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第一部分考研真题精选4.原核生物启动序列-10区的共有序列称为()。[扬州大学2019研]6.Western杂交的对象是()。[扬州大学2019研]D.既是RNA,又是DNA7.DNA变性是指()。[浙江海洋大学2019研]8.下面哪一个是蛋白合成的起始密码子()。[扬州大学2019研]9.寡聚dT-纤维素柱层析用于()。[浙江海洋大学2019研]A.从总DNA中分离纯化质粒DNAB.从总核蛋白中分离DNPC.除去杂蛋白D.从总RNA中纯化mRNA10.下列关于DNA复制的说法错误的是()。[扬州大学2019研]B.需要DNA连接酶11.下列对蛋白质修饰会引起蛋白降解的是()。[扬州大学2019研]B.磷酸化12.在E.coli细胞中DNA聚合酶I的作用主要是()。[浙江海洋大学2019研]B.E.coliDNA合成的起始江海洋大学2019研]14.蛋白质生物合成的方向是()。[扬州大学2019研]A.从C→N端C.从N端和C端同时进行B.都有放射性D.都不含放射性16.遗传密码的主要破译者是()。[扬州大学2019研]D.Griffth17.某DNA分子中腺嘌呤的含量为15%,则胞嘧啶的含量应为()。[浙江海洋大学2019研]50%—15%=35%。因此答案选D。18.蛋白质的合成场所()。[扬州大学2019研]C.细胞核D.叶绿体1.看家基因[暨南大学2019研]2.外显子[扬州大学2019研]4.基因芯片[浙江海洋大学2019研]6.RNA甲基化[暨南大学2018研]8.无义突变[扬州大学2019研]9.断裂基因[浙江海洋大学2019研]13.核糖体RNA[暨南大学2018研]14.翻译[浙江海洋大学2019研]15.Intron[暨南大学2019研]16.操纵子[扬州大学2019研]17.Probe[宁波大学2019研]19.CircularRNA[暨南 20.原位杂交(ISH)[浙江海洋大学2019研]21.Tm[扬州大学2019研]22.基因治疗[暨南大学2018研]23.Geneticengineering[宁波大学殊的氨酰-tRNA合成酶识别的tRNA,即在3'端接25.端粒酶[暨南大学2018研]26.基因治疗[浙江海洋大学2019研]27.Ribosomalbindingsite[武汉科技大学2019研]上游约8~13核苷酸处,存在一段由4~9个29.衰减子[扬州大学2019研]30.Repressorprotein[宁波大学2019研]32.SD序列[扬州大学2019研]33.microsatelliteDNA[宁波大学2019研]34.Northernblothybr35.shRNA[暨南大学2019研]36.逆转录[扬州大学2019研]27.GFP[宁波大学2019研]38.复制型转座[浙江海洋大学2019研]41.单细胞测序[暨南大学2018研]43.反式作用因子[浙江海洋大学2019研]46.表观遗传学[暨南大学2019研]传学分支学科。表观遗传的类型有DNA修饰(如DNA甲基化)、组蛋白修饰、47.转化[浙江海洋大学2019研]48.蓝白斑筛选[暨南大学2018研]49.multigenefamily[宁50.转录组[暨南大学2018研]学2019研](2)蛋白质合成(2)真核生物mRNA的特征是5'端的帽子及3'的多(A)结构:磷酸基团并能通过其3'-OH位与下一个核苷酸的5'磷酸基团形成二酯键,转录产物的起始序列为3.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用?[浙江海洋大学2019研](1)信使RNA(mRNA)(2)转运RNA(tRNA)(3)核糖体RNA(rRNA)(1)转录起始复合物的形成(2)反式作用因子(3)转录起始的调控(1)核糖体RNA(rRNA):(2)转运RNA(tRNA):(5)小RNA:小RNA是一类非编码RNA,通过与mRNA碱基互补配对来参与mRNA的可变剪切。性比仅含有3.1kb上游DNA克隆的转录活性大50倍,其原因是什么?[浙江海洋大学2019研]9.什么是DNA损伤?生物体DNA损伤与哪些因素有关?生物细胞有哪些机制来处理DNA损伤,并进行DNA损伤修复?