2025年湘师大新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年湘师大新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷813考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（）A.培养贴附性细胞时要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、易于贴附B.需将培养细胞的松盖培养瓶置于95%CO2和5%O2的混合气体培养箱中C.传代培养时，少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，其遗传物质已经改变D.培养正常的或病变的细胞，可用于生理、病理、药理等方面的研究2、植物组织培养依据的原理；培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是()

①体细胞全能性②离体植物器官、组织或细胞③根、芽④生长素和细胞分裂素⑤生长素和乙烯⑥愈伤组织⑦再分化⑧脱分化⑨植物体A.①、②⑦⑥⑧③⑨、④B.①、②⑧⑥⑦③⑨、④C.①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤D.①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤3、一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能（）A.有选择地繁殖某一性别的家畜B.繁殖家畜中的优秀个体C.用于保存物种D.改变物种的基因型4、下列关于动物细胞培养的叙述中，错误的是（）A.用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.培养过程中需要使用胰蛋白酶获得离散的细胞C.动物细胞培养液与植物组织培养液的组成成分相同D.动物细胞培养是动物细胞工程的基础5、动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（）A.动物细胞培养B.动物细胞融合C.生产单克隆抗体D.动物细胞核移植6、如图是中国科学家首次用体细胞核移植技术克隆出两只猕猴的简单流程，叙述错误的是（）

A.培养供体体细胞的培养液中常需添加动物血清B.卵母细胞去核和体细胞注射常在显微镜下操作C.克隆猴的诞生利用了体外受精和胚胎移植技术D.克隆后代的遗传物质与供体体细胞不完全一致7、苹果醋具有较好的营养和保健功能。下列有关家庭制作苹果醋的操作中，错误的是（）A.碗中加少量米酒敞口静置，取表面菌膜B.选取成熟较度高的苹果洗净后榨汁C.向苹果汁中加入适量的蔗糖和抗生素D.醋酸发酵阶段每隔一段时间进行搅拌8、用农杆菌侵染水稻（二倍体）细胞，获得1条染色体上R基因被插入T-DNA的个体T0．T-DNA插入基因的位置如图1所示。T0自交得T1，同时用P1、P2、P3为引物检测T1个体的基因组成情况，如图2所示。（图1箭头方向为引物所在子链的延伸方向；R基因被T-DNA插入后，用P1、P2为引物无法完成PCR）。下列叙述错误的是（）

A.该实验中所用的P1、P2、P3三种引物均为单链DNAB.R基因被T-DNA插入后可能会导致基因无法表达相应蛋白C.用P1、P2引物进行PCR得到产物的个体均为R基因纯合子D.W、H、M个体的比例不为1：2：1，是因为调查的样本数量较小评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)9、下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（）A.在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进排卵B.从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养获能处理后才能用于受精C.受精过程中，卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，阻止多精入卵D.设计试管婴儿技术，有利于生育健康的下一代，不会造成社会危害10、科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的受精卵中，培育出山羊乳腺生物反应器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有关叙述错误的是（）A.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入山羊的受精卵B.在该转基因羊中，人凝血因子存在于乳腺细胞，而不存在于其他细胞C.人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNAD.科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因重组在一起，从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达11、近年来；全人源化单克隆抗体技术发展迅速，利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体的制备流程如图所示，下列说法正确的是（）

A.该技术能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应B.过程①②采用核移植技术，体现了动物细胞核的全能性C.过程⑧要经过选择培养基筛选、克隆化培养和抗体检测等过程D.体外培养B细胞也可以大量获得针对该抗原的单克隆抗体12、下列关于土壤中纤维素分解菌的分离与计数，叙述正确的是（）A.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌B.培养基中应含大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养C.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基13、下列关于基因工程中几种工具的叙述，正确的是（）A.限制酶可水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键B.DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接起来C.DNA聚合酶能够从核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因14、细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到如图结果。下列分析正确的是（）

