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文档简介
…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页,总=sectionpages22页第=page11页,总=sectionpages11页2025年外研版选修1生物下册阶段测试试卷806考试试卷考试范围:全部知识点;考试时间:120分钟学校:______姓名:______班级:______考号:______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题,共16分)1、下列关于加酶洗衣粉的叙述,错误的是()A.冷水洗涤去污效果总体比温水效果好B.洗衣粉中表面活性剂不能促进酶活性C.在pH=7.0的水中,碱性蛋白酶依然能起作用D.洗衣粉中酶主要是通过分解污渍发挥作用2、下列关于“发酵食品加工的基本方法”的叙述中,错误的是()A.果酒制作过程中,若发酵条件控制不当果酒可能变酸B.含水量大于85%的豆腐利于保持湿度,适宜制作腐乳C.果醋制作过程中,应连续充入无菌空气以利于醋酸发酵D.腐乳制作过程中,适量加盐可防止豆腐变软、变质3、在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验,在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素(浓度相同)的无菌滤纸片,d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如下图。以下判断错误的是。
A.a处抑菌效果小于b处B.b处的滤纸片没有沥干C.c处抗生素无效D.d为对照4、培养硝化细菌的碳源、氮源、能源依次是()A.葡萄糖、氨、葡萄糖B.葡萄糖、铵盐、太阳能C.二氧化碳、氨、氧化氨D.二氧化碳、氨、太阳能5、下列关于凝胶色谱法原理的叙述,错误的是()A.凝胶是微小的多孔球体,大多数是由多糖类化合物构成的B.交联葡聚糖凝胶(G-75)中的75表示凝胶的得水值C.相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶颗粒外部移动D.相对分子质量较小的蛋白质只能在凝胶颗粒内部移动6、微生物培养过程中,肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是()A.细胞的大小、形状、颜色B.菌落的大小、形状、颜色C.有无鞭毛D.能否形成芽孢7、探究pH对果胶酶活性影响的实验中,下列说法中不正确的是()A.自变量是不同的pHB.无关变量有温度、底物浓度、酶浓度、反应时间等C.可通过测定滤出的果汁体积判断果胶酶的最适pHD.pH过低时,果胶酶活性变小,但不失活8、通过样品处理和粗分离得到的血红蛋白溶液,还含有其他种类的蛋白质分子(如呼吸酶等)。怎样将杂蛋白与血红蛋白分离开来呢?常用凝胶色谱法进行纯化。以下做法、说法不正确的是()A.色谱柱的装填过程要注意:装填前凝胶需要充分溶胀、装填要均匀、尽量紧密,降低颗粒间隙;无气泡;洗脱液洗涤平衡不能断流B.凝胶色谱分离蛋白质包括:制作色谱柱、装填色谱柱、样品加入和电泳C.样品加入和洗脱的基本过程是:调节缓冲液面→加入蛋白质样品(不能破坏凝胶面)→调节缓冲液面→洗脱→红色区带均匀地移动标志着成功→收集分装蛋白质。最后将纯化的样品进行电泳鉴定D.如果红色区带移动不均匀、歪斜、散乱、变宽等,其主要原因是色谱柱的装填有问题评卷人得分二、多选题(共7题,共14分)9、分析图内某种洗衣液盒上的资料;理解正确的是()
A.这种洗衣液较易清除衣服上的蛋清污渍B.在60℃以上的水中,蛋白酶会失去活性C.这种洗衣液对衣服上油渍也能较易清除D.该洗衣液不适合洗涤丝绸面料衣物10、有细胞结构的微生物基本上都可以分解尿素“如细菌、真菌(酵母菌)、放线菌等”。下列关于能分解尿素的微生物的叙述正确的是()A.酵母菌能利用尿素做氮源,根本原因是其含有合成脲酶的基因B.尿素中的氮元素可用于合成细菌的蛋白质C.在资源和空间不受限制的阶段,若最初接种M个细菌,繁殖n代后细菌的数量是2n×M个D.可以利用人工诱变、转基因、多倍体育种等方法培育高效分解尿素的细菌11、厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质,易腐烂变质,滋生病原微生物等。若处理不当,可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳,减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂,某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验,并得出下图的实验结果。下面叙述错误的是()
A.巨大芽孢杆菌生长过程中需要氮源,圆褐固氮菌生长过程中不需要氮源B.要统计活菌数量可采用平板划线法和稀释涂布平板法C.将1mL菌液稀释100倍,在3个平板上分别接0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为3.9×105D.处理该类厨余垃圾废液,两菌种的最佳接种量比为1:112、地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨,其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用,这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维酶的纤维素分解菌,其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有稻草作碳源的固体培养基上培养,得到若干菌落后用刚果红处理,看到如图2所示情况,下列有关叙述,错误的是()
