2025年外研版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.选择培养基中应以尿素为唯一碳源B.挑取单菌落后可用划线法进行接种C.鉴别培养基中可加入酚红作指示剂D.培养皿在接种微生物后需倒置培养2、下列关于人类与环境的叙述，正确的是（）A.生物圈是地球表面有生物存在的连续的薄层B.控制人口增长的唯一出路是设法降低出生率C.大气平流层中臭氧含量的减少导致温室效应D.防治酸雨最有效的办法是限制二氧化碳的排放3、下图是“DNA的粗提取和鉴定”实验中几个重要操作的示意图；下列叙述错误的是（）

A.图①的原理是DNA不溶于酒精，而某些蛋白质可溶于酒精B.图①和图③都需要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌，便于DNA的析出并保持结构完整C.猪血不宜选作“DNA的粗提取和鉴定”的实验材料D.若图④操作后DNA充分溶解，则NaCl溶液的浓度约为2mol/L4、用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N（如图所示）分别切割质粒和目的基因，构建表达载体。下列叙述错误的是（）

A.限制酶作用于特定位置的磷酸二酯键切割DNA分子B.两个DNA分子的黏性末端在DNA连接酶作用下连接C.连接形成的重组质粒仍然可以用酶M或酶N进行切割D.质粒和目的基因连接后的碱基对序列是AGATCC//TCTAGG5、水稻根部一般没有根瘤菌，在种植时常需要施加氮肥。科学家想利用基因工程技术将相关基因导入水稻细胞中，建立水稻“小型化肥厂”，让水稻直接固氮，减少使用氮肥的生产成本以及可能造成的环境污染。下列相关叙述错误的是（）A.用PCR技术可从根瘤菌DNA中获取固氮基因B.PCR扩增后的目的基因可直接注入水稻细胞中C.PCR技术可用于检测目的基因是否插入水稻基因组中D.实验中需将转基因水稻种植在缺氮培养液中进行筛选6、PCR技术（荧光PCR法），又称qPCR法，是指在反应体系中加入荧光物质，通过专门仪器实现实时荧光检测，以荧光强度来测定PCR循环后产物中的核酸水平，是病毒核酸检测的主流方法。IgM和IgG均属于免疫球蛋白家族，是机体在抗原物质刺激下由浆细胞产生的抗体，IgM/IgG联合检测（胶体金法）是新冠抗体检测试剂盒主要采用的技术。下列说法不正确的是（）A.利用PCR技术进行新冠病毒核酸检测的前提是新冠病毒的一段核酸序列已知B.利用PCR技术扩增新冠病毒的核酸用到的酶有逆转录酶、TaqDNA聚合酶等C.IgM/IgG检测试剂盒的原理是抗原—抗体特异性结合D.利用IgM/IgG试剂盒检测为阳性，一定为新冠肺炎患者7、下图是生产抗新冠病毒的单克隆抗体的过程。下列有关叙述正确的是（）

A.②过程经细胞融合，获得的杂交瘤细胞只有一种B.③过程经过选择培养后，只有自身融合的细胞死亡C.④过程进行抗体检测，若结果为阴性，则应重新实验D.为保证获得足量相应的B淋巴细胞，①过程应给小鼠注射大量的新冠病毒8、CD47是一种细胞膜表面糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。为验证抗CD47的单克隆抗体可以减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，下列叙述错误的是（）

A.实验流程中CD47充当抗原的作用B.融合、筛选得到的杂交瘤细胞不一定能产生抗CD47的单克隆抗体C.对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体D.预期实验结果为：实验组的巨噬细胞的吞噬能力高于对照组9、下列有关以CO2为唯一碳源的自养微生物所需营养物质的描述中，错误的是（）A.铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质不是该微生物的能源物质C.水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质D.琼脂是该微生物的营养要素之一评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（）A.在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进排卵B.从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养获能处理后才能用于受精C.受精过程中，卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，阻止多精入卵D.设计试管婴儿技术，有利于生育健康的下一代，不会造成社会危害11、下列关于“转基因”的叙述，错误的是（）A.转入的外源基因不会使作物的其他基因的表达受到影响B.被转移的基因是功能已知的基因，人们对它们研究得已经相当透彻，绝对不会引起安全性问题C.在“转基因”的过程中，必须用到工具酶D.转基因技术成果已进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用12、下列关于DNA粗提取与鉴定的实验叙述不正确的是（）A.获取鸡血时，容器中应先加入适量的NaCl溶液以防止血液凝固B.由于DNA对高温耐受性差，故提取时需加入95%的冷酒精C.可用木瓜蛋白酶纯化过滤后研磨液中的DNAD.向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中缓缓加蒸馏水，当出现析出物时停止加水13、下图是我国科学家制备小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞的相关研究流程；其中Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用。下列叙述正确的是（）