A.实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行灭菌处理B.对上、下层菌计数时应采用稀释涂布平板法而不能用显微镜直接计数C.由甲、乙、丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性D.野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势15、为保障公共健康；需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌B.完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在25℃下培养观察C.为减少实验误差，应按照上述实验步骤多次取样重复进行检测D.可用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量16、已知苏云金芽孢杆菌中的毒蛋白基因B和豇豆中的胰蛋白酶抑制剂基因D均可导致棉铃虫死亡，棉花的短果枝由基因A控制，基因A所在的染色体有片段缺失，含片段缺失染色体的雄配子致死。科研人员将抗虫基因B和D导入棉花的同一条染色体上获得了基因型为AaBD的多个短果枝抗虫棉植株，让其自交得到F1（不考虑减数分裂时的染色体互换）。下列说法正确的是（）A.若抗虫基因与控制果枝的基因位于两对同源染色体上，则基因型为AaBD的短果枝抗虫棉植株产生的配子基因型为AAaaDB.若基因D与a位于同一条染色体上，则F1中短果枝抗虫:短果枝不抗虫:长果枝抗虫＝2:1:1C.若F1中短果枝抗虫:长果枝不抗虫＝1:1，则基因型为AaBD的短果枝抗虫棉植株产生雌配子的基因型为ABD和aD.若F1中短果枝抗虫:短果枝不抗虫:长果枝抗虫:长果枝不抗虫＝3:1:3:1，则果枝基因和抗虫基因可能位于两对同源染色体上评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)17、在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？____________________________18、酵母菌是______________微生物。酵母菌进行有氧呼吸的反应式如下：______________________；酵母菌进行无氧呼吸的反应式如下：_________________。19、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。20、去除DNA中的杂质，可以直接在DNA粗提取液中加入___________，反应10—15分钟，嫩肉粉中的________________能够分解_______________。21、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。22、生物数据库的知识与正在迅猛发展的生物信息学有关。什么是生物信息学________？23、第四步：_____评卷人得分四、判断题(共4题，共28分)24、通过体细胞核移植技术已经获得了多种克隆动物，该技术的成功率已经很高。（选择性必修3P54）()A.正确B.错误25、利用基因工程技术建立移植器官工厂是目前基因工程取得实际应用成果非常多的领域。（选择性必修3P90）()A.正确B.错误26、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。（选择性必修3P108）()A.正确B.错误27、我国对转基因技术的方针是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。（选择性必修3P104）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共20分)28、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物；该菌具耐高盐的特性。哥伦比亚血平板含无菌脱纤维羊血，金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。如图为检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答：

（1）从功能上看7．5％NaCl（高盐）肉汤培养基属于________培养基，用该培养基对金黄色葡萄球菌进行培养的主要目的是提高___________。

（2）从培养过程分析，振荡培养可以____________________________；更有利于微生物的生长。

（3）在配制哥伦比亚血平板时，添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌________（填“之前”或“之后”），原因是________________________。

（4）图中血平板上的接种方法是________________。经规范操作并多次重复，血平板上均出现__________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。但牛奶供应商仍认为此菌并非牛奶所携带，因此需要对本次操作进行完善，具体方案是________________。29、嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶。为使其在工业生产中更好地应用；开展了以下实验。如图为质粒限制酶酶切图谱，如表为几种限制酶的识别序列及酶切位点。请回答下列问题：

(1)通常情况下，获得的目的基因需要进行扩增，最简便的方法是_________技术。

(2)分析上图，可选择_______和_______两种不同的限制酶切割质粒，以防止质粒自身环化。质粒被切割后，可用_______将其与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是_______。

(3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为_______。

(4)蛋白质工程是二代基因工程，它的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→_______→_______→找到相对应的脱氧核苷酸序列。评卷人得分六、综合题(共4题，共24分)30、某生物兴趣小组设计如图装置进行果酒和果醋发酵；回答下列问题：

（1）果酒的制作离不开酵母菌。酒精发酵时，酒精产生的场所是酵母菌的_____。若用平板划线法和稀释涂布平板法分别纯化培养酵母菌时，则这两种接种方法操作过程中的共同点是_____（答出两点）。

