2025年粤人版选择性必修三生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年粤人版选择性必修三生物上册阶段测试试卷15考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、我国科学家利用基因编辑技术获得一只彻底敲除BMAL1基因（控制生物节律的核心基因之一）的猕猴甲，发现其出现睡眠紊乱的症状。将该猕猴的体细胞核植人去核的卵母细胞中得到重组细胞，然后培育重组细胞得到了五只具有睡眠紊乱症状的克隆猴。相关叙述不正确的是（）A.猕猴甲体内各种细胞表达的基因完全相同B.克隆猴的胚胎发育过程中会发生细胞凋亡C.五只克隆猴的获得能够证明动物体细胞核具有全能性D.通过上述技术可批量制备疾病动物模型用于科学研究2、我国科学家于2017年获得世界上首批体细胞克隆猴“中中”、“华华”，他们是将同一只雌性食蟹猴的体细胞移植到去核卵细胞中培育成的。下列叙述错误的是（）A.克隆猴的诞生体现了动物体细胞核的全能性B.两只克隆猴的体细胞染色体数和性别都相同C.该技术的实验对象不是人，因此不需要考虑实验伦理问题D.与胚胎细胞相比，动物体细胞克隆不易成功的原因是其分化程度较高3、科学家在蛙的核移植实验中发现，肠上皮核移植1%-2%形成蝌蚪，囊胚核移植50%形成蝌蚪或成蛙。下列叙述正确的是（）A.实验中用到核移植、胚胎移植等技术B.该发现说明低等动物细胞的全能性更容易表达C.这种差异与两种核原先所处的细胞质环境有关D.该发现说明细胞质对异源细胞核的调控具有专一性4、关于哺乳动物胚胎发育顺序排列正确的是A.卵裂、囊胚、原肠胚B.受精卵、卵裂、囊胚、原肠胚C.卵裂、受精卵、囊胚、原肠胚D.受精卵、卵裂、原肠、胚囊胚5、下图是利用体细胞核移植技术获得克隆奶牛的流程图。下列叙述错误的是（）

A.过程①除去的是卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物B.过程②为动物细胞培养，一般用幼龄动物的体细胞C.过程④可用电刺激技术处理D.过程⑤要求代孕母牛具有较多的优良性状6、花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图所示。下列有关叙述错误的是（）

A.图中培育杂种植株所用的技术体现了植物细胞全能性和细胞膜流动性原理B.过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化C.过程①可使用纤维素酶和果胶酶，过程②用灭活的病毒进行诱导D.病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株7、纤维素分解性细菌能利用分泌的纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖等并吸收利用。刚果红是一种染料，能与像纤维素这样的多糖形成红色复合物，而不能与其水解产物发生类似反应。将不能直接吸收纤维素的甲、乙两种菌分别等量接种在含纤维素和刚果红的培养基上，甲菌菌落周围无变化，乙菌菌落周围呈现透明圈。下列说法错误的是（）A.实验中所用的培养基以纤维素为唯一碳源B.乙菌属于纤维素分解性细菌C.该实验的关键是防止杂菌污染D.配制培养基时需调至中性或弱碱性8、玉米的赖氨酸含量比较低，科学家将合成赖氨酸的关键酶——天冬氨酸激酶中352位的苏氨酸变成异亮氨酸，二氢吡啶二羧酸合成酶中104位的天冬氨酸变成异亮氨酸后，可大大提高玉米中的赖氨酸含量。下列有关蛋白质工程的叙述，正确的是（）A.蛋白质工程的目的是获得满足人类生产和生活需求的蛋白质B.经蛋白质工程改造后的两种酶改变氨基酸这一性状不可遗传C.利用基因工程技术不能改变基因上的特定位点的核苷酸序列D.对两种酶进行改造可通过直接改造蛋白酶的分子结构来实现评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)9、下列相关实验的叙述，正确的是（）A.发酵过程中，要严格控制温度、pH等发酵条件，否则会影响菌种代谢产物的形成B.DNA的粗提取与鉴定实验中，用菜花替代鸡血作为实验材料，实验操作会有不同C.PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液、蒸馏水等在使用前不用灭菌D.用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时，DNA分子的迁移速率与凝胶浓度、分子大小无关10、下列关于基因工程中的基本工具的说法中，正确的是（）A.基因工程中的工具酶有限制性内切核酸酶和DNA连接酶B.DNA连接酶可将任意的DNA片段通过形成磷酸二酯键而连接起来C.质粒上必须有标记基因才可作为载体D.限制性内切核酸酶一般不仅仅能切割外源DNA，也能切割自身的DNA分子11、下图是我国科学家制备小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞的相关研究流程；其中Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用。下列叙述正确的是（）

