2025年新科版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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相关限制酶的识别序列及切割位点（注：箭头表示切割位点）。名称识别序列及切割位点名称识别序列及切割位点HindⅢ

A↓AGCTT

TTCGA↑AEcoRIG↓AATTC

CTTAA↑GPvitⅡCAG↓CTG

GTC↑GACPstICTGC↓AG

GA↑CGTCKpnIG↓GTACC

CCATG↑GBamHIG↓GATCC

CCTAG↑G

A.需设计特异性的引物通过PCR技术扩增phb2基因B.为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入KpnⅠ和EcoRⅠ两种不同限制酶的识别序列C.需用CaCl2处理大肠杆菌制备感受态细胞，以提高转化率D.图2中3号的质粒很可能是含目的基因的重组质粒6、生化分子实验中，一般用LB培养基来预培养菌种，使菌种成倍扩增达到使用要求，也可用于培养基因工程受体菌，如大肠杆菌。LB培养基可分为液体培养基和固体培养基。某实验小组为了培养大肠杆菌，制备了LB培养基，该培养基的配方如下表所示。下列叙述错误的是（）。组分胰化蛋白胨酵母提取物NaCl含量（g）10510定容至1000mL

A.该实验小组配制的LB培养基为液体培养基B.LB培养基中的胰化蛋白胨既是碳源，也是氮源C.进行湿热灭菌前，还需要将该培养基调至酸性D.向该培养基中接种目的菌时，不能用平板划线法7、科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚中获得转基因鸡，目的蛋白在输卵管细胞中特异表达，并能在鸡蛋中收集。下列说法错误的是（）A.可从cDNA文库获取人溶菌酶基因B.RNA聚合酶识别鸡输卵管细胞特异表达的启动子C.可通过农杆菌转化法将人溶菌酶基因导入鸡胚D.鸡输卵管细胞可将人溶菌酶分泌到细胞外8、人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程。①~④表示相关的操作，EcoRI、BamHI为限制酶，它们的识别序列及切割位点如下表所示。下列有关叙述正确的是（）

。限制酶识别序列及切割位点EcoRIG↓AATTCBamHIG↓GATCC

A.过程①所需的两种引物中分别加上GAATTC和GGATCC序列有利于后续操作B.构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间才能进行复制C.过程③利用的是T-DNA的特性将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA中D.过程④需利用液体培养基进行培养，可通过PCR技术检测干扰素基因是否表达9、为提高玉米中赖氨酸含量，科学家将天冬氨酸激酶第352位的苏氨酸改造成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中104位的天冬氨酸改造为异亮氨酸。上述改造的常规操作是（）A.直接改造上述两种蛋白质的空间结构B.对指导上述两种酶蛋白合成的mRNA进行改造C.利用诱变育种技术促使上述两种酶蛋白的基因突变D.利用基因工程技术，对控制上述两种酶蛋白的基因进行改造评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)10、下列有关生物技术引起的安全性和伦理问题的叙述，不正确的是（）A.基因编辑制造婴儿的行为是不符合伦理道德的B.设计试管婴儿是为了治疗疾病，不会出现负面影响C.我国禁止生殖性克隆人和有关人胚胎干细胞的研究D.世界各国都应该禁止在任何情况下生产、储存和发展生物武器11、地中海贫血症是一种遗传性溶血性贫血症。有一对表现型正常的夫妇，他们以前生育过地中海贫血症儿子，该患儿的珠蛋白结构异常，在一岁时死去。现在妻子又怀孕了，于是进行了产前诊断，诊断时用限制酶PstI酶切后电泳结果如图1所示，图2为珠蛋白基因及其侧翼序列的Pst酶切位点。下列叙述正确的是（）

A.正常的珠蛋白基因长度为4．4kb突变后的致病基因长度为3．7kbB.若未产生新的PsI酶切位点，则致病基因可能是碱基对缺失产生的C.致病基因是隐性基因，并且夫妻两人都是隐性致病基因的携带者D.孕妇体内的胎儿虽然含有致病基因，但是生下来并不会患该病12、北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述不正确的是（）

A.过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D.应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其表达13、植株甲金花菜是一种多年生开花植物，具有多种优良性状，另一种远缘植株乙青花菜存在抗除草剂基因，欲将植株乙细胞中抗除草剂基因引入植株甲中，进行了如下操作。下列相关叙述，正确的是（）