（2）制作果酒时，发酵瓶中需预留1/3空间的主要目的是_____；每隔段时间要打开气体出口的主要目的是_____。

（3）利用获得的果酒生产果醋时，气体入口应持续通无菌空气的原因是_____。

（4）果醋酿制成功后，某同学用稀释涂布平板法测定果醋中某菌种的数量时，在同一稀释倍数下涂布了3个平板，统计的菌落数分别是35、167和176．其他同学建议不宜将这三个数据求平均值来计算该菌种数量，理由是_____。31、M蛋白在人体神经发育过程中起重要作用；M基因发生突变或表达异常可导致神经发育紊乱性疾病，如Rett综合征和MDS等。

(1)M蛋白可识别并结合甲基化DNA，进而调控靶基因的_____。

(2)对一位Rett综合征患者进行检测发现；其M基因发生了一个碱基对的替换，细胞内只有截短的M蛋白。

①一个碱基对的替换导致M基因的mRNA_____；翻译后合成了截短的M蛋白。

②研究者提出，可通过改造tRNA使患者细胞能够合成正常长度的M蛋白。请简述利用该技术治疗此类Rett综合征的基本原理。_____

(3)图1为一个MDS患者的家系图。采集全部家系成员外周血进行检测；核型分析未发现染色体数目异常，测序发现其M基因均为野生型，M基因表达的检测结果如图2，M基因拷贝数如下表。

检测对象M基因拷贝数Ⅰ11Ⅰ23Ⅱ13Ⅱ22正常男性1正常女性2

①根据以上信息推测Ⅱ2患病的原因。_____

②女性体细胞中有一条X染色体是失活的，失活X染色体上绝大多数基因被沉默。用限制酶HpaⅡ剪切Ⅰ2基因组DNA；然后进行PCR扩增及电泳，结果如图3。

图3中引物组合应为_____。

③Ⅰ2的M基因拷贝数高于正常女性，但表型正常，请结合以上研究提出合理解释。_____32、金黄色葡萄球菌肠毒素（SEs）是一类可溶性小分子蛋白质；是引起细菌性食物中毒及肠胃炎的主要因素之一。回答下列问题：

(1)为了用基因工程制备SEs纯品，科研人员首先需要___________；若采用___________技术进行这一阶段的操作，前提条件是要有一段_________________________________；以便合成引物。

(2)科研人员利用如图所示的质粒进行基因工程操作的核心步骤，即___________，已知在新霉素抗性基因内部存在HindIII识别序列，质粒的其他部位和目的基因内部均无XbaI、SacI、HindIII三种限制酶的识别位点，假设SEs基因为680bp，在进行操作时，若选择SacI对目的基因和质粒进行酶切，缺点是___________；若选择XbaI、SacI对目的基因和质粒进行酶切，缺点是_________________，因此最好选用_______________对目的基因和质粒进行酶切。操作成功后的结构（M）长___________bp。

(3)若以大肠杆菌为受体细胞，导入M前需在大肠杆菌的培养液中加入适量的___________。33、许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因；其编码的产物β—半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从受体细胞中筛选出导入重组质粒的细胞，过程如图所示。请据图回答：

(1)基因工程中，基因表达载体的组成包括复制原点、启动子、终止子、_________、_________。

(2)限制酶EcoRI的识别序列和切割位点是Sma_I的识别序列和切割位点是图中目的的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是_________，连接过程中需要的基本工具是_________。

(3)转化过程中，大肠杆菌应先用Ca2+处理，使其处于能吸收周围_________的状态。

(4)菌落颜色为白色的是_________，原因是_________。

(5)检测菌落③中的目的基因是否表达，可采用的方法是_________。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、B【分析】【分析】

1；动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

2；细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上；称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

【详解】

A；细胞会贴壁生长；培养贴附性细胞时要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、易于贴附，A正确；

B、需将培养细胞的松盖培养瓶置于95%空气和5%O2的混合气体培养箱中；B错误；

C；随着细胞传代次数的增多；绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，与正常细胞相比，其遗传物质已发生突变，C正确；