A.受精卵发育过程中桑椹胚前的细胞都是全能性细胞B.推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老C.过程③胚胎干细胞细胞核大、核仁明显D.从卵巢中获取的卵母细胞可直接用于过程①14、下列关于动物细胞培养液的叙述，正确的是（）A.为了防止培养过程中出现细菌污染，可以在培养液中添加抗生素B.动物细胞培养液与植物组织培养的培养基相同C.CO2的主要作用是维持培养液的pHD.培养液应该定期更换，以防止代谢物积累对细胞自身造成危害15、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中16、下图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径；下列有关叙述正确的是（）

A.获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因B.奶牛2体内不同组织细胞的基因组成一定相同C.成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)17、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？____________________________18、______——“分子缝合针”19、通常将DNAD的羟基（—OH）成为_______________端，而磷酸基团的末端成为___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向总是从_________________延伸。20、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。21、将DNA粗提取液在____________℃的恒温水浴箱中保温10—15分钟。22、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。23、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。24、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________评卷人得分四、实验题(共3题，共30分)25、黄粉虫可以吞食；降解塑料；利用黄粉虫肠道微生物对白色污染进行生物降解，是一种绿色环保的处理工艺。下图是从黄粉虫肠道中分离、纯化微生物的过程，回答下列问题：

(1)富集培养基按物理性质属于___________培养基，不含有_____________，但含有酵母膏、蛋白豚。酵母膏能提供所需的__________________。

(2)选择培养基中需加入_______________作为唯一碳源，稀释涂布后最后一组可能形成菌落。统计菌落数目的方法有_______________和利用显微镜直接计数。

(3)如果对白色污染进行传统填埋、焚烧容易造成二次污染，黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解______（填“会”或“不会”）造成二次污染。26、有研究表明CDKN2B基因与小鼠的寿命有关；科学家将该基因导入小鼠体内，统计其寿命是否高于正常小鼠。图1表示CDKN2B基因与相关限制酶酶切位点，该基因转录出的mRNA碱基序列与A链的碱基序列相同（T；U视为相同的碱基），图2为质粒简图，请回答下列有关问题：

（1）科学家首先采用PCR技术对目的基因进行扩增。PCR过程中每一循环有两次升温一次降温，其中降温的目的是_______________________________________________________。

（2）科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在___________和___________之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ分别切割目的基因和载体后产生黏性末端。携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，发现约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白，原因是___________。为了避免这种现象的发生，应对以上方法进行改进，改进措施为___________。

（3）若想让一个转入了目的基因的受精卵发育成多个个体，可以采用___________技术，操作时应注意做到_______________________________________________________。27、被称为“水中小白鼠”的斑马鱼是一种体长4厘米左右的热带淡水鱼；与人类基因同源性高达87%，并有相似的器官；生理功能和信号通路。由于发育周期短、费用低、体外受精、透明等优点，斑马鱼现在越来越广泛地应用于毒性检测、疾病模型创制、药物筛选等领域中。

研究人员欲通过使胰岛素基因表达受阻从而构建糖尿病模型斑马鱼。吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂；通过将其注入斑马鱼受精卵可阻碍相关基因的表达。针对其作用原理，现有两种假说：

假说1：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切。

假说2：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

为了验证上述假说；研究人员进行了如下实验：

(1)从受精卵发育了3天的实验组和对照组的细胞中提取总RNA，再通过逆转录获得cDNA。若假说1成立，选择上图所示引物2和引物3进行PCR后的结果为______（填字母）。A．实验组有杂交带B．实验组无杂交带C．对照组有杂交带D．对照组无杂交带(2)若要证明假说2成立，进行PCR时，需要选择上图所示引物有____________。

(3)采用PCR技术扩增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)为了获取大量斑马鱼胚胎干细胞用于药物筛选，可加入__________________，用于分散斑马鱼囊胚中的__________________。再取分散细胞作为初始材料进行______培养，然后分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为______细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、A【分析】【分析】

1.鉴定分解尿素的细菌：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨；氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够产生脲酶，并分解尿素。

