2025年浙教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年浙教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述错误的是（）A.这条技术路线利用的原理是植物细胞的全能性B.生根时，培养基通常应含2，4-D等生长素类调节剂C.出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控D.在愈伤组织培养基中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞2、新型冠状病毒的检测主要包含核酸检测、抗体检测、抗原检测等几种方法。其中利用实时荧光RT-PCR技术检测新型冠状病毒特异性核酸序列是最常用的方法。RT-PCR是将逆转录（RT）、PCR以及荧光标记等相结合的技术。下列说法错误的是（）A.与抗体检测方法相比，核酸检测能够检测到早期患者和无症状感染者B.利用上述技术检测新型冠状病毒时，PCR的模板实际上是逆转录得到的cDNAC.利用上述技术检测新型冠状病毒时，逆转录酶在每次循环中都能够发挥作用D.RT-PCR反应中需加入样品、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、引物、逆转录酶等3、CCR5是HIV入侵人体T细胞的主要辅助受体之一。有科学家为了使婴儿一出生就具有抵抗艾滋病的能力，通过基因编辑破坏了受精卵中的CCR5基因，该做法引起了民众普遍的担忧。下列各项不属于担忧依据的是（）A.CCR5基因可能还参与了其他生理过程的调控B.基因编辑技术有可能因编辑对象错误（脱靶）造成不可预知的后果C.被编辑个体受其他疾病感染的风险可能会提高D.该技术虽然符合人类伦理道德，但可能存在潜在的安全风险4、甘薯由于能增强免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等越来越被人们喜爱。但甘薯属无性繁殖作物，同时又是同源六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相关操作不合理的是（）A.利用组织培养形成的胚状体制作人工种子，解决种苗用量大、成本高的问题B.利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高C.利用原生质体融合实现体细胞杂交，可以克服杂交不亲和，充分利用遗传资源D.利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，大大缩短育种年限5、科学家米尔斯坦和科勒设计了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，如图为其实验流程图，c为杂交瘤细胞，下列相关的叙述或说法中，不正确的是（）

A.a是骨髓瘤细胞，①诱导融合不同于植物体细胞杂交的方法是灭活病毒诱导法B.制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是它能分泌多种特异性抗体C.②表示在选择性培养基上进行培养，③需要进行抗体阳性检测D.用放射性同位素标记的单克隆抗体可对肿瘤细胞进行靶向放疗6、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。治疗性克隆是指通过克隆技术获得重组胚胎，然后从早期胚胎中分离出胚胎干细胞，使之定向分化为特定的细胞、组织和器官，用于替代疗法。下列叙述错误的是（）A.生殖性克隆需将细胞核移植到去核卵母细胞中B.生殖性克隆需借助早期胚胎培养技术C.治疗性克隆需借助胚胎移植技术D.治疗性克隆需要的胚胎干细胞可来自囊胚7、某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为3盘，一盘取样冷藏，一盘使用公筷，一盘不用公筷，实验过程如下图。下列相关操作或叙述错误的是（）

A.配制培养基X需采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌B.计数时应选择菌落数在30~300之间的平板C.在固体培养基X上用涂布器接种细菌D.固体培养基X对菜品中的细菌有选择性8、下图表示利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）做的研究；下列相关说法正确的是（）

A.a过程表示基因工程，其核心步骤是将目的基因导入受体细胞B.b过程可增加ES细胞的数量，并且维持细胞不分化的状态C.c过程表示早期胚胎培养，发育到囊胚期的细胞均具有发育的全能性D.d过程移入代孕小鼠的胚胎能够存活，是因为胚胎尚未与母体建立组织上的联系，处于游离状态9、朋友圈中经常有一些与生物学有关的说法，有些有一定的科学依据，有些违反生物学原理。以下说法中有科学依据的是（）A.北方售卖的香蕉往往需要用乙烯催熟，儿童食用这种香蕉会导致性早熟B.癌细胞主要进行无氧呼吸会消耗大量葡萄糖，可以通过饥饿来治疗癌症C.转基因食品中含有外源基因，食用后能进入人体细胞并改变人体遗传物质D.添加了蛋白酶的加酶洗衣液，用于蚕丝制品的洗涤时会对衣物造成损伤评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)10、为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。下列不符合生物技术的安全性和伦理问题的是（）A.利用生物技术改造工程菌获得大量的抗生素B.克隆技术可应用到器官移植但不能进行人体克隆C.中国反对生物武器，但在特殊情况下可以生产生物武器D.基因编辑技术不仅可用于疾病预防领域研究，也可用于编辑婴儿11、下列关于单克隆抗体的叙述中，正确的是（）A.制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用B.单克隆抗体特异性强、纯度高、产量大、灵敏度高C.工业化制备单克隆抗体一般通过体内培养获得D.单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应T细胞形成的杂交瘤细胞产生的12、某些细菌能产生β-内酰胺酶水解抗生素；给抗感染治疗带来很大困难。利用检测试条可检测细菌是否产β-内酰胺酶，试条左右两侧对称含有一定浓度梯度的抗生素，并在一侧添加克拉维酸（一种β-内酰胺酶抑制剂）。将两个含不同抗生素的检测试条放置在涂布有待检菌株的培养基上，培养一段时候后结果如下图所示。下列说法正确的是（）