A.②过程是涂布器取乙中的菌液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面B.甲、乙试管中的液体都属于液体培养基,主要作用是稀释菌种C.Ⅰ号、Ⅱ号培养基都属于固体培养基,配置时先灭菌后调节pHD.可挑取图2中周围出现透明圈的菌落,用平板划线法继续纯化13、下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中不正确的是()A.果酒和果醋的发酵菌种不同,但代谢类型相同B.制作果酒和果醋时都应用70%的酒精对发酵瓶消毒C.变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的制作可用同一装置,但需控制不同发酵条件14、下列关于传统发酵技术的叙述,错误的是()A.较高温度和密闭环境有利于果醋的发酵B.盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味C.果酒、果醋和腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所都是细胞质基质D.与自然发酵相比,人工接种菌种不易被杂菌污染15、我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载:“泡菜之水,用花椒和盐煮沸,加烧酒少许。如有霉花,加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换,勿令其干。”下列说法错误的是()A.“泡菜之水,用花椒和盐煮沸”的目的是彻底灭菌B.“霉花”主要由酵母菌繁殖形成,酵母菌往往来自蔬菜C.“坛沿外水须隔日-换,勿令其干”的目的是保证坛内适宜湿度D.制作泡菜的时间越长,亚硝酸盐的含量越高评卷人得分三、填空题(共6题,共12分)16、_____________、___________和__________都会影响酶的活性。为了解决这个难题,科学家通过________生产出了能够耐酸、耐碱、__________和较高温度的酶,并且通过特殊的化学物质将酶层层包裹,与洗衣粉的其他成分隔离。17、果胶酶能够分解___________,瓦解植物的____________及___________,使榨取果汁变得更容易,而果胶分解成可溶性的______________,也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,包括_______________、__________________和_________________等。18、新鲜的柑橘皮中含有大量的果蜡、果胶和水分,如果直接压榨,出油率较低。为了提高出油率,需要将柑橘皮____________去水,并用______________浸泡。为了使橘皮油易于与水分离,还要分别加入相当于橘皮质量0.25%的_____和5%的_______________,并调节pH至___________________。19、默写腐乳制作的实验流程示意图______20、蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成;人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中氧气和二氧化碳的运输。
(1)分离血红蛋白的方法是_____,其原理是根据_____来分离蛋白质。
(2)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、_____和纯度鉴定。
(3)血红蛋白因含有_____而呈现红色,采集血液时需要预先加入柠檬酸钠,目的是_____。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂,如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色;在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的_____,目的是使红细胞破裂释放血红蛋白;在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L的_____中。
(4)本实验用的是交联葡聚糖凝胶(SephadexG-75),其中“G”表示_____,“75”表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸收水分7.5g。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡的原因是_____,给色谱柱添加样品的具体操作是_____。
(5)判断纯化的蛋白质是否达到要求,选用的检测方法是_____。21、血红蛋白的释放。
将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加________到________体积,再加40%体积的______,置于磁力搅拌器上充分搅拌10min。在________和________的作用下,红细胞______,释放出血红蛋白。评卷人得分四、实验题(共2题,共12分)22、酵母菌对酒精的耐受性影响酒类酿造研究者利用酒精敏感型酵母菌(中)和酒精耐受型酵母菌(乙)进行了相关实验;回答问题。
(1)酒精是酵母菌进行___________的产物,在___________中产生。发酵过程中,随着发酵液酒精浓度增加,酒精分子可插入到生物膜___________的疏水区;破坏膜完整性。
(2)海藻糖由两分子葡萄糖连接而成;可通过与膜成分结合而稳定膜结构。研究者制备了含有和不含葡萄糖的培养基培养两种酵母菌,并在酒精冲击的条件下测定相关指标。如下图。
①将两种酵母菌置于含酒精的培养基中震荡培养,同时设置___________的培养基作为对照。每隔一段时间取菌液,利用___________法接种在固体培养基表面进行计数并计算细胞存活率。
②图1、2结果显示,___________有利于酵母菌合成海藻糖;结合图3、4结果可知,海藻糖含量高的酵母菌存活率___________。
③海藻糖含量提高将助于提高酵母菌的酒精耐受力的实验证据有___________。
(3)综上所述,推测酒精耐受型酵母菌的耐受机理是____________________。23、红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2;我们可以选用猪;牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:
(1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步:________、粗分离、______和________。
(2)实验前取新鲜的血液;要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是_____________。
②以上所述的过程即是样品处理,它包括红细胞的洗涤、______________;分离血红蛋白溶液。
