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降脂与降糖活性研究综述目录TOC\o"1-2"\h\u7176降脂与降糖活性研究综述 1215111.1体外降脂降糖活性研究方法 1315111.1.1胆酸盐含量检测方法 1166271.1.2胰脂肪酶活性检测方法 214531.1.3α-淀粉酶活性检测方法 2241291.2胆酸盐结合研究进展 2253841.2.1胆酸盐概述 2245041.1.2胆酸盐结合机理 3252631.1.3胆酸盐结合剂概况 3247161.3胰脂肪酶抑制研究进展 4165391.3.1胰脂肪酶概述 424721.3.2胰脂肪酶抑制剂概况 4205501.4α-淀粉酶抑制研究进展 4160741.5体内降脂降糖活性研究方法 51.1体外降脂降糖活性研究方法目前关于测定体外降脂活性方法主要有体外结合胆酸盐能力和抑制胰脂肪酶活性等,而体外降糖活性主要从对抑制淀粉酶活性和葡萄糖苷酶活性等方面进行测定。1.1.1胆酸盐含量检测方法测定胆酸盐含量的主要方法有紫外分光光度法、糠醛比色法和高效液相色谱法等。紫外分光光度法的原理是因为胆汁酸的本身缺乏π电子,不能发生电子跃迁,对其进行紫外扫描时没有特殊吸收波长,但通过添加浓硫酸会将其变为酚类物质,在387nm时会出现吸收峰。其方法操作简单,但灵敏性低。糠醛比色法是检测胆酸盐含量的一种常用的方法,其原理是糠醛分子的羧基会在浓硫酸催化下与胆汁酸分子的羟基发生缩合反应,对反应物质进行紫外扫描时,胆汁酸分子会在490~550nm的波长范围内产生明显的吸收峰。该检测方法较为简便,并且灵敏度高,准确度和重现率较好。高效液相色谱法是近年来流行的方法,主要用于胆汁酸含量的精密检测,其结果较为稳定,最低检测限值低,但操作方法较为复杂,成本较高。1.1.2胰脂肪酶活性检测方法测定胰脂肪酶活性的检测方法主要有碱滴定法、对硝基苯酚(PNP)法和铜皂法等。碱滴定法的原理是油脂会在胰脂肪酶的作用下水解产生游离脂肪酸,使用NaOH标准溶液作为滴定液,酚酞溶液作为指示剂,以每分钟产生的脂肪酸含量作为胰脂肪酶活力单位,从而测得胰脂肪酶的活性,该测定速度快,但准确性不高。PNP法的原理是对硝基苯酚棕榈酸酯(PNPP)在胰脂肪酶的作用下产生PNP,PNP在405nm下有吸收峰,通过测定吸光度值来得出胰脂肪酶的活性。铜皂法是利用苯溶液来萃取脂肪酸再加入醋酸铜显色剂,离心后取有机相,在710nm下测定吸光度值以得到胰脂肪酶的活性,该方法比较繁琐,且具有一定的毒性,较少使用(江慧芳2007)。1.1.3α-淀粉酶活性检测方法检测α-淀粉酶的方法主要有:碘比色法、3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法和凝胶扩散法等,其中最常用的是DNS比色法。该方法的原理是淀粉水解后会生成还原性糖,还原糖和DNS加热后反应生成红棕色的氨基化合物,化合物在580nm波长下具有最大吸收峰,通过测定吸光度值来得出α-淀粉酶的活性(张雪娇等2020)。1.2胆酸盐结合研究进展1.1.1胆酸盐概述人体内的胆细胞可以分泌胆汁,其中胆汁酸是胆汁的主要成分,其他成分包括水、胆固醇、无机盐等。大多数的胆汁酸会和钠离子、钾离子、甘氨酸和牛磺胆酸相结合而形成胆(汁)酸盐。胆汁酸盐在结构上既具有磺酸基、羟基等亲水基团,又具有甲基等疏水的基团。由于具有两种的亲侧面基团,所以胆汁酸盐具有较强的界面活性(Alrefai2007)。根据不同的来源可将胆汁酸分为两种类型:初级胆汁酸和次级胆汁酸。初级胆汁酸是来源于肝脏,由其中的胆固醇在肝脏细胞微液和线粒体中一系列转录酶的作用下催化而来的。根据形态分布,可以将初级胆汁酸分为:游离型和结合型。其具有较强的亲水性能力,极性高的特点,可以与钾钠离子结合而形成胆汁酸盐。次级胆汁酸是将初级胆汁酸被肠道中微生物的分解脱羟而形成的,同样分为游离型和结合型。前者包括脱氧胆酸和石胆酸,而后者包括甘氨脱氧胆酸和牛磺脱氧胆酸(Sjovall1960)。在肝脏中的胆细胞首先分泌产生胆汁,在肠道中绝大多数的胆酸盐会经过重吸收,重回血液中经过静脉循环的方式重新回到肝脏中。在肠道循环中游离型胆汁酸会变为结合型胆汁酸,两种方式得到的结合型胆汁酸会和胆汁一起进入肠道中。整个过程就是胆汁酸盐的肠道循环过程。在肠道中对于胆酸盐的重吸收的类型大多是主动型,有少量游离型胆汁酸会通过被动型重吸收的作用而回到血液中,石胆酸和复溶物不被吸收而直接通过粪便排出(Zarras1999)。