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文档简介
…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页,总=sectionpages22页第=page11页,总=sectionpages11页2025年新科版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围:全部知识点;考试时间:120分钟学校:______姓名:______班级:______考号:______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题,共14分)1、不能作为生物武器的生物是()A.霍乱弧菌B.鼠疫杆菌C.乳酸菌D.天花病毒2、上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可以大大提高基因表达水平的新方法,使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍,标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。以下与此有关的叙述,正确的是()A.转基因牛的培育过程只涉及基因工程、胚胎工程的相关技术B.该培育过程一般需要用到乳腺蛋白基因的启动子等调控组件C.所谓“提高基因表达水平”主要是指提高人白蛋白基因在牛乳腺细胞中的含量D.人们只能在转基因牛的乳汁中获取到人白蛋白,是因为此基因只存在于乳腺细胞中3、下列关于植物组织培养和动物细胞培养的比较,正确的是()A.依据的原理都是细胞的全能性B.培养基中都需要添加琼脂C.培养基中都需要添加有机碳源D.都需要用CO2培养箱培养4、在做分离“分解尿素的细菌”实验时,A同学从对应10-6培养基中筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述不正确的是()A.A同学出现这种结果的原因可能是土样不同B.可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照,以证明培养基是否受到污染C.让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验,如果结果与A同学一样,则可证明A同学无误D.B选项的实验思路遵循了实验的对照原则,而C选项的没有5、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置,甲、乙、丙、丁是四份送检样品在测定后的电泳标记位置,哪份标本最有可能确诊为禽流感()
A.甲B.乙C.丙D.丁6、科学家利用病毒介导的方法将细胞发育过程中起重要作用的转录因子(如基因Oct3/4和基因Sox2等)导入已分化的体细胞中,使其重新编程得到了一种类似于胚胎干细胞的新型细胞——诱导多能干细胞(iPS)。研究发现,iPS可在适当诱导条件下定向分化成各种类型的细胞,也可以发育成具有繁殖能力的个体。下列叙述错误的是()A.iPS可诱导发育成个体,体现了动物的体细胞具有全能性B.iPS定向诱导获得的皮肤可避免免疫排斥反应的发生C.已分化的体细胞与iPS的遗传物质存在某些差异D.iPS与胚胎干细胞一样可作为治疗某些疾病的潜在来源7、治疗白化病、苯丙酮尿症等人类遗传病的根本途径是()A.口服化学药物或摄食特殊食物B.注射化学药物或利用射线照射C.诱发致病基因发生突变D.用基因治疗纠正或弥补有缺陷的基因评卷人得分二、多选题(共9题,共18分)8、科学家通过“治疗性克隆”研究发现;利用病人本身的细胞可治疗其患有的某些疾病。一般将胚胎干细胞进行基因修饰后,经诱导分化成相应的组织器官用于移植。其过程如下图所示。下列关于“治疗性克隆”的叙述不正确的是()
A.人类“治疗性克隆”属于生物工程中的细胞工程B.该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养、胚胎移植等C.此过程体现了胚胎干细胞具有全能性D.“治疗性克隆”与“异体器官移植”相比,其优点之一是避免了免疫排斥反应9、2019年,中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术,用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是()A.克隆猴基因组成差异小,可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究10、下列关于“转基因”的叙述,错误的是()A.转入的外源基因不会使作物的其他基因的表达受到影响B.被转移的基因是功能已知的基因,人们对它们研究得已经相当透彻,绝对不会引起安全性问题C.在“转基因”的过程中,必须用到工具酶D.转基因技术成果已进入人类的生产和生活,特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用11、有关质粒的叙述,下述说法不正确的为()A.质粒是细菌细胞不可缺少的遗传物质B.质粒可用于基因的扩增和蛋白质的表达C.每个细菌细胞都都含有一个质粒D.质粒都由4种脱氧核糖核苷酸脱水缩合而成12、常乳是母牛泌乳期一周后直到泌乳停止前一周这个时间段内分泌的乳汁。奶牛自身乳房和乳头中可能含有的细菌,加上挤乳过程中产生的少量污染,常乳中会有一定量的细菌存在。研究小组要检测一份常乳样品中细菌的总量(不考虑菌种),检测流程如下图,每个平板上接种菌液量为0.1mL。下列说法正确的是()
A.倒平板时将培养皿打开一条细缝,不要完全打开,防止杂菌污染B.上述方法是稀释涂布平板法,培养基要营养全面,适合各种细菌生长C.也可以通过连续划线的方法接种,通过菌落数计算样品中的细菌总数D.若三个平板上的菌落平均数为59,则所每毫升样品中细菌总数为5.9×10713、下面为制备单克隆抗体过程示意图,下列相关叙述错误的是()
A.①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B.④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的C.④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞D.⑤可以无限增殖14、β-苯乙醇是赋予白酒特征风味的物质。从某酒厂采集并筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌应用于白酒生产。下列叙述正确的是()A.所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和灼烧灭菌B.通过配制培养基、灭菌、分离和培养能获得该酵母菌C.还需进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力D.该酵母菌的应用有利于白酒新产品的开发15、微生物在食品和饮料生产中发挥了重要作用。下列叙述错误的是()。选项应用主要菌种发酵说明A味精谷氨酸棒状杆菌发酵得到的谷氨酸就是提味增鲜的味精B酱油霉菌(黑曲霉)将原料中的蛋白质分解成多肽和氨基酸,经淋洗调制而成C醋醋酸菌O2和糖类都充足时分解糖类产生乙酸,缺少糖源则不能产生乙酸D啤酒酵母菌主发酵阶段糖分解和代谢物生成后,需低温、通气环境进行后发酵