A.受精卵发育过程中桑椹胚前的细胞都是全能性细胞B.推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老C.过程③胚胎干细胞细胞核大、核仁明显D.从卵巢中获取的卵母细胞可直接用于过程①12、人群中有部分人体内缺乏乳糖分解酶,饮用鲜牛奶后会导致肠胃不适；消化不良。“低乳糖奶牛”的诞生,有望给患有“乳糖不耐症”的人群提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程,相关叙述不正确的是（）

A.犊牛的性状和黑白花奶牛的性状完全一致B.卵母细胞需在体外培养到MⅡ期然后用离心法去核C.犊牛的出生体现了动物细胞核的全能性D.体细胞核移植技术可用于人类组织器官的移植和保护濒危动物13、生活垃圾分类就是通过回收有用物质减少生活垃圾的处置量，提高可回收物质的纯度增加其资源化利用价值，减少对环境的污染。目前，各地陆续颁布实施《生活垃圾管理条例》，生活垃圾分类已成为市民的日常生活方式。处理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述正确的是（）

A.剩余饭菜、玻璃碎片、果皮果壳属于湿垃圾B.菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对碘液分解能力不同C.若垃圾分类不当混入过期的抗生素或电池等会抑制微生物生长D.图中将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法14、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源15、2020年7月20日，国际医学权威期刊《柳叶刀》上发表了新冠病毒疫苗II期临床试验的成果。该试验是由陈薇院士等人领衔的团队开展的研究，试验中使用的疫苗是一种腺病毒载体重组新冠病毒疫苗(基因重组疫苗)。试验结果表明，单次接种疫苗28天后，99．5%的受试者产生了特异性抗体，95．3%受试者产生了中和抗体，89%的受试者产生了特异性T细胞免疫反应。这表明，陈薇团队研发的新冠疫苗可为健康人群提供“三重保护”，将新冠病毒“拒之门外”。下列叙述正确的是（）A.该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后，体内能产生分泌特定抗体的效应T细胞C.主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性D.新冠肺炎康复患者可以不注射该疫苗16、下图是快速RT-PCR过程示意图；①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（）

A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力B.③PCR过程只需要引物bC.RT-PCR不能检测基因表达水平D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)17、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有___________和___________发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行________的测定。18、获取目的基因的方法______、______、______19、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。20、注意：a生理基础：______，______

b植物细胞融合前需用______和______除去细胞壁21、植物诱导融合的方法：物理法包括______等。化学法一般是用_____作为诱导剂。评卷人得分四、实验题(共4题，共8分)22、多发性硬化症是一种由纤维蛋白渗入大脑引发的神经系统疾病。科研人员欲应用生物工程技术治疗该病。请回答下面有关问题。

（1）研究人员将纤维蛋白作为_________注射到小鼠体内，激活了小鼠的________免疫，进而制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术属于_______范畴（填写下面正确选项）。

A．基因工程B．细胞工程C．胚胎工程D．蛋白质工程。

（2）制备5B8的基本流程如下：从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取________，与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合。然后用特定的__________筛选符合要求的杂交瘤细胞后；再通过克隆；检测、筛选、培养等环节，最终从小鼠腹水中提取到5B8。

（3）活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；当吞噬细胞中大量产生ROS并释放时，会毒害周围神经元。NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。为研究5B8的作用机制，研究者检测了经5B8处理后吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，结果如图一；图二。

①作为标准参照的GADPH蛋白表达量稳定且含量丰富，可排除_________对实验结果的影响。

②综合两幅图的检测结果，通过对比_______组可知，纤维蛋白可以______________，使其对神经元产生毒害；而通过对比______组结果发现:5B8能_________。