[武汉科技大学2019研]11.简述荧光定量PCR的原理及应用。[暨南大学2019研]o会导致RNA聚合酶的暂停,破坏RNA-DNA杂合链5'端的正常结构。18.典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤。[暨南大学2018研](1)提取供体生物的目的基因(或称外源基因)片段和载体质粒。20.何为DNA重组技术?其主要步骤为何?[浙江海洋大学2019研]21.何为RNA干扰?其作用机制怎样?[暨南大学2019研]22.试述什么是SUMO及SUMO化修饰的生物学意义。[扬州大学2019研]23.RecA蛋白是怎样调节SOS反应?[浙江海洋大学2019研](1)当细胞内出现过长的单链DNA时,细胞内的RecA蛋白识别并与之结合形成一种特殊的24.简述Sanger双脱氧链终止法的原理。[武汉科技大学2019研](1)第一层折叠组装是DNA分子围绕着组蛋白组装成核小体,此时DNA体积减小了6倍。(2)第二次折叠是每6个核小体盘旋为一圈,形成直径为30nm的染色质丝,此时致密程度增加4030.蛋白质合成后的加工修饰内容有哪些?[浙江海洋大学2019研]b.常见的IS都是很小的DNA片段(约1千碱基对),末端具有反向重复序列,转座时往往复制宿主靶位点一小段(4~15碱基对)DNA,形成位于IS两端的正向重复序列。即TnA家族,是指没有IS的、体积庞大的转座子(5000bp以上),带有3个基因,两翼带有38bp的(4)转座的应用如下:3.为什么细菌的RNA聚合酶能在恰当的区域停止转录?[浙江海洋大学2019研]会导致RNA聚合酶的暂停,破坏RNA-DNA杂合链5'端的正常结构。a.人工合成b.互补DNA(cDNA)的克隆学2019研]7.蛋白质合成体系主要包括哪些成分?各有何作用?(至少7种)[浙江海洋大学2019研](1)PCR和细胞内DNA复制的相同点⑥扩增DNA的时候都会经历DNA双链的解开(变性),寡聚核酸与单链DNA的结合(退火),以及DNA聚合酶开始合成DNA(延伸)的三个过程。⑤用75%冷的乙醇洗涤沉淀,4℃,7500g以下,离心5min,弃上清。(2)检测RNA质量的方法如下:ATGTCCGAAGTAATCGAAGAACATCTTCTCAGCGATAATTCTGATGATTCCAGCTCGGTCTAC………GGACGAACCACGAAGAGApET-28a多克隆位点如下重组蛋白C端带His标签。(1)酶切位点前后应添加1~6个保护碱基,以提高限制性核酸内切酶的切割效率。(2)His标签位于酶切位点的下游,且靠近终止密码子,且mRNA的翻译方向是由N端向C端,所(3)引物长度一般在18~27bp,且与目的片段有合适的互补长度以保证引物可以顺利结合。上游引物可为(5'端至3'端):下游引物可为(5'端至3'端):3.写出原核表达实验步骤。(1)按上述步骤提取该组织的RNA,反转录为cDNA。(4)将重组质粒转入感受态的大肠杆菌BL21中,涂布,根据载体所携带的抗性标记筛选出稳定遗传(5)摇菌、扩大培养,待菌液生长到对数生长期,收集菌体,裂解、收集蛋白质。(6)将总蛋白制备成溶液通过镍柱,由于A蛋白携带有His标签,可以被吸附在镍柱上,然后加缓冲液将吸附在镍柱上的A蛋白洗脱下来,即可得到A蛋白溶液。第二部分章节题库1953年,Watson和Crick提出()。D.遗传物质通常是DNA而非RNA1.分子生物学2.基因复制转录复制转录蛋白质2.比较基因(gene)和开放阅读框(openreadingframe,ORF)两个概念内涵的异同。以及在编码片段间(外显子)的间断切割序列(内含子)。开放阅读框都被非编码序列(即内含子)插A.延伸温度B.退火温度C.熔解温度D.降解温度2.DNA的复性过程()。B.可以由低温产生C.是磷酸二酯键的形成3.下面关于复制转座的叙述中,不正确的是()。B.要求有转座酶D.要求有解离酶C.4种dNDP【解析】合成DNA时的底物是dNTP(4种脱氧核糖核苷酸),包括dATP,dTTP,dCTP,dGTP;合成RNA时的底物是NTP(4种核糖核苷酸),包括ATP,UTP,CTP,GTP。6.生物体内天然状态的DNA几乎都以()形式存在。7.下列关于双链DNA碱基含量关系,错误的是()。B.按3'→5方向进行D.