(3)收集的血红蛋白溶液要进行粗分离,其方法是___________。
(4)然后通过_____________法将样品纯化,样品纯化的目的是____________。最后经___________进行纯度鉴定。
(5)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的______、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。评卷人得分五、非选择题(共4题,共28分)24、某地为解决果农苹果滞销的问题;采用生物技术生产苹果酒和苹果醋。另外,苹果中的苹果多酚具有抗过敏;抗癌细胞增生、调节脂质代谢等多种生理功能,提取苹果多酚已成为一个热门产业。请回答下列问题:
(1)制作苹果醋时起作用的微生物是__________。从微生物培养的角度分析;苹果汁为微生物生长提供的营养物质有__________等。对从混杂的微生物中分离出的酿制苹果酒的菌种的数目进行统计时,常采用的方法是__________和显微镜直接计数法。
(2)发酵完成后;制作的果酒品质非常好,为方便后续生产使用,可将菌液与灭菌的__________混匀,放在-20℃的冷冻箱中保存。
(3)提取苹果多酚适宜采用萃取法,萃取的效率主要取决于_________,同时还受原料颗粒的大小、紧密程度、含水量等条件的影响。在萃取前需将细胞培养物粉碎和干燥,干燥时应控制好________。为了防止有机溶剂挥发,还要在加热瓶口安装_________。25、梨树胶孢炭疽病是严重危害梨树的一种真菌病害;目前生产上侧重于用化学药剂进行防治,该方法对人类健康和生态环境都有危害。为改善这种状况,科研工作者对梨树胶孢炭疽病生物防治菌进行分离纯化,具体流程如下:
各种菌株的分离→炭疽病生物防治菌的筛选→炭疽病生物防治菌对病原菌抑菌活性的测定→最后确定的炭疽病生物防治菌为RT-30菌株。
请回答:
(1)研究未知的微生物时,一定注意进行规范的无菌操作,以防研究者______。分离和筛选菌株的培养基为______,其原理是______。
(2)分离和筛选出来的菌株,要进行纯化处理,纯化处理的常用方法有______。纯化得到的菌株经培养会表现出稳定的菌落特征,菌落特征包括菌落的______。
(3)最后确定的炭疽病生物防治菌为RT-30菌株的理由是______。使用后的培养基在丢弃前需进行______。26、下图为果酒的生产工艺流程简图;据图回答问题。
选料→冲洗→①→灭菌→接种→发酵→②→果酒。
(1)流程中①;②处的内容应为___________、___________。
(2)果酒制作离不开___________;与醋酸菌相比,前者在结构上的主要特点是___________。
(3)果酒制作过程中;接种完成后要先向发酵液中通入一段时间的无菌空气,目的是___________。
(4)果酒制作是否成功;需发酵后用____溶液来鉴定,该物质与酒精反应呈现___________色。
(5)若是制作果醋时,需要在___________供应和糖源充足时,醋酸菌将糖分解成醋酸;在糖源不充足时,也可以利用___________生成醋酸。27、请回答下列蛋白质的提取和分离实验相关问题:
(1)凝胶色谱法是根据_________________分离蛋白质的有效方法。
(2)蛋白质的提取和分离实验中洗涤红细胞的目的______________________________。
(3)重复洗涤三次;直至____________________,表明红细胞已洗涤干净。在该过程中离心速度过高和时间过长会导致___________________________。
(4)在凝胶色谱柱装填时不得有气泡存在;原因为气泡会________________________。在操作中不能发生洗脱液流干漏出凝胶颗粒的现象,如果发生则___________________。
(5)在蛋白质的分离过程中如果观察到__________________________________,说明色谱柱制作成功。评卷人得分六、综合题(共3题,共6分)28、阆中保宁醋是全国四大名醋之一。具有色泽红棕;醇香回甜、酸味柔和、久陈不腐等独特风格;保宁醋传统发酵生产工艺流程如下:
请结合所学知识回答下列问题:
(1)在保宁醋的发酵过程中;密闭发酵阶段可以将温度控制在____________,此时主要是_________等微生物发挥作用。
(2)根据其工艺流程;破头主要有____________等作用。
(3)保宁醋“久陈不腐”的主要原因有____________。
(4)在实验室要筛选出高产醋酸菌作为菌种;应采用____________培养基,使用后的培养基丢弃前一定要进行____________。
(5)在微生物的接种技术中,最常用的是____________和____________;其核心都是要__________,保证培养物的纯度。29、利用不同微生物的发酵作用来制作果酒;果醋、腐乳和酸奶等食品的历史悠久;遍布民间,一般称作传统发酵技术。根据传统发酵技术的相关知识,回答以下问题:
(1)果酒和果醋的制作:
①酵母菌是酿制葡萄酒不可缺少的微生物,如果要获得优质野生酵母菌最好在葡萄园的土壤中采样,利用酵母菌发酵制作葡萄酒要控制的温度为___________________。果醋发酵接种菌种时温度需升高到______________________________________,且需要通气。酵母菌的遗传物质在存在方式上不同于醋酸菌的特点是________________________________________________________________________________________________________________________。
②果酒发酵装置内要留1/3空间,在发酵期的用途一是初期提供有氧条件促进酵母菌的大量繁殖,二是______________________________________________________________________________________________。
(2)腐乳的制作:
①腐乳制作有多种微生物参与,其中起主要作用的是____________________________________________。
②豆腐发酵主要利用微生物产生的______________________________________酶等;通过发酵,豆腐中营养物质更易于消化和吸收。
