2024年浙教新版选修1生物下册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2024年浙教新版选修1生物下册月考试卷320考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、下列对果胶酶的作用的叙述中，错误的是（）A.果胶酶是一种催化剂，可以改变反应速度B.果胶酶在蛋白酶作用下可能会被降解C.果胶酶能将乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸D.果胶酶能瓦解植物的细胞壁及胞间层2、为探究果胶酶量对苹果出汁率的影响；某同学分别称取纯果胶酶lmg；2mg、3mg9mg，将其与等量苹果泥混匀。37℃恒温水浴保温20min，8mg组测出的果汁量如图箭头所示，则4mg果胶酶组最可能的结果是（）

A.①B.②C.③D.④3、下列关于利用海藻酸钠制备固定化酵母细胞的说法错误的是（）A.包埋法常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素等B.包埋的酵母细胞偏多导致形成的凝胶珠颜色偏浅C.若CaCl2溶液浓度过高，会造成凝胶珠太硬不利于发酵D.固定化酵母细胞进行发酵需控制葡萄糖溶液的浓度4、下列有关固定化酶和固定化细胞的说法正确的是（）A.固定化酶的优势在于能催化系列生化反应B.固定化细胞技术一次只能固定一种酶C.固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性迅速下降D.固定化细胞使用的都是活细胞，在应用时要注意为其提供适宜的生存条件5、野生型大肠杆菌菌株能在未添加某种维生素的基本培养基上生长；氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在添加了多种维生素的完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A；B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是（）

A.图中①②④为基本培养基，③为完全培养基B.紫外线的目的是提高突变率，增加突变株的数量C.B的正确操作是用涂布器把菌液均匀地涂布在②表面D.经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养6、新鲜菠萝直接食用会“蜇嘴”，而食堂里的菠萝咕噜肉吃起来不会，这与菠萝蛋白酶的活性有关。某生物兴趣小组通过实验探究温度对菠萝蛋白酶活性的影响，结果如图所示。下列说法错误的是（）

A.菠萝蛋白酶的活性随温度升高先增大后减小B.菠萝蛋白酶在20℃和60℃时空间结构相同C.沸水浸泡过的菠萝吃起来不会“蜇嘴”D.选择在40℃左右研究pH对菠萝蛋白酶活性的影响7、利用卷心菜发酵制作泡菜的过程中；乳酸菌；酵母菌细胞数量和pH的变化如图所示。下列叙述不正确的是（）

A.酵母菌和乳酸菌均有由核膜包被的细胞核B.发酵初期乳酸菌建立了明显的菌种优势C.前6天pH下降主要由乳酸菌代谢引起D.发酵中期酵母菌通过无氧呼吸为细胞增殖提供能量评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)8、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，对该实验有关叙述错误的是（）A.涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233B.涂布了一个平板，统计的菌落数是230C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度D.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数估计值9、一些真菌中的漆酶可以分解油漆中的许多有机污染物，漆酶可以氧化愈创木酚，产生红棕色物质，因此根据真菌生长过程中培养基的颜色变化，可以挑选出具有潜在漆酶活性的土壤真菌。下列叙述正确的是（）A.含有愈创木酚的平板培养基属于选择培养基B.对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法C.倒置平板培养可防止培养基被滴落的冷凝水污染D.制备培养基的步骤依次是溶化、灭菌、定容、倒平板10、我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”意思是瓮中酒液凉了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用尽了。下列叙述正确的是（）A.用酒曲酿酒过程中，为加快微生物代谢需不断通入O2B.酒液温度的变化与酒曲中微生物呼吸作用释放热量有关C.起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放形成的D.“曲势尽”可能是瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致11、某同学设计了图示的发酵装置；下列有关叙述正确的是()

A.该装置可阻止空气进入，用于果酒发酵B.该装置便于果酒发酵中产生的气体排出C.去除弯管中的水，该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸D.去除弯管中的水后，该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相似12、为了给工厂化繁殖脱毒甘薯苗提供技术支持；科研人员利用植物组织培养技术研究了甘薯茎尖大小对诱导分化苗和脱毒苗的影响，结果如下表所示，相关叙述正确的是（）

。处理外植体数/个成苗数/苗脱毒苗数/苗小于0.3mm20110.3-0.5mm20107大于0.6mm20134A.在不同的培养阶段，需调整培养基中植物激素的种类和比例B.培育脱毒苗依据的原理有细胞的全能性C.实验结果表明茎尖越大，成苗率和脱毒效率越高D.0.3～0.5mm大小的茎尖最有利于获得抗病毒苗评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)13、棉花是自然界中纤维素含量_______的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。许多商品纤维素都是由天然纤维素制得的，如水溶性的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、不溶于水的微晶纤维素等。14、蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成；人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中氧气和二氧化碳的运输。

（1）分离血红蛋白的方法是_____，其原理是根据_____来分离蛋白质。

（2）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、_____和纯度鉴定。

（3）血红蛋白因含有_____而呈现红色，采集血液时需要预先加入柠檬酸钠，目的是_____。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂，如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色；在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的_____，目的是使红细胞破裂释放血红蛋白；在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L的_____中。

