2025年湘教版选修1生物下册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年湘教版选修1生物下册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、下列关于物质提取、纯化原理的叙述中，不正确的是（）A.采用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是不同蛋白质分子的相对分子质量不同，在色谱柱中的移动速度不同B.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程C.不能选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白D.将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质2、下列关于各种传统发酵技术实验的说法，不正确的是A.果酒和果醋发酵过程中发酵液的pH均较小B.检验醋酸产生简单易行的方法之一是品尝C.腐乳的发酵过程中，添加酒的含量一般控制在12%左右D.泡菜盐水的制备，需要按照盐与清水的质量比为4:1的比例配制3、芳香油的提取方法主要分为三种：蒸馏法、萃取法和压榨法。以下关于提取方法的叙述中，错误的是（）A.水蒸气蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油B.压榨法适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料中的芳香油的提取C.若植物有效成分易水解，应采用水蒸气蒸馏法D.提取玫瑰精油和橘皮精油的实验流程中共有的操作是过滤4、以下关于微生物发酵的说法正确的是A.利用乳酸菌制作泡菜需经常开盖放气B.腐乳发酵后期密封处理利于毛霉繁殖C.醋酸杆菌利用线粒体供能进行果醋发酵D.利用酵母菌无氧呼吸产生酒精制作果酒5、酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛地应用于各个领域，下列有关叙述错误的是A.90℃高温会使Taq酶失去催化活性B.制备固定化酶的方法主要有包埋法、交联法和吸附法C.固定化酶固定时可能会造成酶的损伤而影响活性D.固定化细胞可以催化一系列酶促反应6、下列有关说法，正确的是（）A.对于频繁使用的菌种，可采用甘油管藏法保藏B.对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-4℃保藏的方法C.培养基中能够为微生物提供碳源的物质，一定也能作为能源D.平板划线时，每次划线前都要将接种环进行灼烧灭菌7、下列关于制作泡菜的叙述，错误的是（）A.添加陈泡菜水可明显缩短泡菜制作时间B.泡菜盐水浓度过高会导致泡菜咸而不酸C.制作泡菜的过程中有机物的种类将减少D.传统泡菜制作利用的是天然乳酸菌发酵8、下列关于测定亚硝酸盐含量的叙述不正确的是（）A.亚硝酸盐经一定方式显色反应后呈玫瑰红色B.显色反应后亚硝酸盐的理化性质没有发生变化C.不同浓度的亚硝酸盐显色深浅不同D.样品液显色后，通过与已知浓度的标准显色液比色，可以大致估算出样品液中亚硝酸盐的含量评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)9、科研人员研究了不同洗涤浓度（单位体积的水中加入洗衣粉的量）的两种加酶洗衣粉的去污力（%）；结果如下表。下列说法错误的是（）

。洗涤浓度。

去污力（%）

洗衣粉品种。

0.2%0.4%0.6%0.8%加酶洗衣粉甲71.578.980.079.9加酶洗衣粉乙69.580.480.680.5A.加酶洗衣粉中的酶制剂是通过基因工程生产出来的，并使用了包埋法固定B.若洗涤的是相同污布，则两种加酶洗衣粉的洗涤效果相似C.相同pH时，加酶洗衣粉洗涤效果比普通洗衣粉好D.所有加酶洗衣粉最适洗涤浓度都为0．4%，浓度过大是不必要的10、图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作；图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图。下列叙述正确的是。

A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液B.图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D.图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中11、某同学设计了如图所示的果酒和果醋发酵装置；下列有关叙述正确的是。

A.进行果醋和果酒发酵的最适温度相同B.该装置既可阻止空气进入，也便于发酵产生的气体排出C.去除弯管中的水，该装置即可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸D.发酵过程中，发酵液的pH逐渐降低，密度逐渐下降12、地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有稻草作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用刚果红处理，看到如图2所示情况，下列有关叙述，错误的是（）

A.②过程是涂布器取乙中的菌液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面B.甲、乙试管中的液体都属于液体培养基，主要作用是稀释菌种C.Ⅰ号、Ⅱ号培养基都属于固体培养基，配置时先灭菌后调节pHD.可挑取图2中周围出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化13、下列关于酶的应用的说法中，不合理的是（）A.使用加酶洗衣粉先用热水浸泡洗衣粉和衣物，洗涤效果好B.污渍成分比较复杂时应选用复合加酶洗衣粉，以减少用量C.加酶洗衣粉中的酶制剂需用特定材料包裹，属于固定化酶D.固定化酶可以反复使用，且固定化后不会影响酶的催化活性14、马奶酒是“蒙古八珍”之一，其中发酵型奶酒是利用某些微生物将马奶中的乳糖水解成单糖1和单糖2，酵母菌再利用这些单糖发酵产生酒精，从而制成马奶酒。科研人员研究分别利用野生型酵母菌和马奶酒中酵母菌的发酵情况，结果如下图所示。下列有关叙述正确的是（）