2.微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着划线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；筛选产脲酶细菌需要制备以尿素为唯一氮源的选择培养基；A错误；

B；挑取单菌落后需在酒精灯火焰旁；用平板划线法进行接种，B正确；

C；可在鉴别培养基中加入酚红作指示剂；观察是否变红来鉴定菌种是否为尿素分解菌，C正确；

D；培养皿在接种微生物后需倒置培养；以防止冷凝水倒流污染培养基，D正确。

故选A。

【点睛】2、B【分析】【分析】

1；生物圈是地球上的所有生物与其生存的环境形成的一个统一整体；生物圈的范围：以海平面为标准来划分，生物圈向上可到达约10千米的高度，向下可深入10千米左右深处，厚度为20千米左右的圈层，包括大气圈的底部、水圈的大部和岩石圈的表面．

2；臭氧层破坏（1）臭氧层作用：吸收日光中的紫外线；对地球生物具有保护作用．（2）破坏原因：空气中的氟利昂等物质的大量排放。

3；酸雨（1）形成原因：主要是硫和氮的氧化物溶于雨水而降落至土壤或水体中；酸雨的pH＜5.6；（2）来源：煤、石油等化石燃料的大量燃烧等。

【详解】

A；生物圈指地球有生物存在的部分；包括所有生物及其生存环境，它是地球表面不连续的一个薄层，A错误；

B；地球的资源是有限的；食物的生产也是有限的，那么人类生存的唯一出路就是设法降低出生率，做到自我控制，B正确；

C；温室效应是由于温室气体增多引起的；C错误；

D；防治酸雨最有效的办法是限制二氧化硫和一氧化氮的排放量；或者从燃料中把这些物质去掉，D错误。

故选B。

【点睛】3、B【分析】【分析】

实验原理：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。

（1）实验材料的选取。

凡是含有DNA的生物材料都可以考虑；但是使用DNA含量相对较高＿＿＿＿＿＿＿＿的生物组织，成功的可能性更大。

（2）破碎细胞；获取含DNA的滤液。

破碎动物细胞：如在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水；同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。破碎植物细胞（如洋葱），需在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

①加入蒸馏水作用：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体；使血细胞吸水胀裂，再加上搅拌的机械作用，加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA。

②加入洗涤剂的作用是：洗涤剂是一些离子去污剂；能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；加入食盐的作用是：溶解DNA。

③如果研磨不充分；会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物；用二苯胺鉴定不显示蓝色等。

【详解】

A；DNA不溶于酒精；95%的冷酒精凝集效果最佳，所以图①的原理是DNA不溶于酒精，某些蛋白质可溶于酒精，以便除去溶于酒精的杂质，提取含杂质较少（或较纯净）的DNA，A正确；

B；图①玻璃棒逆时针方向搅拌；目的是提取出含杂质较少的DNA，图③玻璃棒顺时针方向搅拌，目的是为了加速细胞破裂，使DNA从细胞核中释放出来，B错误；

C；哺乳动物成熟红细胞中不含DNA；猪血中DNA含量低，不适合选作“DNA的粗提取和鉴定”的实验材料，C正确；

D；DNA在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同；能溶于2mol/L的氯化钠溶液，D正确。

故选B。4、C【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

题图分析：图中M酶与N酶的识别序列不同；但是它们切割形成的末端序列相同，因此这两种酶切割形成的黏性末端能够重组，可以把它们称为是同尾酶。

【详解】

A；限制酶能作用于DNA分子的特定序列；并在相应位置的磷酸二酯键切割DNA分子，A正确；

B；图中的两个DNA分子在相应限制酶的作用下；产生的黏性末端是相同的，二者能在DNA连接酶作用下连接起来，B正确；

C、在DNA连接酶的作用下，图中的质粒和目的基因形成的碱基对序列是由于连接后的序列不再是两种酶的识别序列，因此不可以用M酶或N酶进行切割，C错误；

D；由C项可知；进行切割质粒和目的基因连接后的碱基对序列是AGATCC//TCTAGG，D正确。

故选C。

【点睛】5、B【分析】【分析】

PCR技术的原理是模拟生物体内DNA分子复制的过程，利用DNA分子热变形原理，通过控制温度控制控制DNA分子的解聚和结合，DNA分子体内复制过程DNA的解旋是在解旋酶的作用下实现的；PCR扩增DNA片段过程最高经过n次扩增，形成的DNA分子数是2n个；其中只有2条单链不含有引物。