A.过程A取顶芽细胞的操作有利于获得脱毒苗B.过程B中常用PEG诱导原生质体融合C.两个细胞融合完成的标志是再生出细胞壁D.该杂种植株的获得利用了植物细胞的全能性14、如图是单克隆抗体制备过程示意图，1～3代表相关过程，a～e代表相关细胞，其中c是两两融合的细胞。以下叙述错误的是（）

A.过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠产生特异性免疫反应B.过程2的促融方法可采用电融合技术，该技术能击穿核膜促使核融合C.c细胞有三种，每种细胞染色体组数不相等，e细胞是杂交瘤细胞D.过程3是进行抗体检测，并克隆产生阳性细胞的过程评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)15、酵母菌是______________微生物。酵母菌进行有氧呼吸的反应式如下：______________________；酵母菌进行无氧呼吸的反应式如下：_________________。16、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。17、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。18、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。19、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________20、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________评卷人得分四、判断题(共1题，共7分)21、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共18分)22、近年来；纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题：

（1）在果醋制作时；运用醋酸菌在供应________________和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以生成醋酸。反应式为：________________________。

（2）制作泡菜的腌制过程中；会产生亚硝酸盐。在____________________条件下，亚硝酸盐与对氨苯磺酸发生________________反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成__________色染料。

（3）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时；应注意控制________；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在_____________%左右。

（4）在果酒制作时，变酸的原因是_____________________________。23、某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基；成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题。

（1）培养基中加入化合物A的目的是__________，这种培养基属于__________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的__________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”呼吸作用的类型是__________。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是__________。

（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是__________，操作时采用__________灭菌的方法。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是____________________。

（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用104、105、106倍稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是__________，此对照实验的目的是____________________。评卷人得分六、综合题(共4题，共20分)24、[选修3：现代生物科技专题]

甲；乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料；利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：

（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是__________。

（2）甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到__________。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是____________（填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”）。

（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是________。A中的愈伤组织是叶肉细胞经_______形成的。

（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，___________（填“能”或“不能”）采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是____________。25、我国科学家黄三文团队通过基因编辑技术培育出二倍体自交系和杂交优势显著的杂交马铃薯品系“优薯1号”；突破了百年来马铃薯自交不亲和薯块只能无性繁殖的难题。如图是科学家用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因的示意图。

(1)据图分析CRISPR/Cas9基因编辑技术能对基因进行定点编辑，其原理是由一条单链向导RNA引导Cas9蛋白到_____进行切割。已知CRISPR/Cas9仅存在于原核生物，故需借助_____技术才能在马铃薯细胞中发挥作用。Cas9蛋白和向导RNA结合形成的复合物结合后能切割DNA，从功能上来看该复合物相当于基因工程中的限制酶，CRISPR/Cas9打破了限制酶_____的局限性。所以在使用CRISPR/Cas9系统对不同基因进行编辑时，应使用_____（填“相同”或“不同”）的向导RNA。

(2)敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因后可让该植株自交观察是否产生种子来检测其作用效果，这属于_____水平的鉴定。

(3)基因编辑技术比传统的基因工程技术更准确，目的性更强。通过上述材料，推测利用CRISPR/Cas9基因编辑技术进行基因敲除的应用价值可能有_____（答出一点即可）。26、研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母菌；并进行大量培养。如图所示为操作流程：

(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的__________，及时对培养基进行分装，并进行________________灭菌。

(2)过程②梯度稀释时，先分别向A、B、C三支试管中加入9mL__________，再依次加入酵母菌培养液的上清液或稀释液1mL，摇匀。取多个稀释倍数的酵母菌培养液0.1mL分别接种到多个平板上。甲、乙研究员在105稀释倍数下得到的结果:甲涂布4个平板，统计的菌落数分别是150、178、259、310；乙涂布4个平板，统计的菌落数分别是152、165、175、148，则1mL培养液中含有的酵母菌数量最可能为_____个。

(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。合理的有____（多选）

a．为保证无菌操作；接种针；接种环使用前都必须灭菌。

b．划线时应避免划破培养基表面；以免不能形成正常菌落。

c．挑取菌落时；应挑取多个菌落，分别测定酵母菌细胞中甲醇的含量。

d．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度；获得甲醇高耐受株。

(4)步骤⑤中，为使酵母菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和________供应。为监测酵母菌的活细胞密度，经等体积台盼蓝染液染色，理论上应统计______色细胞的个数。