A.乳糖属于二糖，其元素组成是H、OB.14~16h时，野生型酵母菌内可能正在进行单糖2发酵相关基因的表达C.与野生型酵母菌相比，马奶酒中酵母菌完成酒精发酵用时更短D.在发酵过程中，两种类型的酵母菌细胞内均存在[H]的积累15、下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是（）A.在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长B.条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸C.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小D.将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量16、下列实验过程中，出现的正常现象有（）A.制作果酒时，发酵瓶中溶液产生较多泡沫B.用果酒制作果醋过程中，液面出现一层褐色菌膜C.制作腐乳过程中，豆腐表面发黏且长有白色菌丝D.用固定化酵母进行酒精发酵，凝胶珠浮在液面17、下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（）A.进行植物组织培养时，操作者的双手和工作台要进行灭菌处理B.用二倍体植株进行花药离体培养后得到的植株高度不育C.植物组织培养过程中发生了基因重组和染色体数目变异D.外植体在诱导形成愈伤组织期间，每天必须进行适当时间和强度的光照评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)18、凝胶色谱柱的装填。

装填凝胶时要尽量________，从而降低颗粒之间的空隙。不能有________存在，因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的________，降低分离效果。洗脱液不能______，露出凝胶颗粒，否则需重新装填。19、蛋白质的提取和分离一般分为四步：________、粗分离、______和________。20、在测定蛋白质分子质量时，通常使用_________________电泳。21、玫瑰精油是制作高级香水的主要成分，能使人产生愉悦感。实验室玫瑰精油的粗提取，将玫瑰花瓣与清水的质量按_____，用___________法进行提取。玫瑰精油的化学性质稳定，_________溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏。22、根据蒸馏过程中原料放置的位置，可以将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和__________蒸馏。其中，水中蒸馏的方法对于有些原料不适用，如柑橘和__________。这是因为水中蒸馏会导致原料_____和有效成分___________等问题。因此，柑橘、柠檬芳香油的制备通常使用___________。23、细胞代谢会合成许多产物；人们可将其提取纯化后用于生产生活实践，请据此回答：

（1）植物芳香油的组成非常复杂，主要包括______________及其衍生物。提取橘皮精油时常采用压榨法而不用水中蒸馏法，原因是____________________________________________________________。

（2）新鲜柑橘皮直接压榨，出油率低，为了提高出油率，需要将柑橘皮___________________________。

（3）橘皮压榨液还要加入相当于橘皮质量0．25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，是为了_______________。

（4）提取胡萝卜素，一般采用__________________（填方法），提取时加热瓶口要安装回流冷凝装置，这是为了__________________________________。

（5）有一种Car-red菌可以生产天然β-胡萝卜素，现采用固定化细胞技术固定该菌生产胡萝卜素，固定Car-red菌应采用________________法。24、为防止发酵液被污染，发酵瓶要清洗干净，用体积分数为_______________的酒精消毒。25、色谱柱填料的处理。

商品凝胶是干燥的颗粒，使用前需直接放在________中膨胀。为了加速膨胀，可以将加入__________的湿凝胶用________加热，逐渐升温至接近沸腾。这种方法不仅时间______，还能除去凝胶中可能带有的________，排除胶粒内的______。评卷人得分四、实验题(共3题，共15分)26、请回答以下有关从土壤中分离纤维素分解菌的实验的相关问题：

(1)纤维素分解菌分泌的纤维素酶包括C1酶；Cx酶和________三部分。

(2)将土壤样品制成菌液；先接种到以________为唯一碳源的液体培养基中培养一段时间，这种培养基从功能的角度来说属于____培养基，此过程的主要目的是______。

(3)对上述液体培养基中的纤维素分解菌进行分离与鉴定；需要采用__________法接种到添加染色剂______的培养基上培养。通过观察透明圈大小来判断其______。

(4)若要对纤维素酶进行固定化，一般不采用包埋法，原因是______。27、溴氰菊酯(分子式C22H19BrNO3)是菊酯类杀虫剂中毒性最强的一种；被广泛用于防治农业害虫，但其很难在自然环境中快速降解。现欲从富含溴氰菊酯农药的活性污泥中分离获得高效降解菊酯农药的菌株，请用一定量的活性污泥；溴氰菊酯母液及下表培养基，完成分离步骤：

。成分。

含量。

NH4NO3

1.0g

MgSO4·7H2O

0.5g

（NH4）2SO4

0.5g

KH2PO4

0.5g

K2HPO4

1.5g

NaCl

0.5g

水。

1000mL

(1)微生物的实验室培养中需要用到无菌技术；其目的是_________________________。

(2)在上述培养基中加入一定量的__________________________________；同时加入活性污泥样品，在适宜条件下培养一段时间，可增加目的菌的浓度。通过该过程的选择培养可以“浓缩”所需微生物，原因是：________________________________。用平板划线法接种后，若要获得能降解菊酯农药的细菌，一般将平板放在_____________℃的温度下倒置培养1～2d。