A.AB.BC.CD.D16、iPS细胞被称为诱导多能干细胞,可通过转入相关因子来制备。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来,后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导成该类细胞。下列说法正确的是()A.导入的物质可以是DN蛋白质,还可用小分子物质来诱导B.iPS细胞的体外培养需要在无菌的CO2培养箱中进行C.T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞,说明体内细胞的分化是可逆的D.与胚胎干细胞相比,iPS细胞的优点是分裂能力强,分化程度低评卷人得分三、填空题(共9题,共18分)17、在课题1中,我们学习了稀释涂布平板法。这一方法常用来统计样品中_________________的数目。当样品的稀释度足够高时,____________________。18、禁止生物武器公约。
(1)1972年4月10日,苏联、美国、英国分别在其首都签署了《禁止试制、生产和储存并销毁细菌(生物)和毒剂武器公约》(简称_____);并于1975年3月26日生效。1984年11月15日,我国也加入了这一公约。
(2)我国在任何情况下_____、_____、_____生物武器,并反对生物武器及其技术和设备的扩散。19、获取目的基因的方法______、______、______20、生态工程的设计所依据的是______和______原理21、蛋白质工程是指以______作为基础,通过______,对现有蛋白质进行_____,或制造一种______,以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产______的蛋白质)
22、细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就______,称为______。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面______时,细胞就会_____,这种现象称为______。23、植物体细胞杂交的意义:_____。24、在我国市场上究竟有多少种转基因产品呢?一位同学带着这样的问题,进行了调查并将结果归纳成下图。
对该同学的调查和归纳结果,有人表示认同,有人提出质疑。质疑者认为:目前我国市场上根本没有大豆、玉米或甜菜的转基因产品。我们的观点是什么_____?25、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______,方法是采用______。评卷人得分四、判断题(共1题,共5分)26、转基因生物可能会破坏生态平衡(______)A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题,共36分)27、如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图;请分析回答有关问题:
(1)正确的操作顺序是_______________________(用字母和箭头表示)。
(2)图中C、E步骤都加入了蒸馏水,但其目的不同,分别是_______________________和_______________________。
(3)为鉴定图中A步骤中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可将其溶解后,滴加________________试剂后沸水浴加热,如果出现___________________;则证明该丝状物的主要成分为DNA。
(4)图中A步骤的目的是_________________________________________。28、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物;该菌具耐高盐的特性。哥伦比亚血平板含无菌脱纤维羊血,金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞,产生透明的溶血圈。如图为检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答:
(1)从功能上看7.5%NaCl(高盐)肉汤培养基属于________培养基,用该培养基对金黄色葡萄球菌进行培养的主要目的是提高___________。
(2)从培养过程分析,振荡培养可以____________________________;更有利于微生物的生长。
(3)在配制哥伦比亚血平板时,添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌________(填“之前”或“之后”),原因是________________________。
(4)图中血平板上的接种方法是________________。经规范操作并多次重复,血平板上均出现__________的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。但牛奶供应商仍认为此菌并非牛奶所携带,因此需要对本次操作进行完善,具体方案是________________。29、玉米是重要的粮食作物;其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白,由P基因编码,在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示,请回答下列问题:
(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段,能被_______识别并结合,驱动基因的持续转录,如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部,可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达,应优先选用_______酶组合,将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。