③经临床实验证实，单克隆抗体5B8确实对多发性硬化症有明显疗效。请根据上述结果分析其具有疗效的原因____________________。23、普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱；有人将地衣芽孢杆菌的a-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。请据图回答：

（1）图甲中为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以______________作为唯一碳源。②③过程需重复几次，目的是______________。

（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________；推测该同学接种时可能的操作失误是___________________________。

（3）以淀粉为原料，用等量的工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵一段时间，接种_____________菌的发酵罐需要先排气，其原因是______________。

（4）用凝胶色谱法分离a-淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较_____________。24、单克隆抗体技术在生物工程中有着广泛的应用；下图1是单克隆抗体制备流程图，下图2是我国科研人员为了准确筛选没有明显表型特征的某种微生物所采用的流程图，图3是某双特异性抗体作用示意图，双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。

（1）据图2分析，科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建____________________，并导入用__________处理的大肠杆菌细胞中；获取大量膜蛋白。

（2）已知细胞合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径，其中“D途径”能被氨基嘌呤阻断。兔子的已免疫的淋巴细胞有上述两种途径，但一般不分裂增殖；兔子的骨髓瘤细胞中只有“D途径”，但能不断分裂增殖。据此，图1所示的__________（填“HAT培养基”或“多孔板”）中添加氨基嘌呤可以达到筛选目的，其原理是______________________________。

（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，目的是______________________________。

（4）与直接使用抗肿瘤药物相比，将抗肿瘤药物与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是________________________________________，体现的是双特异性单克隆抗体在__________方面的用途。25、有研究表明CDKN2B基因与小鼠的寿命有关；科学家将该基因导入小鼠体内，统计其寿命是否高于正常小鼠。图1表示CDKN2B基因与相关限制酶酶切位点，该基因转录出的mRNA碱基序列与A链的碱基序列相同（T；U视为相同的碱基），图2为质粒简图，请回答下列有关问题：

（1）科学家首先采用PCR技术对目的基因进行扩增。PCR过程中每一循环有两次升温一次降温，其中降温的目的是_______________________________________________________。

（2）科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在___________和___________之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ分别切割目的基因和载体后产生黏性末端。携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，发现约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白，原因是___________。为了避免这种现象的发生，应对以上方法进行改进，改进措施为___________。

（3）若想让一个转入了目的基因的受精卵发育成多个个体，可以采用___________技术，操作时应注意做到_______________________________________________________。评卷人得分五、综合题(共1题，共4分)26、汽油进入土壤后；会对土壤的理化性质造成影响。筛选降解汽油能力较强的菌种将会大大提高修复污染土的效率。科研人员对土壤微生物进行分离鉴定并对其降解汽油性能进行测定和优化，从而为汽油污染土的生物修复提供优良菌种。科研人员进行了相关实验，过程如下。

（1）菌种的分离与鉴定：称取石油污染土1.0g放入到无菌生理盐水中，溶液的稀释度为10-1。对菌种进行纯化后临时保藏。

（2）优良降解菌株的筛选：将纯化后的菌种接种到LB培养基中置于摇床上进行培养；然后接种到降油培养基内在培养2；4、6d后，分别对培养基内的汽油含量进行测定，并计算最终的汽油降解率。

（3）菌种降解性能的测定。组别定量变量改变温度pH7.0，培养20h26①323538改变pH值温度32，培养②h6.06.57.07.58.0改变时间温度32，pH值为7.01216②2428

结果如下：

优良降解菌的筛选。菌种编号汽油含量汽油降解率0d2d4d6d6d菌143.2941.521.19070.25菌242.8931.281.02574.37菌343.411.3621.11272.20菌442.781.1850.99575.13菌543.3251.481.20169.98

回答下列问题：

(1)在菌种的分离与鉴定时，石油污染土1.0g放入到__________mL无菌生理盐水中，溶液的稀释度为10-1。利用稀释涂布法可对菌种进行计数，其原理是_____________________。

(2)对菌种进行临时保藏时，需先将菌种接种到试管的__________上，在合适的温度下培养。筛选菌种时，将纯化后的菌种接种到LB培养基中置于摇床上进行__________培养。

(3)单因素实验中表格的①②处分别填入的数值为__________，__________。

(4)若要研究降解性能最好的菌种的最适pH值，应选取的pH范围是____________，作出此选择的依据是______________________________。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、A【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎。