(3)将最终得到的菌株接种到___________________培养基上，将试管放入_____________℃冰箱内进行临时保藏。但是，这种方法保存的时间不长，因为菌种容易___________________。28、某些老陈醋会出现产气现象；原因是老陈醋中含有产气细菌。产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌，产气菌产生的气体积累会引起胀瓶，影响产品安全。实验小组以瓶装变质老陈醋（胀瓶）；未变质老陈醋为实验材料，筛选出导致老陈醋产气的细菌。回答下列问题：

(1)为了筛选产气细菌，实验人员设置了甲、乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种__________。阐述如何从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株：__________。

(2)实验小组初步筛选出了A1；A2和A3三株疑似的产气细菌；筛选过程如下图所示。

①过程a的接种方法是__________，判断依据是__________。

②统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致__________，或培养时间太长导致__________。

③现有5%的过氧化氢溶液，A1、A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材。写出判断A1、A2和A3三种菌株是否为产气细菌的实验思路：__________。

(3)分别用三组平板培养A1、A2、A3三种菌株，然后在培养基上分别加入等量一定浓度的青霉素溶液，培养一段时间后可以观察到一圈清晰区（抑菌圈），这是细菌生长被抑制所致。测量清晰区的直径，数据如下表所示：。细菌不同浓度青霉素条件下清晰区直径/mm5/（μg·mL-1）7.5/（μg·mL-1）10/（μg·mL-1）15/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）20/（μg·mL-1）A10.2281317A2710121516A356566

该实验的目的是__________。从表中数据可以看出，5μg·mL-1青霉素和20μg·mL-1青霉素在抑制A1和A3菌株上的区别是__________、__________。评卷人得分五、非选择题(共4题，共32分)29、常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵；而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。请分析回答下列问题：

（1）在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中；下列选项需要的是__________（填序号）。

①酒精灯②接种环③高压蒸汽灭菌锅④培养皿。

（2）将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以______为碳源的培养基中；_______（填“有氧”或“无氧”）条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。

（3）将搜集到的酵母菌放入培养液中扩大培养后；用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数的公式为（C÷V）×M，其中C代表______。对于需要长期保存的菌种，可以采用___________的方法。

（4）纯化后的酶A可以用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下；带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明_____________。

（5）生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下：将酶A固定在_______的载体上，将其装入反应柱内后，需用_____________充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶A。30、下图是利用山楂制作果酒果醋的流程：回答下列问题：

回答下列问题：

（1）酒精发酵主要利用酵母菌的____________呼吸；酵母菌与醋酸菌在结构上的主要区别是____________。

（2）酒精发酵前加入的白砂糖主要是为酵母菌提供____________。下图表示白砂糖的添加量对酒精生成量的影响；白砂糖的添加量为____________%左右最为合理。

（3）醋酸发酵前；需要加入纯净水对山楂果酒进行稀释，原因是________________________。

（4）转为醋酸发酵后；应将反应条件改变为________________________。

（5）将发酵好的山楂果醋在80℃左右的温度下热处理8〜10min，其目的是____________，同时还可以防止杂菌污染。31、【生物——选修1:生物技术实践】

请回答下列与苹果酒和苹果醋制作相关的问题：

(1)制作苹果酒过程中；酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物难以存活，是因为发酵液中的环境条件是____________。

(2)图30所示装置的充气口在制作苹果酒过程中；应该______，在制作苹果醋的过程中，应该___________。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是_______________。

(3)利用苹果酒制作苹果醋；应如何控制温度:_________________。

(4)制作苹果醋的过程中；使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得，图31所示操作是利用______法进行接种，在操作过程中应注意的事项有下列哪几项______(填序号)。

①每次划线前和结束时都需要灼烧接种环；②灼烧接种环后；待其冷却后再划线；③第二次及以后的划线，要从上一次划线的末端开始划线；④最后一次划线不能和首次划的线相接触。

(5)分离纯化获得菌种后，可采用__________的方法长期保存菌种。32、下图是果酒果醋的生产工艺流程简图。请据图回答以下问题：

（1）该流程中清洗的目的是____。葡萄榨汁前需要除去果柄，此操作是在清洗之____（填“前”或“后”）进行的。为了提高葡萄的出汁率，在压榨前可加入一定量的____酶。

（2）在酸性条件下，可用____来检测果酒发酵是否成功。若要进一步检测所得果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用____法；但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。

（3）在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有____菌发酵产生乳酸；也可能是____，导致____菌生长繁殖，产生醋酸。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、C【分析】【分析】

1；原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法；相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离；

2；用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的pH范围内；维持其结构和功能；

3；分离血红蛋白溶液时；将搅拌好的混合液转移到离心管中，经过中速长时离心后，可明显看到试管中溶液分为4层，从上往下数，第1层为甲苯层，第2层为脂溶性物质的沉淀层，第3层为血红蛋白水溶液，第4层为杂质沉淀层；

