违反生物进化的自然发展规律：

人类所以发展到如此高的进化文明程度，是由其自然发展规律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到无性生殖，这种行为如不加阻止，必将给人类种下无穷的灾难。【解析】①克隆人是对人权和人的尊严的挑战；②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆人违反生物进化的自然发展规律等。四、判断题(共3题，共24分)23、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。24、B【分析】【详解】

基因工程技术可以使建立移植器官工厂的设想成为现实；说明并未开始实际应用。

故题中描述错误。25、A【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。

故正确。五、实验题(共2题，共18分)26、略

【分析】【分析】

1；选择培养基是指通过培养混合的微生物；仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。

2；分解纤维素的微生物的分离的实验原理：

（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖能被微生物利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。

（2）在培养基中加入刚果红；可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

3；统计菌落数目的方法：

（1）显微镜直接计数法：

①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板；在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；

②方法：用计数板计数；

③缺点：不能区分死菌与活菌。

（2）间接计数法（活菌计数法）：

①原理：当样品的稀释度足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作：

a；设置重复组；增强实验的说服力与准确性。

b；为了保证结果准确；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M；其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

【详解】

（1）土壤取样时；一般选择纤维素丰富的环境。选择培养的目的是增加纤维素分解菌的数量。

（2）若测得稀释一定倍数的0.1mL稀释液中纤维素分解菌的菌落数平均值为51，通过计算得知每毫升样品中有5.1×107个纤维素分解菌，则由每mL样品中的菌株数=（c÷V）×M可得，该稀释液的稀释倍数＝5.1×107÷51×0.1=105。

（3）鉴别纤维素分解菌的培养基中应加入CR染料；它可以与纤维素形成红色复合物。若在鉴别培养基上得到部分有透明圈的菌落，透明圈越大说明降解纤维素能力越强，所以图中降解纤维素能力最强的是菌落1。

【点睛】

本题结合流程图，考查微生物的分离和培养，解题关键是识记土壤微生物分离的原理及方法；识记培养基的种类及作用，能结合图中信息准确答题。【解析】纤维素增加纤维素分解菌的数量105红①27、略

【分析】豆豉的制作原理与腐乳的制作类似：起主要作用的是真菌中的毛霉；适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸；甘油和脂肪酸。

【详解】

（1）黄豆煮熟的目的主要破坏黄豆内部结构；使蛋白质变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用，冷却后再接种的原因是防止高温杀死菌种；

（2）发酵装置的上层含氧量比较高；发酵装置内上层黄豆的发酵效果比底层好，说明该发酵菌是需氧菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；

（3）盐能抑制微生物生长所以制作豆豉过程中要加入适量的盐；避免变质；

（4）大豆到豆豉的过程中；主要利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，所以其中最显著的变化是蛋白质被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸；

（5）腐乳的制作过程也是利用了毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用；毛霉、曲霉等微生物都是真核生物。

【点睛】

本题考查了豆豉制作的相关知识，要求考生能够识记豆豉制作的原理；能够利用酶的专一性解答蛋白酶和脂肪酶作用的产物是解答本题的关键。【解析】破坏大豆内部分子结构，使蛋白质适度变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用防止高温杀死菌种好氧菌抑制微生物生长蛋白质转变成氨基酸和肽。腐乳真核六、综合题(共4题，共28分)28、略

【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：

（1）充足的营养供给--微量元素；无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。

（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。

（3）无菌；无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素；以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

（1）

生物体内衰老细胞的及时清除体现了免疫系统的监控和清除功能。

（2）

过程①是动物细胞培养；其培养液中除合成培养基的成分外，还需添加一定量的血清；血浆等天然成分，同时要保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境中。过程②是将目的基因导入受体细胞，导入前需要先利用PCR技术将四种目的基因扩增。iPS细胞是一类具有胚胎干细胞特性的细胞。哺乳动物的胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，在功能上具有发育的全能性特点。过程③是细胞分化，其实质是基因的选择性表达。

【点睛】

本题以输入T细胞延缓衰老为情境，考查T细胞、动物细胞培养和基因工程技术的流程等知识，旨在考查考生的理解能力、实验与探究能力和综合运用能力，以及生命观念和科学思维的核心素养。【解析】（1）监控和清除。

（2）血清或血浆无菌、无毒PCR早期胚胎或原始性腺全能性基因的选择性表达29、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；根据PCR过程的特点可绘制1个sGFP片段复制图示如下：

【详解】

（1）PCR扩增sGFP的原理是双链DNA复制，由于DNA两条链反向平行，且DNA聚合酶只能使新合成的DNA子链从5′→3′方向延伸，所以该过程需要根据sGFP两端（3′端）碱基序列设计特异性引物序列，为了保证sGFP正确插入到质粒中，还需要在引物的5′端添加限制酶识别序列，由于质粒大片段是利用HindⅢ和BamHⅠ共同切割得到的质粒的长片段，所以B链5′是利用HindⅢ切割形成的黏性末端，根据HindⅢ识别的碱基序列可知，图中b链的黏性末端碱基序列（5′→3′）为AGCT。

（2）扩增过程中需要用到Taq酶（热稳定DNA聚合酶）。由分析图示可知；第一；二轮循环合成的子链长度均不同，第三轮循环产生的子代DNA分子中，存在两个含有等长的两条核苷酸链的DNA分子，即仅含引物之间的序列，第三轮的DNA再进行一次半保留复制，可形成8个两条链等长的sGFP片段，消耗7个引物1。

（3）过程②为构建重组DNA；需要的工具酶是DNA连接酶。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，而终止子是使转录终止的序列，而目的基因不携带启动子和终止子，所以