2025版高考生物一轮总复习第10单元生物技术与工程第36课微生物的培养技术及应用教师用书

第36课微生物的培育技术及应用►学业质量水平要求◄1．通过分析培育基各成分在微生物培育中的作用，得出可以通过调整培育基的配方，有目的地培育某种微生物的结论。(科学思维)2．通过分析选择培育基的原理，理解适者生存的含义。(生命观念)3．通过微生物的相关试验，学会培育、分别微生物以及微生物计数的试验设计。(科学探究)考点一微生物的基本培育技术1．培育基(1)概念：人们依据微生物对养分物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的养分基质。(2)种类①按物理状态可分为液体培育基和固体培育基。②按功能可分为选择培育基和鉴别培育基。(3)成分：各种培育基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满意微生物生长对pH、特别养分物质以及氧气的需求。2．无菌技术(1)含义：在培育微生物的操作中，全部防止杂菌污染的方法。(2)常用方法3．微生物的纯培育(1)概念：由单一个体繁殖所获得的微生物群体是纯培育物，获得纯培育物的过程就是纯培育。(2)过程：包括配制培育基、灭菌、接种、分别和培育等步骤。(3)常用接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。(4)实例——酵母菌的纯培育1．培育基只能用以培育、分别、鉴定、保存微生物，不能用以积累其代谢物。 (×)2．由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培育物。 (√)3．经高压蒸汽灭菌后的培育基，要冷却至50℃左右时，才能在酒精灯火焰旁边倒平板。 (√)4．平板划线时要留意将最终一次的划线与第一次的划线相连。 (×)【教材细微环节命题】(选择性必修3P12～13旁栏思索)(1)在未接种的培育基表面是否有菌落生长？没有。假如有，说明白培育基被杂菌污染。(2)在接种酵母菌的培育基上，假如你视察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由什么引起的吗？假如视察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等引起的。1．常见物品的消毒或灭菌方法(1)消毒方法及适用对象(2)灭菌方法及适用对象2．平板划线操作的留意事项(1)灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。(2)其次次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端起先，能使微生物的数目随着划线次数的增加而渐渐削减，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。(3)划线时最终一区不要与第一区相连。(4)划线时用力大小要适当，防止用力过大将培育基表面划破。(5)操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都须要对接种环进行火焰灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧的目的如下表：项目第一次操作每次划线之前划线结束目的杀死接种环上原有的微生物杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种干脆来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目依次削减杀死接种环上残存的菌种，避开微生物污染环境和感染操作者考向1|培育基的成分与功能的分析1．下列有关培育基的叙述，正确的是()A．培育基是为微生物的生长繁殖供应养分的基质B．培育基中都只含有碳源、氮源、水和无机盐C．固体培育基中加入少量水即可制成液体培育基D．微生物在固体培育基表面生长，可形成肉眼可见的单个细菌繁殖而来的菌落A解析：培育基是为微生物的生长繁殖供应碳源、氮源、水和无机盐等养分的基质，A正确；微生物培育基的主要养分物质有碳源、氮源、水和无机盐等，有的还须要生长因子等特别的养分，固体和半固体培育基须要琼脂，液体培育基不须要琼脂，B错误；液体培育基中加入琼脂可制成固体培育基，C错误；微生物在固体培育基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落，但不肯定是单个细菌繁殖而来的，D错误。2．已知某种细菌以CO2为唯一碳源，下列相关叙述正确的是()A．可推想该细菌的代谢类型为自养需氧型B．无机盐是该细菌不行缺少的养分物质C．培育过程中碳源同时充当该细菌的能源物质D．培育该细菌的培育基中不须要添加氮源B解析：该细菌以CO2为唯一碳源，可推想该细菌的代谢类型为自养型，但不能确定是不是需氧型，A错误；微生物生长一般须要水、碳源、氮源和无机盐等养分物质，B正确；CO2不能为微生物供应能量，C错误；氮源是微生物必需的养分物质，培育该细菌的培育基中需添加氮源，D错误。考向2|无菌技术的辨析3．(2024·北京卷)人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分别出葡萄球菌。下述操作错误的是()A．对配制的培育基进行高压蒸汽灭菌B．运用无菌棉拭子从皮肤表面取样C．用取样后的棉拭子在固体培育基上涂布D．