(3)对亚硝酸盐的定量测定可以用_______________________________法,因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成_______________________________色化合物。30、红酸汤是种很有特色的火锅底料;制作流程如图所示。请分析回答以下问题:
(1)密封发酵时;常在坛中加人成品红酸汤,其目的是__________________________。
(2)装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是____________________。红酸汤制作过程的初期会有气泡冒出;但气泡的产生会逐渐停止,试分析原因:__________________________。
(3)亚硝酸盐含量会影响酸汤的品质,在发酵过程中,可以定期采用_____________法检测亚硝酸盐含量。是在盐酸酸化的条件下,与其他物质反应生成_____________色染液。参考答案一、选择题(共8题,共16分)1、A【分析】【分析】
1;加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉;目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶,其中,应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更好的去污能力。
2;影响加酶洗衣粉活性的条件:温度、pH和水量。影响加酶洗衣粉的效果的因素:水温、水量、水质、洗衣粉的用量、衣物的质地、大小、浸泡和洗涤的时间。3、酶作用的特点是高效性、专一性和作用条件温和。
【详解】
A;温度过高酶容易失去活性;但是温度过低酶的活性降低,因此冷水洗涤去污效果应该比温水差,A错误;
B;加酶洗衣粉中常常添加的酶是碱性蛋白酶;洗衣粉中的表面活性剂对碱性蛋白酶活性没有促进作用,B正确;
C;pH=7.0的水中;碱性蛋白酶依然能起作用,只是效果不如碱性环境,C正确;
D;洗衣粉中酶主要是通过使蛋白质等水解成可溶性的小分子的氨基酸或多肽等;使污迹容易从衣物上脱落,D正确。
故选A。2、B【分析】【详解】
果酒制作过程中,若发酵条件控制不当,如氧气和醋酸菌的进入,可能进行醋酸发酵使果酒变酸,A正确;含水量为70%左右的豆腐利于保持湿度,适宜制作腐乳,B错误;醋酸菌是好氧菌,因此果醋制作过程中,应连续充入无菌空气以利于醋酸发酵,C正确;腐乳制作过程中,适量加盐可析出水分并抑制杂菌的生长,以防止豆腐变软、变质,还可以调节腐乳的风味,D正确。3、A【分析】【详解】
透明圈大的抑菌效果好,透明圈小的抑菌效果弱。d为空白对照,与d处的比较可说明a处抑菌效果大于b处;A错误;D正确。
B处透明圈不规则,可说明b处的滤纸片没有沥干;B正确。
C处的与d处相同,说明c处抗生素无效;C正确。4、C【分析】【分析】
本题考查实验室的微生物培养;解题关键是要掌握硝化细菌的代谢类型。
【详解】
硝化细菌的同化作用类型为自养型,因而所需碳源不是现成的有机物,而应是无机物即二氧化碳;硝化细菌合成有机物时需把氨氧化成亚硝酸所释放的能量,故硝化细菌形成有机物的环境条件是具有NH3和O2;能源则来源于氧化氨气释放的能量,故选C。
【点睛】
硝化细菌属于自养型细菌,原核生物,广泛存在于自然环境中。其存活需要水分及氧气,只有同时满足水分与氧气的供应才能存活。5、D【分析】【分析】
凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法,所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体;在小球体内部有许多贯穿的通道,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。
【详解】
A;凝胶实际上是一些微小的多孔球体;在小球体内部有许多贯穿的通道,大多数是由多糖类化合物构成的,A正确;
B;交联葡聚糖凝胶(G-75)中的75表示凝胶的得水值;即每克凝胶膨胀时吸水7.5g,B正确;
C;相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道;只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,C正确;
D;相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时;相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,也能在凝胶外部移动,D错误。
故选D。6、B【分析】【分析】
鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是菌落形态;金黄色葡萄球菌为圆形光滑较小菌落,直径一般只有1mm左右,白色或金黄色;而枯草杆菌的菌落表面为不规则隆起,菌落较大,直径有5mm左右,表面粗糙,白色或略带一些暗黄色。
【详解】
A.肉眼观察不到细菌的大小;形状、颜色;A错误;
B.鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是菌落形态;如菌落的大小;形态、颜色,B正确;
C.肉眼无法观察到细菌的鞭毛;C错误;
D.肉眼也不能观察到是否形成芽孢;D错误。
故选B。
【点睛】
本题考查微生物的实验室培养、细菌的鉴定等相关知识,相关知识点只需考生识记即可正确作答;需要考生扣住题干的“肉眼”一词,要求考生明确肉眼无法观察到细菌的特征,只能观察菌落的特征。7、D【分析】【分析】
自变量是指在一组变量中;能够影响其他变量发生变化,而又不受其他变量影响的变量.自变量一般是对所研究现象的一种解释。
因变量是指依赖于其他变量;而又不能影响其他变量的变量.因变量一般是我们所希望解释的现象。
无关变量(也称控制变量)是指与自变量同时影响因变量的变化;但与研究目的无关的变量。
【详解】
实验目的是探究pH对酶活性的影响;因此实验的自变量为pH,A正确;温度;底物浓度、酶浓度、反应时间等属于该实验的无关变量,无关变量应保持相同且适宜,B正确;可通过测定滤出果汁体积判断果胶酶最适pH,C正确;pH值过低时,酶的空间结构改变,导致其变性失活,D错误。
【点睛】
注意探究pH对果胶酶活性影响的实验中自变量、因变量和无关变量的判断。8、B【分析】【分析】