需要DNA聚合酶的作用9.在切口平移反应中加入EcoliDNApolI的原因是()。A.启动子B.转座子菌Ti(tumorinducing)或Ri(rootinducing)质粒中的一段DNA序列11.DNA受热变性时()。D.加入互补RNA链冷却可形成DNA-RNA杂交分子12.直接抑制DNA复制的抗癌药是()13.下列可能引起移码突变的是()。A.点突变E.插入3个或3的倍数个核苷酸【解析】移码突变是指DNA分子由于某位点碱基的缺失或插入(不是3或3的倍数),引起阅读框发15.(多选)引发体的组成包括()。B.一个防止DNA降解的单链结合蛋白16.(多选)DNA连接酶在体内的主要作用是()。D.也可以连接RNA分子17.(多选)下述关于DNA聚合酶的描述中,哪些是错误的?()18.(多选)核酸变性可发生下列哪种效应?()E.溶液黏度下降【答案】BCDE【解析】核酸变性是指在物理或化学因素的作用下,维系核酸二级结构的氢键和碱基堆积力受到破坏,DNA双链解旋变为单链。核酸变性后,260nm的紫外吸收明显增高,产生增色效应。同时,黏度下降、浮力密度升高、沉降速度加快,生物学功能全部或部分丧失。1.染色体中DNA与结合成复合体,并形成串珠样的_结构。【答案】组蛋白;核小体【解析】核小体是由DNA和组蛋白(H1、H2A、H2B、H3、H4)形成的染色质的基本结构。2.DNA高级结构的主要形式是结构,可以分为和两大类。【答案】超螺旋;正超螺旋;负超螺旋【解析】DNA的高级结构是指DNA的二级、三级结构,主要形式是超螺旋,包括正超螺旋和负超螺旋。3.DNA复制时的RNA引物是由的活性切除的。【答案】DNA聚合酶I;5'→3'外切核酸酶4.在DNA复制和修复过程中修补大片段DNA损伤的酶为0【答案】DNA聚合酶I5.真核生物中有5种DNA聚合酶。它们是:和_。【答案】DNA聚合酶α;DNA聚合酶β;DNA聚合酶y;DNA聚合酶8;DNA聚合酶ε【解析】DNA聚合酶是指以亲代DNA为模板,催化底物dNTP分子聚合为子代DNA的一类酶。真6.DNA连接酶催化一条DNA链末端的和相邻的另一条链末端的之间形成3'-5'真核生物DNA连接酶连接DNA的能量由_提供。【答案】5'磷酸根;3'羟基;磷酸二酯键;ATP【解析】DNA连接酶主要功能是将DNA分子中的5'磷酸基团同3'羟基端链接起来,形成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连成完整的链,在DNA复制、修复中起着重要作用。真核生物中利用ATP提供能量,原核生物中由烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)提供能量。7.在光复活过程中,光复活酶作用于,使它复原为【答案】嘧啶二聚体;嘧啶【解析】光复活作用是一种高度专一的DNA直接修复过程,只着用于由于紫外线引起的DNA嘧啶二聚体(主要为TT),使其复原为嘧啶。8.DNA修复包括3个步骤:对DNA链上不正常碱基的识别与切除,对已切除区域的重新合成,对剩下切口的修补。【答案】DNA切割酶;DNA聚合酶;DNA【解析】DNA修复是指细胞对DNA损伤后的一种反应,包括错配修复、光修复、切除修复、重组修复、诱导修复等。其中切除修复的步骤为:DNA切割酶对DNA链上不正常碱基的识别与切除、DNA聚【解析】DNA的二级结构包括右手螺旋(如A-DNA和B-DNA)和左手螺旋(如Z-DNA)。6.基因组DNA复制时,先导链的引物是DNA,后随链的引物是RNA。()2.复制子3.冈崎片段6.单核苷酸的多态性12.复制叉14.染色体结构域(domainofachromosome)16.回文序列(palindrome)17.滚环复制(rollingcirclereplication)18.突变(mutation)7.简述利用双脱氧末端终止法(Sanger法)测定DNA一级结构的原理。①插入序列(IS):两端有IR,只编码转座酶,结果是使插入的IS两端形成了DR或靶重复;(1)核酸的带电荷性质(2)核酸的高分子性质(3)核酸的紫外吸收1.以下有关大肠杆菌转录的叙述,哪一项是正确的?()【解析】RNA聚合酶作用以NTP(ATP,UTP,CTP,GTP)作为底物,合成RNA链;需要ATP提3.