(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养,培养基中需加入_______进行筛选,此物质属于氨基糖苷类抗生素,它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成,使植物的光合作用和_______受到干扰;从而引起植物细胞死亡。
(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团,经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞,在适宜的培养基中,这种单细胞可以发育成_______;再继续发育成转基因玉米株系。
(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前,组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口,目的是_______。30、番茄果实在成熟的过程中;多聚半乳糖醛酸酶(PG)合成显著增加,以降解果胶使细胞壁破损,从而使果实变红变软,但不利于保鲜。科学家利用基因工程得到转基因番茄,大大延长果实保质期。操作流程如下,回答下列问题:
(1)利用RT—PCR技术即逆转录—多聚酶链式反应制备PG基因,最好从番茄的_____细胞中提取mRNA,此技术所需要的酶主要有_____。
(2)据图可知,转基因番茄主要通过抑制PG基因的_____过程;使PG合成量减少,从而延长果实保质期。
(3)图中的农杆菌。能够在含_____的培养基中生存,而在含_____的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌。
(4)图中将反向连接PC基因导入番茄细胞的方法称为_____。要检测感染农杆菌后的番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因,_____(填“能”或“不能”)用标记的PG基因的单链作为探针进行检测,理由是_____。
(5)在将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中,培养基_____(填“要”或“不要”)添加有机营养物质,原因是_____。评卷人得分六、综合题(共4题,共16分)31、研究人员在培育转bt基因抗虫番茄过程中,选用hpt(抗潮霉素基因)为标记基因。为了提高转基因番茄的安全性,在筛选成功后,用Cre酶(能特异识别loxp位点;切除loxp位点间的基因序列)切除hpt。相关技术流程如图。
(1)步骤①中,为防止原番茄植株带有病毒,应选用______作为外植体;培养时,常在培养基中加入2,4-D,其作用是____________。
(2)步骤②将bt基因导入愈伤组织的最常用方法是___________________________
(3)步骤③需在培养基中加入__________________以初步筛选出转人bt基因的植株。
(4)提取F1植株的基因组DNA,用hpt特异性引物进行PCR。其中,植株1和2的PCR产物电泳结果如图,据此判断,植株___________为不具有hpt的抗虫番茄。32、【生物——选修3现代生物科技专题】
图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答:
(1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_________期的内细胞团或胎儿的_____中分离得到的一类细胞。
(2)图中分化程度最低的干细胞是______。在体外培养条件下,培养液中加入___因子;可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。
(3)在机体内,皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因___________的结果。
(4)某患者不能产生正常的白细胞,通过骨髓移植可以达到治疗的目的,骨髓的治疗的实质是将上图的______________细胞移植到患者体内。
(5)若要克隆某种哺乳动物,从理论上分析,上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的___________,其原因是___________。
(6)若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA的复制,使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的______________期。
(7)在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段,用__________细胞与骨髓细胞融合,经多交筛选最终得到能分泌__________________的杂交瘤细胞。33、2020年诺贝尔化学奖颁给了EmmanuelleCharpentier和JenniferA.Doudmna;以表彰她们开发出一种基因组编辑方法,该种基因组编辑技术常用CRISPR/Cas9系统。水稻第8号染色体上的Badh2基因编码含503个氨基酸的甜菜碱脱氢酶,该基因突变可影响香味物质2-AP。为研究Badh2基因与水稻香味的关系,科研人员用CRISPR/Cas9基因编辑技术对水稻Badh2基因进行编辑,从而获得一株突变体。
(1)CRISPR/Cas9系统包含gRNA和Cas9蛋白,水稻细胞表达该系统需获得的目的基因序列是____,然后利用________________酶构建基因表达载体。为了将含有上述载体的受体细胞筛选出来,该载体上还需包含_____________序列。
(2)水稻Badh2基因包含15个外显子序列(位于目的基因内的编码序列)和14个内含子序列(位于目的基因内的非编码序列),其中_______(填“外显子”或“内含子”)序列就是编码甜菜碱脱氢酶的序列,推测其碱基总数至少有________个,基因的表达离不开启动子,原因是____________。
(3)科研人员用CRISPR/Cas9系统对水稻Badh2基因进行编辑后获得8个T0代转基因植株,然后对每个转基因苗进行基因测序。首先提取相应的DNA进行PCR扩增实验,该技术需设计特异性引物,目的是___。PCR技术扩增结果显示有一个T0转基因苗被成功编辑,待其成熟后播种其种子获得T1代植株,测序发现其Badh2基因的第1外显子发生一个碱基T的插入,据此推测,与野生型相比,T1代植株Badh2基因控制合成的甜菜碱脱氢酶的氨基酸序列________(填“发生”或“不发生”)改变,原因是________。
(4)为进一步研究Badh2基因在转基因植株后代中的作用,科研人员提取并定量分析了野生型和T1突变体的Badh2基因的RNA总量和2-AP含量,结果如图所示,据此推测Badh2基因与水稻香味的关系是_______。