（4）本实验用的是交联葡聚糖凝胶（SephadexG-75），其中“G”表示_____，“75”表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸收水分7.5g。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡的原因是_____，给色谱柱添加样品的具体操作是_____。

（5）判断纯化的蛋白质是否达到要求，选用的检测方法是_____。15、为了加速膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，这样做的目的是___________16、萃取法是将粉碎、__________的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油_____________在有机溶剂中的方法。芳香油溶解于有机溶剂后，只需蒸发出有机溶剂，就可以获得纯净的植物芳香油了。17、防止_____________入侵，获得_________________的培养物，是研究和应用微生物的前提。在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的___________________条件，另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。18、分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合液离心后可观察到试管中溶液分为4层（从上往下）：

第1层：________的甲苯层。

第2层：脂溶性物质的沉淀层——______薄层固体。

第3层：________的水溶液——红色透明液体。

第4层：其他杂质的________沉淀物。

将液体用______过滤，除去________________，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的________液体。评卷人得分四、实验题(共4题，共20分)19、农作物秸秆中的纤维素阻碍了堆肥技术在处理有机固体废物领域的发展。为提高堆肥品质；科研人员探究了温度对纤维素分解菌分解能力的影响，实验步骤如下：①纤维素分解菌的筛选；分离及纯化→②纤维素分解菌菌株数量测定→③纤维素酶活力测定和降解滤纸能力的检测。请回答下列问题：

（1）步骤①中，若用稀释涂布平板法接种，则必须将菌液进行一系列的_____。已知纤维素酶的最适温度在45～65℃之间，欲从45～65℃的恒温箱中筛选出能高效分解纤维素的细菌，请写出测定纤维素酶的最适温度的实验思路_________。

（2）步骤②中；在条件适宜的环境下培养细菌10d后，用_________（填一种实验用具）在显微镜下可计算细菌数量。此方法中的“条件”至少包括：适宜温度；以_________作为唯一碳源的_____（填“固态”“半固态”或“液态”）培养基等。可用台盼蓝染液鉴定视野中细菌是否死亡，原理是_________。

（3）步骤③中，酶活力可用培养基上菌落直径及_____来表示。20、草莓是北京春末夏初的时令水果；草莓汁酸甜适口，深受大众喜爱。加工草莓汁时，草莓中的果胶易导致果汁浑浊，影响品质。为探究不同条件对草莓汁澄清度的影响，研究人员进行了实验，结果如下表所示。

。组别。

果胶酶用量。

(mL·kg-1)

pH

温度(℃)

草莓汁透光率。

(%)

1

0.025

2.5

35

24.55

2

0.035

4.5

35

96.47

3

0.035

2.5

45

22.70

4

0.045

3.5

35

96.47

5

0.045

2.5

55

13.12

请回答问题：

（1）草莓细胞中，果胶是植物细胞的重要组成成分，果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的_____，果胶分解成可溶性的______；使草莓汁澄清。

（2）根据研究结果，生产过程中可选择第_____组作为条件组合，原因是_________。

（3）果胶酶作为食品添加剂添加到草莓汁中，饮用后是否会影响人体健康，理由是_____。21、鸭梨醋饮属绿色健康饮品；既保存了鸭梨中的多种氨基酸；维生素、矿物质、有机酸等营养成分，又兼具果醋醒酒护肝、助消化、降低血脂、软化血管等养生保健功能深受广大消费者青睐。如图为鸭梨醋饮的制作流程图，请根据图回答下列问题：

（1）若得到的鸭梨汁非常浑浊，通常解决的方法是_____________。

（2）为了提高过程①所用微生物的利用率，最好用_____________法固定，而固定酶一般不采用此法，理由是_____________。

（3）过程②所用的微生物是_____________。

（4）为获得高纯度的果酒；需要对过程①所用的微生物进行分离和纯化，其过程为：

第一步：配制培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的_____________、碳源、生长因子、水和无机盐等基本营养成分，原料称重溶解后，需进行，然后进行_____________；然后进行灭菌操作。

第二步：接种。微生物纯化常用的接种方法是_____________。

第三步：培养。温度控制在_____________℃。

第四步：挑选符合要求的菌落。22、我国科学家屠呦呦因发现治疗疟疾的新药物青蒿素而获得2015年诺贝尔医学奖。青蒿素是一种无色针状晶体；易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，主要从黄花蒿中提取。近年来又发现青蒿素具有较强的抗肿瘤作用，某科研小组按如下步骤进行了相关实验：

①从黄花蒿中提取青蒿素；②将等量癌细胞分别接种到4组培养瓶中；适宜条件下培养24h后除去上清液；③向4组培养瓶中分别加入等量含2；4、8、16μmol/L青蒿素的培养液，适宜条件下继续培养；④72h后统计并计算各组的细胞增殖抑制率。回答下列问题：

(1)提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法，原因是___________；根据青蒿素____________的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，萃取前要将黄花蒿茎叶进行________；以提高萃取效率。

