2025年冀教新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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①制备工程农杆菌②构建植物表达载体。

③获取人类凝血因子Ⅸ基因④番茄植株中凝血因子Ⅸ基因的检测。

⑤用农杆菌转化番茄植株并筛选⑥提取凝血因子Ⅸ并检测活性A.③①②⑤⑥④B.⑥③①②⑤④C.④③②①⑤⑥D.③②①⑤④⑥2、下列对哺乳动物体细胞核移植技术的描述，错误的是（）A.该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植B.通常采用减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞作为受体细胞C.可通过显微操作法除去卵母细胞核D.克隆动物是对提供体细胞核的动物进行了完全复制3、细菌性肺炎一般需要注射或口服抗生素进行治疗。当细菌出现耐药性时，疗效下降。金黄色葡萄球菌（SAU）是细菌性肺炎的病原体之一。A、B、C、D四种抗生素均可治疗SAU引起的肺炎。为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂量抗生素A、B、C、D四张大小相同的滤纸片a、b；c、d置于SAU均匀分布的平板培养基上；在适宜条件下培养48h，结果如图。下列相关叙述不正确的是（）

A.对实验使用的培养皿进行灭菌，可以采用干热灭菌的方法B.用一定稀释倍数的菌液涂布在不含抗生素的培养基上可获得SAU均匀分布的平板C.该实验表明，临床上疗效最佳的是抗生素DD.滤纸片b周围抑菌圈中出现一菌落，可能是形成该菌落的SAU发生了基因突变4、青蒿素是从植物黄花蒿的叶片中所提取的一种代谢产物，而茎及其他部位中的青蒿素含量及其微小。下列关于利用植物组织培养生产青蒿素的叙述，错误的是（）A.在黄花蒿组织培养过程中的一定阶段必须给予光照B.加入大量生长素可能不利于组织生长，不能提高青蒿素的产量C.可通过大量培养愈伤组织以直接获得青蒿素D.可大规模栽培组织培养苗以获取药用成分5、如图为蛋白质工程操作的基本思路；下列叙述正确的是（）

A.图中①代表转录，②代表翻译，④代表分子设计，⑤代表DNA合成B.蛋白质工程的目标是对基因的结构进行分子设计C.从图中可以看出蛋白质工程的基本途径是违背中心法则的D.蛋白质工程是改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，不需要对基因进行操作6、如表所示为某微生物培养基的配方，下列有关说法错误的是（）。成分含量成分含量NaNO33gFeSO40.01gK2HPO41g葡萄糖30g琼脂15g定容至1000mLMgSO4·7H2O0.5g抗生素0.1万单位

A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基B.由培养基的原料可知，所培养的微生物是异养型，培养的微生物可以是酵母菌C.本培养基中抗生素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求D.若该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去抗生素和NaNO3，并加入尿素评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)7、2020年7月20日，国际医学权威期刊《柳叶刀》上发表了新冠病毒疫苗II期临床试验的成果。该试验是由陈薇院士等人领衔的团队开展的研究，试验中使用的疫苗是一种腺病毒载体重组新冠病毒疫苗(基因重组疫苗)。试验结果表明，单次接种疫苗28天后，99．5%的受试者产生了特异性抗体，95．3%受试者产生了中和抗体，89%的受试者产生了特异性T细胞免疫反应。这表明，陈薇团队研发的新冠疫苗可为健康人群提供“三重保护”，将新冠病毒“拒之门外”。下列叙述正确的是（）A.该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶B.受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后，体内能产生分泌特定抗体的效应T细胞C.主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性D.新冠肺炎康复患者可以不注射该疫苗8、下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（）A.在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进排卵B.从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养获能处理后才能用于受精C.受精过程中，卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，阻止多精入卵D.设计试管婴儿技术，有利于生育健康的下一代，不会造成社会危害9、为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。下列不符合生物技术的安全性和伦理问题的是（）A.利用生物技术改造工程菌获得大量的抗生素B.克隆技术可应用到器官移植但不能进行人体克隆C.中国反对生物武器，但在特殊情况下可以生产生物武器D.基因编辑技术不仅可用于疾病预防领域研究，也可用于编辑婴儿10、PCR可以特异性地快速扩增目的基因，成功的扩增应该产生与目的基因大小一致的扩增产物，不严谨的操作会导致无扩增产物或出现非目的基因扩增产物。下列说法正确的是（）A.若PCR反应缓冲溶液中未加入Mg2+，则结果可能不会出现扩增产物B.若模板DNA中含有抑制耐高温的DNA聚合酶活性的杂蛋白，则结果可能不会出现扩增产物C.若引物与非目的序列发生碱基互补配对，则结果可能会出现非目的序列扩增产物D.若引物间发生碱基互补配对，则结果可能会出现非目的序列扩增产物11、下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程；下列相关叙述正确的是（）