4；气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序；降低分离效果；

5；血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤；②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白溶液．（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析．（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳；

6；电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同；使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离或鉴定。

【详解】

A；凝胶色谱法分离蛋白质的原理是不同蛋白质分子的相对分子质量不同；在色谱柱中的移动速度不同，A正确；

B；电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程；B正确；

C；由于哺乳动物的成熟红细胞内无细胞核和众多的细胞器；所以常常选用猪、牛、羊等哺乳动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白，C错误；

D；透析的原理是小分子能够通过半透膜；因此,利用透析法可以去除样品中相对分子量较小的杂质，D正确。

故选C。2、D【分析】【分析】

本题考查果酒；果醋、腐乳和泡菜的制作技术。

【详解】

果酒主要是通过酵母菌的无氧呼吸产生，果醋发酵是醋酸杆菌利用葡萄糖为底物发酵而成有醋酸的形成，两种过程中发酵液的pH均较小，A正确；检验醋酸产生简单易行的方法是品尝或pH试纸测定，B正确；腐乳的发酵过程中，添加酒的含量一般控制在12%左右，抑制微生物的生长，C正确；泡菜盐水的制备，需要按照盐与清水的质量比为1:4的比例配制，D错误。3、C【分析】【分析】

植物芳香油的提取方法：蒸馏法；压榨法和萃取等。

（1）蒸馏法：芳香油具有挥发性。把含有芳香油的花；叶等放入水中加热；水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物；冷却后，油水混合物又会重新分成油层和水层，除去水层便得到芳香油，这种提取方法叫蒸馏法。根据蒸馏过程中原料放置的位置的标准，将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏。

（2）萃取法：这种方法需要将新鲜的香花等植物材料浸泡在乙醚；石油醚等低沸点的有机溶剂中；使芳香油充分溶解，然后蒸去低沸点的溶剂，剩下的就是芳香油。

（3）压榨法：在橘子；柠檬、甜橙等植物的果皮中；芳香油的含量较多，可以用机械压力直接榨出，这种提取方法叫压榨法。植物芳香油的蒸馏提取过程：浸泡、加热蒸馏、乳浊液的分离。

【详解】

A；水蒸气蒸馏法的原理是；先利用水蒸气将植物挥发性较强的芳香油携带出来，然后再分离。蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油，A正确；

B；压榨法提取植物芳香油的操作较简单；压榨法适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取，B正确；

C；若植物有效成分易水解；不应采用水蒸气蒸馏法，C错误；

D；提取玫瑰精油和橘皮精油的实验流程中均有分液操作（提取玫瑰精油的实验流程中的分液操作是用分液漏斗将油层和水层分开；提取橘皮精油的实验流程中的分液操作是先将过滤后的压榨液静置，再用分液漏斗将上层的橘皮精油分离出来），D正确。

故选C。4、D【分析】【分析】

1；果酒和果醋制作原理与发酵条件：

。

果酒制作。

果醋制作。

酵母菌。

醋酸菌。

菌种来源。

____上的野生型酵母菌。

变酸酒表面的菌膜。

发酵过程。

有氧条件下，酵母菌通过____大量繁殖：

C6H12O6＋6O2―→____________；

无氧条件下，酵母菌通过____产生酒精：

C6H12O6―→____________

氧气、糖源____时：

C6H12O6＋2O2―→2CH3COOH＋2CO2＋2H2O；

____糖源；氧气充足时：

C2H5OH＋O2―→____________

温度。

一般酒精发酵____________℃，繁殖最适为____℃左右。

最适为____________℃

气体。

前期：____，后期：____

需要____

时间。

____________天。

____________天。

2；腐乳的制作原理：毛霉等微生物产生蛋白酶、脂肪酶；分解有机物。

①蛋白质氨基酸＋小分子的肽。

②脂肪甘油＋脂肪酸。

3、泡菜的制作：菌种来源：附着在蔬菜上的乳酸菌。制作原理：在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。反应式：C6H12O6→2C3H6O3。

【详解】

A；利用乳酸菌制作泡菜时产物是乳酸；没产生气体，所以不需要开盖放气，A错误；

B；腐乳发酵后期密封处理不利于毛霉繁殖；B错误；

C；醋酸杆菌属于原核生物；细胞中没有线粒体，C错误；

D；酵母菌为异养兼性厌氧型生物；利用酵母菌无氧呼吸产生酒精制作果酒，D正确；

故选D。

【点睛】

归纳并识记不同微生物发酵的原理和过程是解题的关键。5、A【分析】【分析】

解答此题的关键是需要掌握固定化酶、固定化细胞的区别

使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较：。

直接使用酶

固定化酶

固定化细胞

酶的种类

一种或几种

一种

一系列酶

制作方法

物理吸附法、化学结合法、包埋法

物理吸附法、包埋法

是否需要营养物质

否

否

是

缺点

①对环境条件非常敏感，易失活②难回收，成本高，影响产品质量

不利于催化一系列的酶促反应

反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降

优点

催化效率高，耗能低、低污染

①既能与反应物接触，又能与产物分离②可以反复利用

成本低，操作容易

【详解】

TaqDNA聚合酶是从一种水生嗜热菌株中分离提取的，具有耐高温的特性，在90℃仍具有酶活性，A错误；固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法，B正确；酶在固定时可能会使酶的结构产生变化，从而改变酶的催化活性，C正确；固定化细胞含有催化生化反应的一系列酶，可在多步酶促反应中发挥连续催化作用，D正确。6、D【分析】【分析】