已知一mRNA中有600个核苷酸,那么它的基因双链中C和A总共的碱基数是()。系。根据①,该基因双链中共有600个碱基对,1200个核苷酸;根据②,在该基因双链中A与T的数目A.病毒单链负链RNA直接作为mRNAD.单链负链RNA病毒的基因组只编码tRNA【解析】含有负链RNA的病毒(如狂犬病毒),由单链负链RNA先合成单链正链DNA,而后再转录D.病毒和噬菌体6.下面有关RNA编辑的描述,不正确的是()。A.改变了DNA所编码的遗传信息7.真核mRNA后加工的顺序是()。8.用高聚脱氧胸苷酸纤维素(oligo-dT纤维素)分离纯化mRNA的层析方法称为()。D.反相层析9.下列哪种RNA的剪接需要剪接体参与?()B.放线菌素DC.鹅膏蕈碱B.绝大部分启动子都存在一10bp处的TATA区和-35bp处的TTGACA区D.在原核生物中,-35区与一10区之间的距离大约是16~19,小于15bp或大于20bp都会降低启动12.单链DNA分子5'-pCpGpGpTpA-3',能够与下列哪一种RNA单链分子进行杂交?()A.回文结构E.多聚A序列一个富含GC碱基的二重对称区(又称回文结构),由这段DNA转录产生的RNA容易形成发夹结构。2.DNA的合成方向,RNA的转录方向,蛋白质4.大肠杆菌RNA聚合酶的亚基组成为06.通常原核生物的终止子在终止点之前均有一个,其产生的RNA可形成_o7.真核生物mRNA转录后的成熟步骤主要包括5.真核生物的5S、18S和28SrRNA通常组成一个单位进行转录。()6.原核生物转录启动子有3个重要部位:—10区、-35区和SD序列。1.转录因子2.启动子合成的DNA链。可作为模板转录为RNA的那条链该链与转录的RNA碱基互补(A-U,G-C)。在转录过5.内含子和外显子6.转录步,转录是mRNA以及非编码RNA(tRNA、rRNA等)的合成步骤。7.顺式作用元件8.mRNA帽子9.核心酶13.剪接体(spliceosome)答:(1)转录起始阶段(2)终止阶段5.真核生物转录的前体hnRNA如何加工为成熟的mRNA?会在第6位N原子(N₆)位置发生甲基化。(2)真核生物的mRNA通常具有5'端帽子和3'端poly(A)尾巴,转录起始前的-25bp区段多有典RNA种类简写生理功能核蛋白体组成蛋白质合成模板核不均一RNA成熟mRNA的前体小核RNA参与hnRNA的剪接对基因的表达起调节作用核酶(2)增强子的类型第4章生物信息的传递(下)——从mRNA到蛋白质1.下列叙述不正确的是()。2.决定tRNA携带的氨基酸种类的是()。因子因子的特异位点结合;保持30S亚基的稳定性,4.在原核生物蛋白质合成过程中,核糖体小亚基与mRN5.关于遗传密码的论述,哪些是不正确的?()7.下列哪个氨基酸是先以前体形式结合到多肽中,然后再进行加工的?()8.嘌呤霉素抑制蛋白质生物合成的机制是()。D.结构与甲硫氨酰tRNA相似,与甲硫氨酰竞争结合tRNAA.在mRNA分子的起始密码子上游8~13个核苷酸处的顺序密码子AUG上游约8个碱基位置,帮助招募核糖体RNA,并将核糖体比对并结合到信使RNA(mRNA)10.与tRNA中的反密码子为GCU配对的mRNA中的密码子是()。11.蛋白质翻译后的修饰主要包括()。A.乙酰化12.以下关于蛋白质翻译的说法中,哪一项是错误的?()C.原核生物的30S亚基先与IF-3结合,然后与tRNA结合,最后再与mRNA结合D.真核生物mRNA的帽子结构能促进翻译的起始1.核糖体是合成的场所,主要存在于和,其功 ,位于肽链的端。起始tRNA是,它携带的氨基酸是。4.蛋白质的生物合成中,每增加一个氨基酸要消耗个高能键。【答案】61;3;1;无义11.细胞内存在一种称为泛素的蛋白质,它的主要作用是14.有六个密码子的氨基酸为和,而仅有一个密和色氨酸(Try)只有1个密码子外,其它氨基酸都有2~成多肽链中用于指导蛋白质的跨膜转移(定位)的N-末端的氨基酸序列(有时不一定在N端)。6.在蛋白质合成中,起始合成时起始tRNA结合在核糖体的A位上。()9.叶绿体的rRNA核糖体是由16S、5S、23S、5.8S组成的。()2.SD序列茎(与TyC环联接)和氨基酸接受茎(又称CCA茎,因所有tRNA的分子末端均含胞苷酸(C)、胞苷酸4.遗传密码5.终止密码子7.