【详解】

A；PCR技术的原理是模拟生物体内DNA分子复制过程；故用PCR技术可从根瘤菌DNA中获取固氮基因，A正确；

B；PCR扩增后的目的基因需要与运载体结合；构建基因表达载体后再注入水稻细胞中，B错误；

C；PCR技术可用于检测目的基因是否插入水稻基因组中：若出现杂交带；则证明插入成功，C正确。

D；具有固氮基因的水稻根系微生物能利用空气中的氮气；故培养基中不需要加入氮源，从而对转基因水稻进行筛选，D正确。

故选B。6、D【分析】【分析】

1；PCR是体外人工选择性扩增DNA的一种方法；它类似于生物体内DNA的复制。在生物体内DNA复制需要模板、引物、DNA聚合酶、DNA解旋酶、脱氧核苷酸；而体外PCR反应同样需要类似的成分，有模板、引物、PCR缓冲液、Taq酶、脱氧核苷酸。其中引物是人工设计的特定序列，实现对特定位置的扩增。

2；免疫学的临床应用有两个方面：一是应用免疫理论来阐明许多疾病的发病机制和发展规律；二是应用免疫学原理和技术来诊断和防治疾病。免疫学原理主要是抗原抗体特异性结合的原理。

【详解】

A；PCR是扩增DNA的一种方法；如果是RNA病毒，首先要转化成DNA，也就是反（逆）转录；利用PCR技术进行新冠病毒核酸检测时，引物是病毒的一小段DNA片段，A正确；

B；PCR是扩增DNA的一种方法；利用PCR技术扩增新冠病毒的核酸，首先要转化成DNA，也就是反（逆）转录，反（逆）转录用到的酶是逆转录酶、PCR过程需要耐高温的TaqDNA聚合酶，B正确；

C；IgM和IgG均属于免疫球蛋白家族；是机体在抗原物质刺激下由浆细胞产生的抗体，该抗体可以与新冠病毒的表面抗原结合，其检测原理是抗原―抗体特异性结合，C正确；

D；利用IgM/TgG试剂盒检测为阳性；可能感染新冠病毒，但不一定患病，D错误。

故选D。7、C【分析】【分析】

题图分析：图示是生产抗新冠病毒的单克隆抗体过程；其中①表示给小鼠注射特定抗原，②表示细胞融合，③表示筛选出杂交瘤细胞，④表示专一抗体检测和克隆化培养。

【详解】

A；②过程融合形成的杂交瘤细胞有多种；A错误；

B；③过程经过选择培养后自身融合细胞和未融合的细胞都死亡；B错误；

C；④过程若进行专一抗体检测结果为阴性；说明细胞融合失败，需要重新实验，C正确；

D；为保证获得相应的B淋巴细胞；①过程应给小鼠注射适量的新冠病毒的相应抗原，D错误。

故选C。8、C【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；用CD47免疫小鼠；则CD47充当抗原，A正确；

B；融合、筛选得到的杂交瘤细胞不都是两两融合的杂交瘤细胞；还有骨髓瘤细胞两两融合的细胞核效应B细胞两两融合的细胞，所以不一定能产生抗CD47的单克隆抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；根据单一变量原则可知；应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系为对照，C错误；

D；实验组中加入了单克隆抗体；抗体与肿瘤细胞表面的CD47发生特异性结合，从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，而对照组中没有加入单克隆抗体，不能与肿瘤细胞表面的CD47结合，因而无法解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，因此，实验组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组可验证上述推测，D正确。

故选C。9、D【分析】【分析】

培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

【详解】

A；铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮素；A正确；

B、以CO2为唯一碳源的自养微生物；二氧化碳不是该微生物的能源物质，B正确；

C；水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质；C正确；

D；琼脂是凝固剂；不是该微生物的营养要素之一，D错误。

故选D。

【点睛】二、多选题(共7题，共14分)10、A:C【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；在采集卵母细胞之前；需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进超数排卵，A正确；

B；从卵巢中吸取的卵母细胞；必须经体外培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；

C；受精过程中；卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，这是防止多精入卵的两道屏障，C正确；

D；以治疗为目的的设计试管婴儿技术；是救治患者最好、最快捷的办法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在伦理问题，D错误。

故选AC。

【点睛】11、A:B【分析】【分析】

1；基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。

2；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的；因而极有可能破坏原有基因，并使之表达受到影响，A错误；