1.菌种保存：

。

临时保存法。

长期保存法（甘油管藏法）

适用对象。

频繁使用的菌种。

长期保存的菌种。

培养基类型。

固体斜面培养基。

液体培养基。

温度。

4℃

-20℃

方法。

菌落长成后于冰箱中保存；每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上。

将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于冷冻箱内保存。

缺点。

菌种易被污染或产生变异。

2.用稀释涂布平板法统计菌落数目时；有些细菌靠在一起，形成一个菌落，这样统计的菌落数往往比活菌的实际数目少；显微镜直接计数法统计微生物数目时，由于不能排除死细胞的数量，所以统计的数目往往偏高。

3.微生物的培养基一般含有碳源；氮源、水和无机盐等营养物质。

4.接种环常采用灼烧灭菌法灭菌。

【详解】

A；对于频繁使用的菌种；可采用临时保存法保藏，A错误；

B；对于需要长期保存的菌种；可以采用甘油管藏法保存，在低温-20℃下保存，B错误；

C；培养基中能够为微生物提供碳源的物质；不一定能作为能源，如无机碳源，C错误；

D；平板划线时；每次划线前都要将接种环进行灼烧灭菌，D正确。

故选D。7、C【分析】【分析】

泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌．在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。

【详解】

A；陈泡菜水中含有乳酸菌；加入“陈泡菜水”的目的是提供乳酸菌菌种，从而缩短泡菜发酵时间，A正确；

B；泡菜盐水浓度过高；乳酸菌会通过渗透作用失水，抑制乳酸菌生长，制作的泡菜会咸而不酸，B正确；

C；因为乳酸菌发酵过程中分解有机物；因此制作泡菜的过程，蔬菜中有机物的干重减少，乳酸发酵过程中产生很多中间产物，有机物种类增加，C错误；

D；传统制作泡菜所用微生物是乳酸菌发酵；其代谢类型是异养厌氧型，D正确。

故选C。8、B【分析】【分析】

测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。测定亚硝酸盐含量的常用方法是比色法，比色法测定亚硝酸盐含量的一般步骤是：配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色；计算。

【详解】

在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色复合物，A正确；由亚硝酸盐检测原理可知，显色是发生化学反应的过程，因此显色反应后亚硝酸盐的理化性质发生改变，B错误；不同浓度的亚硝酸盐显色深浅不同，亚硝酸盐浓度越大，呈现的颜色越深，C正确；测定亚硝酸盐含量的丰富是比色法，将显色后的样品与已知浓度的标准液比色，可大致估算出样品液中亚硝酸盐的含量，D正确。二、多选题(共9题，共18分)9、A:C:D【分析】【分析】

分析题干和表格信息可知；该实验的目的是探究不同酶；不同洗涤浓度对洗涤效果的影响，实验的自变量是酶的种类和浓度，因变量是洗涤效果，洗涤的温度、洗涤时间、洗涤方式、洗涤材料和污物的种类及污染程度等属于无关变量，无关变量应该保持一致且适宜。

【详解】

A；加酶洗衣粉是将通过基因工程生产的酶通过特殊物质层层包裹；与洗衣粉的其他成分隔离，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用，并没有运用到固定化酶技术，因为酶未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用，A错误；

B；分析表格中的信息可知；相同浓度条件下，两种洗衣粉的洗涤效果无显著差异，因此若洗涤的是相同污布，两种加酶洗衣粉的洗涤效果相似，B正确；

C；pH会影响酶的活性；pH过高或过低时都会使酶变性失活，因此相同pH时，加酶洗衣粉洗涤效果不一定好于普通洗衣粉，C错误；

D；该表格显示甲、乙两种洗衣粉的最适洗涤浓度相同；都为0.6%左右，但是不能说明所有加酶洗衣粉最适洗涤浓度都相同，D错误。

故选ACD。

【点睛】10、B:C:D【分析】【分析】

制作固定化酵母细胞的实验步骤：1、酵母细胞的活化；2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液；3；配制海藻酸钠溶液（该实验成败的关键步骤）；4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合；5、固定化酵母细胞。