可译框架、可读框(ORF)8.信号肽9.移码突变10.起始因子(原核中IF,真核中eIF)11.氨酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsyn-thetase)的核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致(在RNA中是以U取代了DNA中的13.分子伴侣(molecularchaperone)假尿嘧啶(ψ)和甲基化的嘌呤(mG,mA)等。AA-tRNA·EF-Tu·GTP复合物并与核糖体的A位点相结合(3)移位:核糖体向mRNA的3'方向移动一个密码子,使得带有第二个氨基酸(现已成为二肽)的1.为什么说“tRNA为第二遗传密码”?tRNA有哪些种类?各自的功能是什么?④在模板mRNA编码区5端形成核糖体-mRNA-起始tRNA复合物并将甲酰甲硫氨酸(原核)或甲硫氨酸(真核)放入核糖体P位点。④真核生物eIF种类多(10多种),而原核生物IF种类少(3种)。第5章分子生物学研究法(上)ONA、RNA及蛋白质操作技术2.对限制性内切核酸酶的作用,下列描述哪个不正确?()D.切割生物DNA分子4.关于感受态细胞性质的描述,下面哪项说法不正确?()A.具有可诱导性C.具有可转移性C.信号肽序列D.多克隆位点8.下面关于多克隆位点(multipleclonesite,MCS)的描述中,不正确的是()。9.(多选)进行重组体的筛选时,下列哪些方法说明外源基因进行了表达?()10.(多选)报告基因()。性>环状。【答案】2;回文序列鉴定RNA分子。5.引物在基因工程中至少有4个方面的用途:T,正好与PCR产物上突出的A配对。 13.在切口移位标记探针时,DNaseI处理DNA的温度应控制在,温度过高会使,不利2.某一内切酶在一环状DNA上有3个切点,用此酶切割环状DNA可得到3个片段。()2.分子杂交3.多聚酶链式反应(PCR)7.蛋白质组学8.基因工程9.卫星DNA11.质粒 12.限制与修饰系统(restriction-mo13.细菌人工染色体文库,BAC文库(bacterial2.重组DNA(基因工程)的主要步骤。的RNA,留下独特的RNA用于文库4.什么是cDNA文库?同基因组文库有何差别?(2)基因组文库与cDNA文库的差别8.怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRI限制位点中去?②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降第6章分子生物学研究法(下)基因功能研究1.噬菌体展示可用来研究()。2.Western杂交是用于下列杂交技术中的哪一个?()3.基因敲除(knockout)的方法一般是用来阐明()。4.检测DNA片段和蛋白质的相互作用常用的技术为()。5.有关穿梭质粒载体的描述正确的是()。6.下列关于噬菌斑筛选法描述不正确的是()。7.蓝白试验筛选时,IPTG的作用是()。B.诱导o肽的合成D.作为显色反应的指示剂B.亮氨酸拉链结构9.目前在转基因小鼠中常用的基因敲除技术(geneknockout)的原理是()。B.离体定向诱变10.传统的SAGE技术用()个碱基的标签代表一个基因。11.FRET可以用来测量()范围内大分子之间的距离。12.酵母单杂交系统可用来研究()。D.酵母蛋白质性质13.用于研究DNA-蛋白质相互作用的技术是()。D.凝胶阻滞分析【解析】基因工程(geneticengineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术,是20世纪70年代发8.常用的定点突变方法一般有及1.凝胶滞缓实验(EMSA)2.斑点杂交3.核酸原位杂交4.基因芯片答:基因芯片又称DNA芯片,是指采用原7.噬菌体展示技术8.穿梭载体(shuttlevector)10.酵母单杂交系统(yeastone-hybidsystem)11.随机扩增多态性DNA(randomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD)13.原位杂交技术(insituhybfidization,ISH) 14.