视察菌落的形态和颜色等进行初步推断C解析：为避开杂菌污染干扰，需对配制的培育基进行高压蒸汽灭菌，A正确；葡萄球菌需从人体皮肤的微生物中分别，为避开杂菌污染，故须要运用无菌棉拭子从皮肤表面取样，B正确；棉拭子上的微生物须要用平板划线法在培育基上进行接种，C错误；依据微生物在固体平板培育基表面形成的菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别，D正确。4．(2024·湖北卷改编)灭菌、消毒、无菌操作是生物学试验中常见的操作。下列叙述正确的是()A．动、植物细胞DNA的提取必需在无菌条件下进行B．微生物、动物细胞培育基中需添加肯定量的抗生素以防止污染C．为防止蛋白质变性，不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培育基进行灭菌D．可用高压蒸汽灭菌法对试验中所运用的微量离心管、细胞培育瓶等进行灭菌D解析：动、植物细胞DNA的提取不须要在无菌条件下进行，A错误；动物细胞培育基中需添加肯定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物的培育不能加入抗生素，B错误；一般用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培育基进行灭菌，以防止杂菌污染，C错误；可用高压蒸汽灭菌法对试验中所运用的微量离心管、细胞培育瓶等进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。【易错提示】把握选择无菌技术的原则(1)考虑无菌技术的效果：灭菌的效果比消毒要好。(2)考虑操作对象的承受实力：活体生物材料、操作者的手等只能消毒，而不能灭菌。考向3|微生物的纯化方法及过程的分析5．下图为试验室培育和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是()A．①步骤运用的培育基是已经调整过pH并灭菌的培育基B．①②③步骤操作时须要在酒精灯火焰旁进行C．③到④的过程中，接种环共灼烧了5次D．④步骤操作时，不能将第1次和第5次的划线相连C解析：①步骤表示倒平板，在倒平板之前培育基已经调整过pH并灭过菌，A正确。①②③步骤操作时须要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染，B正确。接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以③到④的过程中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，③到④的过程中共需灼烧接种环6次，C错误。④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连，D正确。【易错分析】培育物、纯培育物、纯培育的辨析考点二微生物的选择培育和计数1．微生物的选择培育(1)选择培育基：将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基。(2)稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基表面，进行培育。①系列稀释操作系列稀释：移液管须要经过灭菌。操作时，试管口和移液管应离火焰1～2cm。操作过程如下：②涂布平板操作序号图示操作1取0.1mL菌液，滴加到培育基表面2将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中3将沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼烧，待酒精燃尽后，冷却8～10s4用涂布器将菌液匀称地涂布在培育基表面。涂布时可转动培育皿，使菌液涂布匀称③培育：待涂布的菌液被培育基汲取后，将平板倒置，放入30～37℃的恒温培育箱中培育1～2d。2．微生物的数量测定(1)稀释涂布平板法①计数原理：当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少活菌。②计数标准：为了保证结果精确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。③计数方法：通常选用肯定稀释范围的样品液进行培育，以保证获得菌落数为30～300、适于计数的平板。在同一稀释度下，至少应对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。④统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上视察到的只是一个菌落，因此统计结果一般用菌落数表示。(2)显微镜干脆计数法①计数原理：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下视察、计数，然后再计算肯定体积的样品中微生物的数量。②优点：是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。③缺点：统计的结果一般是死菌数和活菌数的总和。3．土壤中分解尿素的细菌的分别与计数1．利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分别和计数。 (×)2．培育分解尿素的细菌，培育基的pH会增大。 (√)3．筛选分解尿素的细菌的培育基以尿素为唯一氮源，且为液体培育基。 (×)4．利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数。 (×)5．