2025年湘教版选择性必修3生物下册月考试卷

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。细胞人染色体编号株12345678A株＋＋＋＋－－－－B株＋＋－－＋＋－－C株＋－＋－＋－＋－A、B、C株均有b酶的活性A、B、C株均无e酶的活性A、B株有c酶的活性而C株无B株有a酶的活性C株有d酶的活性据此分析，可以得出的结论是（）A.杂种细胞中会发生人细胞染色体的随机丢失B.杂种细胞中最多有8条染色体来自人的细胞C.a酶位于3号染色体，b酶位于1号染色体D.d酶位于7号染色体，e酶位于1号染色体2、下列关于生物工程发展中的科学史实或理论基础的叙述，错误的是（）A.我国成功培育的克隆猴适合用作研究人类疾病的模型动物B.体外成功培养神经元为动物细胞全能性提供了证据支持C.密码子的通用性是转基因得以实现的理论基础之一D.DNA分子半保留复制机制是PCR技术的理论基础3、下列叙述中，不正确的是（）A.每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体B.在动物细胞培养过程中，细胞培养应在含5%CO2的培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pHC.哺乳动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植D.植物组织培养、动物细胞培养、植物体细胞杂交和动物细胞融合得到的都只是细胞或杂交（种）细胞4、某学习小组以葡萄为材料进行果酒、果醋发酵实验，下列相关叙述合理的是（）A.在果酒发酵后期拧松瓶盖的间隔时间可适当延长B.无氧条件下，醋酸菌可将乙醇转化成醋酸C.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐增大D.果醋发酵所需醋酸菌来自果酒发酵的发酵液5、如图是“人造肉”的细胞培养肉系统示意图。该系统的运作涉及细胞工程领域中的（）

①动物细胞和组织培养技术②细胞融合技术③细胞核移植技术④干细胞技术。

A.①②B.②③C.③④D.①④6、下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程；有关叙述不正确的是（）

A.用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长B.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原C.利用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等方法均可诱导细胞融合获得乙D.丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁7、如图为核移植实验过程示意图，根据图示分析下列叙述正确的是（）

A.去核的时期应该在MⅠ期，原因是该时期第一极体和卵细胞核较近B.桑葚胚细胞应提取出细胞核后，尽快注入去核的卵母细胞中C.电融合法可促使重构胚形成，后期还需要其他方法激活重构胚D.受体动物应选择与供体相同的品种，防止出现免疫排斥现象8、人乳铁蛋白是乳汁中主要的铁结合蛋白，可提高人体吸收铁的能力，增强免疫力。研究者通过生物工程技术制备山羊乳腺生物反应器，过程如图。下列相关叙述错误的是（）

A.①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子B.②过程通常在显微镜下进行去核、注入等操作C.该过程培养的山羊所有组织细胞均能分泌人乳铁蛋白D.该过程利用了转基因、胚胎移植等工程技术9、下列过程不属于克隆的是（）A.单个大肠杆菌形成单菌落B.壁虎断尾后长出新尾巴C.PCR扩增抗除草剂基因D.植物组织培养技术扩繁兰花评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载：“泡菜之水，用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。如有霉花，加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列说法错误的是（）A.“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的是彻底灭菌B.“霉花”主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往来自蔬菜C.“坛沿外水须隔日-换，勿令其干”的目的是保证坛内适宜湿度D.制作泡菜的时间越长，亚硝酸盐的含量越高11、甲图为牛胚胎移植示意图，乙图为胚胎发育某时期示意图，下列叙述错误的是（）

A.甲图中冲卵的目的是获取受精卵B.对供体母牛和受体母牛注射性激素，进行同期发情处理C.性别鉴定时需将图乙②处细胞做染色体分析D.受精卵形成乙的过程中进行卵裂，每个细胞的体积变小12、植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，现有两种烟草硝酸还原酶缺失突变体，为探究两种突变体的突变是否在同一基因位点上，研究人员将两种突变体进行植物体细胞杂交。下列分析正确的是A.诱导两种突变体进行植物体细胞杂交时应先用纤维素酶和果胶酶酶解得到原生质体B.可用高Ca2+-高pH诱导原生质体融合，细胞膜融合是细胞融合完成的标志C.若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长，说明两种突变体的突变位点相同D.两种突变体均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长13、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖14、下图是利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白的操作流程；其中细胞①已导入人血清白蛋白基因。相关叙述正确的是（）