(2)萃取青蒿素的过程应采用________加热；加热时常在加热瓶口安装回流冷凝装置，目的是______________。萃取液在浓缩之前需进行________；以除去萃取液中的不溶物。

(3)科研小组进行上述②～④步骤实验的目的是__________。步骤③中需要设置对照组，对照组的处理方法为______________。评卷人得分五、非选择题(共3题，共30分)23、（生物技术实践）

尿素是一种重要的农业氮肥；但不能被农作物直接吸收，土壤中有一种好氧型细菌能把尿素分解成氨。欲从土壤中筛选出能分解尿素的细菌并予以纯化计数，采用了如图所示的基本操作流程。

请回答下列问题：

（1）有些细菌能分解尿素；有些细菌则不能，原因是前者能产生______________。

（2）能在该选择培养基上生长的细菌______________（填“一定”或“不一定”）都能分解尿素；若在平板中加入酚红，目的菌落出现的变化是_______________。

（3）筛选得到的菌落可以采用平板划线法进一步纯化,每次划线后接种环必须____________；才能再次用于划线。纯化获得的菌种可以保存在试管中，塞上棉塞或盖上封口膜，不能密封，原因是_____________________。

（4）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有和其作用有__________________。（答出两点）24、酸菜是经乳酸菌发酵而成的一种发酵食品；制作过程中极易积累亚硝酸盐。一些乳酸菌能合成亚硝酸盐还原酶，能够显著降低亚硝酸盐含量。请回答相关问题。

（1）为获得高产亚硝酸盐还原酶的乳酸菌；某研究组以东北传统自然发酵酸菜为材料进行分离。

①在进行乳酸菌分离纯化时；科研人员将酸菜发酵液稀释后涂布在含溴甲酚绿（遇酸变色）的__________（“选择”或“鉴别”）培养基上，___________（“需氧”或“厌氧”）培养一段时间后，挑取周围变色的_________临时保存。

②在进行高产亚硝酸盐还原酶菌株筛选时；将临时保存的各菌种分别接种到含______的液体培养基中培养一段时间，离心收集上清液，在________酸化条件下，依次加入对氨基苯磺酸；N-1-萘基乙二胺盐酸盐进行反应，筛选反应显色较_____的菌株。

（2）利用筛选得到的菌种进行酸菜腌制；测定亚硝酸盐含量（单位：mg/kg），结果如下表所示：

据表分析，亚硝酸盐含量最高时的腌制条件是________________________。为避免细菌大量繁殖，产生大量的亚硝酸盐，除控制好表中涉及的腌制条件外，还需控制好腌制的____________。25、利用不同微生物的发酵作用来制作果酒；果醋、腐乳和酸奶等食品的历史悠久；遍布民间，一般称作传统发酵技术。根据传统发酵技术的相关知识，回答以下问题。

（1）在泡菜腌制的过程中；要注意控制腌制的时间；_______和_________；最后要向坛盖边沿的水槽中注满水，这一操作的目的是保证坛内乳酸菌发酵所需的__________________。泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜是由于__________的繁殖形成的。用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是________。

（2）在制作腐乳过程中；所需的微生物来源于____________；而现代的腐乳生产是在_____________条件下，将优良的菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染。腐乳在酿造后期发酵中添加适量酒液的目的是________________(填序号）。

①防腐②与有机酸结合形成脂③利于后期发酵④满足饮酒需要。

（3）在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由__________大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源时将乙醇变为乙醛，然后变为醋酸。评卷人得分六、综合题(共4题，共8分)26、人参是一种名贵中药材；其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：

请回答：

（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行____________________。接种前，要对人参根进行_____________。

（2）用于离体培养的根切块，叫做____________。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于______________________污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于_________________污染。

（3）用少量________酶处理愈伤组织；获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。

（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用___________方法，操作时应采用_______________加热。27、纸片扩散法（K-B法）是药敏试验的一种常用方法；其原理是将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，培养一段时间后在纸片周围会形成透明的抑菌圈。请回答下列问题：

(1)药敏试验的目的是_______，因变量是________。

(2)K-B法接种测试菌的方法是______，获得纯培养物的关键是_____。接种后的平板在培养时倒置的原因是______。

(3)某研究小组将含有相同浓度抗生素Ⅰ~Ⅳ的四个纸片分别贴放在生长有测试菌的琼脂平板上，在合适的温度条件下孵育16h，结果如图所示。

MIC是药敏试验中评价抗生素药效的常用指标，其定义为某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。对该测试菌而言，抗生素Ⅰ的MIC______（选填“大于”“小于”或“等于”）抗生素Ⅲ的MIC；在相关实验操作均严谨规范的情况下，在含有抗生素Ⅳ的纸片周围出现了较大的抑菌圈，但抑菌圈中存在有个别菌落。试对上述现象的成因做出分析：_____。28、随着生产生活和科技的发展；广泛应用很多微生物知识，请分析回答下列问题：

（1）利用蓝莓酿制的蓝莓酒，被称为“液体黄金”。如果酒的生产流程，压榨前需除去果柄，此操作要在冲洗_____________（填“之前”或“之后”）进行。若从混杂的维生物中分离酿制蓝莓酒的菌种应使用_________培养基。喝剩的蓝莓酒开盖放置一段时间后会变酸，原因是____________________。