34、人乳头瘤病毒(HPV)是目前传播广泛的病毒之一;人类感染HPV轻则可自愈,重则会导致宫颈癌等疾病,严重危害人类健康,而疫苗是预防宫颈癌最有效的武器。回答下列问题:
(1)HPV可感染宿主黏膜和皮肤上皮细胞。皮肤和黏膜属于人体的第_________________道防线,此防线连同人体的第二道防线_________________(填组成成分)是人人生来就有的;且可针对多种病原体发挥作用,被称为非特异性免疫。
(2)某男孩在一消毒不严的游泳池感染了HPV,导致脚部皮肤出现大量脓包,血检时发现其血清中含一定量的HPV抗体,此过程中主要借助体内的_________________(填细胞名称)等通过_________________免疫抵抗HPV。当HPV进入细胞后,细胞毒性T细胞发挥作用使_________________;释放病毒到体液中,最终被消灭。
(3)宫颈癌在中国女性最常见的癌症中排名第6;HPV疫苗注射是有效的预防手段。我国研制的九价HPV疫苗能预防9种高危型HPV引发的子宫颈癌,半年内完成3剂接种后,能大大增强对子宫颈癌的预防作用。如图表示首次注射HPV疫苗引起机体发生免疫反应的过程示意图,请回答下列问题:
a.细胞②是_________________,其分泌的物质A是_________________。
b.当再次注射HPV疫苗时,疫苗能直接刺激图中的细胞_________________(填数字序号)。
(4)HPV疫苗其成分主要是HPV衣壳蛋白L1或其重组蛋白。已分离出的HPV达100多型,其中至少14型可导致宫颈癌或其他恶性肿瘤。为预防多种类型HPV引起的宫颈癌,科学家们正致力于研制“以一防多”的HPV衣壳蛋白疫苗,此过程需借助_________________工程这一现代化科技手段来完成。参考答案一、选择题(共7题,共14分)1、C【分析】【分析】
1;生物武器种类:包括致病菌、病毒、生化毒剂;以及经过基因重组的致病菌等.把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方,可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
2;生物武器的特点:单位面积效应大;有特定的伤害对象;具有传染性;危害时间久;不易被发现和鉴定;使用者本身易受伤害;生物武器造价低;技术难度不大,隐秘性强,可以在任何地方研制和生产。
【详解】
生物武器包括致病菌;病毒、生化毒剂;以及经过基因重组的致病菌等,霍乱弧菌、鼠疫杆菌、天花病毒都有高致病性和传染性,可以作为生物武器,但乳酸菌为一种非致病菌,不可作为生物武器,ABD错误,C正确。
故选C。2、B【分析】【分析】
转基因动物的受体细胞是受精卵;所以含有转基因的受精卵在形成个体时,所有细胞都会含有转入的基因,“提高基因的表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞表达出更多的人白蛋白,而不是含有更多的白蛋白基因。只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白,因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞才表达。
【详解】
A;转基因牛的培育过程涉及基因工程、动物细胞培养、胚胎移植等技术以及配套工程的相关技术;A错误;
B;由题意“使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍”可知:该培育过程一般需要用到乳腺蛋白基因的启动子等调控组件使目的基因在乳腺细胞内表达;B正确;
C;提高基因表达水平是指设法使牛的乳腺细胞中含有的人白蛋白基因指导合成更多的人白蛋白;C错误;
D;人们只能在转基因牛的乳汁中获取到人白蛋白;是因为此基因只在乳腺细胞中表达,D错误。
故选B。3、C【分析】【分析】
植物组织培养和动物细胞培养的比较:
。比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基成分营养物质(蔗糖)、植物激素等营养物质(葡萄糖)、动物血清等培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无毒苗等获得细胞或细胞产物【详解】
A;植物组织培养依据细胞的全能性原理;动物细胞培养依据细胞增殖原理,A错误;
B;植物组织培养是固体培养基;需要添加琼脂,动物细胞培养是液体培养基,不需要添加琼脂,B错误;
C;植物组织培养和动物细胞培养的培养基中都需要添加有机碳源;C正确;
D、动物细胞培养过程中二氧化碳用于调节培养液的pH值,而植物组织培养的过程中不需要二氧化碳培养箱,D错误。4、D【分析】【分析】
1.生物实验应遵循对照原则;等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则。
2.A同学的实验结果可能是培养基污染造成的;还可能是A同学实验操作过程中污染造成的,也可能是与其他同学所取土壤样品不同造成的,关键是设法排除影响结果的因素。
【详解】
A;A同学出现这种结果的原因可能是土样不同;也可能是操作中污染造成的,A正确;
B;A同学的实验结果可能是培养基污染造成的;可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照,以证明培养基是否受到污染,B正确;
C;如果是A同学实验操作过程中污染造成的;让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验,如果结果与A同学一样,则可证明A同学无误,C正确;
D;B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则;D错误。
故选D。
【点睛】5、C【分析】【分析】
有关PCR技术的相关知识:(1)概念:PCR全称为聚合酶链式反应;是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术;(2)原理:DNA复制;(3)前提条件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物;(4)过程:①高温变性:DNA解旋过程;②低温复性:引物结合到互补链DNA上;③中温延伸:合成子链.PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶,高温条件下氢键可自动解开。
【详解】
据图分析;图中P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置,甲;乙、丙、丁是四份送检样品在测定后的电泳标记位置,其中丙的电泳位置与P最接近,因此最有可能为禽流感。
故选C。6、A【分析】【分析】
胚胎干细胞的特点:在形态上;体积较小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物任何一种组织细胞。另一方面,在体外培养条件下,ES细胞可不断增殖而不发生分化,可进行冷冻保存,也可以进行某些遗传改造。