1.1.2胆酸盐结合机理胆酸盐的生物合成与代谢起到着维持体内胆固醇水平平衡的作用,如果胆汁酸在循环前被结合,从而不能进入肝脏,会促进肝脏胆固醇的降解得到的更多的胆汁酸,从而使血液中的胆固醇进入肝脏(彭新磊1998)。胆酸盐的结合剂可以降血脂,在肠道中与胆汁酸相结合会降低其重吸收率,不溶的复合物增多,排泄物的增多会使得胆汁酸无法从肠道循环而回到肝脏,从而促使胆汁酸的含量增多,降低血液或肝脏中的胆固醇含量。1.1.3胆酸盐结合剂概况胆酸盐结合剂是指可以在肠道循环过程中结合胆酸盐形成不溶性物质并排出体外,从而增加胆汁酸的分泌,增强分解胆固醇的能力,从而减少胆固醇的含量。胆酸盐结合剂可分为阴离子交换树脂和膳食纤维结合剂。研究表明,不溶性的膳食纤维的对胆酸盐的结合能力要强于可溶性膳食纤维。膳食纤维结合胆酸盐包括直接结合作用、结合水分和溶胀作用三种。Zacherl等(2011)发现柠檬中膳食纤维是通过直接结合的方式来结合胆酸盐;燕麦β-葡聚糖、果胶等多糖既可以通过直接结合的方式来结合胆酸盐,也可以经过水分结合,增加胃肠道的粘度来增加胆酸盐的排出量;某些海藻类膳食纤维可以通过溶胀作用来降低胆酸盐的浓度。Kahlon(2000)等人研究结果发现燕麦麸中不溶性膳食纤维体外结合胆酸盐的能力存在着很大的差异,米麸的降血脂机理与其结合胆酸盐的能力呈正相关。1.3胰脂肪酶抑制研究进展1.3.1胰脂肪酶概述在日常进食中的绝大部分脂肪都是经过TG而吸收的,整个消化过程是食物从进入开始,在肠道中被脂肪酶消化水解,随后经过十二指肠中胰脂肪酶(PPL)和其辅酶的作用下,水解生成游离脂肪酸和单脂等产物。在人进食后,自由脂肪酶经过肠道循环,通过依靠脂蛋白来运输到不同的器官,从而形成新的TG分子。而PPL在TG的有效消化中起着重要作用。能够负责一半以上的膳食脂肪的水解。因此,胰脂肪酶水解饮食中绝大多数的脂肪,其产生的脂肪酸与甘油单酯会结合胆固醇和胆盐等物质而形成凝胶基团,这些基团会被肠道细胞所吸收从而形成人体的甘油三酯,过度的脂肪积累将会形成肥胖。抑制PPL的活性,从而减少TG的吸收,是降低血脂水平,改善肥胖的一大方面。如今,唯一临床批准使用的抑制PPL活性的药物只有奥利司他,但其使用后会有腹胀腹泻、便秘、油性斑点等副作用。而天然的PPL抑制剂并不会有这些毒副作用,所以从天然产物中寻找高效、低毒的PPL抑制剂就成了如今研究的热点。1.3.2胰脂肪酶抑制剂概况PPL的抑制剂主要来源有三种,分别是化学合成产物、天然产物和微生物的代谢产物,而治疗肥胖的PPL抑制剂主要来源于后两者。其中天然产物主要包括皂苷、黄酮和多酚类等从天然植物中提取的产物。如今有研究发现,多糖类化合物在降脂方面有着不错的效果。多糖类化合物对动物的TG、TC、LDL-C和游离脂肪酸等血脂的代谢指标有不错的抑制效果,并可以提高血液中HDL-C的含量。李向阳等研究结果发现金钗石斛多糖能明显降低高脂饮食大鼠血清中的TG、TC、LDL-C的含量,抵消其肝脏细胞的脂肪化效果。楮盼盼等(2015)的研究结果表明苦荞麦多糖对PPL有着良好的抑制效果,抑制率可达到50%以上。植物多糖在抑制胰脂肪酶活性方面是值得深入研究的1.4α-淀粉酶抑制研究进展抑制α-淀粉酶的活性是控制血糖水平的重要影响因素,通过抑制淀粉代谢过程中的关键酶,可以延迟餐后血糖的升高,控制血糖指数的升高,对胰岛素的抗性也有一定的帮助。α-淀粉酶在消化途径中发挥重要作用,可将食物中的碳水化合物转化为葡萄糖,经小肠进入血液而升高血糖,一些已投入使用的抗糖药物,如阿卡波糖、米格列醇等,通过抑制α-淀粉酶等肠道关键酶的活性,来控制糖尿病患者饭后的血糖含量。天然产物及微生物的代谢产物有着不错抑制α-淀粉酶的效果,例如茶叶(Wangetal2010)、玫瑰茄(Hansawasdi2020)等提取物都对α-淀粉酶有着不错的抑制效果。王飞等(2012)在研究桃胶多糖的降血糖活性作用时,发现桃胶多糖可以通过抑制α-淀粉酶的方式来降低血糖水平。Hasan等(2014)研究表明石岩枫多糖具有α-淀粉酶抑制活性,并在之后的动物试验中发现其能有效降低大鼠的血糖水平。BelHadj等人(2013)研究发现石莼多糖干预下的糖尿病大鼠模型的血浆和小肠中α-淀粉酶活性受到抑制,并且血浆中TG和TC水平有着明显的下,说明石莼多糖具有治疗糖尿病的潜在作用。如今
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