【详解】

A；溶化的海藻酸钠应冷却至室温后与活化的酵母菌混合；A错误；

B、海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入CaCl2溶液中；以制备凝胶珠，B正确；

C；搅拌可使酵母菌与培养液充分接触；有利于发酵的顺利进行，C正确；

D；凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次后；再转移到发酵装置中，D正确。

故选BCD。11、B:D【分析】【分析】

果酒制作的原理：先通气；酵母菌进行有氧呼吸而大量繁殖，后密封，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。果醋制作的原理：醋酸菌是嗜温菌，也是嗜氧菌，因此其进行果醋发酵时需要不间断的供氧。

【详解】

A；果酒发酵的最适温度是18～25℃；果醋发酵的最适温度是30～35℃，错误；

B；果酒发酵需要无氧环境；该装置鹅颈中的水可以隔绝空气，创造无氧环境，果酒发酵中产生的气体是二氧化碳，该装置便于二氧化碳的排除，正确。

C；醋酸菌是嗜氧菌；即使去除弯管中的水，该装置也不能满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌呼吸所需的氧气，错误；

D；果酒发酵过程中；葡萄糖分解变成酒精，因此发酵液密度会逐渐减小；同时pH会逐渐降低，呈酸性，正确。

故选BD。12、A:B:C【分析】分解纤维素的微生物的分离实验的原理：①土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；根据Ⅰ号培养基上菌落分布均匀可知；②过程是用涂布器取乙中的样品稀释液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面，即乙中是分解纤维素菌的样品稀释液，不是菌液，A错误；

B；液体培养基的作用是让菌体增殖；而不是稀释菌种，甲、乙试管中的液体都是样品稀释液，捕食液体培养基，B错误；

C；配置固体培养基的基本步骤是计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板；故需要先调pH，再灭菌，C错误；

D；刚果红能与纤维素形成红色复合物；若菌落周围出现透明圈，说明纤维素分解菌将纤维素进行了分解，可挑取该菌落用平板划线法继续纯化该菌体，D正确。

故选ABC。13、A:C:D【分析】【分析】

加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉；目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶；脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力。

【详解】

A；热水浸泡会使酶失活；从而降低加酶洗衣粉的洗涤效果，A错误；

B；复合加酶洗衣粉中有多种酶；因酶有专一性，所以污渍成分复杂时选用复合加酶洗衣粉较好，B正确；

C；特定材料包裹酶是避免酶在不良环境中失活；不属于固定化酶，C错误；

D；通过化学结合法等方法固定酶会影响其催化活性；D错误。

故选ACD。

【点睛】14、A:B:C【分析】【分析】

据图可知；野生型酵母菌首先利用单糖1进行发酵，当这种糖耗尽时（14h左右），酒精产量的增加停滞一段时间，才开始利用单糖2进行发酵。

【详解】

A；乳糖是由1分子半乳糖和1分子葡萄糖构成的二糖；其元素组成是C、H、O，A正确；

B；据图可知；野生型酵母菌首先利用单糖1进行发酵，当这种糖耗尽时（14h左右），酒精产量的增加停滞一段时间，才开始利用单糖2进行发酵。故14~16h时，野生型酵母菌内可能正在进行单糖2发酵相关基因的表达，以促进对单糖2的利用，B正确；

C；由图可知；野生型酵母菌完成酒精发酵用时大约22h，马奶酒中酵母菌完成酒精发酵用时大约14h，即马奶酒中酵母菌完成酒精发酵用时更短，C正确；

D、在酵母菌酒精发酵过程中，[H]与丙酮酸反应生成酒精和CO2；因此两种类型的酵母菌内均不存在[H]的积累，D错误。

故选ABC。15、A:B:C【分析】【分析】

果酒、果醋制作原理与发酵条件。

果酒制作

果醋制作

菌种

酵母菌

醋酸菌

菌种

来源

附着在葡萄皮上的酵母菌

变酸酒表面的菌膜

发酵

过程

有氧条件下，酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6＋6O26CO2＋6H2O；无氧条件下，酵母菌通过无氧呼吸产生酒精：C6H12O62C2H5OH＋2CO2

氧气、糖源充足时：

C6H12O6＋2O22CH3COOH＋2CO2＋2H2O；

缺少糖源、氧气充足时：

C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O

温度

一般酒精发酵18～25℃，

繁殖最适为20℃左右

最适为30～35℃

气体

前期：需氧，后期：无氧

需要充足的氧气

【详解】

果酒发酵后期；酵母菌活动逐渐减弱，产生的二氧化碳逐渐降低，放气时间间隔可延长，A正确。当氧气；糖源都充足时，醋酸菌可将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，B正确。果酒发酵过程中因为营养物质的消耗，有氧呼吸过程中也有水的产生，故发酵液的密度减小，C正确。制作腐乳时是逐层加盐，瓶口处需加大用盐量，以减小被杂菌污染的可能性，D错误。故选：ABC。

【点睛】

解答本题关键在于对果酒、果醋的制作原理的理解应用。16、A:C:D【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，进行有氧呼吸大量繁殖；（2）在无氧条件下，产生酒精和二氧化碳。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒制作时；除了产生酒精，还会产生大量二氧化碳，因此发酵瓶中容易产生较多泡沫，A正确；