血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有:(1)样品处理:①红细胞的洗涤(低速短时间离心);②血红蛋白的释放(需要加入蒸馏水和甲苯),③分离血红蛋白(中速长时间离心);(2)粗分离:①分离血红蛋白溶液,②透析;(3)纯化:调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质;(4)纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
【详解】
A;色谱柱的装填过程要注意:装填前凝胶需要充分溶胀、装填要均匀、尽量紧密;降低颗粒间隙;无气泡,如果有气泡,会扰乱洗脱的次序;洗脱液洗涤平衡不能断流,颗粒不能露出洗脱液,A正确;
B;凝胶色谱分离蛋白质包括:制作色谱柱、装填色谱柱、样品加入和洗脱;电泳属于纯度鉴定,B错误;
C;样品加入和洗脱的基本过程是:调节缓冲液面(缓冲液面和色谱柱凝胶齐平)→加入蛋白质样品(不能破坏凝胶面)→调节缓冲液面(让样品进入凝胶柱中)→洗脱→红色区带均匀地移动标志着成功→收集分装蛋白质。最后将纯化的样品进行电泳鉴定;C正确;
D;如果红色区带移动不均匀、歪斜、散乱、变宽等;其主要原因是色谱柱的装填有问题,需要重新装填色谱柱,D正确。
故选B。
【点睛】二、多选题(共7题,共14分)9、A:B:D【分析】【分析】
加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉;目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶;脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶,其中,应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉水解为小分子物质,使洗衣粉具有更好的去污能力。
【详解】
A;蛋清污渍的主要成分是蛋白质;该洗衣粉中含有蛋白酶,因此这种洗衣粉较易清除衣服上的蛋清污渍,A正确;
B;高温会使酶变性失活;使用该洗衣粉时不能用60℃以上的水,说明在60℃以上的水中,蛋白酶会失去活性,B正确;
C;根据酶的专一性原理可知;蛋白酶能够水解蛋白质污渍,但是不能水解油渍,C错误;
D;该洗衣粉中含有蛋白酶;能水解蛋白质,因此不能洗涤毛料、丝绸等富含蛋白质的衣料,D正确。
故选ABD。10、A:B:C【分析】【分析】
绝大多数微生物都能利用葡萄糖;但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,利用尿素为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出分解尿素的微生物。
【详解】
A;脲酶能够将尿素降解成氨和二氧化碳;因此酵母菌能利用尿素做氮源,根本原因是其含有合成脲酶的基因,A正确;
B;蛋白质组成元素包括N;因此尿素中的氮元素可用于合成细菌的蛋白质,B正确;
C、在资源和空间不受限制的阶段,细菌为“J”形增长,其分裂方式为二分裂生殖,因此最初接种M个细菌,繁殖n代后细菌的数量是2n×M个;C正确;
D;细菌为原核生物;没有染色体,因此不能用多倍体育种等方法培育高效分解尿素的细菌,D错误。
故选ABC。11、A:B:C:D【分析】【分析】
微生物接种的方法很多;最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。若要对微生物进行取样计数,接种方法只能是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
【详解】
A;微生物的生长需要碳源、氮源、无机盐等物质;只是有些固氮菌由于能利用氮气作为氮源,不需要在培养基中添加氮源,A错误;
B;平板划线法不能用于计数;B错误;
C、将1mL菌液稀释100倍,在3个平板上分别接0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为(42+39+36)÷3÷0.1×100×1000=3.9×107;C错误;
D;根据图示可知;两菌种的接种量比为1:1时比两菌种的接种量比为2:1时效果好,但由于该实验设置的两菌种的接种量比例的组数过少,所以无法判断处理该类厨余垃圾废液的两菌种的最佳接种量比,D错误。
故选ABCD。12、A:B:C【分析】分解纤维素的微生物的分离实验的原理:①土壤中存在着大量纤维素分解酶;包括真菌;细菌和放线菌等,它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶,可以把纤维素分解为纤维二糖,进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用,故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中,纤维素分解菌能够很好地生长,其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌。
【详解】
A;根据Ⅰ号培养基上菌落分布均匀可知;②过程是用涂布器取乙中的样品稀释液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面,即乙中是分解纤维素菌的样品稀释液,不是菌液,A错误;
B;液体培养基的作用是让菌体增殖;而不是稀释菌种,甲、乙试管中的液体都是样品稀释液,捕食液体培养基,B错误;
C;配置固体培养基的基本步骤是计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板;故需要先调pH,再灭菌,C错误;
D;刚果红能与纤维素形成红色复合物;若菌落周围出现透明圈,说明纤维素分解菌将纤维素进行了分解,可挑取该菌落用平板划线法继续纯化该菌体,D正确。
故选ABC。13、A:C【分析】【分析】
果酒;果醋制作的注意事项。
(1)材料的选择与处理:选择新鲜的葡萄;榨汁前先将葡萄冲洗,并除去枝梗,以防葡萄汁流失及污染。冲洗以洗去灰尘为目的,且不要太干净,以防洗去野生型酵母菌。
(2)防止发酵液被污染的方法①榨汁机要清洗干净并晾干。②发酵瓶要洗净并用体积分数为70%的酒精消毒;或用洗洁精洗涤。③装入葡萄汁后要封闭充气口。
【详解】
A;果酒发酵的菌种是酵母菌;其代谢类型为异养兼性厌氧型,而果醋发酵的菌种是醋酸菌,其代谢类型是异养需氧型,A符合题意;
B;制作果酒和果醋时均需要对发酵瓶消毒;均可用体积分数为70%的酒精进行消毒,B不符合题意;