基因定点突变(site-directedmutagenesis)16.荧光共振能量转移(fluorescenceresonanceenergytransfer,FR个基团(受体)的吸收光谱有一定的重叠,当这两个荧光基团间的距离合适时(一般小于100A),就可观DNA,何者为闭环DNA。(1)从电泳凝胶中回收三种DNA分子。(3)在选择平板上长菌落的为闭环DNA, 在细胞培养和小鼠血清中分别减少了94.2%和84.5%,肝细胞中的HBcAg下降了99%。(2)在基因药物的研制和开发方面。根据21个寡核苷酸siRNA能够抑制同源mRNA的表达,可以(2)琼脂糖凝胶电泳c.琼脂糖凝胶结构均匀,含水量大(约占98%~99%),近似自由电泳,样品扩散度较自由电泳小,g.进行第二次电泳。(1)同位素原位杂交技术第7章原核基因表达调控1.下列哪个操纵子中没有衰减子序列?()2.下列有关SD序列的说法,哪个是正确的?()3.下列关于基因表达调控的论述正确的是()。控这个系统的是()。A.色氨酸期、晚早(delayearly)期和晚(late)期3个时期early)期、晚早(delayearly)期和晚(late)期3个时期7.操纵子一般是由()组成的。正调节负调节是I否ⅢA.I:开启;Ⅱ:关闭;Ⅲ:关闭;IV:开启A.乳精C.大肠杆菌的SOS反应啶的7核苷酸序列互补的富含嘌呤的3~7个核苷酸序列(AGGAGG),是核糖体小亚基与mRNA结合并13.下面哪项不属于原核生物操纵子的结构?()B.终止子D.内含子14.cAMP在转录的调控作用中将出现下列哪种现象?()一个调控这个系统?()3.根据操纵子对能调节它们的小分子的应答反应的性质,可分为操纵子和操纵子。8.原核生物的基因调控主要发生在转录水平上,根据调控机制的不同可分为和。在第遏1.1953年WatsonJ.D.&CrickF.H.C.提出了操纵子模型。()在1961年首次提出来的。而1953年WatsonJ.D.和CrickF.H.C.提出的是DNA双螺旋结构模型。14.在原核基因操纵子中都有CRP位点。()2.管家基因基因位点(金黄色葡萄球菌),某些时候可能到10个基因位点(致伤弧菌)。3.诱导表达4.反式作用因子5.负调控6.操纵子7.前导肽9.cAMP受体蛋白(CRP)11.魔斑12.结构基因(1)可诱导的基因调控4.为什么操纵区(operator)和启动子(promoter)突变总是顺式显性(cis-dominat)、反式隐性 (tram-recessive)突变?而编码阻抑蛋白(repressofprotein)的基因突变,则既是顺式显性、又是反色氨酸密码子处停止,阻止了1:2配对,而使2:3配对,因此不能形成3:4被正常翻译,核糖体阻止2:3配对导致3:4配对,终止信号出现,从而导致转录(1)结构方面(组织形式)的区别(2)表达方式方面的区别(7)糖酵解途径中位于葡萄糖-6-磷酸与甘油之间的某个代谢产物是腺苷酸环化酶的抑制剂。9.为什么半乳糖操纵子需要两个转录起始位点?(2)生长过程中细胞必须随时合成差向异构酶,以保证尿苷二磷酸的供应。(3)在没有外源半乳糖的情况下,细胞通过半乳糖差向异构酶(galE产物)的作用由UDP-葡萄糖(4)galmRNA组成型合成水平已高于lac操纵子所合成的lacmRNA水平,显然这部分mRNA是在(5)如果只有S₁一个启动子,那么由于这个启动子的活性依赖于cAMP-CRP,当培养基中有葡萄糖存在时就不能合成异构酶。当加入唯一的启动子是S₂时,那么,即使在有葡萄糖存在的情况下,半乳糖也(6)无论从必要性或经济性方面考虑,都需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子(S₂)进行本底水平的组成型合成,以及一个依赖于cAMP-CRP的启动子(S₁)对高水平合成进行调节。只有在S₂活性完全被cAMP-CRP控制时,调控作用才是有效的。10.在细菌lac和trp操纵子上,为什么阻遏蛋白编码的基因不一定要和结构基因连在一起?反式作用因子。大多数真核转录调节因子由某一基因表达后,可通过另一基因的作用,从而激活另一基因的转录,这种调节蛋白即为反式作用因子。编码反式作用因子调控的靶序列(基因)可以不在同一染色体上。11.简述基因的表达与调控机理。答:(1)基因的表达的机理为DNA与RNA的复制,维持生命的延续。