A.用胰蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞B.生物反应器内应控制好适宜的温度，并冲入纯氧保证细胞呼吸C.培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长D.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，减少环境污染12、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中，下图为该操作示意图。下列相关叙述正确的是（）

A.人工诱导原生质体融合可使用离心法B.融合的原生质体再生出细胞壁后再进行组织培养C.杂种细胞经过一定激素和营养的诱导，发育成为杂种植株D.筛选出的杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，但只能通过母本进行传递13、我国首例绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪的培育过程如图所示，其中字母代表结构或生物，数字代表过程，下列相关叙述错误的是（）

A.为了①和②的顺利完成，需要用灭活的病毒对细胞进行诱导B.将C的细胞核去掉，实质上是去除纺锤体—染色体复合物C.为避免将E植入F时产生排斥反应，移植前应给F注射免疫抑制剂D.移入F的桑葚胚要经历囊胚、原肠胚等阶段才能形成猪的幼体14、世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿用到了能够精确定位并修饰基因的基因编辑技术，即基因编辑时用约为头发二十分之一细的针把Cas9蛋白和特定的RNA引导序列注入受精卵中，对CCR5基因进行修改，预期婴儿出生后能天然抵抗人类免疫缺陷病毒，关于该技术的安全性问题，下列说法正确的是（）A.基因编辑时，引导序列可能发生变异，导致剪切错误，造成不可预知的后果B.经过基因编辑的个体，有可能影响基因选择性表达，而导致其他疾病的产生C.将基因编辑技术应用于治疗性克隆，符合人类伦理道德D.只要加强监管、完善法律法规、完善技术手段，不需担心基因编辑技术的安全性15、在中国的传说中，醋最早是由“酒圣”杜康之子发明。杜康的儿子墨塔在-．次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸，但香气扑鼻，且酸甜可口，于是墨塔便把“廿一日”加一“西”字，给这种酸水起名为“醋”。下列叙述正确的是（）A.酒发酵初期通入氧气的目的是促进酵母菌进行有氧呼吸，大量增殖B.酒精是在酵母菌细胞的线粒体中产生，可用酸性重铬酸钾试剂检测C.墨塔酿酒反成醋的原因可能是发酵装置密封不严或发酵装置没有清洗干净D.酿酒时糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)16、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。17、功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中______部位的两个核苷酸之间的______断开，因此具有______。18、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。19、去除DNA中的杂质，可以直接在DNA粗提取液中加入___________，反应10—15分钟，嫩肉粉中的________________能够分解_______________。20、去除DNA中的杂质，可以在滤液中加入2mol/L浓度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再调节NaCL溶液浓度为0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用浓度为2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________21、植物诱导融合的方法：物理法包括______等。化学法一般是用_____作为诱导剂。评卷人得分四、判断题(共3题，共12分)22、目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。（选择性必修3P54）()A.正确B.错误23、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术，体现了动物细胞的全能性。（选择性必修3P52）()A.正确B.错误24、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。（选择性必修3P93）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共9分)25、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。评卷人得分六、综合题(共2题，共16分)26、人参是一种名贵药材；具有良好的滋补作用。口服α-干扰素在慢性乙肝；丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

。限制酶识别序列和切割位点EcoRlG↓AATTCBamHlG↓GATCC

（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是________________________。设计引物时需要避免引物之间形成____________，而造成引物自连。科研人员还在两种引物的一端分别加上了________和________序列；以便于后续的剪切和连接。