A.抗生素的大量使用会导致产β-内酰胺酶细菌的出现B.由实验结果可知，越靠近试条两端的抗生素浓度越大C.该菌能产生β-酰胺酶，试条1中克拉维酸添加在试条右侧D.使用试条2中所含抗生素治疗该菌感染的效果更好13、野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述正确的是（）

A.图中①②④为完全培养基，③为基本培养基B.A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量C.B的正确操作是用涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在②表面D.经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养14、下列关于土壤中纤维素分解菌的分离与计数，叙述正确的是（）A.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌B.培养基中应含大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养C.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基15、为探究提高“日照蓝莓”品质和产量的新途径，某生物兴趣小组以“日照蓝莓”的主要品种——兔眼蓝莓为实验材料进行脱毒处理，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述正确的是（）A.取材时可选用兔眼蓝莓的芽尖等分生组织作为外植体B.用70%酒精和5%左右次氯酸钠对外植体消毒时，要控制好时间以避免造成伤害C.对分化培养基灭菌前需添加生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类等生长调节剂D.脱毒后的兔眼蓝莓果实体积更大，产量更高，后代个体中更不易被病毒感染16、用来判断选择培养基是否起到了选择作用和培养基是否被污染需要设置的对照组分别是（）A.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C.未接种的该选择培养基D.接种了的该选择培养基17、下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。下列说法正确的是（）

A.若能在细菌B中检测到人的生长激素基因，则说明该基因工程项目获得成功B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的就是导入了重组质粒的细菌C.将人的生长激素基因与质粒A结合的过程共形成了4个磷酸二酯键D.将重组质粒导入细菌B之前，可以用Ca2+处理细菌B18、下列有关小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是（）A.精子在获能液中于37℃、5%CO2条件下培养的目的是使精子获得能量B.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，发育成的个体没有形态学差异C.胚胎干细胞具有自我更新能力和分化潜能，可以分化形成各种组织D.囊胚期细胞开始分化，其增殖过程中可能会发生基因突变和染色体变异评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)19、哺乳动物核移植可以分为______核移植（比较容易）和______核移植（比较难）。20、在筛选纤维素分解菌的过程中，人们发明了___________，这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。刚果红(CongoRed，简称__________)是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成____________，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红一纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的______________。这样，我们就可以通过是否产生________________来筛选纤维素分解菌。21、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。22、胚胎工程。

胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，由______、______、______、胚胎冷冻保存技术和______技术等组成的现代生物技术。23、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。评卷人得分四、判断题(共4题，共16分)24、对微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最广泛和取得实际应用成果最多的领域，是因为微生物具有生理结构和遗传物质简单、生长繁殖快、对环境因素敏感和容易进行遗传物质操作等优点。（选择性必修3P101）()A.正确B.错误25、蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误26、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。（选择性必修3P93）()A.正确B.错误27、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共28分)28、（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点；因此常作为遗传学研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。29、金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌；具有高度耐盐化的特性，在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。某研究小组进行了测定某处土壤中金黄色葡萄球菌数量的实验。回答下列问题：

(1)实验小组选用含7．5%NaCl的牛肉膏蛋白胨培养基培养金黄色葡萄球菌，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是_________（用文字和箭头表示）。培养基中加入7．5%NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选，原因是_________。

(2)在制作血平板时需要等平板冷却后，方可加入血液，以防止_________。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现_________。