统计菌落数目时为保证结果精确，一般选择菌落数目最多的平板进行统计。 (×)6．利用显微镜干脆计数法统计的细菌数量就是活菌的数量。 (×)【教材细微环节命题】1．(选择性必修3P16思索·探讨)(1)假如让你配制一种培育基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分别出来，培育基的配方该如何设计？设计一种选择培育基，用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分别出来。(2)该培育基与一般培育基有哪些共同点和不同点？与一般培育基相比，这种培育基只是用尿素作为唯一氮源，培育基的其他养分成分基本相同。2．(选择性必修3P16思索·探讨)结合比照组，分析培育物中是否有杂菌污染以及选择培育基是否筛选出一些菌落。假如没有接种的培育基上没有菌落生长，说明培育基没有被杂菌污染。假如接种后的完全培育基上的菌落数明显多于选择培育基上的菌落数，说明选择培育基筛选出了一些尿素分解菌。1．常见选择培育基的设计原理与应用实例选择培育基设计原理应用实例详细处理分别菌种依据养分需求不添加碳源自养微生物(硝化细菌等)不添加氮源固氮微生物(根瘤菌等)以尿素为唯一氮源能分解尿素的微生物以石油为唯一碳源能分解石油的微生物加入某种化学物质，其不作为养分物质，对目标微生物无害，但会抑制或杀死其他微生物加入青霉素、四环素或链霉素抑制细菌和放线菌生长→分别酵母菌、霉菌等加入10%的酚抑制细菌和霉菌生长→分别放线菌利用特别环境置于无氧条件下厌氧型和兼性厌氧型微生物置于高盐环境中其他菌在高盐环境中易失水而不能生存→分别金黄色葡萄球菌置于高温环境中其他微生物因酶失活而无法生存→分别耐高温微生物2．平板划线法和稀释涂布平板法的比较项目平板划线法稀释涂布平板法图示过程用接种环在固体培育基表面连续划线，将聚集的菌种逐步分散到培育基的表面将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培育基的表面，进行培育优点可以视察菌落特征，对混合菌进行分别可以计数，可以视察菌落特征相同点都运用固体培育基，若没有特别要求，两种方法都可以用来分别微生物3．两种微生物计数方法的比较项目间接计数法(稀释涂布平板法)干脆计数法(显微计数法)原理当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少活菌利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算肯定容积的样品中微生物的数量公式每克样品中的菌落数＝(C/V)×MC：稀释度下平板上生长的平均菌落数；V：涂布平板时所用的稀释液的体积/mL；M：稀释倍数每毫升原液所含细菌数＝每小格内平均细菌数×400×104×稀释倍数缺点当两个或多个细胞连在一起时，平板上视察到的只是一个菌落不能区分活菌和死菌结果比实际值小比实际值大4．微生物的筛选与鉴别方法(1)微生物的筛选方法单菌落挑取法利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培育基表面，干脆依据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物选择培育法利用选择培育基对微生物进行选择培育，干脆获得目的微生物鉴定培育法利用鉴别培育基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微生物(2)微生物的鉴别方法菌落特征鉴别法依据微生物在固体培育基表面形成的菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别指示剂鉴别法在以尿素为唯一氮源的培育基中加入酚红指示剂，培育某种微生物后，培育基变红，说明该种微生物能够分解尿素透亮圈鉴别法为了筛选出高效降解淀粉菌种，该培育基应以可溶性淀粉为唯一碳源，由于培育基中含有淀粉，而以淀粉为唯一碳源的微生物能产生淀粉酶分解淀粉，淀粉被分解后遇碘液不呈现蓝色，因而随着淀粉被分解，蓝色褪去，出现透亮圈5．对土壤中分解尿素的细菌的分别与计数试验的结果分析与评价内容现象结论有无杂菌污染的推断比照的培育皿中无菌落生长未被杂菌污染培育物中菌落数偏高可能被杂菌污染菌落形态多样，菌落数偏高培育物中混入其他氮源选择培育基的筛选作用牛肉膏培育基上的菌落数目大于选择培育基上的数目选择培育基具筛选作用样品的稀释操作得到2个或2个以上菌落数目在30～300的平板操作胜利重复组的结果若选取同一种土样，统计结果应接近考向1|选择培育基成分与功能的分析1．下列能选择出分解尿素的细菌的培育基是()A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、蒸馏水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、蒸馏水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、蒸馏水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、蒸馏水A解析：在A项的培育基中既有尿素作为唯一氮源，又有其他各种成分，可以选择出分解尿素的细菌；而B项中无尿素作氮源，C项中缺少碳源，D项中有牛肉膏、蛋白胨可供应氮源的成分。2．物质W是一种含氮有机物，W在培育基中达到肯定量时培育基表现为不透亮。某小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌，结果如下图。下列说法错误的是()A．