在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟；可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体。

核移植时；对提供细胞核和细胞质的动物需要进行同期发情处理，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。

【详解】

A；重组细胞发育成猕猴甲过程；需要经过细胞分裂分化过程，而细胞分化的实质是基因的选择性表达，所以猕猴甲体内不同细胞中表达的基因不完全相同，A错误；

B；细胞的寿命是有限的；在克隆猴的胚胎发育过程中，衰老细胞的更新要细胞分裂和细胞凋亡，B正确；

C；五只克隆猴的获得证明已经分化的动物体细胞的细胞核仍具有发育为完整个体的潜能；即细胞核具有全能性，C正确；

D；利用基因编辑技术获得的猕猴甲；因彻底敲除BMAL1基因而出现睡眠紊乱的症状，可用于研究BMAL1基因的功能及睡眠的调节，故通过上述技术可批量制备疾病动物模型用于科学研究，D正确。

故选A。

【点睛】2、C【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。

【详解】

A；克隆猴是将一只雌性食蟹猴的体细胞移植到去核卵细胞中培育成的；体现了动物体细胞核的全能性，A正确；

B；由于两只克隆猴都是由同一雌性食蟹猴的体细胞移植到去核卵细胞中培育成的；所以这两只猴的体细胞染色体数和性别都相同，B正确；

C；体细胞核移植技术需要考虑实验伦理问题；C错误；

D；与胚胎细胞相比；动物体细胞克隆不易成功的原因是其分化程度较高，细胞全能性低，D正确。

故选C。

【点睛】

3、C【分析】【分析】

1；细胞核移植技术；是指将一个动物细胞的细胞核移植至去核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。

2；对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割；否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

【详解】

A；蛙是体外受精；生殖发育过程都是在体外完成的，所以实验中用到核移植技术，不用胚胎移植，A错误；

B；该实验用的是蛙的不同种类细胞；说明同一物种不同种类细胞全能性不同，B错误；

C；细胞核和细胞质是相互依存的；这种差异与两种核原先所处的细胞质环境有关，C正确；

D；不同细胞核移植都可能发育成个体；不能说明细胞质对异源细胞核的调控具有专一性，D错误。

故选C。4、B【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

哺乳动物胚胎发育顺序是受精卵经卵裂形成囊胚；再经细胞分裂和细胞分化形成原肠胚，即哺乳动物胚胎发育过程为：受精卵；卵裂、囊胚和原肠胚。

故选B。5、D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。

【详解】

A；过程①可用显微操作去核法除去卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物；从而确保为重组细胞提供的只是质的部分，A正确；

B；过程②过程②为动物细胞培养；一般用幼龄动物的体细胞，其分化程度低，更易于培养，B正确；

C、重构胚是指人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力。用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体；蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚；使其完成细胞分裂和发育的进程，所以过程④可用电刺激技术处理，C正确；

D；过程⑤是胚胎移植；操作前需要对代孕母牛进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，并不要求代孕母牛具有较多的优良性状，因为该个体的性状并不影响子代的性状，D错误。

故选D。6、C【分析】【分析】

据图分析；①是去除细胞壁，②是原生质体融合，③是脱分化过程，据此分析作答。

【详解】

A；植物体细胞杂交技术将杂种细胞培养成完整植株；体现了植物细胞全能性；两个物种细胞的融合体现了细胞膜流动性原理，A正确；

B；③是由杂交细胞诱导成为愈伤组织的过程；表示脱分化，该过程中需要加入植物激素如生长素和细胞分裂素来诱导，B正确；

C；过程①是去除植物细胞壁的过程；由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，故可用纤维素酶和果胶酶去壁，过程②诱导原生质体融合的方法可用聚乙二醇，灭活的病毒是诱导动物细胞融合的方法，C错误；

D；可将病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上；一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株，该过程属于个体生物学水平的测定，D正确。

故选C。7、A【分析】【分析】

1；培养基的主要成分：

①主要成分：水；碳源、氮源、无机盐。

②其他成分：还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。

③牛肉膏和蛋白胨：来源于动物；含有糖；维生素和有机氮等营养物质。

④几种微生物培养时的特殊需求：培养乳酸杆菌时；需要添加维生素；培养霉菌时，需要将培养基调至酸性；培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性；培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。