(3)土壤是微生物天然的培养基，测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量时，一般采用_________法。为了保证获得菌落数在_________之间适于计数的平板，需要选用一定稀释范围的样品液进行培养。测定土壤中金黄色葡萄球菌、放线菌和真菌的数量时，稀释倍数较低的是_________。实验结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，其原因是_________。30、人的血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大；通常从人血中提取，但由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重，如果应用基因工程等技术，将人的血消白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下：

I．采用良种供体奶牛的卵母细胞和精子；通过体外受精，形成受精卵；

II．将人血消白蛋白基因导入奶牛受精卵；形成重组细胞；

III．电脉冲刺激重组细胞；促使其形成早期胚胎；

Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中；最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题：

（1）实验步骤Ⅰ中，受精时，防止多精入卵的生理反应包括____________________。

（2）实验步骤Ⅱ中，需先构建基因表达载体，将HSA基因与__________等调控组件重组在一起；再导入奶牛受精卵。

（3）实验步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加__________。培养过程需要定期更换培养液，目的是__________。

（4）实验步骤Ⅳ中，应选择性别为__________的奶牛胚胎进行移植；对早期胚胎（如囊胚）进行性别鉴定的常用方法是____________________。移植前还需要检测目的基因是否成功导入受精卵，检测方法是采用__________技术。31、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。评卷人得分六、综合题(共4题，共28分)32、类胡萝卜素具有抗癌；降血脂等多种生物学功能。研究者从海藻中克隆出了催化类胡萝卜素形成的关键酶P的基因；并通过转基因技术获得转P基因烟草植株，相关操作流程如图所示。回答下列问题：

(1)P基因是通过逆转录的方法获得的，该方法所需的模板是__________；将P基因与Ti质粒重组时，需要使用限制酶切割Ti质粒的__________片段；才能借助该片段将P基因转入烟草植株细胞中并插入其染色体DNA上。

(2)流程图中①②处依次是__________、__________。

(3)为检测转基因烟草植株的DNA上是否插入了P基因以及P基因是否转录出mRNA，随机选取转基因苗1～9，检测P基因的有无及P基因的mRNA相对含量，结果如图2、3所示。据图推测，植株__________中可能没有成功转入P基因；依据图3可知，若要继续进行个体生物学水平的鉴定，则最好选择植株__________，理由是__________。

33、现代生物技术常用于筛选特定微生物或突变体等用于工业生产。该过程中培养基的配置；培养条件控制、目的菌筛选等都甚为关键。请回答相关问题。

(1)某小组用两种培养基筛选土壤中能高效降解淀粉的细菌（目标菌）。Ⅰ号培养基：在LB培养基（含有酵母菌提取物；胰化蛋白胨、NaCl）中加入淀粉（5g/L）。

Ⅱ号培养基：氯化钠（5g/L）；硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），淀粉（15g/L）。

①在Ⅰ号培养基中，主要为微生物提供氮源的是________________。

②若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号培养基中，培养一段时间后，不能降解淀粉的细菌比例会下降，其原因是_____________。

③Ⅱ号培养基中加入适量凝固剂后，可用于分离目标菌，接种时，应采用的方法是_________________。

(2)下表是两种细菌在以淀粉为唯一碳源的培养基上培养后测出的相应指标，据表可知细菌___________分解淀粉能力较强，原因是____________。菌种菌落直径：（mm）透明圈直径：（mm）细菌Ⅰ5.111.2细菌Ⅱ8.113.0

(3)进行某些菌种保存时，需要制备空白斜面，其中一个关键步骤就是在灭菌_________________（填“前”或“后”）把LB______________(填“固体”或“液体”）培养基分装到多个试管。34、稗草是稻田间常见的一种杂草；其外形与水稻极为相似，田间除草时很容易遗漏。为减轻耕作者的辛劳，提高水稻的产量，应寻找去除稗草的有效措施。

（1）稗草与水稻争夺_______等（填出2项即可）；会导致水稻产量下降。

（2）研究人员通过实验发现黄腐酸（FA）可影响稗草幼苗的生长；结果见图。可以看出，FA对稗草株高；根长及鲜重的影响与生长素的作用特点相似，做出此判断的依据是：_______。