（2）测培养大肠杆菌数时，如图接种方法为___________法示意图，在图中______（填图中序号）区域更易获得单菌落，判断依据是_______________。

（3）____________法常用于统计样品中的活菌数，先将菌液进行一系列的______，然后取少量菌液涂布在培养基表面，这种方法得到的菌落数比活菌的实际数目低，原因是______。在稀释105倍的培养基内，得到下表统计结果中准确可信的是________组。对该菌种数目统计时，常用的方法是活菌计数法和_________计数法。

。组别平板数统计的菌落数取平均值甲组两个250和220235乙组三个160、240和110170丙组四个280、200、340和160245丁组五个120、60、270、220和130160

（4）相关实验结束后，使用过的微生物培养基应进行_____________后才能倒掉。29、红酸汤是种很有特色的火锅底料；制作流程如图所示。请分析回答以下问题：

（1）密封发酵时；常在坛中加人成品红酸汤，其目的是__________________________。

（2）装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是____________________。红酸汤制作过程的初期会有气泡冒出；但气泡的产生会逐渐停止，试分析原因：__________________________。

（3）亚硝酸盐含量会影响酸汤的品质，在发酵过程中，可以定期采用_____________法检测亚硝酸盐含量。是在盐酸酸化的条件下，与其他物质反应生成_____________色染液。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、C【分析】果胶酶是一种催化剂，酶能降低化学反应的活化能，因此果胶酶可以改变反应速度，A项正确；果胶酶的本质为蛋白质，在蛋白酶作用下可能会被降解，B项正确；果胶是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物，果胶酶可以将果胶分解成半乳糖醛酸，C项错误；果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，因此果胶酶可以将其瓦解，D项正确。2、C【分析】【分析】

1；果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一；它是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物，不溶于水。在果汁的加工中，果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊。

2；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易，果胶被果胶酶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。

3；果胶酶的来源：植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶。由霉菌发酵生产的果胶酶是食品加工业中使用最大的酶制剂之一；被广泛地应用于果汁加工业。

4；酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶活性的高低可以用在一定条件下；酶所催化的某一化学反应的反应速率来表示。

【详解】

酶可以催化化学反应的进行；酶的含量可以影响化学反应的速率，但不会影响最终结果，所以4mg果胶酶组的反应速率慢，完全催化反应所需时间较长，但最终生成果汁的量与8mg组测出的果汁量相同，4mg果胶酶组最可能的结果为③曲线，C正确，ABD错误。

故选C。

【点睛】3、B【分析】【分析】

固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。包括包埋法；化学结合法和物理吸附法。固定化酶优点是使酶既能与反应物接触；又能与产物分离，还可以被反复利用。固定化细胞优点是成本更低，操作更容易，可以催化一系列的化学反应。

【详解】

A；包埋法常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等；A正确；

B；海藻酸钠浓度过低导致形成的凝胶珠颜色过浅；所包埋的酵母细胞数目较少，B错误；

C、CaCl2溶液使酵母细胞形成稳定结构，固定在凝胶珠中，若CaCl2溶液浓度过高；会造成凝胶珠太硬不利于发酵，C正确；

D；葡萄糖溶液浓度不能过高；否则可能造成酵母菌失水死亡，故固定化酵母细胞进行发酵需控制葡萄糖溶液的浓度，D正确。

故选B。

【点睛】4、D【分析】【分析】

固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学的方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术.包括包埋法；化学结合法和物理吸附法。

固定化酶优点是使酶既能与反应物接触；又能与产物分离，还可以被反复利用。

固定化细胞优点是成本更低；操作更容易，可以催化一系列的化学反应。

【详解】

A；某种固定化细胞的优势在于能催化系列生化反应；A错误；

B；固定化细胞技术一次可以固定一系列酶；固定化酶技术一次只能固定一种酶，B错误；

C；固定化酶和固定化细胞都能反复使用；且酶的活性不变，C错误；

D；固定化细胞时要考虑保证细胞有活性；例如需要给细胞提供适宜的营养等生存条件，D正确。

故选D。5、A【分析】【分析】

分析题图可知：图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌；然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基；完全培养基；在基本培养基中，某氨基酸营养缺陷型突变株不能生长，而在完全培养基中能够生长，据此可以选择出氨基酸营养缺陷型突变株。

【详解】

A；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长；氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，根据题干信息和图形分析，图中①②④为完全培养基，③为基本培养基，A错误；

B；紫外线照射的目的诱导野生大肠杆菌发生基因突变；通过紫外线照射处理可提高突变频率，从而增加突变株的数量，B正确；

C；B操作是将菌液滴加到培养基表面；再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C正确；

D；从图中可看出；D在基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养，D正确。

故选A。6、B【分析】【分析】

温度能影响酶促反应速率；在最适温度前，随着温度的升高，酶活性增强，酶促反应速率加快；到达最适温度时，酶活性最强，酶促反应速率最快；超过最适温度后，随着温度的升高，酶活性降低，酶促反应速率减慢。