【详解】
A;iPS不是体细胞;因此不能体现动物的体细胞具有全能性,A错误;
B;由于是自身细胞;因此机体对iPS定向诱导获得的皮肤不会发生免疫排斥反应,B正确;
C;已分化的体细胞导入基因Oct3/4和基因Sox2;因此遗传物质发生了改变,C正确;
D;iPS与胚胎干细胞都具有定向分化为各种细胞的能力;因此都可作为治疗某些疾病的潜在来源,D正确。
故选A。7、D【分析】【分析】
采取基因疗法替换致病基因;使得正常基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗遗传病的目的。
【详解】
人类遗传病的病因是细胞内的遗传物质发生了改变;其治疗措施是基因治疗,正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,因此治疗白化病;苯丙酮尿症等人类遗传病的根本途径是用基因治疗纠正或弥补有缺陷的基因。D正确,ABC错误。
故选D。二、多选题(共9题,共18分)8、B:C【分析】【分析】
1;治疗性克隆:指利用克隆技术产生特定细胞和组织(皮肤、神经或肌肉等)用于治疗性移植。生殖性克隆:指将克隆技术用于生育目的;即用于产生人类个体。2、分析题图:图示为治疗性克隆的大概过程,即从患者身上提取一个体细胞核,移植到去核的卵细胞中,形成一个新细胞,经过动物细胞培养成胚胎干细胞,经过细胞分裂、分化形成组织和器官。
【详解】
A;人类“治疗性克隆”应用的主要技术有核移植、动物细胞培养;属于生物工程中的动物细胞工程,A正确;
B;由图可知;该治疗过程中应用的主要技术有核移植、动物细胞培养,没有应用胚胎移植技术,B错误;
C;此过程没有形成完整个体;不能体现胚胎干细胞的全能性,C错误;
D;“治疗性克隆”与“异体器官移植”相比;器官来自于同一个体,其优点之一是避免了免疫排斥反应,D正确。
故选BC。9、B:D【分析】【分析】
动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中;使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
【详解】
A;5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术(属于无性繁殖)获得的;所以其基因组成差异小,可减少个体差异对实验的干扰,A正确;
B;经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴;B错误;
C;克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物;C正确;
D;不能利用该技术进行克隆人的研究;D错误。
故选BD。
【点睛】10、A:B【分析】【分析】
1;基因工程的工具:(1)限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列;并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂;(2)DNA连接酶:连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键;(3)运载体:常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
2;转基因生物的安全性问题:食物安全(滞后效应、过敏源、营养成分改变)、生物安全(对生物多样性的影响)、环境安全(对生态系统稳定性的影响)。
【详解】
A;外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的;因而极有可能破坏原有基因,并使之表达受到影响,A错误;
B;目前科学家对基因的结构、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解相当有限;再加上转移的基因虽然是功能已知的基因,但不少却是异种生物的基因,因此可能会引起安全性问题,B错误;
C;在“转基因”的过程中;必然用到工具酶,如限制酶和DNA连接酶,C正确;
D;转基因技术成果在农业和医药上发挥了极大的作用;已进入人类的生产和生活,D正确。
故选AB。
【点睛】11、A:C【分析】【分析】
质粒是细胞染色体外能够复制得很小的环状DNA分子。广义上说几乎所有的细胞都有质粒(比如线粒体DNA);狭义上指存在于许多细菌酵母菌;放线菌等生物中的质粒。质粒与染色体DNA一样都是双链DNA分子,质粒亦可携带遗传信息,质粒上面一般含有几个到几百个基因,控制着细菌的抗药性、固.氮、抗生素生成等性状。然而质粒也有一些与染色体DNA不同的特性。
质粒具有以下特点;质粒可以独立复制;质粒很小细菌质粒的分子量乙般较小,约为细菌DNA的0.5%~3%;质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用。
【详解】
A;细菌的遗传物质是DNA;质粒是某些细菌细胞质中小型的环状DNA,质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用,因此,质粒不是细菌细胞不可缺少的遗传物质,A错误;
B;质粒可以独立复制;因此,目的基因与质粒连接后形成重组质粒之后,目的基因可随着质粒DNA的复制而复制,质粒上有基因存在,如质粒上有抗性基因的存在,因此质粒还可控制蛋白质的表达,B正确;
C;细菌细胞不都含有质粒;且每个细菌细胞不都含有一个质粒,C错误;
D;质粒是小型的环状DNA分子;因此,是由4种脱氧核糖核苷酸脱水缩合而成的,D正确。
故选AC。
【点睛】12、A:B:D【分析】【分析】
分析题文描述和题图:图示为采用稀释涂布平板法分离常乳样品中细菌总量的流程图。首先将常乳样品进行一系列梯度稀释,然后取1×105倍稀释的稀释液0.1mL分别涂布到3个平板上进行培养。为了防止杂菌污染;稀释涂布平板的所有操作都应控制无菌条件。
【详解】
A;为了防止杂菌污染;倒平板时应将培养皿打开一条细缝,不要完全打开,A正确;
B;为了检测一份常乳样品中细菌的总量;图示对常乳样品进行了一系列梯度稀释,由此可见,上述方法是稀释涂布平板法,培养基要营养全面,适合各种细菌生长,B正确;
C;通过连续划线的方法接种;不易分离出单个菌落,不能用于微生物的计数,C错误;
D、取1×105倍稀释的稀释液0.1mL分别涂布到3个平板上进行培养,若三个平板上的菌落平均数为59,则所每毫升样品中细菌总数为59÷0.1×105=5.9×107;D正确。
故选ABD。13、A:C【分析】据图分析;①过程表示获取B淋巴细胞和骨髓瘤细胞;②过程促进细胞融合,采用离心;电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导,筛选出杂交瘤细胞;④过程通过专一抗体检验阳性,筛选出能够产生特异性抗体的细胞群;⑥过程表示动物细胞培养。