（3）为进一步确定FA是否通过调控稗草的生长素合成而发挥作用。研究者测定了FA浓度为0．02g·L-1时稗草生长素合成相关基因A；B、D的表达量；实验结果如图。

①检测基因A；B、D的表达量；需提取细胞中的总RNA，在_______酶作用下合成cDNA，然后利用荧光定量PCR技术测定，计算出该基因表达的相对值。

②实验结果表明：_______。推测这三个基因在生长素合成过程中均起_______（选填“促进”或“抑制”）作用。

（4）若要把FA应用于稻田除草，需要考虑的关键性问题包括______。（至少答2条）35、继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后；膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，下图为将基因表达载体导入小鼠细胞后的检测示意图，结合图示回答以下问题：

（1）可选用_______________方法将生长激素基因导入小鼠受体细胞。

（2）要检测转基因小鼠是否培育成功，需要检测的内容是①采用_______________技术检测小鼠染色体DNA上是否插入了目的基因。具体的做法是用_______________作为探针，使探针与基因组DNA杂交，结果显示有_______________，则说明目的基因已经插入染色体DNA中。上图________（填“M”或“N”）中含有目的基因。②检测目的基因是否转录出mRNA。③_______________。

（3）从分离蛋白质的角度分析，乳腺和膀胱哪一个作为转基因动物的生物反应器更好？__________，原因是_____________________________________________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

植物组织培养的过程为：离体的植物组织；器官或细胞经过脱分化形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育形成植株，该过程受基因选择性表达的调控。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的比例影响了细胞分化的方向。

【详解】

A；这条技术路线是植物组织培养技术；利用的原理是植物细胞的全能性，A正确；

B；在植物组织培养中；当生长素用量比细胞分裂素用量比例高时，有利于根的分化，B正确；

C；愈伤组织再分化形成胚状体时；一般先形成芽，再形成根，而分化的实质是基因的选择性表达，C正确；

D；愈伤组织细胞含有细胞壁；加入细胞融合诱导剂不会诱导细胞融合，因此不会得到染色体加倍的细胞，D错误。

故选D。2、C【分析】【分析】

1；PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

2；在反应体系中；首先加热至90～95℃，此时模板DNA在高温条件下变性，即其中的氢键断裂，解开为单链，接着反应体系中温度降低，两种引物分别与解开的两条单链之间形成氢键完成中温复性的过程，然后体系中温度上升体系中的游离的脱氧核苷酸依次连在引物上开始中温延伸过程。

【详解】

A；目前新型冠状病毒的检测方法主要集中在核酸和抗体检测上；因抗体的产生需要一个免疫过程，与抗体检测相比，核酸检测的优点是早期诊断、灵敏度和特异性高等，故核酸检测能够检测到早期患者和无症状感染者，A正确；

B；新冠病毒的遗传物质为RNA；要先将病毒RNA逆转录，再将得到的cDNA进行多聚酶链式反应扩增得到了大量DNA片段，故PCR的模板实际上是逆转录得到的cDNA，B正确；

C；由于PCR反应体系加热至95℃时；逆转录酶会变性失活，因此逆转录酶不能在每次循环中都发挥作用，C错误；

D；RT-PCR技术（聚合酶链式反应）是在实验室以少量样品制备大量DNA的一项生化技术；反应系统中包括微量DNA样品、耐高温的DNA聚合酶、引物、4种脱氧核苷酸、逆转录酶等，D正确。

故选C。

【点睛】3、D【分析】【分析】

HIV通过识别靶细胞表面的受体进入靶细胞；故可以通过敲除CCR5避免HIV入侵。

【详解】

A；CCR5基因可能还参与了其他生理过程的调控；敲除CCR5基因后其他生理过程会受到影响，A错误；

B；基因编辑技术有可能因编辑对象错误（脱靶）造成不可预知的后果；故会引发民众的担忧，B错误；

C；被编辑个体受其他疾病感染的风险可能会提高；会引发民众的担忧，C错误；

D；该技术不符合人类伦理道德；D正确。

故选D。4、B【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同种的植物体细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；植物细胞工程应用之一是利用胚状体包囊人工胚乳和人工种皮制成人工种子；实现大规模生产，从而降低成本，A正确；

B；茎尖等分裂旺盛部位病毒极少或无病毒感染；所以利用茎尖分生组织培养出无病毒且保持优良性状的幼苗，脱毒苗不等于抗毒苗，通过基因工程将抗病毒基因转移至受体细胞从而培育出抗病毒的转基因植物，B错误；