D；科学家培养正常或各种病变的细胞；用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据，D正确。

故选B。

【点睛】2、B【分析】【详解】

试题分析：（1）植物组织培养技术的原理是：植物细胞具有全能性；即①；

（2）植物组织培养过程：离体植物器官、组织或细胞愈伤组织根；芽→植物体；即②⑧⑥⑦③⑨；

（3）决定植物脱分化和再分化的关键因素是：植物激素的种类和比例；特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”，因此诱导的激素为生长素和细胞分裂素，即④。

考点：植物培养的条件及过程3、D【分析】【分析】

动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。利用体细胞克隆技术可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；可用于保护濒危物种，有选择地繁殖某一性别的家畜，克隆技术属于无性繁殖，克隆动物的基因型与供核动物相同，不能改变动物的基因型。

【详解】

A；克隆可以有选择地繁殖某一性别的家畜；A不符题意；

B；克隆技术可以促进优良畜群繁育；B不符题意；

C；克隆动物可应用于濒危物种的保护；C不符题意；

D；克隆动物的基因型与核供体相同；故不能改变动物的细胞核基因型，D正确。

故选D。4、C【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。动物细胞培养的原理是细胞增殖。

【详解】

A；用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组织；因为这些细胞生命力旺盛，细胞分裂能力强，A正确；

B；将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞；B正确；

C；植物组织培养基中需要有机营养和无机营养；动物细胞培养液中要加入各种有机营养和无机营养成分；此外还需加入动物血清等天然成分，C错误；

D；动物细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合、核移植等；其中动物细胞培养是基础，D正确。

故选C。5、A【分析】【分析】

动物细胞工程常用的技术手段有很多；其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。

【详解】

动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养；动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等；其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础，A正确，BCD错误。

故选A。6、C【分析】【分析】

核移植的概念为动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；培养供体体细胞的培养液中常需添加动物血清以补充其发育所需的物质；A正确；

B；卵母细胞去核和体细胞注射常在显微镜下操作；B正确；

C；克隆猴培育过程中需要运用细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术；是一种无性生殖方式，没有完成体外受精，C错误；

D；克隆出的后代与供体的遗传物质和表现型不完全一致；因为供体提供了核基因和部分质基因，细胞质基因还来自受体卵母细胞，同时表现型除了受基因控制外，还受外界环境因素的影响，D正确。

故选C。7、C【分析】【分析】

参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛再将乙醛变为醋酸。

【详解】

A；碗中加少量米酒敞口静置；为醋酸菌营造有氧环境，使其进行醋酸发酵，此后可取表面菌膜作为菌种，A正确；

B；苹果醋制作时原料应选用新鲜、成熟度好的苹果；B正确；

C；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；若加入抗生素会杀死发酵菌，C错误；

D；醋酸杆菌为好氧型菌；进行有氧呼吸，故醋酸发酵阶段每隔一段时间进行搅拌以营造有氧环境，D正确。

故选C。8、C【分析】【分析】

用农杆菌侵染水稻（二倍体）细胞；获得1条染色体上R基因被插入T-DNA的个体T0，T0为杂合子，其自交后代理论上为1：2：1。

【详解】

A；引物一般为单链DNA分子；A正确；

B；R基因被T-DNA插入后；R基因被破坏，所以无法表达相应蛋白，B正确；

C；R基因被T-DNA插入后；用P1、P2为引物无法完成PCR，用P1、P2引物进行PCR得到产物的个体不可能是R基因纯合子，C错误；

D；T0为杂合子；自交后代理论上为1：2：1，图中W、H、M个体的比例不为1：2：1，可能是因为调查的样本数量较小，误差较大所致，D正确。

故选C。二、多选题(共8题，共16分)9、A:C【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；在采集卵母细胞之前；需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进超数排卵，A正确；

B；从卵巢中吸取的卵母细胞；必须经体外培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；

C；受精过程中；卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，这是防止多精入卵的两道屏障，C正确；

D；以治疗为目的的设计试管婴儿技术；是救治患者最好、最快捷的办法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在伦理问题，D错误。