【详解】
A;B淋巴细胞是从小鼠的脾脏中提取的;骨髓瘤细胞不是,A错误;
B;④中筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞;可以通过检测抗原、抗体反应,如果有反应说明表达了抗体,B正确;
C;④中的筛选是为了获得能产生一种抗体的杂交瘤细胞;C错误;
D;⑤可以无限增殖;也能产生特异性抗体,D正确。
故选AC。14、A:C:D【分析】【分析】
选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学;物理因素的抗性而设计的培养基;使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选率。
【详解】
A;培养基一般选择高压蒸汽灭菌;接种工具一般用灼烧灭菌,A正确;
B;分离纯化酵母菌;操作如下:配制培养基→灭菌→接种→培养→挑选菌落,B错误;
C;为了筛选的到目的菌;应该进行发酵实验检测该酵母菌产β-苯乙醇的能力,C正确;
D;筛选到一株产β-苯乙醇的酵母菌可应用于白酒新产品的开发;D正确。
故选ACD。15、A:C:D【分析】【分析】
1;果酒的制作离不开酵母菌;酵母菌是兼性厌氧微生物,在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖,把糖分解成二氧化碳和水;在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵。
2;谷氨酸棒状杆菌为需氧菌。
【详解】
A;发酵得到谷氨酸经过一系列处理制成谷氨酸钠是味精;A错误;
B;酱油由霉菌(黑曲霉)将原料中的蛋白质分解成多肽和氨基酸;经淋洗调制而成,B正确;
C;醋酸菌在缺少糖源时;可以直接将乙醇转化为乙醛,再将乙醛变为乙酸,C错误;
D;主发酵阶段糖分解和代谢物生成后;需低温、密闭环境进行后发酵,D错误。
故选ACD。16、A:B【分析】【分析】
iPS细胞被称为诱导多能干细胞;具有分裂和分化的能力。
【详解】
A;目前已采用多种方法来制备iPS细胞;包括借助载体将特定的基因导入细胞中,直接将特定的蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞,A正确;
B、iPS细胞的体外培养是利用动物细胞培养技术,需要在无菌的CO2培养箱中进行培养;B正确;
C;T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞;说明离体的已分化的细胞经过诱导可转化为能分化的状态,C错误;
D;胚胎干细胞和iPS细胞均具有分裂能力强;分化程度低的特点,D错误。
故选AB。三、填空题(共9题,共18分)17、略
【解析】①.活菌②.培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌18、略
【分析】【详解】
为最大程度的保障人类权益;签署了禁止生物武器公约:
(1)《禁止试制;生产和储存并销毁细菌(生物)和毒剂武器公约》;简称《禁止生物武器公约》。
(2)我国对于生物武器的态度是在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器,并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】①.《禁止生物武器公约》②.不发展③.不生产④.不储存19、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】基因文库人工合成PCR技术20、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】生态学工程学21、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在22、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接触抑制。23、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】克服了远缘杂交不亲和的障碍。24、略
【分析】【详解】
目前我国市场上的转基因食品,从原料来源看,进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品,国内生产的有棉籽油和番木瓜,故我国市场上有大豆等的转基因产品。【解析】目前我国市场上的转基因食品,从原料来源看,进口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相关产品,国内生产的有棉籽油和番木瓜。25、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。四、判断题(共1题,共5分)26、A【分析】【详解】
转基因生物可能会破坏生态平衡,特别是对生物多样性的影响。大自然经过亿万年的演化,各种生物相对处于一种和谐的生态平衡状态。但是,如果我们用转基因技术把某种生物人为地变得更加“强悍”,那其他物种就会衰败以至灭绝,故本题正确。五、实验题(共4题,共36分)27、略
【分析】【分析】
1;利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验原理:①DNA在氯化钠溶液中的溶解度;是随着氯化钠的浓度变化而改变的.当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低.利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出;②DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液.利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA;②DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
2;利用动物细胞进行DNA的粗提取与鉴定的实验步骤是:①制备鸡血细胞液;②提取鸡血细胞和物质,③细胞核物质中DNA的溶解,④析出含有DNA的粘稠物,⑤过滤获取纱布上的粘稠物,⑥DNA的再溶解,⑦加冷却酒精使DNA析出,⑧二苯胺鉴定DNA分子。
【详解】
(1)DNA的粗提取和鉴定步骤是:加入蒸馏水;破碎细胞→过滤,获取含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定.所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A。
(2)C加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破;释放细胞核物质;E步骤甲蒸馏水是降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出。