选择培养基：在培养基中加入某种化学物质；以抵制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。

【详解】

A；本实验并不是为了分离获取纤维素分解性细菌；而是为了鉴定甲、乙两种菌是否为纤维素分解性细菌，当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，即使培养基中有除了纤维素外其他的碳源，也不会对实验结果造成干扰，因此实验中所用的培养基不是以纤维素为唯一碳源，A错误；

B；刚果红能与像纤维素这样的多糖形成红色复合物；而不能与其水解产物发生类似反应，乙菌菌落周围呈现透明圈，说明乙菌能将纤维素分解，使纤维素的水解产物无法与刚果红形成红色复合物，故乙菌属于纤维素分解性细菌，B正确；

C；微生物培养的关键是防止菌污染；C正确；

D；培养细菌时；需要将培养基调至中性或弱碱性，D正确；

故选A。8、A【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

【详解】

A；蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求；对蛋白质的结构进行设计改造，A正确；

B；经蛋白质工程改造后的酶的基因发生了改变；因此经蛋白质工程改造后的两种酶改变氨基酸这一性状可以遗传，B错误；

C；利用基因工程技术可以改变基因上特定位点的核苷酸序列；进而实现对蛋白质的改造，C错误；

D；要对蛋白质的结构进行改造；必须通过改造或合成基因来完成，D错误。

故选A。二、多选题(共8题，共16分)9、A:B【分析】【分析】

1；DNA粗提取和鉴定过程中破碎动植物细胞；获取含DNA的滤液区别：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

2；影响DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素很多；包括DNA分子大小和构型、琼脂糖浓度、所加电压、电泳缓冲液的离子强度等。

【详解】

A；微生物发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件；因为环境条件的变化不仅会影响菌种的生长繁殖，而且会影响代谢产物的形成，A正确；

B；用菜花替代鸡血作为实验材料；其实验操作步骤不完全相同，如植物细胞有细胞壁，破碎细胞时需要研磨并加入食盐和洗涤剂，B正确；

C；为避免外源DNA等因素的污染；PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌，C错误；

D；用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时；DNA分子的迁移速率与琼脂糖的浓度、DNA分子大小及构型等因素有关，D错误。

故选AB。

【点睛】

本题考查发酵技术、DNA和蛋白质技术等相关知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验需要采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。10、A:C【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制性内切核酸酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶；A正确；

B；DNA连接酶只能催化具有互补黏性末端或平末端的DNA片段之间形成磷酸二酯键；B错误；

C；质粒上必须有标记基因才可作为载体；便于筛选含有目的基因的受体细胞，C正确；

D；限制性内切核酸酶的作用是不切割自身DNA分子；只切割外源DNA，以保护自身DNA的安全，D错误。

故选AC。

【点睛】11、A:B:C【分析】【分析】

分析图示可知；将卵子去核，然后注入Oct4转基因小鼠的精子，用氧化锶激活，可使该换核的细胞形成雄原核，并分裂分化形成单倍体囊，最终形成孤雄单倍体胚胎干细胞。

【详解】

A；由于桑椹胚期的细胞没有出现分化；桑椹胚前的细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，是全能性细胞，A正确；

B；从题干可知；Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用，可推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老，B正确；

C；过程③胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；体积较小，细胞核大，核仁明显，C正确；

D；卵巢中取出来的是未成熟的卵细胞；要进行培养到减数第二次分裂的中期才能受精，不能直接用于过程①，D错误。

故选ABC。

【点睛】12、A:B【分析】分析题图：图示为“低乳糖奶牛”的培育过程；首先采用基因工程技术将“乳糖分解酶基因”导入受体细胞，再采用核移植技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术获得转基因克隆动物。