朊病毒的蛋白质,是正常蛋白质的一个异构体。能使正常的蛋白质发生异构化,成为新的朊病毒,表现为:蛋白质→蛋白质。但本质上可以说是一种(2)基因表达调控的机理基因表达存在时空差异性。不同的生活时期基因表达存在的时间特异性和不同。细胞中(或同一物种的不同个体中)存在空间特异性。具体的调控机理在不同生物有不同特点,主要有真核生物的调控与原核①原核生物的调控主要通过转录调控,以开启或关闭某些基因的表达来适应环境条件。环境因子常是调控的诱导物,群体中第8章真核基因表达调控A.锌指结构4.基因表达时的顺式作用元件包括()。D.转录因子5.细胞蛋白激酶根据底物蛋白质被磷酸化的氨基酸残基种类可分为3类,不包括()。B.酪氨酸型D.天冬氨酸型6.直接受cAMP调节的分子是()。D.蛋白激酶BB.增强子8.真核生物基因转录调控中,反式作用因子局部结构形式(基元)不包括()。D.亮氨酸拉链11.(多选)真核基因经常被断开()。式12.(多选)下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物基因组?()B.组蛋白基因13.(多选)关于DNA甲基化的说法正确的是()。14.(多选)可变剪接()。15.(多选)染色体上5'-mCpG修饰对基因表达的影响途径,最佳选择是()。1.哺乳类RNA聚合酶IⅡ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是 5.真核生物的mRNA加工过程中,5端加上,在3端加上后者由催化。如果子被切除,外显子通过RNA剪接过程连接在一起。在此过程中涉及的RNA分子(如U1和U2等)被统8.转录因子TFIIIA的DNA结构域具有花式,而API的DNA结构域则具有花式。1.基因家族4.基因重排6.核心启动子7.转录因子8.增强子9.结构域10.螺旋-转折-螺旋(HTH)11.锌指结构12.受体13.G蛋白15.第二信使 20.反式作用因子(trans-actingfactor)21.亮氨酸拉链(leucinezipper)转录起始毫无影响;同样地,+84以后序列的缺失对转录起始也没有影响。因此,+50到+84间的序列(3)与DNA相互识别的原理②锌指结构:长约30个氨基酸,其中4个氨基酸(2个Cys,2个His)与一个锌离子相结合。端的CpG序列(又称CpG岛)。甲基化范围与基因表达程度呈反比。2.举例说明DNA结合蛋白对基因转录的影响,另简述鉴别DNA结合蛋白在DNA分子上结合位点它们是起始某个(类)基因转录所必需的。a.特异序列的DNA短片段(用DNA克隆或化学合成方法产生单一片段)先用同位素标记,然后与第9章疾病与人类健康1.我国批准的第一个肿瘤基因治疗药物是针对下列哪一种基因的?()2.人类某些神经系统疾病主要与下列哪种核苷酸C.CpG序列3.癌症往往涉及哪两类基因的相互作用?()C.病毒癌基因和原癌基因【解析】癌基因(oncogene)可分为两大类:一类是病毒癌基因(viraloncogene,v-onc),编码病毒4.(多选)下列叙述正确的是()。5.下列哪些关于ras说法是正确的?()E.不能介导信号通路1.癌基因2.朊粒3.抑癌基因4.顺式激活6.p538.基因治疗9.无义突变(nonsensemutation)四、简答题1.简述基因治疗的策略。答:基因治疗指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用,从而达到治疗疾病目的的生物医学新技术。基因治疗的策略如下:exvivo途径是指将含外源基因的载体在体外导入人体自身或异体(异种)细胞(基因工程化的细胞),经体外细胞扩增后输回人体的方法。exvivo途径易于操作、安全性好但不易形成规模,且必须有固定的临invivo途径是指将外源基因装配于特定的真核细胞表达载体上,直接导入人体内的方法。这种载体可以是病毒型或非病毒型,甚至是裸DNA。invivo途径有利于大规模工业化生产,但在技术上要求很高。2.某人在工作中意外受到一次有致癌可能性的放射性辐射,但并非由于本人操作不当所致。事后三个月被发现患有肠癌且已发展为晚期,为此他提出诉讼,要求单位赔偿。从细胞生物学角度你认为他会胜诉吗?为什么?答:从细胞生物学角度来说,我认为应该不会胜诉。