(3)鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA;可滴加二苯胺试剂,在沸水浴加热的条件下如果出现蓝色则该丝状物的主要成分为DNA。
(4)图中A步骤的目的是获取含杂质较少(或较纯净)的DNA。
【点睛】
本题结合图解,考查DNA的粗提取和鉴定,要求考生识记DNA粗提取和鉴定的原理、操作步骤、实验中采用的试剂及试剂的作用等,再结合所学的知识准确答题,难度适中。【解析】C→B→E→D→A使鸡血细胞吸水涨破,释放出细胞核物质降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出二苯胺蓝色提取含杂质较少(或较纯净)的DNA28、略
【分析】【分析】
1;选择培养基:人为提供有利于目的菌株生长的条件;同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。
2;根据题意分析;金黄色葡萄球菌可破坏哥伦比亚血平板上菌落周围的红细胞,产生透明的溶血圈。
【详解】
(1)金黄色葡萄球菌具耐高盐的特性;可用7.5%NaCl(高盐)肉汤培养基进行选择培养,可进一步提高金黄色葡萄球菌的浓度。
(2)振荡培养的目的是使微生物与营养物质充分接触,增加O2浓度;更有利于微生物生长。
(3)因为无菌脱纤维羊血上有红细胞;而高温会破坏红细胞。故添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌之后。
(4)根据图中最右边的图示可知;接种方法是平板划线法。已知金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞,产生透明的溶血圈。故若要初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,则血平板上要均出现周围出现透明溶血圈的菌落。本实验缺乏对照组,实验不完善,还需要设置不加(鲜)牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组。
【点睛】
本题旨在考查学生理解选择培养基的原理和应用、平板划线法的使用要点,把握知识的内在联系并应用相关知识综合解决问题的能力。【解析】选择金黄色葡萄球菌的浓度使微生物与营养物质充分接触/增加O2之后防止高温破坏红细胞平板划线法周围出现透明溶血圈设置不加(鲜)牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组29、略
【分析】【分析】
基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取;利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤;基因表达载体包括目的基因;启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同;导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法;基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定;抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】
(1)启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点;能驱动基因的转录;如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部,则会破坏该基因,获得该基因沉默(失活)突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达,则需要强启动子和P基因不被破坏,因此应优先选用BamHⅠ和SacⅠ酶组合,将Ti质粒切开后构建重组表达载体。农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上,因此T-DNA在该实验中的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。
(2)由图可知;G418抗性基因位于Ti质粒的T-DNA上,随T-DNA一起整合到玉米细胞染色体DNA上,因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织培养,培养基中需加入G418进行筛选,此物质属于氨基糖苷类抗生素,它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成,其中叶绿体是光合作用的场所,线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所,因此可使植物的光合作用和呼吸作用(能量代谢)受到干扰,从而引起植物细胞死亡。
(3)愈伤组织是一种相对没有分化的薄壁细胞团;经液体悬浮培养可以分散成胚性单细胞,在适宜的培养基中,这种单细胞可以发育成胚状体,再继续发育成转基因玉米株系。
(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及玉米的基因型等。目前,组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口,目的是防止杂菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞的染色体DNA上。
(2)G418呼吸作用##能量代谢
(3)薄壁细胞胚状体。
(4)玉米的基因型防止杂菌污染30、略
【分析】【分析】
基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取;利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤;基因表达载体包括目的基因;启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同;导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法;基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因−−DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA−−分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定;抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】