（2）过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________，过程③中需先用____处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

（3）过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过______过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是______________________。（写两点）

（4）治疗中发现，用于口服的α-干扰素在胃中会受到一定程度的破坏影响其功效，需要利用_____________技术加以改造；以达到满意效果。

（5）科研人员认为，将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好，其依据是______________________________。27、植物组织培养是克隆植物的一种方法；过程如下图所示，请据图回答相关的问题：

(1).为了获得脱毒植株，外植体往往取自植物的茎尖等处的分生组织，其原因是________。

(2).培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加植物激素，其目的是诱导外植体____________________。

(3).在生产实践中为获得大量的细胞产物，如紫杉醇，可将①________________放入液体培养基中，经机械方法分散成单个细胞，制备成细胞悬液，再经过____________即可获得大量细胞。

(4).组织培养过程需要植物生长和繁殖的最适条件，否则在光学显微镜下可能观察到________________________________________异常；进而使植物出现遗传不稳定甚至不育现象。

(5).植物组织培养技术不仅应用于花卉、果树的快速、大量繁殖以及脱毒植株的获取，还广泛用于__________________、______________等育种过程中。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

利用番茄表达人凝血因子属于基因工程的技术范畴。

【详解】

基因工程的基本步骤：获取目的基因；构架表达载体，受体细胞的转化，目的基因的表达及检测。

对植物细胞进行转化通常用农杆菌转化法。

综合可知正确的排序应为：③②①⑤④⑥，故选D。2、D【分析】【分析】

动物体细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。

【详解】

A；哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植；由于胚胎细胞的全能性高于体细胞，所以动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植，A正确；

B；体细胞核移植过程中通常采用减数第二次分裂期去核卵母细胞作为受体细胞；因为减数第二次分裂期的卵母细胞中含有促进细胞全能性表达的物质，B正确；

C；体细胞核移植的过程中；去除卵母细胞中的细胞核可采用显微操作去核法，C正确；

D；通过体细胞核移植方法生产的克隆动物不是对供体细胞动物进行了100%的复制；因为克隆动物还有一部分遗传物质来自受体的细胞质，D错误。

故选D。3、C【分析】【分析】

分析题图：图示表示分别将含等剂量抗生素A、B、C、D四张大小相同的滤纸片a、b；c、d置于SAU均匀分布的平板培养基上；抑菌圈越大，说明该抗生素的抑菌效果越好。

【详解】

A；对培养皿等玻璃器皿进行灭菌可采用干热灭菌的方法；A正确；

B；抗生素会抑制细菌生长；用一定稀释倍数的菌液涂布在不含抗生素的培养基上可获得SAU均匀分布的平板，B正确；

C；抑菌圈越大；说明抗生素的抑菌效果越好，因此A、B、C、D四种抗生素，抑菌效果最佳的是抗生素A，C错误；

D、滤纸片b周围抑菌圈中出现一菌落；可能是该菌落的SAU发生了基因突变，产生抗性，D正确。

故选C。

【点睛】4、C【分析】【分析】

1；植物组织培养过程：外植体（离体的植物细胞、组织或器官）脱分化形成愈伤组织；再分化形成胚状体，最后发育成新植体。

2；诱导愈伤组织应该避光培养；原因是：在有光时往往形成维管组织，而不形成愈伤组织．愈伤组织再分化成胚状体时需要光照，原因是：①叶绿素的合成需要光照；②试管苗需要光进行光合作用制造有机物提供营养物质。

3；植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】

A；植物组织培养包括脱分化和再分化两个过程；其中脱分化过程不需要光照，而再分化过程需要光照，A正确；

B；生长素生理作用具有两重性；加入大量生长素可能不利于组织生长，生长素对脱分化和再分化过程具有调节作用，但不能直接提高青蒿素的产量，B正确；

C；青蒿素是从植物黄花蒿的叶片中所提取的一种代谢产物；而茎及其他部位中的青蒿素含量及其微小，因此通过大量培养愈伤组织不能直接获得青蒿素，C错误；

D；可大规模栽培组织培养苗以获取药用成分；D正确。

故选C。

【点睛】5、A【分析】【分析】

1；蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。

2；蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构；又称为第二代的基因工程。

3、基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）。以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）