A.细胞①的培养液中需要加入胃蛋白酶B.“卵母细胞”应在体外培养成熟C.图示“细胞②→早期胚胎”发生输卵管中D.该技术与试管牛培育的主要原理不同15、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖16、北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述不正确的是（）

A.过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D.应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其表达评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)17、选用去核______的原因：卵（母）细胞______；卵（母）细胞______。18、20世纪70年代以后；以基因工程为代表的一大批生物技术成果，进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，但是与其他高新技术一样，生物技术也同样具有双刃剑效应。如同其他高新技术一样，转基因成果和转基因技术也需要你的理性看待。在转基因生物安全方面；

（1）你认为转基因生物有哪些优点，①____________②___________③__________。

（2）你认为转基因生物有哪些缺点，①____________②___________③__________。

（3）你对于转基因生物的态度是__________。19、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有___________和___________发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行________的测定。20、假设PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有个这样的_______个DNA片段，一共需要加入______________个引物。21、为了避免外源DNA等因素污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行_____________。而使用的缓冲液并在__________℃存储。评卷人得分四、判断题(共4题，共28分)22、目前，种植的转基因作物中以水稻和小麦最多，其次是转基因棉花和油菜（______）A.正确B.错误23、酿酒酵母的最适生长温度为30度。()A.正确B.错误24、要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造氨基酸序列来完成。()A.正确B.错误25、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。（选择性必修3P111）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共32分)26、最新调查显示手机每平方厘米就驻扎了12万个细菌；这个数字足以令马桶坐垫上的细菌队伍汗颜。某生物兴趣小组的同学，利用手机表面的细菌进行了相关的培养研究。

（1）为研究手机表面微生物的种类；用稀释涂布平板法进行细菌的纯化和分离。下面的四种菌落分布情况中，哪些选项是通过稀释涂布平板法得到的_____

（2）研究小组用琼脂扩散法测定玫瑰精油对手机表面细菌的抑制情况。该方法的操作步骤如下：首先制备牛肉膏蛋白胨平板，用涂布器将5种细菌分别接种到5个平板上，得到细菌平板。然后制备直径为5mm的滤纸圆片，采用_____灭菌法处理，将灭菌的滤纸片部分放入适宜浓度的玫瑰精油中，对照组放入_____中，浸泡10min，后将滤纸片放在5个细菌平板表面。最后将平板放入恒温培养箱中倒置培养48小时。通过测量_____来检测玫瑰精油对5种细菌的抑制效果。27、铁皮石斛是我国名贵中药；生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：

在固体培养基上；PLBs的重量；生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：

⑴选用新生营养芽为外植体的原因是_____，诱导外植体形成PLBs的过程称______。

⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在_______，_______，____。

⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量；但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题：

①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基______后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为______。

③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的_____时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。28、保加利亚杆菌和嗜热链球菌是工业生产酸奶的常用菌种。酸奶制品在包装；运输和贮藏过程中；易受酵母菌、霉菌等耐酸性真菌污染。为了筛选出抗真菌污染的乳酸杆菌作为酸奶的辅助发酵菌，进行如下实验。

（1）将待选的多株乳酸杆菌接种到MRS____________（填“固体”或“液体”）培养基中，进行扩大培养。培养过程需提供密闭环境，原因是_____________。培养后收集发酵上清液待用。

（2）向放有牛津杯（小金属环）的培养皿中倒入含耐酸性真菌作指示菌的培养基（图1），待培养基完全凝固后拔出牛津杯，培养基上留下直径相等的小孔。往孔中加入等量不同乳酸杆茵的发酵上清液，待其扩散后置于恒温箱中培养24h，测量抑菌圈（图2）的大小。选取____________的乳酸杆菌F作为目标菌种。

（3）研究者认为还要用___________做指示菌；重复上述实验，确认F菌确实可作为工业生产酸奶的辅助发酵苗。

（4）为研究F菌在酸奶体系中对耐酸性真菌的抑制效果；进行了如下实验。

①霉菌污染实验：

将添加了1×106、1×107单位F菌发酵后的酸奶作为实验组（各3杯平行样品），恒温放置28d，每7天肉眼观察一次，记录杯中酸奶表面是否有霉菌生长。请设计一个记录原始实验结果的表格或呈现最终实验结果的统计表格（二选一，要标注表格名称）。___________________________