(5)分离获得的酵母菌还需经过多级筛选才能获取到理想菌株。科研人员利用DY5、RY1、JW14三种菌株，发酵制作杨梅酒，并进行酒精耐受性检测，结果如下表和图:。菌株名称酒精度/%总糖/g•L-1总酸/g•L-1DY57.034.2312.045RY19.015.0112.675JW146.533.6412.099杨梅汁—78.8010.737

三种菌株中，最适于杨梅果酒发酵的是__________。27、玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产；抗病等优良性状；但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行下列步骤试验：获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如下图。

（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是________

①Ti质粒内；每种限制酶只有一个切割位点。

②G基因编码蛋白质的序列中；每种限制酶只有一个切割位点。

③酶切后；G基因形成的两个黏性末端序列不相同。

④酶切后；Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同。

A．①③B．①④C．②③D．②④

（2）如表所示是四种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是________，自交系________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。激素结果自交系2，4-D（2．0mg/L）6-BA（0．5mg/L）IBA（2．0mg/L）愈伤组织形成率（%）芽的分化率（%）根的诱导率（%）根的诱导率（%）甲991390乙858087丙888312丁168583

（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含________的选择培养基。

（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是________。

A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织。

B．无农杆菌附着的转化愈伤组织。

C．农杆菌附着的未转化愈伤组织。

D．农杆菌附着的转化愈伤组织。

（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占________。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系A。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

将人的生长抑制素释放因子的基因转入大肠杆菌体内；并获得表达，这里目的基因是人的生长抑制素释放因子的基因，受体细胞是大肠杆菌，表达是指该基因在大肠杆菌体内合成人的生长抑制素释放因子。

【详解】

A；这里的“表达”是指该基因在大肠杆菌体内合成人的生长抑制素释放因子；而不是进行DNA的复制，A错误；

B；基因表达包括转录和翻译两个步骤；B错误；

C；人的生长抑制素释放因子的基因表达产生的是人的生长抑制素释放因子；而不是生长激素，C错误；

D；人的生长抑制素释放因子的基因表达是指合成人的生长抑制素释放因子；D正确。

故选D。2、D【分析】【分析】

酿酒时必须要用酒曲；加入酒曲的目的是：接种酵母菌，酵母菌首先将糯米中的淀粉分解成葡萄糖，然后让酵母菌在无氧的条件下，将葡萄糖分解生成酒精和二氧化碳。酵母菌的生活需要适宜的温度，防止温度太高将酵母菌杀死，过低又会降低酵母菌的活性，因此一般需将煮熟的糯米冷却到常温后再接种酵母菌。

【详解】

A；酒曲中含有酵母菌和霉菌；它们属于微生物，能分泌多种酶，把淀粉转化为葡萄糖，再把葡萄糖转化为酒精，A正确；

B；用水浸泡酒曲后；其内的微生物吸收水分，代谢能力增强，代谢加快，B正确；

C；酵母菌在无氧的条件下；将葡萄糖分解生成酒精和二氧化碳，C正确；

D；酵母菌的生活需要适宜的温度；用煮沸的水浸泡酒曲会将酒曲内的微生物杀死，D错误。

故选D。3、C【分析】【分析】

1；限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端或平末端。

2；DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

3；常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

【详解】

A；一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列；A正确；

B；基因的运载体质粒是一种环状DNA分子；存在于细菌等生物细胞内，B正确；

C；不同限制酶切割的核苷酸序列露出的黏性末端可能相同；C错误；

D；转基因抗虫棉是利用基因工程技术培育出来的；D正确。

故选C。4、C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备：

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。

①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。

②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞；该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测。

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

A；在动物细胞培养过程中需要定期更换培养液；目的是清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，A错误；

B；单克隆抗体的制备过程中；给小鼠注射抗原的目的是获得能产生相应抗体的B淋巴细胞，B错误；

C；在体外受精技术中；将收集的精子放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是使精子获能，C正确；