C;在变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的;液体表面不能形成菌落,C符合题意;
D;果酒和果醋的制作可用同一装置;但需控制不同发酵条件,果酒制作需要无氧环境,适宜温度为18~25℃,而果醋制作需要有氧环境,适宜温度为30~35℃,D不符合题意。
故选AC。14、A:C【分析】【分析】
1;在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖;再隔绝氧气进行发酵;酒精发酵的最佳温度是在18℃~25℃,pH最好是弱酸性。
2;醋酸菌是好氧性细菌;当缺少糖源时和有氧条件下,可将乙醇(酒精)氧化成醋酸;当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;醋酸菌生长的最佳温度是在30℃~35℃。
3;豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪;都是大分子有机化合物,难以消化、吸收,毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶,能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸,在多种微生物的协同下,豆腐转变成腐乳。
【详解】
A;果醋制作的菌种是醋酸菌;属于好氧菌,故密闭环境不利于果醋的发酵,A错误;
B;腐乳制作过程中;盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味,B正确;
C、参与果酒制作的酵母菌是兼性厌氧型真核生物,参与果醋制作的醋酸菌是需氧型原核生物,参与腐乳制作的毛霉是需氧型真核生物,所以果酒制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质或线粒体、果醋制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质,而腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是线粒体;C错误;
D;与自然发酵相比;人工接种过程中利用了严格的灭菌措施,可以防止其它杂菌污染,且发酵获得的产品品质更好,D正确。
故选AC。
【点睛】15、A:C:D【分析】【分析】
1;泡菜的制作原理:泡菜的制作离不开乳酸菌.在无氧条件下;乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。2、在制作泡菜时所配制的泡菜盐水要煮沸,以杀灭盐水中的微生物,防止杂菌污染。泡菜制作过程中,温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短、容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。
【详解】
A;“泡菜之水;用花椒和盐煮沸”的目的提升泡菜味道、减少水中的溶氧量和消毒杀菌防止杂菌污染,A错误;
B;“霉花”是指泡菜坛表面的一层白膜;主要由酵母菌繁殖形成,酵母菌往往来自蔬菜,B正确;
C;“坛沿外水须隔日一换;勿令其干”的目的是保证坛内的无氧环境,C错误;
D;制作泡菜的过程;亚硝酸盐的含量呈先上升后下降的趋势,D错误。
故选ACD。三、填空题(共6题,共12分)16、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】温度酸碱度表面活性剂基因工程忍受表面活性剂17、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】果胶细胞壁胞间层半乳糖醛酸多聚半乳糖醛酸酶果胶分解酶果胶酯酶18、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】干燥石灰水NaHCO3Na2SO47~819、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】让豆腐长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制20、略
【分析】【分析】
血红蛋白存在于红细胞内;由四条肽链构成,两条α肽和两条β肽链,每条肽链围绕一个亚铁血红素基团,一个血红素基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。
【详解】
(1)分离血红蛋白的方法是凝胶色谱法(又叫分配色谱法);是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质,相对分子质量大的蛋白质分子直接穿过凝胶颗粒间的空隙,路径短,移动速度快,优先可收集到;相对分子质量小的蛋白质分子进入凝胶珠的内部,路径长,移动速度慢,可在后收集。
(2)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理;粗分离、纯化和纯度鉴定。
(3)血红蛋白因含有亚铁血红素基团而呈现红色;采集血液时需要预先加入柠檬酸钠防止血液凝固。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂,如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色;在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的甲苯,破坏细胞膜,释放血红蛋白;在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L磷酸缓冲液,除去无机盐和小分子蛋白质。
(4)纯度鉴定中;用的是交联葡聚糖凝胶,其中“G”表示凝胶的交联程度;膨胀程度和分离范围。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡,气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。给色谱柱添加样品的具体操作是吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端,滴加样品时,吸管管壁贴着管壁环绕移动加样,同时注意不要破坏凝胶面。
(5)经过凝胶色谱法获得的蛋白质;为了确定其是否达要求,可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测。