②酵母菌污染实验：

在添加1×106、1×107单位F菌发酵所得的酸奶中接种等量酵母菌，4℃下储藏28d后，用稀释涂布法对酵母菌进行计数，结果表明F菌对酵母菌具有较高的抑菌率。不宜采用直接观察法研究酸奶中酵母菌的生长情况，原因是________________。

（5）请提出一个有关F菌作为酸奶发酵辅助菌的后续研究方向。_______________________29、柑橘溃疡病是由地毯草黄单胞杆菌引起的；发生在柑橘的一种病害；植株受害后会发生落叶、落果，严重时叶片落光，整株枯死。利用基因工程将来自水稻的Xa27基因导入柑橘可获得抗柑橘溃疡病的植株，利用植物组织离体培养技术则可培育无病毒植株。回答下列问题：

(1)为了获得脱毒苗，通常可以选取植株______附近的组织进行离体培养，选取该部位组织的原因是______。

(2)如图1表示科研人员利用柑橘幼苗获得抗病转基因植株的过程：

①基因表达载体必需的结构除复制原点、启动子、终止子、目的基因外，还有______。

②共培养时，Ti质粒的作用是______。

③共培养后，要利用选择培养基进行培养，目的是______。

④再分化过程中，诱导愈伤组织生根、生芽的先后顺序为______。

⑤从个体生物学水平鉴定柑橘再生植株时可采用______（填具体操作）的方法。经鉴定有几棵植株没有抗病的能力，分别提取这几棵植株的DNA，依据______的特异性碱基序列设计引物，扩增后利用______进行检测；结果如图2。

据图2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。评卷人得分六、综合题(共3题，共30分)30、双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合；目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：

（1）图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是______________；与植物体细胞杂交相比，图1中过程②特有的诱导融合的方法是______________。

（2）过程②选用的骨髓瘤细胞没有接触抑制的现象，主要原因是____________，该瘤细胞______________（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。在细胞培养过程中除了提供营养物质外，还需向培养基中添加_________，并将其置于______________的气体环境的培养箱中进行培养。

（3）为选出能产生专一抗体的细胞，将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7-10个细胞/mL，取0．1ml细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有____个细胞，然后筛选出专一抗体检测为_____（选填“阳性”或“阴性”）的细胞进行克隆化培养；该克隆化培养细胞具有的特点为____________________________。

（4）图1过程⑤注射后，方框内需要经过__次筛选；才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。

（5）图2为双特异性抗体分子，下列叙述不正确的有___。

A．该双特异性抗体在核糖体当中合成。

B．双特异性抗体可以在人体内持续发挥作用。

C．该特异性抗体能与人体内各类肿瘤细胞结合。

D．双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合；因而不具有特异性。

（6）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是_____________________。31、除草剂的有效成分草甘膦能够专一地抑制EPSP合酶的活性；从而使植物体内多种代谢途径受到影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，它在除掉杂草的同时也会使作物受损。解决这个问题的方法之一就是培育抗草甘麟的作物。下面是探究“转入外源EPSP合酶基因能否使矮牵牛抗草甘膜”的流程，回答下列问题：

(1)利用目的基因和Ti质粒构建重组Ti质粒时，需用_____等处理。

(2)将重组Ti质粒转入农杆菌中；该步骤中的Ti质粒除了含有目的基因的可转移DNA片段外，还应当具有_____。

(3)利用含有重组Ti质粒的农杆菌侵染细胞后，再通过_____技术培育得到转基因植株。

(4)用_____同时喷洒给实验组植株和对照组植株。实验组植株的含义_____，对照组植株的含义_____。

结果：对照组植株死亡；实验组植株存活，但也受到了影响。

(5)结论：_____。32、β-葡萄糖苷酸酶（GUS）基因来自大肠杆菌。转GUS基因的植物组织浸泡在含有某底物的缓冲液中；GUS能与底物发生反应，使植物组织呈现蓝色。研究人员利用转GUS基因的葡萄植株，以探究干旱条件对葡萄P启动子的功能是否有诱导作用。请回答：

（1）葡萄P启动子是_________识别并结合的位点。欲获得葡萄P启动子，可根据___________设计引物，利用该引物和从葡萄细胞获取的______为模板进行PCR扩增。

（2）将葡萄P启动子与GUS基因等元件构建基因表达载体，利用__________方法将该基因表达载体导入葡萄愈伤组织，葡萄愈伤组织在培养基中经_________后；进而发育形成转基因葡萄植株。