D；对胚胎进行分割时；要特别注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育，D错误。

故选C。5、B【分析】【分析】

限制酶的选择不能破坏目的基因；不能破坏载体上的关键结构，比如启动子；终止子、复制原点等。

【详解】

A、需设计特异性的引物通过PCR技术扩增phb2基因；A正确；

B；目的基因应导入启动子和终止子之间。图中看出；两者之间存在于三种限制酶切点，但是由于KpnⅠ在质粒上不止一个酶切位点，所以应该选择EcoRⅠ和PvitⅡ两种不同限制酶的识别序列，B错误；

C、需用CaCl2处理大肠杆菌制备感受态细胞；以提高转化率，C正确；

D；用EcoRⅠ和PvitⅡ两种不同限制酶切割质粒；会获得一大一小两个片段，图2中3号的质粒酶切后得到一大一小两个片段，很可能是含目的基因的重组质粒，D正确。

故选B。6、C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；该配方中没有凝固剂；所以为液体培养基，A正确；

B；胰化蛋白胨中含有C、H、O、N等元素；能为大肠杆菌提供碳源和氮源，B正确；

C；对培养基进行灭菌时；常采用湿热灭菌法，由于细菌适宜的培养基为中性或弱碱性，所以灭菌前需用将培养基的pH调至中性或弱碱性，C错误；

D；该培养基为液体培养基；平板划线法是向固体平板进行接种的方法之一，故向该培养基中接种目的菌时，不能用平板划线法，D正确。

故选C。7、C【分析】【分析】

基因工程的步骤：1；获取目的基因；2、基因表达载体的构建；3、将目的基因导入受体细胞；4、目的基因的检测和鉴定。

【详解】

A；获取目的基因可通过PCR扩增、人工合成和从基因文库中获取；A正确；

B；启动子是转录的起点；也是DNA聚合酶识别和结合位点，B正确；

C；将目的基因导入动物细胞用显微注射技术；C错误；

D；溶菌酶基因可在鸡输卵管细胞表达；合成的溶菌酶是一种分泌蛋白，可分泌到细胞外，D正确。

故选C。8、A【分析】【分析】

Ti质粒是在根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种核区DNA外的自主复制的环形双链DNA分子。是一种存在于根癌土壤杆菌中可引起双子叶植物根部致癌的质粒。细菌从双子叶植物的受伤根部侵入根部细胞后；最后在其中裂解，释放出Ti质粒，其上的T-DNA片段会与植物细胞的核基因组整合。

【详解】

A；结合图示可知；PCR的产物用EcoRI和BamHI来酶切，因此在基因的引物两侧加上识别序列GAATTC和GGATCC，A正确；

B；启动子负责与RNA聚合酶结合启动表达；终止子负责终止表达，因此构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间才能进行表达，B错误；

C；过程③是利用T-DNA的特性将目的基因导入到农杆菌中；农杆根瘤菌是原核生物，无染色体，C错误；

D；过程④需利用固体培养基进行培养；可通过分子杂交技术检测干扰素基因是否表达，D错误。

故选A。9、D【分析】【分析】

蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，属于第二代基因工程。

【详解】

A；蛋白质的功能与其高级结构密切相关；而蛋白质的高级结构又非常复杂，所以直接对蛋白质改造非常困难，且即使改造成功也不能遗传，A错误；

B；直接改造相应的mRNA；不一定能够表达产生所需要的蛋白质，且即使成功也不能遗传，B错误；

C；由于基因突变具有不定向性和低频性；所以使用诱变育种的方法不易获得符合要求的基因，C错误；

D；基因工程可定向改造生物的遗传性状；所以可利用基因工程技术，对控制上述两种酶蛋白的基因进行改造，D正确。

故选D。二、多选题(共5题，共10分)10、B:C【分析】【分析】

人们现在的伦理道德观念还不能接受克隆人﹔设计试管婴儿是为了治疗疾病；但有可能被滥用，如用于设计婴儿性别等，可能会出现负面影响﹔进行基因检测时，可通过基因进行检测，也可通过测定基因的表达产物蛋白质来进行;对于基因歧视现象，可通过正确的科学知识传播；伦理道德教育和立法得以解决。