【详解】

A；由图可知；温度低于40℃，菠萝蛋白酶的活性随温度升高而增大，超过40℃时，菠萝蛋白酶的活性随温度升高而减小，A正确；

B；菠萝蛋白酶在20℃时空间结构不变；在60℃时空间结构会被破坏，B错误；

C；由图可知；沸水处理后菠萝蛋白酶的活性几乎为0，所以吃起来不会“蜇嘴”，C正确；

D；研究pH对酶活性的影响时；无关变量需要相同且适宜，温度对这个实验来说是无关变量，即应在温度为40℃左右进行实验，D正确。

故选B。7、A【分析】【分析】

分析图解：在泡菜制作过程中；乳酸菌的数量呈先上升后下降的趋势；由于乳酸菌发酵过程中不断产生乳酸，故pH呈下降趋势，酵母的数量也呈先上升后下降的趋势。

【详解】

A；酵母菌属于真核细胞；具有成形的细胞核，而乳酸菌属于原核细胞，不具有成形的细胞核，A错误；

B；由曲线图分析可知；发酵初期由于pH的迅速下降，其他杂菌的生长受到了严重影响，乳酸菌的数量快速增加，使得乳酸菌建立了明显的菌种优势，B正确；

C；乳酸菌能够将葡萄糖分解为乳酸；前6天pH下降主要由乳酸菌代谢引起，C正确；

D；酵母菌属于兼性厌氧微生物；也能够进行无氧呼吸，发酵中期酵母菌通过无氧呼吸为细胞增殖提供能量，D正确。

故选A。二、多选题(共5题，共10分)8、B:D【分析】【分析】

据题文和选项的描述可知：该题考查学生对统计菌落数目的相关知识的识记和理解能力。

【详解】

用稀释涂布平板法测定同一样品中的细菌数时，为了保证结果准确，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中的细菌总数，A正确，B、D错误；设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，C正确。9、A:B:C【分析】【分析】

1；选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基；使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。

2；制备固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、定容、灭菌、倒平板。

【详解】

A；从功能上分析；含有愈创木酚的平板培养基可用于筛选具有潜在漆酶活性的土壤真菌，属于选择培养基，A正确；

B；对培养基进行灭菌时；应采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，B正确；

C；平板冷凝后皿盖上会凝结水珠；凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，C正确；

D；制备培养基的步骤是：计算、称量、溶化、定容、灭菌、倒平板；D错误。

故选ABC。

【点睛】10、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲酿酒菌种是酵母菌；代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【详解】

A、用酒曲酿酒是利用了微生物细胞呼吸的原理，进行的是酵母菌的无氧发酵，不能一直通入O2；A错误；

B；由于呼吸作用会产热；故会导致酒液温度产生变化，B正确；

C、起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放到发酵液中形成的；C正确；

D；“曲势尽”可能是随着发酵的进行瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致酵母菌大量死亡；D正确。

故选BCD。11、A:B:D【分析】【详解】

果酒制作是厌氧发酵，该装置水可阻止空气进入；果酒发酵产生的气体是CO2，该装置便于CO2的排出；该装置弯管为了排出发酵产生的气体，不能保证果醋发酵需要的O2；去除弯管中的水后；与巴斯德的鹅颈瓶作用相似，排出气体，避免杂菌污染。

【考点定位】本题考查果酒、果醋的制作，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。12、A:B【分析】【分析】

1；生长素用量比细胞分裂素用量；比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。

2；细胞的全能性是指已经分化的细胞；仍然具有发育成完整个体的潜能。

【详解】

A；不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同；因此不同培养阶段培养基中激素种类和比例应适时调整，A正确；

B；培育脱毒苗时依据的原理病毒在植物不同组织中的含量不同和细胞的全能性；B正确；

C；分析表格可知；当茎尖为0.3-0.5mm时，脱毒苗数/苗为7，当茎尖大于0.6mm时，脱毒苗数/苗为4，不能得出茎尖越大，脱毒效率越高，C错误；

D；根据表格中数据可知；0.3-0.5mm大小的茎尖，脱毒苗数/苗最多，因此有利于培养脱毒甘薯，但不是抗病毒的特性，D错误。

故选AB。三、填空题(共6题，共12分)13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】最高14、略

【分析】【分析】

血红蛋白存在于红细胞内；由四条肽链构成，两条α肽和两条β肽链，每条肽链围绕一个亚铁血红素基团，一个血红素基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。

【详解】

（1）分离血红蛋白的方法是凝胶色谱法（又叫分配色谱法）；是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质分子直接穿过凝胶颗粒间的空隙，路径短，移动速度快，优先可收集到；相对分子质量小的蛋白质分子进入凝胶珠的内部，路径长，移动速度慢，可在后收集。

（2）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理；粗分离、纯化和纯度鉴定。

（3）血红蛋白因含有亚铁血红素基团而呈现红色；采集血液时需要预先加入柠檬酸钠防止血液凝固。在血红蛋白样品处理和粗分离中需要用到很多试剂，如在红细跑的洗涤中需要用到生理盐水直至上清液不再呈现黄色；在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的甲苯，破坏细胞膜，释放血红蛋白；在透析过程中需要将透析袋放入20mmol/L磷酸缓冲液，除去无机盐和小分子蛋白质。