故选AC。

【点睛】10、B:C:D【分析】【分析】

转基因动物生产药物：

(1)基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子(原理：基因的选择性表达)。

(2)成果：乳腺生物反应器。

(3)过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物。(只有在产下雌性动物个体中，转入的基因才能表达)。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；因此可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵，A正确；

B；在该转基因羊中；人凝血因子存在于所有细胞中，但只在乳腺细胞中表达，B错误；

C；人凝血因子基因开始转录后；RNA聚合酶以DNA分子一条链为模板合成mRNA，C错误；

D；科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达，D错误。

故选BCD。11、A:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞，最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；利用转基因鼠技术进行全人源化单克隆抗体；能降低单克隆抗体药物的免疫排斥反应，A正确；

B；过程①②利用的是转基因技术；B错误；

C；融合后的细胞需要用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞；还要经过克隆化培养、（专一性）抗体检测等，C正确；

D；B细胞在体外培养条件下不能无限增殖；体外培养B细胞不能获得大量的单克隆抗体，D错误。

故选AC。12、A:D【分析】【分析】

纤维素分解菌能合成和分泌纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。用以纤维素为唯一碳源的培养基可以筛选出纤维素分解菌。

【详解】

A；木材、秸秆中富含纤维素；故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，A正确；

B；应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌；只有纤维素分解菌能够存活，B错误；

C；接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理；接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基用高压蒸汽灭菌法处理，C错误；

D；菌落只能在固体培养基中形成；菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基，D正确。

故选AD。13、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制酶可识别并在特定位置水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键；A正确；

B；DNA连接酶可以连接黏性末端相同；即末端碱基互补的两个DNA片段之间的磷酸二酯键，B正确；

C；DNA聚合酶只能从核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C错误；

D；标记基因可将含有目的基因的细胞筛选出来；故作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因，D正确。

故选ABD。14、A:B:C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；为避免杂菌的污染；实验中的滤膜、培养皿、固体培养基等均需灭菌处理，A正确；

B；对活菌进行计数的方法是稀释涂布平板法；具体方法是：先将菌体进行梯度稀释，再涂布到滤膜的表面，待菌落数稳定时进行计数，不能用显微镜直接计数的原因是显微镜直接计数不能区分死菌和活菌，B正确；

C；tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白；乙组中野生型可产生tce1蛋白作用于tcel-tcil双突变体，后者无法产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在竞争中占据优势；而在丙组中，野生型可产生tce1蛋白作用于tcel突变体，后者可以产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生长受到抑制，由此推测，tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性，C正确；

D；由甲组、乙组可知；野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体的竞争中均占优势，由甲组、丙组可知，野生型细菌X在与tcel突变体的竞争中不占优势，D错误。

故选ABC。15、B:D【分析】【分析】

细菌的数目可以通过滤膜法来测定。将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，根据黑色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌的数量。微生物接种时，为了避免其它杂菌的污染，接种过程要进行无菌操作。灼烧灭菌常适用于接种环；接种针；干热灭菌常适用于玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具；高压蒸汽灭菌常适用于无菌水、培养基。

【详解】

A；检测前需要对水样收集瓶、滤膜、培养基、镊子灭菌；防止杂菌干扰，A正确；

B；完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上；在37℃下培养观察，B错误；

C；为减少实验误差；按照上述实验步骤多次取样重复进行检测，取平均值作为实验数据，C正确；

D；大肠杆菌较小；不能用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测，D错误。

故选BD。16、C:D【分析】【分析】

由题意知；B；D位于一条染色体上，因此不遵循自由组合定律。基因A所在的染色体有片段缺失，含片段缺失染色体的雄配子致死，如果A（a）与BD分别位于两对同源染色体上，则遵循自由组合定律，基因型为AaBD产生的配子的类型及比例是ABD：a：aBD：A=1：1：1：1；如果A（a）与BD位于一对同源染色体上，则A（a）与BD也不遵循自由组合定律，基因型为AaBD的个体产生的配子的类型是ABD：a=1：1或者是aBD：A=1：1。