(1)利用RT—PCR技术即逆转录—多聚酶链式反应制备PG基因;由于多聚半乳糖醛酸酶(PG)可降解果胶使细胞壁破损,从而使果实变红变软,说明PG基因在果肉中表达量较高,所以最好从番茄的果肉细胞中提取mRNA,此技术所需要的酶主要有逆转录酶和Taq酶(或热稳定DNA聚合酶);
(2)据图可知;转基因番茄PG基因与反向连接PG基因的转录产物mRNA1和mRNA2相结合形成双链,从而抑制PG基因的翻译过程,使PG合成量减少,从而延长果实保质期;
(3)分析表达载体的构建过程图可知;目的基因插入到图中农杆菌的四环素抗性基因上,导致农杆菌失去了四环素的抗性,所以图中农杆菌能够在含卡那霉素的培养基中生存,而在含四环素的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌;
(4)图中是利用农杆菌将反向连接PC基因导入番茄细胞的;此方法称为农杆菌转化法。不能用标记的PG基因的单链作为探针进行检测番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因,理由是番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因,均会与该探针形成杂交带;
(5)将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中;需要在培养基中添加有机营养物质,原因是该培养过程中植物细胞不能进行光合作用(或光合作用很弱)。
【点睛】
本题结合图解,考查基因工程和植物组织培养的相关知识,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤;识记植物组织培养的过程及应用,能结合图中信息准确答题。【解析】果肉逆转录酶和Taq酶(或热稳定DNA聚合酶)翻译卡那霉素四环素农杆菌转化法不能番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因,均会与该探针形成杂交带要该培养过程中植物细胞不能进行光合作用(或光合作用很弱)六、综合题(共4题,共16分)31、略
【分析】【分析】
分析题图:图示表示转bt基因抗虫番茄的培育过程,其中①表示脱分化过程,②表示将目的基因导入受体细胞,③表示再分化和筛选过程,最后还要用Cre酶(能特异识别loxp位点;切除loxp位点间的基因序列)切除hpt。
(1)
由于植物分生区附近的病毒极少;甚至无病毒,因此步骤①中,为防止原番茄植株带有病毒,应选用分生组织(或茎尖或根尖或芽尖)作为外植体。该步骤所用的培养基中要加入2,4-D,其作用是诱导形成愈伤组织(或诱导脱分化)。
(2)
将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,因此步骤②将bt基因导入愈伤组织的最常用方法是农杆菌转化法。
(3)
由图可知,抗性基因是潮霉素抗性基因,因此步骤③需在培养基中加入潮霉素以初步筛选出转入bt基因的植株。
(4)
提取F1植株的基因组DNA;用hpt特异性引物进行PCR,其中,植株1出现PCR产物,说明其具有hpt,而植株2没有出现PCR产物,说明其不具有hpt.因此,植株2为不具有hpt的抗虫番茄。
【点睛】
本题结合转bt基因抗虫番茄的培育过程图解,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤,掌握各操作步骤中的相关细节,能结合题中和图中信息准确答题。【解析】(1)分生组织(茎尖;芽尖)诱导形成愈伤组织(诱导脱分化)
(2)农杆菌转化法。
(3)潮霉素。
(4)232、略
【分析】【分析】
1;胚胎干细胞简称ES或EK细胞;来源于早期胚胎或原始性腺(即囊胚期的内细胞团)。
2;胚胎干细胞的特点:具有胚胎细胞的特性;体积较小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物任何一种组织细胞。另一方面,在体外培养条件下,ES细胞可不断增殖而不发生分化,可进行冷冻保存,也可以进行某些遗传改造。
3;胚胎干细胞的主要用途是:①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律;②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中;能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子,如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时,就可以诱导ES细胞向分化,这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段;③可以用于治疗人类的某些顽疾,如帕金森综合症、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良;④培育各种组织器官,用于器官移植,解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。
【详解】
(1)胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞;囊胚阶段细胞开始分化分为内细胞团和滋养层细胞。
(2)图中分化程度最低的干细胞是胚胎干细胞;全能性最高,在体外培养条件下,该种干细胞可诱导分化形成不同类型的组织细胞,培养液中加入分化诱导因子。
(3)细胞分化是细胞中基因选择性表达的结果。
(4)骨髓是人体的造血组织;存在造血功能干细胞,骨髓的治疗的实质是将上图的造血干细胞移植到患者体内。
(5)克隆某种哺乳动物需要供体提供细胞核;而成熟的红细胞没有细胞核,所以不能作为供体。
(6)细胞周期包括分裂间期和分裂期;分裂间期完成DNA分子的复制和有关蛋白质的合成。
(7)单克隆抗体过程中的细胞融合阶段;用B淋巴细胞与骨髓细胞融合,交筛选最终得到能分泌一种特异性抗体的杂交瘤细胞。
【点睛】
本题考查胚胎干细胞的相关知识,要求考生识记胚胎干细胞的概念、来源、特点及相关应用,能结合所学的知识准确答题,属于考纲识记层次的考查。【解析】①.囊胚②.原始性腺细胞③.胚胎干细胞④.分化诱导⑤.选择性表达⑥.造血干⑦.红细胞⑧.细胞中无细胞核⑨.间⑩.淋巴⑪.特异性抗体33、略
【分析】【分析】
1;基因工程又叫DNA重组技术;是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
2;基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤;基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA
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