（4）纯度鉴定中；用的是交联葡聚糖凝胶，其中“G”表示凝胶的交联程度；膨胀程度和分离范围。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡，气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。给色谱柱添加样品的具体操作是吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端，滴加样品时，吸管管壁贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝胶面。

（5）经过凝胶色谱法获得的蛋白质；为了确定其是否达要求，可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测。

【点睛】

本题考查血红蛋白的提取和分离方法、凝胶色普的操作、异常原因分析，要求考生熟记课本相关知识，并理解运用。【解析】凝胶色谱法（又叫分配色谱法）相对分子质量的大小纯化亚铁血红素基团防止血液凝固甲苯磷酸缓冲液凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序，降低分离效果吸管吸1mL样品加到色谱柱的顶端，滴加样品时，吸管管壁贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝胶面。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不但可以节约时间，而且可以除去凝胶中可能带有的微生物，排除凝胶内的空气16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】干燥溶解17、略

【解析】①.杂菌②.纯净③.营养和环境条件18、略

【分析】【分析】

【详解】

分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合液离心后可观察到试管中溶液分为4层（从上往下）：

第1层：甲苯密度最小；故最上层为无色透明的甲苯层。

第2层：脂溶性物质的沉淀层——白色薄层固体。

第3层：血红蛋白的水溶液——红色透明液体。

第4层：其他杂质的暗红色沉淀物。

将液体用滤纸过滤；除去溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明的液体即为血红蛋白溶液。

【点睛】【解析】无色透明白色血红蛋白暗红色滤纸脂溶性沉淀层红色透明四、实验题(共4题，共20分)19、略

【分析】【分析】本题考查纤维素分解菌培养的相关知识；意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。

【详解】（1）若用稀释涂布平板法接种；则必须将菌液进行一系列的梯度稀释。要在45～65℃的恒温箱中筛选出能高效分解纤维素的细菌，需要设置一系列温度梯度，实验思路：取若干以纤维素为唯一碳源的刚果红培养基，在其上接种等量的纤维素分解菌，分别置于45～65℃的不同温度的恒温箱中培养，一段时间后，分别测定各培养基上菌落周围的透明圈大小。

（2）对于细菌的计数；可用血细胞计数板在显微镜下可计算细菌数量。对于纤维素分解菌的培养条件包括：适宜温度；以纤维素作为唯一碳源的液态培养基等。由于活细菌的细胞膜具有选择透过性，不会被台盼蓝染色，因此可用台盼蓝染液鉴定视野中细菌是否死亡。

（3）步骤③中；酶活力可用培养基上菌落直径及透明圈大小来表示。菌落越大；透明圈越大，说明纤维素分解菌的生成的纤维素酶的活性越强，对纤维素的分解和利用越快，细菌繁殖较多。

【点睛】对于微生物纯化后的扩大培养和数量变化研究，需要用液体培养基，使微生物能充分利用营养物质和空间资源。【解析】梯度稀释取若干以纤维素为唯一碳源的刚果红培养基，在其上接种等量的纤维素分解菌，分别置于45～65℃的不同温度的恒温箱中培养，一段时间后，分别测定各培养基上菌落周围的透明圈大小血细胞计数板纤维素液态活细菌的细胞膜具有选择透过性，不会被台盼蓝染色菌落周围透明圈大小20、略

【分析】【分析】

根据表格分析，该实验的自变量有果胶酶用量、pH、温度，因变量是草莓汁透光率或草莓汁澄清度；当果胶酶用量为0.035mL·kg-1、pH为4.5、温度为35℃或者果胶酶用量为0.045mL·kg-1；pH为3.5、温度为35℃时；草莓汁的澄清度最高。

【详解】

（1）果胶酶具有专一性；能够催化果胶水解为半乳糖醛酸，瓦解植物的细胞壁和胞间层，使草莓汁澄清。

（2）根据以上分析可知；第2组和第4组的草莓汁澄清度最高，但是第2组果胶酶的用量较少，可以降低生产成本，因此生产过程中可选择第2组作为条件组合。

（3）果胶是植物细胞壁的主要成分之一；可以被人体消化吸收，因此一般不会影响人体健康。

【点睛】

解答本题的关键是根据实验目的和表格分析判断实验的自变量和因变量，了解果胶酶的作用机理，并能够根据表格找出使得草莓汁澄清度最高的果胶酶用量、pH、温度组合。【解析】细胞壁和胞间层半乳糖醛酸2既可获得澄清度高的草莓汁，又可减少酶用量（降低成本）不会；果胶酶可被人体消化吸收（会，果胶酶可能会引起个别人产生不良反应）21、略

【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；在无氧时，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作的原理：当氧气；糖源都充足时，醋酸萄将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。据图分析，图示①表示果酒发酵，②表示果醋发酵。