【详解】

A；基因编辑制造婴儿的行为不符合伦理道德；A正确；

B；设计试管婴儿如专门用来设计婴儿性别是不符合伦理道德的；可能会存在负面影响，B错误；

C；我国禁止生殖性克隆人；但允许人胚胎干细胞的研究在有关规定下进行，C错误；

D；生物武器危害巨大；世界各国都应禁止生物武器，D正确。

故选BC。11、B:C:D【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端或平末端。

【详解】

A、由图示可知，两个PstI酶切位点之间分别是4.4kb和3.7kb，正常的β珠蛋白基因和突变的致病基因位于酶切位点内部，因此两个基因长度分别小于4.4kb和3.7kb；A错误；

B、含有珠蛋白基因的DNA片段的PstI酶切位点之间的长度由4.4kb变为3.7kb；而突变并未产生新的酶切位点，由此可知酶切位点之间发生了碱基对的缺失，而且这种差异导致了正常基因突变为致病基因，因此突变可能就是碱基对的缺失所导致的，B正确；

C；该夫妇已经生育过患病孩子；因此致病基因是隐性的，夫妻两人都是携带者，C正确；

D、图1可以看出胎儿含有3.7kb，即含有致病基因，但是同时含有4.4kb；即含有显性的正常β-珠蛋白基因，即胎儿为杂合子，不会患病，D正确。

故选BCD。12、A:C:D【分析】【分析】

分析题图：①表示反转录法获取目的基因的过程；②表示基因表达载体的构建过程；之后采用农杆菌转化法；将目的基因导入番茄组织块；最后采用植物组织培养技术，将导入目的基因的番茄组织细胞培养成抗冻番茄植株。基因表达载体通常由启动子；目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法能将质粒导入受体细胞。

【详解】

A；过程①是通过人工合成法获取的目的基因；由于真核生物体内的基因含有不能编码蛋白质的序列（内含子），导致逆转录合成的目的基因与原基因有较大的差异，因此人工合成的目的基因不能用于比目鱼基因组测序，A错误；

B；抗冻蛋白的11个氨基酸的重复序列重复次数越多；抗冻能力越强，并不是抗冻基因的编码区重复次数越多抗冻能力越强，抗冻基因编码区依次相连形成的新基因已不是原来的抗冻基因，因此不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B正确；

C；②是基因表达载体的构建过程；基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，可以通过DNA分子杂交或PCR技术检测受体细胞是否含有目的基因，C错误；

D；利用DNA探针技术检测目的基因是否导入到受体细胞；但表达的产物通常是蛋白质，可利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来，D错误。

故选ACD。

【点睛】13、A:B:C:D【分析】【分析】

分析图可知；该图为植物体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可用酶解法；B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇（PEG）处理；C为培养筛选出所需的杂种细胞；D为照分化，据此答题即可。

【详解】

A；顶端分生组织几乎不带毒；因此，过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗，A正确；

B；B为诱导原生质体融合；可使用聚乙二醇（PEG）促融，B正确；

C；两个植物细胞融合完成的标志是再生出细胞壁；C正确；

D；植物体细胞杂交技术利用了细胞膜的流动性和植物细胞的全能性等原理；D正确。

故选ABCD。14、B:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备涉及细胞融合；细胞培养和细胞筛选；从题干信息图可看出，过程1代表的是注射特异性抗原使小鼠免疫，从而获得能产生相应抗体的B淋巴细胞；过程2是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程；过程3是克隆培养筛选后的阳性细胞，一共需要进行两次，最终获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，此后在培养基或小鼠腹腔中培养。

【详解】

A；图中过程1是通过注射抗原或抗原蛋白来获得产生相应抗体的B淋巴细胞；A正确；

B；过程2是促进细胞融合的过程；其中电融合技术是用低压电流击穿细胞膜促使细胞融合，B错误；

C；c细胞为杂交瘤细胞；有三种，分别是骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞-B淋巴细胞、B淋巴细胞-B淋巴细胞，其中骨髓瘤细胞和B淋巴细胞都有两个染色体组，融合后的细胞都含有4个染色体组，其中e细胞是杂交瘤细胞，C错误；

D；过程3是专一抗体检测及克隆培养筛选后获得阳性细胞；该过程需要多次进行，D正确。

故选BC。三、填空题(共6题，共12分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】兼性厌氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO216、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代18、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆19、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。20、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。四、判断题(共1题，共7分)21、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。五、实验题(共2题，共18分)22、略