【详解】

A；图中①代表转录；②代表翻译，④代表根据蛋白质的结构进行氨基酸序列的分子设计，⑤代表DNA合成，A正确；

B；蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计；通过基因合成或修饰实现，B错误；

C；蛋白质工程是根据具有相应功能的蛋白质结构推测氨基酸序列；进而推测出脱氧核苷酸序列，因此中心法则与蛋白质工程的基本途径相反，但不违背中心法则，C错误；

D；蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。可见，蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计，通过基因合成或改造实现，D错误。

故选A。6、C【分析】【分析】

各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基等。培养基按其特殊用途可分为选择性培养基和鉴别培养基。液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基。

【详解】

A；从培养基成分看；配方中含有凝固剂琼脂，故依物理性质划分，应属于固体培养基，A正确；

B；由培养基的原料可知；葡萄糖属于有机碳源，因此所培养微生物的同化作用类型是异养型，加入的青霉素能抑制细菌的生长，酵母菌是异氧型微生物，都可利用葡萄糖作为碳源，都属于真核生物，因此该培养基培养的微生物可以是酵母菌，B正确；

C；本培养基中抗生素的添加是为了筛选能够抗该抗生素的微生物；C错误；

D、若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应以尿素为唯一氮源，因抗生素有杀菌作用，故应除去抗生素和NaNO3；并应加入尿素，D正确。

故选C。二、多选题(共9题，共18分)7、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已经发展了三代：

第一代疫苗指的是灭活疫苗和减毒活疫苗；通过体外培养病毒，然后用灭活的病毒刺激人体产生抗体，它是使用最为广泛的传统疫苗；

第二代疫苗又称为亚单位疫苗；是通过基因工程原理获得的具有免疫活性的病原特异性结构蛋白，刺激人体产生抗体；

第三代疫苗是核酸疫苗；又称基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是将编码某一抗原蛋白的基因作为疫苗，注射到人体中，通过正常的人体生理活动产生抗原蛋白，诱导机体持续作出免疫应答产生抗体。

【详解】

A；该疫苗是基因重组疫苗；需要将腺病毒载体和新冠病毒的基因进行连接，所以该疫苗的制备需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶，A正确；

B；受试者接受重组新冠病毒疫苗的接种后；体内能产生分泌特定抗体的浆细胞，B错误；

C；主要通过检测受试者体内新冠病毒抗体的含量来评价试验的有效性；C正确；

D；新冠肺炎康复患者体内产生了新冠病毒抗体和和相应的记忆细胞；可以不注射该疫苗，D正确。

故选ACD。8、A:C【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；在采集卵母细胞之前；需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进超数排卵，A正确；

B；从卵巢中吸取的卵母细胞；必须经体外培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；

C；受精过程中；卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，这是防止多精入卵的两道屏障，C正确；

D；以治疗为目的的设计试管婴儿技术；是救治患者最好、最快捷的办法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在伦理问题，D错误。

故选AC。

【点睛】9、C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；可以通过生物合成法、全化学合成法、半化学合成法来产生抗生素；其中生物合成法中可以通过工程菌制造法来产生，A正确；

B；克隆技术是可以克隆器官的；但是不可以人体克隆，禁止生殖性克隆，B正确；

C；中国声明：在任何情况下；不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误；

D；基因编辑技术可用于疾病预防领域研究；但不能用于编辑婴儿，D错误。

故选CD。10、A:B:C【分析】【分析】

PCR技术扩增目的基因。

（1）原理：DNA双链复制。

（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃；引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

【详解】

A、Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大；浓度过高可降低PCR扩增的特异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带，A正确；

B；若模板DNA中含有抑制耐高温的DNA聚合酶活性的杂蛋白；则可能会抑制PCR反应中的延伸步骤，导致结果不会出现扩增产物，B正确；

C；若引物与非目的序列发生碱基互补配对；则会使引物与模板结合位置错误，导致扩增片段错误出现非目的序列扩增产物，C正确；

D；若引物间发生碱基互补配对；则结果可能不出现扩增产物或产物减少，D错误。

故选ABC。11、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2。“人造牛肉”的培养不仅产量高；并可以减少成本和降低环境污染。