【详解】

（1）植物细胞的细胞壁的主要成分是纤维素和果胶；所以通常用果胶酶处理果汁，提高鸭梨的出汁率并使果汁变得澄清。

（2）过程①表示果酒的制作；果酒一般利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法进行固定；而酶分子较小，容易从包理材料中漏出，一般采用物理吸附法或化学结合法。

（3）过程②表示果醋制作；利用的菌种为醋酸（杆）菌。

（4）对酵母菌进行分离和纯化的步骤：

第一步：配制培养基；该培养基必须含有微生物生长所需要的碳源；氮源、生长因子、水和无机盐等基本营养成分；原料称重溶解后，需先调节pH，然后进行灭菌操作，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。

第二步：接种；微生物常用接种方法有平板划线法；稀释涂布平板法。

第三步：培养；果酒制作利用的是酵母菌；酵母菌适宜生存的温度为18~25℃。

第四步：挑选符合要求的菌落。

【点睛】

解答本题的关键是识记和理解果酒和果醋的制作原理、流程等相关基础知识，掌握实验室中分离和纯化微生物的的方法等相关知识，在此基础上结合问题情境，从题意中提取有效信息进行相关问题的解答。【解析】用果胶酶处理包埋酶分子较小容易从包埋材料中漏出醋酸（杆）菌氮源调节pH平板划线法和稀释涂布平板法18~2522、略

【分析】【分析】

三种植物有效成分的提取方法；原理和步骤比较：

。提取物质。

提取方法。

提取原理。

步骤。

玫瑰精油。

水蒸气蒸馏法。

利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来。

水蒸气蒸馏；

分离油层；

③除水；过滤。

橘皮精油。

压榨法。

通过机械加压；压榨出果皮中的芳香油。

①石灰水浸泡；漂洗；

②压榨；过滤、静置；

③再次过滤。

胡萝卜素。

萃取法。

使提取物溶解在有机溶剂中；蒸发后得到提取物。

粉碎；干燥；

萃取；过滤；

③浓缩。

【详解】

（1）由于水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质；而青蒿素不易挥发，所以提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法。根据青蒿素有易溶于有机溶剂的特点，可采用有机溶剂萃取的方法。为了提高萃取效率，萃取前要将黄花蒿茎叶进行粉碎和干燥。

（2）萃取青蒿素的过程应采用水浴加热；以保证受青蒿素热均匀；加热时常在加热瓶口安装回流冷凝装置，目的是防止有机溶剂挥发。萃取液在浓缩之前需进行过滤，以除去萃取液中的不溶物。

（3）设置不同浓度的青蒿素溶液加入癌细胞培养液中，统计癌细胞的增殖速率，说明该实验的目的是探究不同浓度的青蒿素对细胞增殖的影响或者探究青蒿素的浓度与细胞增殖抑制率的关系。步骤③中需要设置一组空白对照组，处理方法是在另一培养皿中加入等量的不含青蒿素的培养液，适宜条件下继续培养。【解析】青蒿素不易挥发，不能随水蒸气蒸馏出来(或水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而青蒿素不易挥发)易溶于有机溶剂粉碎和干燥水浴防止有机溶剂挥发过滤探究青蒿素的浓度与细胞增殖抑制率的关系在另一培养瓶中加入等量的不含青蒿素的培养液，适宜条件下继续培养五、非选择题(共3题，共30分)23、略

【分析】【分析】

1；欲从土壤中筛选出能分解尿素（产生脲酶）的细菌；所用培养基必须以尿素为唯一氮源的选择培养基；尿素分解菌在该选择培养基上能产生脲酶；尿素分解菌产生的脲酶能将尿素分解成氨，氨是碱性物质，可使酚红指示剂变红。

2；微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养；在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）根据以上分析可知；尿素分解菌能够产生脲酶将尿素分解为氨，而不能产生脲酶的细菌不能利用尿素为氮源。

（2）由于固氮菌也能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长；所以在该选择培养基上生长的细菌不一定都能产生脲酶；尿素分解菌产生的脲酶能将尿素分解成氨，氨是碱性物质，可使酚红指示剂变红。

（3）采用平板划线法进一步纯化时；每次划线后接种环必须灼烧并冷却，才能再次用于划线。纯化获得的尿素分解菌是一种好氧型细菌，其有氧呼吸需要气体流通，故将该菌种保存在试管中时不能密封。

（4）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4；一是其作为无机盐可以为细菌生长提供无机营养，二是作为缓冲剂保持细胞生长过程中PH稳定。

【点睛】

本题考查微生物的筛选和培养的知识点，要求学生掌握选择培养基的应用和微生物的接种方法，掌握尿素分解菌的筛选过程和原则，识记培养基中常见的成分及其作用，这是该题考查的重点；把握尿素分解菌的筛选和鉴定方法是突破该题的关键。【解析】脲酶不一定周围指示剂变红(或周围出现红圈)灼烧并冷却细菌有氧呼吸需要气体流通为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中PH稳定24、略

【分析】【分析】

在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基属于选择培养基；使用选择培养基的目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计的培养基属于鉴别培养基，其用途为：鉴别和区分菌落相似的微生物，如伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌。