【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为兼性厌氧型，果酒制作原理是酵母菌在无氧条件下，利用葡萄糖产生酒精和CO2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型，当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

（1）在果醋制作时；醋酸菌在供应氧气和糖源充足时，能将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸。反应式为：C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O

（2）制作泡菜的腌制过程中；会产生亚硝酸盐。在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰色染料。

（3）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时；应注意控制盐的用量；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在12%左右，若酒精含量过高会延长腐乳成熟的时间，若酒精含量过低则不足以杀菌。

（4）在果酒制作时；混有杂菌可能会让果酒变酸。

【点睛】

本题考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作、泡菜的制作等知识，要求学生掌握果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的原理及条件，掌握亚硝酸盐的测定方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】氧气C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O盐酸酸化重氮化玫瑰色盐的用量12混有杂菌23、略

【分析】【分析】

微生物的培养；培养基的成分必须含有碳源；氮源、水和无机盐。获取纯净微生物的关键是防止外来杂菌入侵。实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

【详解】

（1）本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种；所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）分析培养基的配方可知；该培养基由化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，其他成分中为体现出提供碳源和氮源，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；在培养过程中应该振荡培养，增加培养液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的类型是有氧呼吸。

（3）获得纯净“目的菌”的关键是无菌技术；防止外来杂菌入侵。

（4）平板划线操作的工具是接种环；对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌。

（5））实验结束后；使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉，以杀死培养基上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

（6）实验设计过程应遵循对照原则；该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染，检验培养基是否灭菌合格。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术操作方法及接种微生物接种常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】筛选目的菌选择化合物A有氧呼吸防止外来杂菌入侵接种环灼烧防止造成环境污染不接种的空白培养基检验培养基是否灭菌合格六、综合题(共4题，共20分)24、略

【分析】【分析】

【详解】

（1）植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

（2）蔗糖水解后可得到葡萄糖；果糖。用细胞作为材料进行培养获得幼苗；细胞必须具有完整细胞核，才具有发育为个体的一整套完整遗传信息。

（3）影响植物组织培养的两种主要激素是细胞分裂素和生长素。愈伤组织是叶肉细胞经脱分化形成的。

（4）由于花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同；组织培养得到花卉基因型不同于原植株，导致不能保留亲本性状。

【定位】

植物组织培养。

【点睛】

明确植物组织培养过程和原理是解题关键。【解析】绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性，在一定条件下能发育成完整的植株葡萄糖、果糖具有完整的细胞核细胞分裂素、生长素脱分化不能对杂合体的植株来说，其体细胞的基因型相同，而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株25、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因用DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA用分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质用抗原抗体杂交技术。个体生物学水平上的鉴定包括抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

(1)

据题意可知；向导RNA是一条单链RNA，主要功能是与目标DNA(目的基因)上特定碱基序列互补，从而定向引导Cas9蛋白与一个特定的基因位点进行结合，并在该位点切割DNA。因为CRISPR/Cas9仅存在于原核生物，而马铃薯属于真核生物，故需借助转基因技术才能实现基因在不同生物间的转移和表达。切割DNA，断裂的是磷酸二酯键，因而Cas9和向导RNA结合形成的复合物具有类似限制酶的作用，但限制酶在发挥作用时只能识别一种特定的核苷酸序列，而CRISPR/Cas9则打破了这一局限性。CRISPR/Cas9系统具有定向切除DNA片段的作用，因此对不同基因进行编辑时，应使用不同的向导RNA，与相应的目的DNA进行配对，完成定点切除。

(2)

敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因后可让该植株自交观察是否产生种子来检测其作用效果；这属于个体生物学水平的鉴定，以判断自交不亲和基因敲除后的马铃薯是否被赋予了自交产生后代的能力。

(3)

与传统的基因工程相比较；运用CRISPR/Ca9基因编辑技术培育转基因生物，可以更准确进行目的基因敲除，明显避免了目的基因随机插入宿主细胞DNA引发的生物安全性问题，因此该技术有望应用在基因治疗；研究基因功能、构建疾病治疗动物模型等方面。

【点睛】

本题以诺贝尔化学奖基因编辑技术为情境，考查基因工程相关知识。考查学生获取信息、分析题图，处理信息和做出判断的综合应用能力及科学思维的核心素养。【解析】(1)一个特定