【详解】

A；犊牛的细胞核基因来自黑白花奶牛；但其细胞质基因来自卵母细胞，因此其性状与黑白花奶牛的性状不完全一致，A错误；

B；核移植的受体细胞一般选用MⅡ期卵母细胞；进行去核时，通过显微操作去除卵母细胞中的核，用微型吸管可一并吸出细胞核与第一极体，B错误；

C；犊牛的出生属于细胞核移植技术的应用；体现了动物细胞的细胞核具有全能性，C正确；

D；体细胞核移植技术可用于人类组织器官的移植和保护濒危动物；D正确。

故选AB。

【点睛】13、C:D【分析】【分析】

1；根据《上海市生活垃圾管理条例》第四条本市生活垃圾按照以下标准分类规定：湿垃圾；即易腐垃圾，是指食材废料、剩菜剩饭、过期食品、瓜皮果核、花卉绿植、中药药渣等易腐的生物质生活废弃物；干垃圾，即其它垃圾，是指除可回收物、有害垃圾、湿垃圾以外的其它生活废弃物。

2；由题图信息分析可知；该实验的目的是为了筛选获得高效降解淀粉的菌种，在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，属于选择培养基，接种方法是稀释涂布平板法。

【详解】

A；剩余饭菜、果皮果壳属于湿垃圾；玻璃碎片属于干垃圾，A错误；

B；菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对淀粉的分解能力不同；透明圈大的分解能力强，B错误；

C；抗生素或电池等会抑制微生物生长；不利于微生物的分解，C正确；

D；图中出现透明圈；因此将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法，D正确。

故选CD。14、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。15、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已经发展了三代：

第一代疫苗指的是灭活疫苗和减毒活疫苗；通过体外培养病毒，然后用灭活的病毒刺激人体产生抗体，它是使用最为广泛的传统疫苗；

第二代疫苗又称为亚单位疫苗；是通过基因工程原理获得的具有免疫活性的病原特异性结构蛋白，刺激人体产生抗体；

第三代疫苗是核酸疫苗；又称基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是将编码某一抗原蛋白的基因作为疫苗，注射到人体中，通过正常的人体生理活动产生抗原蛋白，诱导机体持续作出免疫应答产生抗体。

【详解】

A；该疫苗是基因重组疫苗；需要将腺病毒载体和新冠病毒的基因进行连接，所以该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶，A正确；

B；受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后；体内能产生分泌特定抗体的浆细胞，B错误；

C；主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性；C正确；

D；新冠肺炎康复患者体内产生了新冠病毒抗体和和相应的记忆细胞；可以不注射该疫苗，D正确。

故选ACD。16、B:C【分析】【分析】

据图可知，逆转录酶可以催化以RNA为模板合成cDNA，还可催化以cDNA为模板合成其互补DNA；RT-PCR过程中需要a、b两种引物。

【详解】

A；逆转录酶催化合成DNA；所以具有DNA聚合酶的能力，A正确；

B、③PCR过程需要引物a、b；因为后续的模板链序列既有与靶RNA一致的，也有与cDNA一致的，B错误；

C；RT-PCR可检测基因的转录情况从而推知基因的表达水平；C错误；

D；通过设计RNA的特异性引物进行RT-PCR检测新冠病毒等RNA病毒；D正确。

故选BC。三、填空题(共5题，共10分)17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】液体发酵固体发酵葡萄糖定量18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因文库人工合成PCR技术19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞膜流动性植物细胞全能性纤维素酶果胶酶21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】离心、振动、电刺激聚乙二醇四、实验题(共4题，共8分)22、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。（6）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，能大量制备。

【详解】

（1）抗体参与体液免疫；科研人员将纤维蛋白作为抗原注射到小鼠体内，激活体液免疫过程，制备出抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）。该项技术为单克隆抗体的制备，属于细胞工程范畴，即B正确，ACD错误。

故选B。

（2）制备抗纤维蛋白的单克隆抗体5B8的基本技术流程为：先从注射了纤维蛋白的小鼠脾脏中获取的相应的B细胞（能产生特定的抗体）与小鼠的骨髓瘤细胞融合获得杂交细胞；用特定的选择培养基进行筛选；获得杂交瘤细胞；对杂交瘤细胞进行克隆和抗体检测，获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞；获得的杂交瘤细胞在体外环境或小鼠腹腔内培养；然后从细胞培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体5B8。

（3）①活性氧（ROS）是氧分子正常代谢的副产物；NADPH氧化酶是催化细胞内产生ROS的主要酶。由于细胞中GAPDH蛋白表达量稳定且含量丰富，在实验中可作为标准参照，排除实验操作等无关变量对结果的影响。

