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细菌染色基本程序COMMONLYUSEDDYES,BACTERIALDYEINGBASICPROCEDURES董慧细菌染色标本检查法细菌为无色半透明的微小生物，用光学显微镜直接进行观察通常显示不清。为了更好的显示细菌的形态、大小、排列、染色和结构组成等特点，常将细菌标本染色后再进行镜检，称为染色标本检查法。常用染料根据助色基解离后的带电情况，可将染料分为碱性和酸性两大类。此外还有复合染料和单纯染料。染色法单染法：只用一种染料复染法：两种或以上染料革兰染色抗酸染色（鉴别染色法）复染法基本步骤初染媒染脱色复染初染：对已干燥固定的标本初步染色，初步显示细菌的形态特征。媒染：用媒染剂以增加染料与被染物的亲和力或使细胞膜通透性改变，目的是加强染色效果。常用媒染剂有碳酸、碘液、明矾等。脱色：用脱色剂使某些已着色的被染物脱去颜色，检查染料结合的稳定性，以显示各种细菌不同染色反应性和结构特点。常用脱色剂是醇类、丙酮等，95%乙醇最常用。复染：又称对比染色，使已脱色的被染物重新着色。常用稀释复红、沙黄、亚甲蓝等。复染法（1）革兰染色法：（结晶紫）初染→（碘液）媒染→（95%酒精）脱色→（稀释复红）复染意义：①鉴定细菌（G+、G-）；②指导临床选择药物；③与细菌的致病性有关：G+—外毒素；G-—内毒素。（2）抗酸染色法：石炭酸复红→3%盐酸酒精（脱色）→碱性亚甲蓝（复染）加温红色：抗酸性细菌。蓝色：非抗酸性细菌。图6-3葡葡球菌属检验程序细菌染色的基本程序涂片干燥固定染色镜检涂片干燥固定染色镜检待干01020304如何制作一张好的片？一、涂片涂片方式因标本而异菌膜面积约1cm2，薄而均匀二、干燥室温中自然干燥。加速干燥，将标本离火焰半尺高处略烘。目的：使水分充分蒸发，为固定做准备。注意事项：切勿靠近酒精灯防止菌体崩解变形。三、固定火焰加热法：玻片有菌膜一面向上，在火焰的外焰钟摆样速度通过三次，时间约3秒钟。目的：使细菌蛋白凝固，杀死细菌；改变细菌对染料的通透性，利于着色使菌体牢固黏附于玻片上。思

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