【详解】

A；由于抗虫基因B和D位于棉花的同一条染色体上；若抗虫基因与控制果枝的基因位于两对同源染色体上，则基因型为AaBD的短果枝抗虫棉植株产生的配子基因型为ABD、A、aBD、a，A错误；

B、若基因B、D与a位于同一条染色体上，则该植株产生的雌配子有A、aBD两种，雄配子只有aBD一种，则F1中AaBD（短果枝抗虫）：aaBD（长果枝抗虫）＝1:1；B错误；

C、若F1中短果枝抗虫（A_BD）:长果枝不抗虫（aa）＝1:1；则可推测亲本产生的雄配子为a，故亲本产生雌配子的基因型为ABD和a，C正确；

D、若F1中短果枝抗虫（A_BD）:短果枝不抗虫（A_）:长果枝抗虫（aaBD）:长果枝不抗虫（aa）＝3:1:3:1；则可推测雄配子有a和aBD两种，即A/a基因与BD基因没有连锁关系，故果枝基因和抗虫基因可能位于两对同源染色体上，D正确。

故选CD。三、填空题(共7题，共14分)17、略

【解析】避免接种环温度太高，杀死菌种18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】兼性厌氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO219、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】嫩肉粉木瓜蛋白酶蛋白质21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质22、略

【分析】【详解】

生物信息学是研究生物信息的采集、处理、存储、传播,分析和解释等各方面的学科，也是随着生命科学和计算机科学的迅猛发展，生命科学和计算机科学相结合形成的一门新学科，生物信息学主要是核酸和蛋白质序列数据的计算机处理和分析。【解析】生物信息学是研究生物信息的采集、处理、存储、传播,分析和解释等各方面的学科，也是随着生命科学和计算机科学的迅猛发展，生命科学和计算机科学相结合形成的一门新学科23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的检测和鉴定四、判断题(共4题，共28分)24、B【分析】【详解】

目前；用体细胞核移植技术得到克隆动物的成功率还很低。

故错误。25、B【分析】【详解】

基因工程技术可以使建立移植器官工厂的设想成为现实；说明并未开始实际应用。

故题中描述错误。26、A【分析】【详解】

生殖性克隆存在伦理道德等方面的问题，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。本说法正确。27、A【分析】【详解】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）；对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。我国对转基因技术的方针是一贯的、明确的，就是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。

该说法正确。五、实验题(共2题，共20分)28、略

【分析】【分析】

1；选择培养基：人为提供有利于目的菌株生长的条件；同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。

2；根据题意分析；金黄色葡萄球菌可破坏哥伦比亚血平板上菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。

【详解】

（1）金黄色葡萄球菌具耐高盐的特性；可用7.5％NaCl（高盐）肉汤培养基进行选择培养，可进一步提高金黄色葡萄球菌的浓度。

（2）振荡培养的目的是使微生物与营养物质充分接触，增加O2浓度；更有利于微生物生长。

（3）因为无菌脱纤维羊血上有红细胞；而高温会破坏红细胞。故添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌之后。

（4）根据图中最右边的图示可知；接种方法是平板划线法。已知金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。故若要初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，则血平板上要均出现周围出现透明溶血圈的菌落。本实验缺乏对照组，实验不完善，还需要设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组。

【点睛】

本题旨在考查学生理解选择培养基的原理和应用、平板划线法的使用要点，把握知识的内在联系并应用相关知识综合解决问题的能力。【解析】选择金黄色葡萄球菌的浓度使微生物与营养物质充分接触/增加O2之后防止高温破坏红细胞平板划线法周围出现透明溶血圈设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组29、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作过程主要包括四个步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导人受体细胞；目的基因的检测与鉴定。（1）目的基因的获取方法目的基因的获取方法主要有从自然界已有的物种中分离出来（如鸟枪法从基因文库或cDNA文库中获取）、人工合成（常用的方法有化学合成法和反转录法）、PCR技术扩增目的基因。（2）构建基因表达载体；需分别用限制酶切割目的基因和质粒，用限制酶切割质粒时，选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点、启动子、终止子等必须的结构。用DNA连接酶连接，构成重组质粒。（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法：将含有目的基因的表达载体提纯→从雌性动物体内取出卵（可在体外受精，也可在体内受精）→采用显微注射仪进行显微注射→将注射了目的基因的受精卵经胚胎早期培养一段时间后，移植到雌性动物的输卵管或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。