【详解】

（1）①由于溴甲酚绿遇酸变色；故培养基中的微生物若能产生酸性物质，可出现一定的颜色变化，可据此判断培养基中是否含有乳酸菌等能产生酸性物质的菌体，故含溴甲酚绿（遇酸变色）的培养基属于鉴别培养基。由于一个菌落可由一个菌体繁殖产生，故厌氧培养一段时间后，为保证菌体的纯度，可挑取周围变色的（单个）菌落临时保存。

②亚硝酸盐还原酶可将亚硝酸盐还原，故能够高产亚硝酸盐还原酶的菌株能将培养液中的亚硝酸盐大量还原，使培养液中亚硝酸盐含量下降。对亚硝酸盐含量测定的原理是：亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。所以在进行高产亚硝酸盐还原酶菌株筛选时，将临时保存的各菌种分别接种到含亚硝酸盐（或NaNO2）的液体培养基中培养一段时间；离心收集上清液，在盐酸酸化条件下，依次加入对氨基苯磺酸；N-1-萘基乙二胺盐酸盐进行反应，筛选反应显色较浅的菌株。

（2）据表分析；亚硝酸盐含量最高时的腌制条件是食盐用量5%，腌制7天。为避免细菌大量繁殖，产生大量的亚硝酸盐，除控制好表中涉及的腌制条件外，还需控制好腌制的温度。

【点睛】

本题考查泡菜制作相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。考生通过分析作答。【解析】鉴别厌氧（单个）菌落亚硝酸盐（或NaNO2）盐酸浅食盐用量5%，腌制7天温度25、略

【分析】试题分析：本题考查果酒和果醋的制作；腐乳的制作、酸奶的制作等知识；要求学生识记果酒、果醋、腐乳和酸奶制作的原理及过程，能结合所学的知识准确答题。果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃，因此酒精发酵的条件是无氧且温度控制在18～25℃，酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，因此可以用酸性重铬酸钾溶液检测发酵过程是否产生酒精；果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或酒精转化成醋酸，醋酸菌是好氧菌，最适宜生长的温度范围是30-35℃，因此醋酸发酵时应该持续通入氧气并将温度控制在30-35℃；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸；酸奶制作的原理是乳酸发酵。据此答题。

（1）在泡菜腌制的过程中；要注意控制腌制的时间；温度和食盐的用量；最后要向坛盖边沿的水槽中注满水，这样可以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜是由于产膜酵母的繁殖形成的。用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少。

（2）在制作腐乳过程中；所需的微生物来源于空气中的毛霉孢子；而现代的腐乳生产是在无菌条件下，将优良的菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染。腐乳在酿造后期发酵中添加适量酒液的目的是①防腐，②与有机酸结合形成脂，③利于后期发酵。

（3）在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由醋酸菌大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源时将乙醇变为乙醛，然后变为醋酸。【解析】温度食盐的用量无氧环境产膜酵母先增加后减少空气中的毛霉孢子无菌①②③醋酸菌六、综合题(共4题，共8分)26、略

【分析】【分析】

消毒是指用比较温和的物理或化学方法清除或杀灭除芽胞外的所有病原微生物；使其数量减少达到无害化。常用消毒方法：煮沸消毒法；紫外线照射、巴氏消毒法和化学药剂消毒。灭菌是指用强烈的物理或化学方法杀灭所有微生物，包括致病的和非致病的，以及细菌的芽胞。常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。

【详解】

（1）接种前，要对材料人参根进行消毒（不能填灭菌，灭菌时是采用强烈的因素杀菌），配制培养基并分装后要用灭菌锅灭菌。

（2）用于离体培养的根切块称为外植体；真菌污染后会形成有颜色的绒毛状菌落；细菌污染后会形成有光泽的黏液状菌落。

（3）利用果胶酶处理愈伤组织可以获得单个的细胞。

（4）由题干可知；人参皂苷易溶于亲水性有机溶液，故而采用萃取的方法可以从培养物干粉中提取人参皂苷宜，操作时应采用水浴加热。

【点睛】

本题结合利用细胞培养技术生产人参皂苷的流程图，综合考查微生物的培养和分离、植物组织培养及应用、植物芳香油的提取等知识，只要考生识记相关知识点即可正确答题，属于考纲识记层次的考查。对于此类试题，考生要掌握牢固的基础知识才行。【解析】①.灭菌②.消毒③.外植体④.真菌（霉菌）⑤.细菌⑥.果胶⑦.萃取⑧.水浴27、略

【分析】【分析】

平板划线法操作过程：①将接种环放在火焰上灼烧；直到接种环烧红。②在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。③将试管口通过火焰。④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。⑤将试管通过火焰，并塞上棉塞。⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三；四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。⑧将平板倒置放入培养箱中培养。

【详解】

（1）结合题干；将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，培养一段时间后在纸片周围会形成透明的抑菌圈，根据抑菌圈的大小可以检测测试菌对抗菌药物的敏感程度，以指导临床合理选用抗菌药物，故药敏试验的目的是检测测试菌对抗菌药物的敏感程度，以指导临床合理选用抗菌药物，因变量是抑菌圈的大小。

（2