（3）取上述转基因葡萄植株分为A、B两组，A组置于正常条件（无干旱处理）下培养，B组置于干旱条件下培养。一段时间后分别取A、B组葡萄植株幼根，浸泡在含有底物的缓冲液中，观察幼根颜色变化情况。请预测实验现象及相关结论。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、A【分析】【分析】

动物细胞融合时；可以用物理方法(离心；振动、电激)、化学方法(聚乙二醇)、生物方法(灭活的病毒)。动物细胞培养基所需的营养物质有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。细胞株是在10代～50代之间起传代作用的细胞。

【详解】

A；据图分析可知；杂种细胞中会发生人细胞染色体的随机丢失，A正确；

B；杂种细胞中最多有46条染色体来自人的细胞；B错误；

C、B株有a酶的活性，B株特有的人染色体是6号，所以a酶位于6号染色体，同理推测b酶位于1号染色体；C错误；

D；d酶位于7号染色体；e酶位于8号染色体，D错误。

故选A。2、B【分析】【分析】

遗传密码的特性：

一；连续性。

编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读；密码间既无间断也无交叉。

二；简并性。

遗传密码中；除色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子外，其余氨基酸有2；3、4个或多至6个三联体为其编码。

三；通用性。

蛋白质生物合成的整套密码；从原核生物到人类都通用。已发现少数例外，如动物细胞的线粒体；植物细胞的叶绿体。密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。

四；摆动性。

转运氨基酸的tRNA的反密码需要通过碱基互补与mRNA上的遗传密码反向配对结合；但反密码与密码间不严格遵守常见的碱基配对规律，称为摆动配对。

五；方向性。

起始密码总位于编码区5′末端；而终止密码位于3′末端，每个密码的三个核苷酸也是5′至3′方向阅读，不能倒读。

【详解】

A；人与猴的亲缘关系较近；我国成功培育的克隆猴适合用作研究人类疾病的模型动物，A正确；

B；细胞全能性是指细胞经分裂和分化后仍具有形成完整有机体的潜能或特性。体外成功培养神经元不能为动物细胞全能性提供了证据支持；B错误；

C；蛋白质生物合成的整套密码；从原核生物到人类都通用密码子的通用性是转基因得以实现的理论基础之一，C正确；

D、pcr技术原理：DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链；在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝，D正确。

故选B。3、D【分析】【分析】

1；植物细胞工程包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术；二者均利用了细胞的全能性；

2；动物细胞培养利用了细胞增殖的原理；动物细胞核移植技术只体现了动物细胞核的全能性。

【详解】

A；每一个效应B淋巴细胞都是受到特定抗原刺激后产生的；只能分泌一种特异性抗体，A正确；

B、动物细胞培养应在CO2的培养箱中进行，5%CO2的作用是调节培养液的pH；B正确；

C；根据核供体的不同；哺乳动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，C正确；

D；植物组织培养可获得试管苗；植物体细胞杂交可获得杂种植株，D错误。

故选D。4、A【分析】【分析】

酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时；酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵。在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵。醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。

【详解】

A；果酒发酵过程中拧松瓶盖的目的是释放二氧化碳；在果酒发酵后期，瓶内的有机物减少以及发酵条件会发生改变等，酒精发酵产生的二氧化碳减少，所以拧松瓶盖的间隔时间可延长，A正确；

B；在糖源、氧气充足的条件下；醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸，醋酸菌属于好氧菌，无氧条件下，醋酸菌会死亡，B错误；

C；果酒发酵过程中；葡萄糖分解变成酒精和二氧化碳，酒精分子质量更小，因此发酵液密度会逐渐减小，C错误；

D；果酒发酵的发酵液中含有酵母菌；果醋发酵所需醋酸菌是接种的醋酸菌，不能来自果酒发酵的发酵液，D错误。

故选A。

【点睛】5、D【分析】【分析】

分析图示可知；从牛的体内取出胚胎干细胞和多能干细胞，以及从猪的体内取出肌肉干细胞，将它们在培养皿中进行动物组织培养，使其细胞数量增加，然后将其转到生物反应器中进一步培养，将培养后的细胞进行物理成型加工，即可得到定制化人造肉。

【详解】

根据上述分析可知；图中涉及了①干细胞的提取和培养；④动物细胞和组织培养的技术，未涉及细胞融合和细胞核移植技术，即D正确，ABC错误。

故选D。6、A【分析】【分析】

甲表示抗原；乙表示杂种细胞，丙表示杂交瘤细胞，丁表示能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，两次抗体检测：专一抗体检验阳性。