B；目前科学家对基因的结构、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因，因此可能会引起安全性问题，B错误；

C；在“转基因”的过程中；必然用到工具酶，如限制酶和DNA连接酶，C正确；

D；转基因技术成果在农业和医药上发挥了极大的作用；已进入人类的生产和生活，D正确。

故选AB。

【点睛】12、A:B:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的实验原理：1；DNA的溶解性（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精．利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性．洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；柠檬酸钠可以防止血液凝固；因此获取鸡血时，容器中应先加入柠檬酸钠以防止血液凝固，加入适量的NaCl溶液目的是维持血细胞的形态，A错误；

B；DNA对高温的耐受性比蛋白质强；DNA不溶于冷酒精，而其他杂质可溶于酒精，则用体积分数为95%的冷酒精能提纯DNA，B错误；

C；木瓜蛋白酶能分解蛋白质；但不能分解DNA，因此可用木瓜蛋白酶纯化过滤后研磨液中的DNA，C正确；

D；当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时；DNA的溶解度最低，DNA析出量最大，因此向溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液中缓缓加蒸馏水，直至析出物不再增加为止，D错误。

故选ABD。13、A:B:C【分析】【分析】

分析图示可知；将卵子去核，然后注入Oct4转基因小鼠的精子，用氧化锶激活，可使该换核的细胞形成雄原核，并分裂分化形成单倍体囊，最终形成孤雄单倍体胚胎干细胞。

【详解】

A；由于桑椹胚期的细胞没有出现分化；桑椹胚前的细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，是全能性细胞，A正确；

B；从题干可知；Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用，可推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老，B正确；

C；过程③胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；体积较小，细胞核大，核仁明显，C正确；

D；卵巢中取出来的是未成熟的卵细胞；要进行培养到减数第二次分裂的中期才能受精，不能直接用于过程①，D错误。

故选ABC。

【点睛】14、A:C:D【分析】【分析】

1；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

2；由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚；所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，因此在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。

3；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理；通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。

（2）营养物质：无机物（无机盐；微量元素等）；有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）、血清和血浆(提供细胞生长必须的营养成份)。

（3）温度和pH（36.5±0.5℃；7.2～7.4）。

（4）气体环境（95%的空气+5%CO2的混合气体），其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定。

【详解】

A；抗生素可以抑制细菌的生长；所以在进行动物细胞培养过程中可以在培养液中添加抗生素，用以防治细菌的污染，A正确；

B；动物细胞培养液与植物组织培养的培养基不同；动物细胞培养液通常需要加入动物血清、血浆，B错误；

C；在动物细胞培养过程中；气体环境是95%的空气+5%CO₂的混合气体，其中5%CO₂气体是为保持培养液的pH稳定，C正确；

D；代谢产物积累会对细胞自身造成危害；营养物质减少不利于细胞的培养，所以动物细胞培养过程中需要定期更换培养液，为细胞提供充足营养并防治代谢产物积累危害细胞，D正确。

故选ACD。15、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。16、A:D【分析】【分析】

分析题图：奶牛1的培育采用了基因工程技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛2的培育采用可基因工程技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；A正确；

B；奶牛2的培育过程中；在囊胚阶段注入了含有外源基因的受体细胞，因此其体内不同组织细胞的基因型可能不同，B错误；

C；奶牛3表明受体细胞的细胞核具有全能性；C错误；

D；结合分析可知；奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养，D正确。

故选AD。三、填空题(共8题，共16分)17、略

【解析】避免接种环温度太高，杀死菌种18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】DNA连接酶19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能从头开始合成，而只能从3，端延伸DNA子链的5，端向3，端20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】60—7522、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代23、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。24、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗四、实验题(共3题，共30分)25、略

【分析】【分析】

分离菌株的思路：

（1）自然界中目的菌株的筛选：①依据：根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找。②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。

（2）实验室中目的菌株的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养温度.pH等）；同时抑制或阻止其他微生物生长。

(1)

富集培养基不含有琼脂；按物理性质属于液体培养基，其中酵母膏能提供所需的碳源和氮源，可获得数目较多的塑料降解菌。

(2)

筛选能降解塑料的微生物；需要使用以塑料为唯一碳源的选择培养基，稀释涂布后最后一组可能形成菌落。微生物的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数。

(3)

如果对白色污染进行传统填埋焚烧容易造成二次污染；黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会造成二次污染。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的种类及功能，掌握接种微生物的方