B；用果酒制作果醋过程中；液面出现一层白色菌膜，而不是褐色菌膜，B错误；

C；制作腐乳过程中；豆腐表面发黏且长有白色菌丝，C正确；

D；用固定化酵母进行酒精发酵；酒精浓度越来越高，因此凝胶珠逐渐浮上液面，D正确。

故选ACD。

【点睛】17、A:C:D【分析】【分析】

植物组织培养概念（广义）又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织。器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养概念（狭义）指用植物各部分组织，如形成层；薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

【详解】

A；植物组织培养需要在严格的无菌和无毒条件下进行；因此要用酒精等对操作员的手、操作的操作台、植物组织培养的外植体等进行消毒处理；用于植物组织培养的培养基需要进行高压蒸汽灭菌处理，A错误；

B；用二倍体植株花药离体培养获得单倍体植株；高度不育，B正确；

C；植物组织培养过程中；细胞通过有丝分裂方式增殖，不会发生基因重组，C错误；

D；植物细胞组织培养时现脱分化形成愈伤组织；这段时间要无菌、恒温、避光，D错误。

故选ACD。三、填空题(共8题，共16分)18、略

【分析】【详解】

人教版教材指出，凝胶色谱柱的装填装柱前要将色谱柱垂直固定在支架上。因为干的凝胶和用级冲液平衡好的凝胶的体积差别很大，因此装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。凝胶用蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液，在与色谱柱下端连接的尼龙管打开的情况下，一次性缓慢倒人色谱柱内，装填时可轻轻蔽动色谱柱，使凝胶装填均匀。在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量紧密，以降低凝胶颗粒之间的空隙。在装填凝胶柱时，不得有气泡存在。气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。在凝胶色谱操作过程中，不能发生洗脱液流干，露出凝胶颗粒的现象。一旦发生这种情况，凝胶色谱柱需要重新装填。【解析】紧密气泡洗脱次序流干19、略

【分析】【详解】

血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。【解析】样品处理纯化纯度鉴定20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】SDS—聚丙烯酰胺21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】1：4水蒸气蒸馏难22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】水气柠檬焦糊水解压榨法23、略

【分析】【分析】

1；植物芳香油主要包括萜类化合物及其衍生物。提取橘皮精油时常采用压榨法而不用水中蒸馏法；原因是水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题。

2；新鲜柑橘皮直接压榨；出油率低，为了提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。

3、固定方法：。名称原理适用范围包埋法将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中多用于细胞的固定化学结合法利用共价链、离子键将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上多用于酶的固定物理吸附法通过物理吸附作用，把酶固定在纤维素、琼脂糖、多孔玻璃和离子交换树脂等载体上

4；胡萝卜素的性质：胡萝卜素是橘黄色结晶；化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂，因此提取胡萝卜素常用萃取法。

【详解】

（1）植物芳香油的组成非常复杂；主要包括萜类化合物及其衍生物。提取橘皮精油时常采用压榨法而不用水中蒸馏法，原因是水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题。

（2）新鲜柑橘皮直接压榨；出油率低，为了提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。

（3）橘皮压榨液还要加入相当于橘皮质量0．25%的NaHCO3和5%的Na2SO4；是为了使橘皮油易于与水分离。

（4）提取胡萝卜素；根据胡萝卜素易溶于有机溶剂，一般采用萃取法，提取时加热瓶口要安装回流冷凝装置，这是为了防止加热时有机溶剂挥发。

（5）Car-red菌为细胞；体积较大，难以被吸附或结合，适于采用包埋法固定。

【点睛】

本题考查固定化技术、从生物材料中提取某些特定成分，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验步骤等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。【解析】萜类化合物原料焦糊和有效成分水解干燥去水，并用石灰水浸泡使橘皮油易于与水分离萃取法防止加热时有机溶剂挥发包埋24、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】70%25、略

【分析】【详解】

色谱柱填料的处理。

商品凝胶是干燥的颗粒，使用前需直接放在洗脱液中膨胀。为了加速膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至接近沸腾。这种方法不仅时间短，还能除去凝胶中可能带有的微生物，排除胶粒内的空气。【解析】洗脱液洗脱液沸水浴短微生物空气四、实验题(共3题，共15分)26、略

【分析】【分析】

要筛选出纤维素分解菌，应该用以纤维素作为唯一碳源的选择培养基。纤维素分解酶的鉴定常用刚果红染色法，其原理是刚果红能和纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌；纤维素酶包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。据此分析作答。

【详解】

(1)纤维素分解菌分泌的纤维素酶包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶。

(2)要筛选出纤维素分解菌；应该用以纤维素作为唯一碳源的选择培养基培养一段时间，其目的是增加纤维素分解菌的浓度或数目（同时抑制其他微生物的增殖）。

(3)用平板划线法接种到添加染色剂刚果红的培养基上培养；可对纤维素分解菌进行分离与鉴定。分解纤维素能力越大，产生的透明圈越大，故可以通过观察透明圈大小来判断其分解纤维素能力的大小。