【详解】

A；用特定的选择培养基对乙筛选；自身融合的细胞以及未融合的细胞均不能生长，A错误；

B；实验目的是制备抗人体胃癌的单克隆抗体；因此给小鼠注射的甲应是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原，B正确；

C；诱导动物细胞融合可用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法；C正确；

D；丙为杂交瘤细胞；为了筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁，D正确。

故选A。7、C【分析】【分析】

受精前的准备阶段：

（1）准备阶段1-精子获能；刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力。

（2）准备阶段2-卵子的准备；动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。

【详解】

A；去核的时期应该在MⅡ期；A错误；

B；由图可知；桑葚胚细胞不需要提取出细胞核，可直接注入去核的卵母细胞中，B错误；

C、电融合法可促使重组胚胎形成，后期还需要其他方法（如电刺激、Ca2+载体；乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重组胚胎；C正确；

D；受体动物应选择与供体相同的品种；一般不会出现免疫排斥现象，两者之间无关，D错误。

故选C。8、C【分析】【分析】

基因工程技术的步骤：目的基因的获取；主要有三种方法：基因文库；PCR技术扩增、人工合成；基因表达载体构建，表达载体组成：启动子+目的基因+终止子+标记基因；目的基因导入受体细胞，动物细胞（受体）采用显微注射技术导入，植物细胞（受体）采用农杆菌转化法或基因枪法或花粉管通道法导入，微生物细胞（受体）采用感受态细胞法导入；目的基因检测与鉴定，采用分子检测、个体生物学水平鉴定。

【详解】

A；①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子；即RNA酶的结合部位，A正确；

B；②为核移植；通常在显微镜下进行去核、注入等操作，B正确；

C；该过程培养的山羊只有乳腺细胞能分泌人乳铁蛋；C错误；

D；通过生物工程技术制备山羊乳腺生物反应器过程中应用到了转基因（人乳铁蛋白基因导入山羊胚胎成纤维细胞）、核移植（胚胎成纤维细胞和卵母细胞形成重构胚）和胚胎移植（重构胚移入山羊体内）等工程技术；D正确。

故选C。9、B【分析】【分析】

克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖；以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群，通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因后代的过程。

【详解】

A；单个大肠杆菌通过二分裂增殖逐渐形成大肠杆菌单菌落；二分裂是无性生殖，属于克隆，A正确；

B；壁虎短尾后长出新尾巴是细胞分裂、分化的结果；不属于克隆，B错误；

C；PCR技术的原理是DNA复制；其扩增基因的过程即DNA的复制，属于分子水平上的克隆，C正确；

D；利用植物组织培养技术扩繁兰花属于无性生殖；相当于个体水平上的克隆，D正确。

故选B。二、多选题(共7题，共14分)10、A:C:D【分析】【分析】

1；泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌．在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。2、在制作泡菜时所配制的泡菜盐水要煮沸，以杀灭盐水中的微生物，防止杂菌污染。泡菜制作过程中，温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短、容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。

【详解】

A；“泡菜之水；用花椒和盐煮沸”的目的提升泡菜味道、减少水中的溶氧量和消毒杀菌防止杂菌污染，A错误；

B；“霉花”是指泡菜坛表面的一层白膜；主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往来自蔬菜，B正确；

C；“坛沿外水须隔日一换；勿令其干”的目的是保证坛内的无氧环境，C错误；

D；制作泡菜的过程；亚硝酸盐的含量呈先上升后下降的趋势，D错误。

故选ACD。11、A:B:C【分析】【分析】

分析甲图：甲图为牛胚胎移植示意图；胚胎移植的具体过程为：对供；受体的选择和处理；配种或人工授精；对胚胎的收集、检查、培养或保存；胚胎进行移植；移植后的检查；对受体母牛进行是否妊娠的检查。分析乙图：①是滋养层；②是内细胞团；③是囊胚腔。

【详解】

A；冲卵是指把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来；甲图中冲卵的目的是获取早期胚胎，A错误；

B；为使供体和受体处于相同的生理状态；通常需要注射孕激素等激素使其同期发情，B错误；

C；进行性别鉴定需要取囊胚的①滋养层细胞做DNA分析；C错误；

D；受精卵形成乙囊胚的过程中进行卵裂；每个细胞的体积变小，细胞总体积不变或略有减少，D正确。

故选ABC。12、A:D【分析】【分析】

植物体细胞杂交过程：1；酶解法去壁获取原生质体；2、人工诱导原生质体融合；3、再生出新细胞壁；标志着原生质体融合完成；4、经脱分化和再分化过程，通过组织培养把杂种细胞培育成杂种植株。