【点睛】
本题考查血红蛋白的提取和分离方法、凝胶色普的操作、异常原因分析,要求考生熟记课本相关知识,并理解运用。【解析】凝胶色谱法(又叫分配色谱法)相对分子质量的大小纯化亚铁血红素基团防止血液凝固甲苯磷酸缓冲液凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序,降低分离效果吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端,滴加样品时,吸管管壁贴着管壁环绕移动加样,同时注意不要破坏凝胶面。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳21、略
【分析】【详解】
血红蛋白的释放。
将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加蒸馏水到原血液体积,再加40%体积的甲苯,置于磁力搅拌器上充分搅拌10min。在蒸馏水和甲苯的作用下,红细胞裂,释放出血红蛋白。【解析】蒸馏水原血液甲苯蒸馏水甲苯破裂四、实验题(共2题,共12分)22、略
【分析】试题分析:据图分析;图1与图2构成对照实验,因变量是菌株的种类和是否含糖,因变量是海藻糖含量,两种条件下菌株甲的海藻糖含量都比较低,且2h后就消失不见了,而菌株以在无糖的条件下海藻糖的含量有缓慢减少的趋势,在有糖的条件下海藻糖的含量先快速上升,后缓慢上升。图3与图4构成对照实验,自变量是时间和菌种种类,因变量是菌种的存活率,两种条件下,两种菌种的存活率都是菌种甲快速下降,菌种以缓慢下降,且两种菌种在有糖的条件下下降的幅度都缓慢与无糖条件。
(1)酵母菌无氧呼吸产生酒精;发生在细胞质基质中;酒精通过细胞膜的方式是自由扩散,因此发酵过程中,随着发酵液酒精浓度增加,酒精分子可插入到生物膜磷脂双分子层的疏水区,破坏膜完整性。
(2)①根据题意分析;将两种酵母菌置于含酒精的培养基中震荡培养,则对照实验应该用不含酒精的培养基培养。稀释涂布平板法接种可用于菌种的计数。
②图1;2结果显示;葡萄糖有利于酵母菌合成海藻糖;结合图3、4结果可知,海藻糖含量高的酵母菌存活率高。
③海藻糖含量提高将助于提高酵母菌的酒精耐受力的实验证据有:在有糖和无糖的条件下;菌株乙细胞中的海藻糖含量均高于菌株甲,乙的存活率均高于甲;在有糖的条件下,两菌株细胞中的海藻糖含量均上升,存活率下降时间略推迟。
(3)综上所述;推测酒精耐受型酵母菌的耐受机理是通过合成较多的海藻糖以稳定酵母菌的膜结构,从而在酒精冲击的情况下仍可存活较长时间。
【点睛】解答本题的关键是等于四幅曲线图的分析,具备对照性原则和单一变量原则的实验思维,分别分析两组对照实验的自变量与因变量之间的关系,进而根据图示准确答题。【解析】无氧呼吸细胞质基质磷脂双分子层不含酒精稀释涂布平板葡萄糖高在有糖和无糖的条件下,菌株乙细胞中的海藻糖含量均高于菌株甲,乙的存活率均高于甲;在有糖的条件下,两菌株细胞中的海藻糖含量均上升,存活率下降时间略推迟通过合成较多的海藻糖以稳定酵母菌的膜结构,从而在酒精冲击的情况下仍可存活较长时间23、略
【分析】【详解】
(1)血红蛋白粗提取和鉴定的步骤包括:样品处理;粗分离纯化和纯度鉴定。
(2)①采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠;以防止血液凝固。
②样品处理又包括红细胞洗涤;血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液。
(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析进行样品的粗分离。
(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化;纯化的目的是去除大分子杂质蛋白,最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
(5)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小;形状的不同;使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。
【定位】
蛋白质的提取和分离【解析】样品处理纯化纯度鉴定①防止血液凝固②血红蛋白的释放透析凝胶色谱去除大分子杂质蛋白SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳大小五、非选择题(共4题,共28分)24、略
【分析】【分析】
由题文描述可知:该题综合考查学生对果醋的制作;微生物的实验室培养与计数、植物有效成分的提取、菌种的保存等相关知识的识记和理解能力。
【详解】
(1)果醋的制作;起作用的微生物是醋酸杆菌。苹果汁中含有水;无机盐、糖类、蛋白质等物质,可为微生物的生长提供水、无机盐、碳源和氮源等营养物质。对分离出的菌种的数目进行统计时,常采用的方法是稀释涂布平板法(或活菌计数法)和显微镜直接计数法。
(2)在-20℃保存菌种的方法为甘油管藏法;需要在菌液中加入适量甘油。
(3)采用萃取法提取植物的有效成分;其萃取的效果主要取决于萃取剂的性质和使用量,同时还受原料颗粒的大小;紧密程度、含水量等条件的影响。在萃取前对细胞培养物进行干燥时,应控制好温度和时间,因为温度太高、干燥时间太长会导致植物的有效成分分解。在萃取时,为了防止有机溶剂挥发,需要在加热瓶口安装回流冷凝装置。
【点睛】
解答本题的关键是识记和理解果醋的制作原理、微生物的营养、微生物的分离与计数及菌种的保存、植物有效成分的提取方法和操作流程及注意事项等相关知识、形成清晰的知识网络。在此基础上,结合问题情境,从题意中提取有效信息进行相关问题的解答。【解析】醋酸杆菌水、无机盐、碳源和氮源稀释涂布平板法(或活菌计数法)甘油萃取剂的性质和使用量温度和时间回流冷凝装置25、略
【分析】【分析】
1.无菌技术。
(1)关键:防止外来杂菌的入侵。
(2)具体操作:①对实验操作的空间;操作者的衣着和手进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染;实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