C；通过植物体细胞杂交技术可以实现两个植物物种间的体细胞杂交；得到同时具有两种遗传物质的植物，可以实现种间的杂交，克服了远缘杂交不亲和的障碍，C正确；

D；愈伤组织具有分裂旺盛的优点；适于诱变育种的取材，能提高突变频率，D正确。

故选B。5、B【分析】【分析】

分析题图：a细胞是小鼠骨髓瘤细胞；b表示诱导细胞融合杂交瘤细胞；c表示筛选出的杂交瘤细胞；①过程是细胞融合；②表示在选择性培养基上进行培养，③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养。

【详解】

A、根据单克隆抗体制备的流程判断：a是骨髓瘤细胞、b是杂交瘤细胞；①诱导融合不同于植物体细胞杂交的方法是灭活病毒诱导法，A正确；

B；对于B淋巴细胞来说；每一种B淋巴细胞经特定抗原刺激后只能产生一种特异性抗体，B错误；

C；①是诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程；②表示在选择性培养基上进行培养、筛选能产生单一抗体的杂交瘤细胞的过程，③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养，需要进行抗体阳性检测，C正确；

D；单克隆抗体具有特异性；用放射性同位素标记的单克隆抗体可对肿瘤细胞进行靶向放疗，D正确。

故选B。6、C【分析】【分析】

治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织(皮肤；神经或肌肉等)用于治疗性移植。

生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；通过克隆技术产生独立生存的新个体。

【详解】

A；生殖性克隆需将细胞核移植到去核卵母细胞中构建形成重组细胞；A正确；

B；生殖性克隆需借助动物细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；B正确；

C；治疗性克隆是利用克隆技术生产特定的细胞、组织和器官；用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，以达到治疗疾病的目的，不需要借助胚胎移植技术，C错误；

D；治疗性克隆需要的胚胎干细胞可来自囊胚中的内细胞团；D正确。

故选C。7、D【分析】【分析】

培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水；碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。

【详解】

A；对培养基进行灭菌；通常使用高压蒸汽灭菌法，A正确；

B；稀释的目的是获得菌落数在30-300之间、适于计数的平板；B正确；

C；能够用于菌落计数的接种方法是稀释涂布平板法；则图示中所用接种工具应为涂布器，C正确；

D；研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”；需要统计所有的细菌，所以固体培养基X对菜品中的细菌酶没选择性，D错误。

故选D。8、B【分析】【分析】

分析题图：图示表示利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）做的研究，其中a表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞，b表示胚胎干细胞的培养；c表示早期培养培养过程，d表示胚胎移植。

【详解】

A；a过程表示基因工程；其核心步骤是构建基因表达载体，A错误；

B、b过程可增加ES细胞的数量；并且ES细胞在饲养层细胞上可维持只增殖不分化的状态，B正确；

C；囊胚期的细胞开始发生细胞分化；其中的内细胞团具有全能性，而滋养层细胞不具有全能性，C错误；

D；d过程移入代孕小鼠的胚胎能够存活；是因为受体的生理环境与供体相同，且受体不会对移入的胚胎产生排斥反应，D错误。

故选B。9、D【分析】【分析】

1；乙烯的作用是促进果实成熟；

2；当血糖浓度降低时；可通过肝糖原水解和脂肪等非糖物质转化为葡萄糖进行补充；

3；转基因食品中的外源基因不会因为使用而整合到人的DNA上；

4；酶具有专一性、高效性和作用条件温和的特性。

【详解】

A；乙烯的功能是促进果实成熟；对人的性成熟无影响，A错误；

B；癌细胞主要进行无氧呼吸会消耗大量葡萄糖；饥饿时将有肝糖原水解或脂肪等非糖物质转化为葡萄糖提供，不能通过饥饿来治疗癌症，B错误；

C；转基因食品中含有外源基因；但通过食用不会整合到人体的DNA而改变人体遗传物质，C错误；

D；由于蚕丝的主要成分是蛋白质；所以添加了蛋白酶的加酶洗衣液，用于蚕丝制品的洗涤时会对衣物造成损伤，D正确。

故选D。二、多选题(共9题，共18分)10、C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；可以通过生物合成法、全化学合成法、半化学合成法来产生抗生素；其中生物合成法中可以通过工程菌制造法来产生，A正确；