【详解】

A；植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶；因此先用纤维素酶和果胶酶酶解得到原生质体，A正确；

B；植物细胞融合完成的标志是再生形成新的细胞壁；B错误；

C；若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长；说明两种突变体的植物体细胞杂交后代能够合成硝酸还原酶，即两种突变体的突变基因位点不同，杂交后未突变的基因重新组合在一起，控制了硝酸还原酶的合成，C错误；

D；据题可知；植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，两种突变体烟草硝酸还原酶都缺失，因此均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长，D正确。

故选AD。13、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。14、B:D【分析】【分析】

题图分析：图示操作流程为“利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白”；因此首先需要将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛乳腺细胞，形成细胞①；取出细胞①的细胞核，注入去核牛卵母细胞中，形成细胞②，该过程采用了核移植技术，其原理是动物细胞的细胞核具有全能性；要形成转基因克隆奶牛还需要采用早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；为了得到单个细胞；在细胞①的培养液中需要加入胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，A错误；

B；图中卵母细胞应该在体外培养到减数第二次分裂中期；此时的次级卵母细胞具有受精能力，B正确；

C；图示“细胞②→早期胚胎”为体外培养胚胎的过程；该过程在体外完成，C错误；

D；图示克隆牛的培育主要采用了核移植技术和胚胎移植技术；属于无性生殖；试管牛的培育主要采用了体外受精和胚胎移植技术，属于有性生殖，因此两者产生犊牛的生殖方式不相同，D正确。

故选BD。15、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。16、A:C:D【分析】【分析】

分析题图：①表示反转录法获取目的基因的过程；②表示基因表达载体的构建过程；之后采用农杆菌转化法；将目的基因导入番茄组织块；最后采用植物组织培养技术，将导入目的基因的番茄组织细胞培养成抗冻番茄植株。基因表达载体通常由启动子；目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法能将质粒导入受体细胞。

【详解】

A；过程①是通过人工合成法获取的目的基因；由于真核生物体内的基因含有不能编码蛋白质的序列（内含子），导致逆转录合成的目的基因与原基因有较大的差异，因此人工合成的目的基因不能用于比目鱼基因组测序，A错误；

B；抗冻蛋白的11个氨基酸的重复序列重复次数越多；抗冻能力越强，并不是抗冻基因的编码区重复次数越多抗冻能力越强，抗冻基因编码区依次相连形成的新基因已不是原来的抗冻基因，因此不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B正确；

C；②是基因表达载体的构建过程；基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，可以通过DNA分子杂交或PCR技术检测受体细胞是否含有目的基因，C错误；

D；利用DNA探针技术检测目的基因是否导入到受体细胞；但表达的产物通常是蛋白质，可利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来，D错误。

故选ACD。

【点睛】三、填空题(共5题，共10分)17、略

【解析】①.卵（母）细胞②.比较大，容易操作③.细胞质多，营养丰富。18、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋子生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理是基因重组；其优点是打破了生殖隔离。但由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的结构；基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果。

【详解】

（1）转基因生物具有以下优点：

作物产量高；能解决粮食短缺问题；利用基因工程生产的抗虫作物能够减少农药使用，减少环境污染；利用基因工程培育的生长迅速；营养品丰富的生物，能增加食物营养，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能够生产稀缺的生化药物。

（2）转基因生物受限于科学发展水平；可能会产生以下问题：

转基因生物与同种生物杂交；可能产生重组病菌；重组病毒或超级杂草；导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出对人类或其他生物有害的病原体，可能使疾病的传播跨越物种障碍。

（3）转基因技术取得了巨大的成果；但科学技术是把双刃剑，面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。

【点睛】

本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解。【解析】解决粮食短缺问题减少农药使用，减少环境污染增加食物营养，提高附加值能产生有毒蛋白或新过敏原可能产生重组病菌、重组病毒或超级杂草可能使疾病的传播跨越物种障碍趋利避害不能因噎废食19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】液体发酵固体发酵葡萄糖定量20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2030×22030×2－221、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】高压灭菌—20四、判断题(共4题，共28分)22、B【分析】【详解】