(3)消毒和灭菌。消毒灭菌概念使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子)使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽孢和孢子)常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌适用对象操作空间、某些液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
2.生物常见的接种的方法。
①平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板;接种,划线,在恒温箱里培养。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后;均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。
【详解】
(1)研究未知的微生物时;一定注意进行规范的无菌操作,以防研究者被致病微生物感染;使用后的培养基在丢弃前需进行灭菌处理,防止杂菌污染;
(2)纯化微生物的常用方法有平板划线法;稀释突变平板法;
菌落特征包括菌落的大小;形态、隆起程度和颜色;
(3)分离和筛选菌株的培养基为选择培养基;其原理是提供有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物生长;
(4)最后确定的炭疽病生物防治菌为RT-30菌株的理由是:能够抑制炭疽病菌的生长繁殖;测定筛选的炭疽病生物防治菌对病原菌的抑制活性;RT-30菌株对病原菌的抑菌活性最大。
【点睛】
本题考查微生物的分离和培养,需要识记无菌技术及实例,掌握接种微生物常用的两种方法,再结合题中信息准确答题。【解析】被致病微生物感染选择培养基提供有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物生长平板划线法、稀释突变平板法大小、形态、隆起程度和颜色能够抑制炭疽病菌的生长繁殖;测定筛选的炭疽病生物防治菌对病原菌的抑制活性,RT-30菌株对病原菌的抑菌活性最大灭菌处理26、略
【分析】试题分析:果酒生产的工艺流程为:选料→冲洗→粉碎→灭菌→接种→发酵→过滤→果酒;所以题中①表示粉碎,②表示过滤。
(1)根据以上分析已知;流程中①;②处分别为粉碎、过滤。
(2)果酒制作离不开酵母菌;为真核生物,而醋酸菌为原核生物,两者的主要区别是酵母菌含有核膜包被的成形的细胞核。
(3)果酒制作过程中;接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气,目的是在有氧条件下,使酵母菌迅速繁殖,增加酵母菌数量,有利于后期发酵。
(4)酸性条件下;重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
(5)醋酸菌在糖源和氧气充足时,能将葡萄糖分解成醋酸;当糖源不足时,醋酸菌可将酒精变成乙醛,再将乙醛最终转变成醋酸。【解析】粉碎过滤酵母菌有核膜包被的细胞核在有氧条件下,使酵母菌迅速繁殖,增加数量酸性重铬酸钾灰绿氧气酒精27、略
【分析】【分析】
血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有:
(1)样品处理:①红细胞的洗涤;②血红蛋白的释放,③分离血红蛋白。
(2)粗分离:①分离血红蛋白溶液;②透析。
(3)纯化:调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。
(4)纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
【详解】
(1)凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法;分子量大的路径短;速度快。
(2)蛋白质的提取和分离实验中;首先要用生理盐水洗涤红细胞,其目的是去除杂蛋白。
(3)洗涤红细胞后有利于后续步骤的分离纯化;洗涤干净的标志是离心后的上清液不再呈现黄色;该实验的目的是分离白细胞,离心速度过高和时间过长会导致白细胞等一同沉淀,而达不到分离效果使实验失败。
(4)由于气泡的存在会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序;降低分离效果,所以在装填凝胶色谱柱时,不得有气泡产生。在操作中不能发生洗脱液流干漏出凝胶颗粒的现象,如果发生则凝胶色谱柱需要重新装填。
(5)在蛋白质分离过程中;如果红色区带均匀一致地移动,说明色谱柱制作成功。
【点睛】
易错点:纯化的过程是调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质,不要记混;记住在装填凝胶色谱柱时,不得有气泡产生。【解析】相对分子质量的大小去除杂蛋白上清液不再呈现黄色白细胞等一同沉淀,达不到分离效果搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果凝胶色谱柱需要重新装填红色区带均匀一致地移动六、综合题(共3题,共6分)28、略
【分析】【分析】
酿酒和制醋是最古老的生物技术;至今已经有五六千年的历史。与酒与醋的生产有关的微生物,分别是酵母菌(真菌)和醋酸杆菌(细菌),它们各有不同的菌种,菌种的不同,所产生的酒和醋的风味也不同。酿酒所用的原料是葡萄或其它果汁,酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖进行酒精发酵,当培养液中乙醇的浓度超过16%时,酵母菌就会死亡。果醋的制作是以果酒为原料,利用醋酸杆菌,将酒精氧化成醋酸的过程。
【详解】
(1)密闭发酵阶段使用的是酵母菌;利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精,为醋酸菌的好氧发酵提供底物,酵母菌的适宜温度为18—25℃。
(2)醋酸菌是好氧菌;破头主要有提供氧气等作用。
(3)“腐”是因为杂菌生长;保宁醋“久陈不腐”的主要原因有醋酸积累形成适合醋酸菌而抑制其他微生物生长的环境(或含有大量醋酸,溶液pH低抑制其他微生物生长)。
(4)选择性培养基;是指根据某种(类)微生物特殊的营养要求或对某些特殊化学;物理因素的抗性而设计的,能选择性区分这种(类)微生物的培养基。筛选出高产醋酸菌作为菌种,应采用选择培养基;为了防止污染环境,使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理。
(5)平板划线法和稀释涂布平板法是两
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