B；克隆技术是可以克隆器官的；但是不可以人体克隆，禁止生殖性克隆，B正确；

C；中国声明：在任何情况下；不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误；

D；基因编辑技术可用于疾病预防领域研究；但不能用于编辑婴儿，D错误。

故选CD。11、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用；融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体，A正确；

B；单克隆抗体具有特异性强、纯度高、灵敏度高；并可能大量制备的特点，B正确；

C；体内诱生法制备的单克隆抗体需要注入到小鼠的体内；最后从小鼠的腹腔中提取腹水，此方法比较麻烦，而且抗体的量也较少，因此对于工业上需求较多的抗体而言，通常是采用体外培养法，C错误；

D；单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和效应B细胞形成的杂交瘤细胞产生的；D错误。

故选AB。12、B:C:D【分析】【分析】

题干分析；某些细菌能产生β-内酰胺酶水解抗生素，从而产生抗药性。试条两侧含有抗生素，并在试条一侧添加β-内酰胺酶抑制剂（能抑制β-内酰胺酶的活性，从而不能水解抗生素），将其放在不含有抗生素的待测菌株上培养，一段时间后发现，试条1右侧和试条2的左右两侧都出现了抑菌圈，说明该部位的菌株能产生β-内酰胺酶。

【详解】

A；基因突变具有不定向性；抗生素使用之前，产β-内酰胺酶的细菌已经出现，抗生素只是起到选择作用，A错误；

B；由实验结果可知；越靠近试条两端的抑菌圈较大，说明抗生素浓度较大，B正确；

C；该菌能产生β-酰胺酶；使用克拉维酸能抑制该菌产生的β-酰胺酶的活性，进而不能抵抗抗生素，试条1右侧出现抑菌圈，左侧没有出现抑菌圈，说明试条1中克拉维酸添加在试条右侧，C正确；

D；试条2左右两侧的抑菌圈菌大于试条1；说明使用试条2中所含抗生素治疗该菌感染的效果更好，D正确。

故选BCD。

【点睛】13、A:D【分析】【分析】

由题图信息分析可知；图中首先利用培养基扩增菌体，然后在涂布在平板上，再通过影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基；完全培养基；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，据此利用培养基的种类便可以选择出氨基酸突变株。

【详解】

A；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长；氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，根据题干信息和图形分析，图中①②④中含有菌落，①②④为完全培养基，③中影印处无菌落，③为基本培养基，A正确；

B；紫外线可以提高突变的频率；而A操作即培养的目的是提高已经突变菌株的浓度（A操作不能提高突变率），即增加突变株的数量，B错误；

C；B操作是将菌液滴加到培养基表面；再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C错误；

D；从图中可看出；D在③基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养，D正确。

故选AD。14、A:D【分析】【分析】

纤维素分解菌能合成和分泌纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。用以纤维素为唯一碳源的培养基可以筛选出纤维素分解菌。

【详解】

A；木材、秸秆中富含纤维素；故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，A正确；

B；应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌；只有纤维素分解菌能够存活，B错误；

C；接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理；接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基用高压蒸汽灭菌法处理，C错误；

D；菌落只能在固体培养基中形成；菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基，D正确。

故选AD。15、A:B【分析】【分析】

植物组织培养技术：

1；过程：离体的植物组织；器官或细胞(外植体)→愈伤组织→胚状体→植株(新植体)。

2；原理：植物细胞的全能性。

3；条件：①细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等)；②一定的营养(无机、有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素)。

【详解】

A；取材时可选用兔眼蓝莓的芽尖等分生组织作为外植体；这是因为芽尖分裂旺盛，且很少带有病毒，甚至不含毒，A正确；

B；用70%酒精和5%左右次氯酸钠对外植体消毒时；要控制好时间以避免造成伤害，否则外植体会受到损失，导致实验失败，B正确；

C；生长调节剂应该在培养基灭菌后添加；否则高温可能使其失去效果，C错误；

D；脱毒后的兔眼蓝莓果实体积更大；产量更高，后代个体中含病毒较少，但并不是不易被病毒感染，D错误。

故选AB。16、A:C【分析】【分析】

对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用；则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组。