原因如下:(1)肿瘤的发生是基因突变逐渐积累的结果。癌症的发生一般不是单一基因的突变,而至少在一个细胞中发生5或6个基因的突变,才能赋予癌细胞所有的特征。即增殖速度快,子代细胞逃脱细胞衰老的命运。(2)癌症发生的核心问题是基因突变,涉及三类基因的参与:①调节细胞增殖的原癌基因活化或者抑癌基因失活;②调节细胞凋亡的促凋亡基因失活或抑制凋亡基因功能增强;③DNA修复基因失活,使突变在细胞内积累,并且累积到调节细胞增生及细胞凋亡的基因时,就有可能使细胞凋亡及增生失去平衡,导致癌症的发生。因此,从细胞生物学看,三个月的时间一般不足以完成癌症从发生到发展至晚期的全过程,导致他肠癌的决定因素应该不是工作中意外受到一次有致癌可能性的放射性辐射。3.简述基因治疗中转移外源基因至体内的非病毒和病毒途径的主要原理。答:(1)采用病毒途径进行基因治疗的主要原理①所用到的病毒载体应该具有三方面的基本特点包括:a.携带外源基因并能组装成病毒颗粒;b.介导外源基因的转移和表达;c.对机体没有致病能力。一般病毒载体必须经过改造才可以用于基因治疗。②改造病毒载体需要首先了解载体病毒的基因组结构和功能(编码区/非编码区、结构蛋白/非结构蛋白、必需基因/非必需基因、包装容量等),然后删除致病基因区域和非必需基因,仅保留必需基因。最后再利用改造的病毒载体包装目的基因,转入机体达到基因治疗的目的。(2)采用非病毒途径进行基因治疗的主要原理①裸DNA法可以采取直接注射、电穿孔法或基因枪轰击将目的基因导入受体细胞,DNA片段整合到基因组中表达,从而起到治疗效果。②脂质体/DNA复合物法是利用可以高效包装DNA的人造膜,制成脂质双层包围DNA水溶液的脂质微球,与细胞融合后被细胞内吞,DNA进入细胞体内表达。③多聚物/DNA复合物法主要利用了DNA带负电,而细胞表面也带负电的特点,所以借助阳离子多聚体把二者聚合到一起,使外源DNA有机会进入细胞,实现基因治疗。4.癌基因和抑癌基因的特点是一旦发生突变,所在的细胞都能被转化为癌细胞。为什么一个叫癌基因,一个叫抑癌基因?答:(1)两者概念不同:①癌基因(oncogene)是细胞内控制细胞生长的基因,具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性。在癌基自己的RNA,合成自己的蛋白质等成分。SARS成受病毒RNA的遗传信息控制。然后在新合成的RNA聚合酶的作用下,由+RNA复制成中特定染色体上某种DNA多态性标志(如RFLP,STR或SSCP等)的等位基因片段在同一患者中由正常组织基因组中的两种变为一种,即等位基因型由杂合子变为纯合子。所以抑癌(1)细胞内免疫即通过基因操作,使基因修饰过的细胞产生各种不同的蛋白质,干扰或阻止HIV在细胞内的复制和细胞间的传播。例如,通过反转录病毒介导,已成功地将HIV表面蛋白Gp120的受体分子及CD4基因、病毒蛋白的突变基因以及过量的HIV顺式顺序导入HIV感染的细胞中,不同程度抑制了(2)药敏自杀基因通过特异的药物,杀死HIV感染的细胞从而达到治疗疾病的目的。HSV-tk基因是基因治疗中的药敏自杀基因。具体而言构建了HSV病毒胸苷激酶基因表达系统,将HSV-tk基因构建于HIV病毒基因LTR启动子下游,由HIV-LTR以及反式激活反应因子共同控制转录,只有在HIV病毒tatGcv),对药物敏感的转HSVtk基因的HIV感染细胞就会被杀死,而未感染的细胞不受影响。除HSV-k基因外,白喉毒素及丝氨酸、胱氨酸基因也可用作自杀基因,这类基因产物本身对细胞有毒害作用,不需另(3)免疫标记治疗在细胞中表达HIV的病毒蛋白模拟病毒感染可诱发CTL细胞的免疫应答,从而预防和治疗HIV的感染。如将转有HIV-III6gpl20基因的皮肤成纤维细胞免疫机体,使其产生HIV外膜蛋白特异的CTL应答。将gp160的DNA质粒直接注射小鼠,使小鼠产生了特异性抗体和CTL应答,这方面(4)反义技术及核酸的应用如用反转录病毒载体或腺病毒载体将HIV病毒基因的反义RNA转移到靶细胞中,以达到治疗的目的,运用腺病毒I型AV基因,将HIV病毒tat/rev基因的反义模板插入其中,由RNA聚合酶Ⅲ控制转录,再将该腺病毒载体转染T

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