目前，种植的转基因作物中以大豆和玉米最多，其次是转基因棉花和油菜，所以错误。23、B【分析】【详解】

酿酒酵母的最适生长温度是28℃；但在发酵过程中，一般将温度控制在18-30℃，这是因为果皮表面附着的野生酵母菌可能有多种（有多种酵母菌参与了发酵过程），从实践的角度看，大致控制温度范围比较简单易行。

故本说法错误。24、B【分析】【详解】

要对蛋白质的结构进行设计改造；最终必须通过改造基因中的碱基序列来完成，因为基因能指导蛋白质的生物合成。

故错误。25、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等。故该说法正确。五、实验题(共4题，共32分)26、略

【分析】【分析】

1；微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经溶化的培养基倒入培养皿制成平板、划线接种、在恒温箱里培养。在线的开始部分；微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过适量稀释后，均匀涂布在固体培养基表面，经培养后可形成单个菌落。

2；常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。

【详解】

（1）培养微生物的培养基一般含有水；碳源、氮源和无机盐；在除上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

（2）制备固体培养基的基本步骤有：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。等平板冷却凝固后；应将平板倒置，这样做的目的是，防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面对培养基造成污染，又可以避免培养基中的水分过快的挥发。

（3）由图和分析可知；A；B、C为通过稀释涂布平板法得到的菌落（菌落分布较均匀），D为通过平板划线法得到的菌落（菌落分布在线条上）。

故选ABC。

（4）为保持滤纸的干燥；灭菌时应用干热灭菌法，不宜采用高压蒸汽灭菌法。将灭菌的滤纸片分别放入适宜浓度的玫瑰精油和无菌水中（对照）浸泡10min，再将滤纸片放在5个细菌平板表面，最后将平板放入恒温箱中倒置培养48h。通过测量透明圈直径(抑菌圈直径)可判断玫瑰精油对5种供试细菌的抑制效果，抑菌圈越大，说明抑制作用越强。

【点睛】

本题考查微生物的培养、筛选、琼脂扩散法测定玫瑰精油的抑菌情况等知识，要求识记培养基的成分、筛选方法，熟练掌握实验步骤。【解析】ABC干热无菌水透明圈的直径（大小）27、略

【分析】【分析】

【详解】

⑴新生营养芽分裂能力强；细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs；根据题干可知，PLBs，类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。⑵据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，原因可能是生长起始较快，快速生长时间较长，PLBs产量较高。⑶①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA。②根据题干可知，实验50天完成，每10天取样，需要取5次样；空白组不需要重复，处理组，每组重复三次，因此每次取样中，需要记录15个样品中的数据，取样5次共需要测定的样品数为75。③适量的ABA可提高生物碱产量，当样品的PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。

【考点】

本题主要考查植物组织培养和设计实验，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系、具有对一些生物学问题进行初步探究的能力和并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。【解析】细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs细胞的脱分化生长起始较快快速生长时间较长PLBs产量较高灭菌、冷却75PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大28、略

【分析】醇母菌生长时不出现菌丝；无法肉眼直接观察研究F菌抑菌的机理，F茵抑菌物质的化学本质，F菌是否会影响酸奶的感官品质，F菌对人体健康的影响（合理即可）

【分析】

菌种的扩大培养是发酵生产的第一道工序；该工序又称之为种子制备。种子制备不仅要使菌体数量增加，更重要的是，经过种子制备培养出具有高质量的生产种子供发酵生产使用。扩大培养一般选液体培养基，因为液体培养基可与菌种充分接触。

【详解】

（1）将待选的多株乳酸杆菌接种到MRS液体培养基中；进行扩大培养。培养过程需提供密闭环境，原因是乳酸菌是厌氧型微生物/为乳酸菌创造无氧环境。培养后收集发酵上清液待用。

（2）据题意分析可知；选取抑菌圈较大的乳酸杆菌F作为目标菌种，因为抑菌圈大，说明其抑制真菌的能力强。

（3）研究者认为还要用保加利亚杆菌和嗜热链球菌做指示菌；重复上述实验，确认F菌确实可作为工业生产酸奶的辅助发酵苗。

（4）为研究F菌在酸奶体系中对耐酸性真菌的抑制效果；进行了如下实验。

①霉菌污染实验：依据实验的对照原则；还应设置空白对照组，且同样设3杯平行样品，其它操作及观察同实验组，具体图表见答案。

②酵母菌污染实验：不宜采用直接观察法研究酸奶中酵母菌的生长情况；原因是醇母菌生长时不出现菌丝，无法肉眼直接观察.