【详解】

A；胰蛋白酶处理动物组织；可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，A正确。

B、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2；B错误。

C；动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上。所以细胞贴附瓶壁的培养瓶或培养皿的内表面光滑；无毒，易于贴附，如果想得到大量的产物，可以增大细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长，C正确。

D；人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产；同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，D正确。

故选ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：该图为体细胞杂交过程；其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；人工诱导原生质体融合的方法有化学法（聚乙二醇）和物理法（离心、振动、电刺激等）两大类；A正确；

B；杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志；融合成功之后再进行组织培养，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导；脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，进一步成为杂种植株，C正确；

D；甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，具备乙品种细胞质中的可育基因，因此精子中具备一半核基因，并可通过父本（精子）进行传递，D错误。

故选ABC。13、A:C【分析】【分析】

分析图解，可以看出绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪涉及了多项生物工程技术。图中B表示基因表达载体的构建；然后将目的基因导入猪胎儿的成纤维细胞，经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞的细胞核与猪的卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞。重组细胞经过早期胚胎培养到桑椹胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内，最后生成转基因克隆猪。由此可见，该过程中利用基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。

【详解】

A；①是将重组DNA导入受体细胞；直接采用显微注射法，无需对受体细胞进行诱导，②过程通常是将细胞注入去核卵母细胞中，然后利用电融合法使D构建成功，A错误；

B；C是处于MⅡ期的卵母细胞；这个时期的“核”实际上是纺锤体—染色体复合物，B正确；

C；受体对移入的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；因此无需给F注射免疫抑制剂，C错误；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要经历囊胚、原肠胚阶段的发育才能成为猪的幼体，D正确。

故选AC。14、A:B:C【分析】【分析】

基因编辑技术是指通过核酸酶对靶基因进行定点改造；实现特定DNA的定点敲除；敲入以及突变等，最终下调或上调基因的表达，以使细胞获得新表型的一种新型技术。

【详解】

A；基因编辑时的引导序列是RNA；RNA的碱基序列改变可能导致识别错误，导致剪切错误，造成不可预知的后果，A正确；

B；基因编辑后；基因的序列发生改变，基因的表达具有选择性，可以相互影响，基因选择性表达受干扰后，容易导致某些疾病的产生，B正确；

C；依据我国法律；生殖性克隆不符合人类伦理道德，治疗性克隆符合人类伦理道德，C正确；

D；加强监管、完善法律法规、完善技术手段；但基因编辑技术仍存在一定的安全性，所以要理性看待，D错误。

故选ABC。15、A:C:D【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；酵母菌是兼性厌氧型微生物；所以发酵初期通入氧气的目的是促进酵母菌进行有氧呼吸，大量增殖，A正确；

B；酒精是酵母菌无氧呼吸的产物；在酵母菌细胞的细胞质基质中产生，可以用酸性重铬酸钾试剂检测酒精的产生，B错误；

C；酒变酸是醋酸杆菌发酵的结果；墨塔酿酒反成醋的原因可能是：发酵装置密封不严，发酵装置没有清洗干净，导致醋酸菌混入发酵液中，C正确；

D；在酿酒的过程中；糖类即使未耗尽，酵母菌的发酵过程也会停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，对发酵起抑制作用，导致酵母菌发酵停止，D正确；

故选ACD。三、填空题(共6题，共12分)16、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】特定磷酸二酯键特异性18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】嫩肉粉木瓜蛋白酶蛋白质20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不容的杂质析出DNA过滤溶液中的杂质DNA21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】离心、振动、电刺激聚乙二醇四、判断题(共3题，共12分)22、A【分析】【详解】

目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性，故正确。23、B【分析】【详解】

动物细胞核移植技术体现了动物细胞核的全能性，不能体现动物细胞的全能性，高度分化的动物细胞的全能性受到了限制，故错误。24、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。五、实验题(共1题，共9分)25、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体六、综合题(共2题，共16分)26