(4)纤维素酶分子较小；容易从包埋材料中漏出来，所以一般不采用包埋法。

【点睛】

本题考查纤维素分解菌的筛选和纤维素酶的组成以及固定方法的知识点，要求学生掌握培养基的类型及其作用，理解微生物的筛选方法和原则，这是该题考查的重点，同时要求学生能够准确识记纤维素酶的组成。【解析】葡萄糖苷酶纤维素选择增加纤维素分解菌的浓度或数目（同时抑制其他微生物的增殖）平板划线法刚果红分解纤维素能力的大小酶体积较小，容易从包埋材料中漏出27、略

【分析】【分析】

微生物接种的方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法。

【详解】

（1）微生物的实验室培养中需要用到无菌技术；其目的是防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，从而获得纯净培养物；防止感染操作者；防止污染环境。

（2）现欲从富含溴氰菊酯农药的活性污泥中分离获得高效降解菊酯农药的菌株；所以在上述培养基中加入一定量的溴氰菊酯母液，通过该过程的选择培养可以“浓缩”所需微生物，原因是在选择培养的条件下，可以允许特定的微生物生长，同时阻止或抑制其他种类微生物生长，起到了“浓缩”作用；若要获得能降解菊酯农药的细菌，一般将平板放在30~37℃的温度下倒置培养1～2d。

（3）将最终得到的菌株接种到固体斜面培养基上；将试管放入4℃冰箱内进行临时保藏。但是，这种方法保存的时间不长，因为菌种容易被污染或产生变异。

【点睛】

本题考查微生物的培养和分离，解答本题的关键是理解无菌技术和平板划线法。【解析】防止实验室的微生物被其他外来微生物污染，从而获得纯净的培养物；防止感染操作者；防止污染环境溴氰菊酯母液在选择培养的条件下，可以允许特定的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长，起到“浓缩”作用30-37固体斜面4被污染或产生变异28、略

【分析】【分析】

题中用瓶装变质老陈醋（胀瓶）；未变质老陈醋为实验材料；经过分离、纯化、并初步筛选出A1、A2和A3三株疑似的产气细菌，进一步探究了不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用，表中数据所示的清晰区直径（抑菌圈）越大，代表该菌种生长受到的抑制作用越强。

【详解】

（1）为了筛选产气细菌；实验人员设置了甲；乙、丙三组培养基，甲作为空白对照组，乙接种未变质的老陈醋，丙接种等量的变质老陈醋，对比乙和丙培养基上的菌落形态，从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落，可以从上述培养基中初步筛选疑似产气细菌的菌株。

（2）①过程a所得待测培养基中菌落的分布较为均匀；据此判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法。

②区分菌落种类的依据是菌落的形态；大小、隆起程度和颜色等特征；统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，能有效防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目；或培养时间太长导致菌落粘连影响计数、培养基表面干燥脱水影响菌落数目的统计。

③因为老陈醋中的产气细菌是一类能产生过氧化氢酶的细菌；若有5%的过氧化氢溶液，A1；A2和A3菌株，必要的培养基等实验器材，可以将A1、A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上，观察是否产生气泡，若产生气泡则为产气细菌。

（3）根据题意和表格信息分析可知，该实验的目的是探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用。在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好；在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大。【解析】(1)等量的变质老陈醋对比乙和丙培养基上的菌落形态；从丙培养基上分离出和乙培养基形态不同的菌落。

(2)稀释涂布平板法培养基中长出的菌落是均匀分布的遗漏菌落的种类和数目菌落粘连影响计数（或培养基表面干燥脱水）将A1；A2和A3菌株分别接种到滴有5%的过氧化氢溶液的培养基上；若产生气泡则为产气细菌。

(3)探究不同浓度青霉素对A1、A2、A3菌株的抑制作用在抑制A1方面，5μg·mL-1的青霉素抑菌效果较差，20μg·mL-1的青霉素抑菌效果好在抑制A3方面，5μg·mL-1和20μg·mL-1青霉素的抑菌效果相差不大五、非选择题(共4题，共32分)29、略

【分析】【分析】由题文描述可知；该题考查的是微生物的实验室培养；微生物的分离与计数、蛋白质的分离、固定化酶等相关基础知识。

【详解】(1)平板培养基配制的基本流程为：计算→称量→溶化（包括琼脂）→调节PH→灭菌（将配制好的培养基转移至锥形瓶中；加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅）→倒平板（在酒精灯火焰旁进行），可见，在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，需要的是酒精灯；高压蒸汽灭菌锅和培养皿，即①③④。

(2)由题意可知：自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精；而酒精是酵母菌无氧呼吸的产物，因此将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以木糖为碳源的培养基中，在无氧条件下培养一周后，如果有些酵母菌死亡，则说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。

(3)计算样品菌液中的菌株数时；每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表样品菌液的稀释倍数。对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的