【详解】

根据单一变量原则；对照组需要与选择培养基一样接种；培养，因此用接种了的普通培养基（牛肉膏蛋白胨）和选择培养基进行对照，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基具有选择的功能，作为选择培养基合格的依据；

而培养基是否被污染需要设置的对照是相同的选择培养基但不接种；在相同的条件下培养，观察是否有菌落产生。AC正确。

故选AC。17、C:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；检测到细菌B合成人的生长激素才能说明获得成功；A错误；

B；根据题意；细菌B不含有质粒A及其上的基因，即没有抗氨苄青霉素基因；质粒含抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，基因发生重组时抗四环素基因被破坏，抗氨苄青霉素基因被保留，故在含氨苄青霉素的培养基上能生长的是导入了普通质粒或者重组质粒的细菌，B错误；

C；将人的生长激素基因与质粒A结合的过程连接两个切口；该过程共形成4个磷酸二酯键，C正确；

D、将目的基因导入细菌时，需要用Ca2+处理细菌；使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的生理状态，D正确。

故选CD。

【点睛】18、A:B【分析】【分析】

1；胚胎干细胞（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。（2）具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

2；胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质；胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。

【详解】

A、精子在获能液中于37℃、5%CO2条件下培养的目的是使精子获能；具有受精“能力”，而不是获得能量，A错误；

B；分割的胚胎细胞有相同的遗传物质；但个体的性状还受到环境的影响，因此发育成的个体有形态学差异，B错误；

C；胚胎干细胞是从哺乳动物的早期胚胎或原始性腺中获得的；具有发育的全能性，具有自我更新能力和分化潜能，可以分化形成各种组织，C正确；

D；囊胚期细胞开始分化；其增殖过程中进行的是有丝分裂，该过程中可能会发生基因突变和染色体变异，D正确。

故选AB。三、填空题(共5题，共10分)19、略

【解析】①.胚胎细胞②.体细胞20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】刚果红染色法CR红色复合物透明圈透明圈21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术性别控制23、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。四、判断题(共4题，共16分)24、A【分析】【详解】

微生物具有生理结构和遗传物质简单的优点，便于研究，生长周期短，具有生长繁殖快的优点，遗传物质简单，具有容易进行遗传物质操作的优点，对环境因素敏感，因此对微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最广泛和取得实际应用成果最多的领域，这句话是正确的。25、A【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。

故正确。26、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。27、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，故正确。五、实验题(共4题，共28分)28、略

【分析】【分析】

1；大肠杆菌属于细菌；是原核生物。微生物营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等，另外还需要注意渗透压、温度、pH等条件。大肠杆菌常作为遗传学研究的实验材料．微生物培养的关键是无菌技术，防止外来杂菌的污染。

2；微生物培养的关键是无菌操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。

【详解】

（1）大肠杆菌具有体积小；结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点；培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。

（2）灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物；所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。

（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液，分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，应保证样品稀释的比例适合。

（4）对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状；大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。

（5）培养大肠杆菌时；在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（6）因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素；并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

【点睛】

本题主要考查微生物培养的相关知识，要求考生能够识记大肠杆菌的培养条件以及其作为遗传实验的优点，区分掌握不同材料消毒和灭菌的方法，识记菌种鉴定的方法等，属于基础题。【解析】①.温度②.酸碱度③.易培养④.生活周期短⑤.灭菌⑥.消毒⑦.损伤DNA的结构⑧.比例合适⑨.鉴定(或分类)⑩.将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生.⑪.灭菌29、略

【分析】【分析】

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基；其基本过程为计算；称量、溶化、灭菌、倒平板。培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）。

(1)

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本操作步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。金黄色葡萄球菌具有高度耐盐化的特性；培养基中加入7.5%NaC1不影响金黄色葡萄球菌生长的同时会抑制其他杂菌生长，起到了选择的目的。

(2)

在制作血平板时需要等平板冷却后；方可加入血液，以防止高温破坏血细胞。在血平板上，由于金黄色葡萄球菌可破坏红细胞而使其褪色，因此菌落的周围会出现褪色圈。

(3)

测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量时，一般采用稀释涂布平板法。为了保证获得菌落数在30～300之间适于计数的平板，需要选用一定稀释范围的样品液进行培养。测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量，一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养；测定放线菌的数量，一般选用103、104、105倍的稀释液进行平板培养；测定真菌的数量，一般选用102、103、104倍的稀释液进行平板培养。因此稀释倍数较低的是真菌。由于当两个或多个细胞连在一起时；平板上观察到的只是一个菌落，因此实验结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