②对比1和2组检测结果；细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量升高，说明纤维蛋白提高了吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，使其对神经元产生毒害。通过对比1；2、3组结果发现，经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明5B8能减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS的含量的影响，使两种物质含量下降。

③由第②题可知；经5B8处理后，NADPH氧化酶和ROS的含量会下降，说明单克隆抗体588与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，因此单克隆抗体5B8对多发性硬化症有明显疗效。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和抗纤维蛋白的单克隆抗体（5B8）的作用机理，意在考查考生对所学知识的理解和应用能力。【解析】抗原体液B相应的B淋巴细胞；选择培养基无关变量（如实验操作等）1和2提高吞噬细胞中NADPH氧化酶和ROS的含量1、2、3组（2、3组）减轻纤维蛋白对NADPH氧化酶和ROS含量的影响，使两种物质含量下降单克隆抗体5B8与纤维蛋白结合，可以降低吞噬细胞NADPH氧化酶的量，进而降低ROS产量，从而减小对神经元的伤害，起到治疗多发性硬化症的作用。23、略

【分析】【分析】

据图分析；图甲为可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种的培育过程，其中①表示基因表达载体的构建过程，是基因工程的关键步骤；②③表示分离纯化工程酵母菌菌种。乙图为稀释涂布平板法得到的菌落，但是其菌落没有均匀分布，说明其涂布是不均匀的。

【详解】

（1）该实验的目的是获得可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种；因此其培养基应该以淀粉为唯一碳源；②；③过程为分离纯化工程酵母菌菌种，多次重复筛选可以提高分解淀粉能力强的工程酵母菌菌种的纯度。

（2）图乙显示平板培养后；形成了多个菌落，因此该同学的接种方法是稀释涂布平板法；但是菌落分布不均匀，集中分布在一定区域，说明是涂布不均匀导致的。

（3）与普通酵母菌相比；在以淀粉为原料的培养条件下，工程酵母菌更能够高效地利用淀粉，其分解淀粉产生葡萄糖的能力更强，呼吸作用产生二氧化碳速率更快，所以需要先排气。

（4）凝胶色谱法分离的原理是相对分子质量较大的蛋白质分子；不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动的速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内部的通道，通过的路程较长，移动的速度较慢。因此，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较小。

【点睛】

解答本题的关键是掌握基因工程的基本步骤、微生物的培养和分离、蛋白质的分离等相关知识，能够根据实验目的分析培养基成分，并能够根据工程菌的特点分析其代谢情况。【解析】淀粉进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌（或高效利用利用淀粉的工程酵母菌）稀释涂布平板法涂布不均匀工程酵母工程菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，工程菌呼吸强度大，产生CO2多小24、略

【分析】【分析】

单克隆抗体制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

（1）

据图分析，科研人员利用基因工程将目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建基因表达载体，并导入用CaCl2处理的大肠杆菌细胞中；使目的基因增殖并表达可获取大量膜蛋白。

（2）

杂交瘤细胞由淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成；其合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径。“HAT培养基”有筛选作用，在添加了氨基喋吟的HAT培养基中，杂交瘤细胞“D途径”虽然被氨基嘌呤阻断，但可通过“S途径”合成DNA，不断分裂增殖；而淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，而不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，也不生长。

（3）

带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合；可起到标记目标微生物的作用。

（4）

双特异性单克隆抗体借助单克隆抗体的导向作用；能将药物定向带到癌细胞所在的位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。体现的是双特异性单克隆抗体在治疗疾病方面起到运载药物的用途。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和动物细胞的培养，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养了学生分析图示、获取信息、解决问题的综合应用的能力。【解析】（1）基因的表达载体Ca2+或CaCl2

（2）HAT培养基淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力；故不能在HAT培养基中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养基中因DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，而不生长。

（3）标记目标微生物。

（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞治疗疾病（运载药物）25、略

【分析】【分析】

1；PCR扩增的过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链；引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。

2；构建基因表达载体过程时；目的基因应插在启动子和终止子之间才能正常表达。

【详解】

（1）PCR过程中每次循环两次升温（变性和延伸）和一次降温（复性）；其中降温（复性