2；蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

【详解】

（1）获取目的基因的方法主要有三种；最简便的是PCR技术。

（2）用限制酶切割质粒时；选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点；启动子、终止子等必须的结构，由图可知可选用NdeⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割质粒。用DNA连接酶将切割后的质粒与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是显微注射法。

（3）上述建构好的表达载体含有能够表达β-萄糖苷酶(BglB)的基因；转基因大肠杆菌能够分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能够降解纤维素。

（4）蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。【解析】(1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA连接酶显微注射法。

(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列六、综合题(共4题，共24分)30、略

【分析】【分析】

1；果酒的制作原理是让酵母菌在有氧条件下大量繁殖；然后在无氧条件下产生酒精。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。

果醋制作的原理：

当氧气；糖源都充足时；醋酸菌将葡萄汁中的糖类分解成醋酸。

当缺少糖源时；醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

（1）酵母菌通过无氧呼吸产生酒精；无氧呼吸进行的场所是细胞质基质。用平板划线法和稀释涂布平板法分别纯化培养微生物时，二者都需要在固体培养基上操作；都需要在酒精灯火焰附近接种。

（2）在制作果酒过程中；首先让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，发酵瓶中留有1/3空间不加发酵液；瓶内空气的主要作用是为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气。果酒发酵过程中，酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，每隔一段时间打开气体出口可将二氧化碳排出，以防止发酵瓶内气压过高引起爆裂。

（3）果醋发酵时需要醋酸菌；醋酸菌为好氧型细菌，故制作果醋时，气体入口应持续通入无菌空气。

（4）该同学涂布了3个平板；统计的菌落数分别是35；167和176，其中1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差，若计算平均值会导致结果可信度低。

【点睛】

本题考查果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒、果醋的微生物及其代谢类型，掌握果酒、果醋制作的原理及条件，能结合所学的知识准确判断各选项。【解析】细胞质基质采用固体培养基、在酒精灯火焰旁接种等（合理即可）防止发酵旺盛时汁液的溢出排出发酵过程中产生的二氧化碳果醋发酵时需要醋酸菌，醋酸菌为好氧型细菌此同学的结果中，一个平板的计数结果与另两个相差悬殊，结果的重复性差，若计算平均值会导致结果可信度低31、略

【分析】【分析】

引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。用于PCR的引物长度通常为20〜30个核苷酸。引物使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

【详解】

（1）基因表达的第一个阶段是转录；蛋白质与DNA结合可调控转录过程。

（2）①M蛋白截短；说明氨基酸数目减少，终止密码子提前，即一个碱基对的替换导致M基因的mRNA提前出现终止密码子。

②tRNA的作用是携带氨基酸；终止密码子一般不对应相应的氨基酸，定点突变tRNA基因，使tRNA能识别终止密码子，该tRNA即可在提前终止密码子处将氨基酸添加到肽链中，从而获得正常长度的肽链。

（3）①核型分析未发现染色体数目异常，说明发生的是基因变化，而测序发现其M基因均为野生型，说明基因未突变，而是基因数目的变化。从图示信息分析，I1含有一个M基因，是正常男性，M基因mRNA相对含量较低，Ⅱ2是男性患者，Ⅱ2含有两个M基因，M基因mRNA相对含量较高而得病，其母亲I2含有3个M基因，但表现正常，可知该基因遗传符合X染色体隐性遗传特点，说明其从母亲处获得的X染色体含2个M基因，M基因重复使M蛋白含量高于正常值，导致靶基因表达异常，而Ⅱ1个体含有3个M基因一个来自父亲；两个来自母亲。

②引物使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，该过程需要得到含有酶切位点和CAG重复序列的基因产物，故选引物1和引物3；根据PCR结果分析AR1酶切和非酶切结果相同，说明该染色体失活而未被酶切，说明I2两条X染色体中，AR1所在的X染色体完全失