【点睛】

本题主要考查微生物的培养与分离，考查学生的实验与探究能力。【解析】(1)计算→称量→溶化→灭菌→倒平板7．5%NaC1不影响金黄色葡萄球菌生长的同时会抑制其他杂菌生长。

(2)高温破坏血细胞褪色圈（或溶血圈）

(3)稀释涂布平板30～300真菌当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落30、略

【分析】1；体外受精过程包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、体外受精；其中卵母细胞的采集和培养的方法：

（1）主要方法是：用促性腺激素处理；使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。

（2）第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞。

（3）第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞；叫活体采卵。

2；受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。

【详解】

（1）受精时；往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，透明带反应是阻止多精入卵的第一道屏障，卵细胞膜反应是阻止多精入卵的第二道屏障。

（2）该实验是利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白；因此实验步骤Ⅱ中构建基因表达载体时，需要先将HSA基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，再导入奶牛受精卵。

（3）动物早期胚胎的体外培养时；培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类；维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和动物血清。培养过程需要定期更换培养液，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（4）血清白蛋白要从乳汁中提取；只有雌性奶牛才能产生乳汁，因此胚胎移植时，必须选取雌性奶牛的胚胎进行移植；对早期胚胎（如囊胚）进行性别鉴定的常用方法是取滋养层细胞进行染色体检查或DNA分析；移植前还需要检测目的基因是否成功导入受精卵，通常采用DNA分子杂交技术进行检测。

【点睛】

解答本题的关键是掌握体外受精、受精过程、基因工程等知识，要求考生识记体外受精技术的过程及方法、受精作用的过程、基因工程的操作步骤及应用，并能够联系实际答题。【解析】透明带反应和卵细胞膜反应乳腺蛋白基因的启动子激素和动物血清清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害雌性取滋养层细胞进行染色体检查或DNA分析DNA分子杂交31、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶液颜色的变化是橙色变成灰绿色，则说明发酵液中含有酒精。

【详解】

（1）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了酵母菌的无氧呼吸。酵母菌属于真核生物；其代谢类型是兼性厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精。

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生化学反应；变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色变化。对照组中应加入酒精作为阳性对照。实验过程中应遵循等量原则；单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别标号A、B，A试管中各加入2ml发酵液，作为实验组，B试管中各加入2ml酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸钾，振荡后观察试管中颜色变化，AB两试管都变为灰绿色，即可验证发酵过程中产生了酒精。

（2）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作；因此其发酵菌种为天然的混合菌种。现代工业发酵酿制果酒不同于自制果酒，需要经过沉淀；过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒。

（3）25×16型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数/1mL=1个中方格中酵母菌数×25×10000×稀释倍数，因此该实验中每毫升发酵液中酵母菌数量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入无菌空气。【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧微生物；在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精实验思路：取两支试管分别标号A；B，向A试管中各加入2ml发酵液，向B试管中各加入2ml酒精，向AB两试管各滴加0．5ml溶有0．1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化。

(2)混合菌种沉淀；过滤、灭菌。

(3)2.25×109

(4)酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无菌空气六、综合题(共4题，共28分)32、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

(1)

逆转录过程是以mRNA为模板合成DNA的过程；本实验目的基因是P基因，所以模板是P基因的mRNA；P基因与Ti质粒重组时，需要使用限制酶切割Ti质粒的T-DNA片段，将目的基因插入T-DNA序列中。

(2)

将目的基因转入双子叶植物可以用农杆菌侵染的方法；所以需要将重组载体导入①农杆菌中，②是将烟草叶片培养成转基因植株，运用了植物组织培养技术。

(3)

从图上可以看出；1和4电泳没有条带，说明没有成功转入P基因的植株。植株2的P基因转录量（mRNA相对含量）最高，推测可能合成的P蛋白最多，所以选择转基因烟草植株2进行后续研究。

【点睛】

本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具、操作步骤，掌握各步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题。【解析】(1)P（酶P）的mRNAT-DNA

(2)农杆植物组织培养。

(3)1和4##4和12植株2的P基因的mRNA相对含量（转录量）最高，推测可能