（5）请提出一个有关F菌作为酸奶发酵辅助菌的后续研究方向:研究F菌抑菌的机理；F茵抑菌物质的化学本质，F菌是否会影响酸奶的感官品质，F菌对人体健康的影响。

【点睛】

本题主要考察微生物培养的相关知识，其中准确理解微生物培养的步骤，是解题的关键。【解析】液体乳酸菌是厌氧型微生物/为乳酸菌创造无氧环境抑菌圈较大保加利亚杆菌和嗜热链球菌记录原始实验结果表格。

。组别。

杯号。

放置时间（天数）

0

7

14

21

28

21

28

对照组。

1

2

3

实验组1（1×106单位）

1

2

3

实验组2（1×107单位）

1

2

3

呈现实验结果的统计表格。

。组别。

放置时间（天数）

0

7

14

21

28

28

对照组。

实验组1

实验组2

29、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步骤：①目的基因的获取和筛选；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定；

2；植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少；甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。

【详解】

（1）为了获得脱毒苗；通常选取植株茎尖（或顶端分生区附近的组织）进行离体培养，选取该组织的原因是此处病毒极少甚至无病毒。

（2）①基因表达载体上除有复制原点；启动子、终止子、目的基因外；还有标记基因（便于筛选目的基因）；

②农杆菌Ti质粒上的T-DNA片段可以携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上；

③选择培养的目的是筛选出含有目的基因的柑橘细胞；

④先诱导生芽有利于生根；故再分化阶段，需要先诱导愈伤组织生芽，待长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗；

⑤在个体生物学水平可用接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）的方法，观察植株是否患有柑橘溃疡病来直接鉴定再生植株；分析再生植株没有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依据Xa27基因（目的基因）的特异性碱基序列设计引物，扩增后用（凝胶）电泳分离PCR产物进行检测；植株B、C没有出现条带，则可能是因为没有导入目的基因；植株A、E、F出现条带但不具有抗病能力，则可能是因为导入植物细胞的目的基因不能转录或转录后未翻译或翻译出的蛋白质没有活性等。【解析】(1)茎尖（或顶端分生区）此处病毒极少甚至无病毒。

(2)标记基因携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上筛选出含有目的基因的植物细胞先诱导生芽，再诱导生根接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）Xa27基因（凝胶）电泳导入植物细胞的目的基因不能表达（或不能转录，转录后不能翻译，翻译出的蛋白质没有活性等，合理即可）没有导入目的基因六、综合题(共3题，共30分)30、略

【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞（甲）；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞（乙）；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞（丙）；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

（1）图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠产生特异性免疫反应；进而产生相应的B淋巴细胞；与植物原生质体融合（方法有物理方法和化学方法）相比，诱导动物细胞融合特有的诱导融合的方法是用灭活的病毒处理。

（2）因为骨髓瘤细胞内原癌基因和抑癌基因发生了突变，导致细胞膜表面的糖蛋白减少，从而具有在体外培养条件下无限增殖的能力，没有接触抑制现象；在HAT培养基上只有杂交瘤细胞能存活，故骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上生长；在细胞培养过程中除了提供营养物质外，还需向培养基中添加动物血清等物质，并将其置于95%的空气、5%的CO2培养箱中培养。

（3）筛选出专一抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞进行克隆化培养时；由于要使每个孔内的细胞不多于一个，从而达到单克隆培养的目的；此后还要经过专一抗体检测，选出阳性的细胞进行克隆化培养；该克隆化培养细胞具有的特点为既能无限增殖，又能产生特异性抗体（或既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体）。

（4）为制备单克隆抗体；需将癌胚抗原注射到小鼠体内，以此获取B淋巴细胞。为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，至少需要2次筛选才能达到目的，第一次筛选获得杂交瘤细胞，第二次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

（5）A；抗体的本质为蛋白质；该双特异性抗体在核糖体当中合成，A正确；

B；双特异性抗体有一定的时效；不能长期有效发挥作用，B错误；

C；该特异性抗体具有专一性；不能与人体内各类肿瘤细胞结合，C错误；

D；双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合；具有特异性，D错误。

故选BCD。

（6）与直接使用长春碱相比；将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是双特异性单克隆抗体能将抗癌药物(长春碱)定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量，相当于“生物导弹”。

【点睛】

本题结合图解，考查动物细胞培养及其应用，要求考生识记动物细胞培养的过程及条件；识记诱导动物细胞融合的方法；掌握单克隆抗体的制备过程，能结合所学