透亮圈的形成是因为W物质被分解B．所用的选择培育基应当是以物质W为唯一氮源C．甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源D．乙菌落中的细菌都能降解W，不须要进一步纯化D解析：W在培育基中达到肯定量时培育基表现为不透亮，因此透亮圈的形成是因为W物质被分解，A正确；要筛选出能降解W的细菌，所用的选择培育基应当是以物质W为唯一氮源，B正确；该培育基以W物质为唯一氮源，而甲菌落四周未出现透亮圈，因此甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源，C正确；乙菌落中的细菌不肯定都能降解W，因此仍须要进一步纯化，D错误。【易错提示】能够在选择培育基上生长的不肯定都是目的菌株原则上选择培育基只能允许特定种类的微生物生长，但事实上，微生物的培育是一个特别困难的问题，有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此，能够在选择培育基上生长的不肯定都是目的菌株。考向2|微生物选择培育方法的辨析3．(2024·江苏卷)下列是某同学分别高产脲酶菌的试验设计，不合理的是()A．选择农田或公园土壤作为样品分别目的菌株B．在选择培育基中需添加尿素作为唯一氮源C．适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落D．可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌D解析：农田或公园土壤中含有较多的含脲酶的微生物，A正确；为了筛选可分解尿素的细菌，配制的培育基应选择尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培育基上能生长，B正确；当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，C正确；在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培育基的pH上升，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培育基中加入酚红指示剂，能对分别的菌种做进一步鉴定，D错误。4．(2024·全国乙卷)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培育所利用的碳源关系亲密。为此，某小组通过试验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。碳源细胞干重/(g·L-1)S产量/(g·L-1)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖废液2.300.18回答下列问题：(1)通常在试验室培育微生物时，须要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2点即可)。(2)由试验结果可知，菌株C生长的最适碳源是______________；用菌株C生产S的最适碳源是____________。菌株C的生长除须要碳源外，还须要____________________(答出2点即可)等养分物质。(3)由试验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关试验。请简要写出试验思路：_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是__________(答出1点即可)。解析：(1)通常在试验室培育微生物时，为防止试验用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培育物，须要运用剧烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子，即对所需的玻璃器皿进行灭菌，玻璃器皿常用的灭菌方法有干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。(2)由试验结果可知，以葡萄糖为碳源时菌株C的细胞干重最大，说明最适于菌株C生长的碳源是葡萄糖；而以制糖废液为碳源时，用菌株C生产S的产量高于以葡萄糖为碳源时的产量，说明最适于生产S的碳源是制糖废液。微生物的生长一般都须要水、碳源、氮源和无机盐，还须要满意微生物生长对pH、氧气以及特别养分物质的要求，故菌株C的生长除须要碳源外，还须要氮源、无机盐、水等养分物质。(3)分析题中表格可以看出，在以淀粉为碳源的培育基中，菌株C不能生长，缘由可能是菌株C中缺少分解淀粉的酶，不能利用淀粉。(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，试验自变量为制糖废液的浓度，可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培育基，培育菌株C，其他条件相同且相宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度。(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，既有利于削减污染、节约原料，又能降低生产成本。答案：(1)高压蒸汽灭菌、干热灭菌(2)葡萄糖制糖废液氮源、无机盐、水(3)不能合成淀粉酶(4)配制等量的一系列不同浓度的制糖废液分别接种等量的菌株C，其他条件相同且相宜，培育一段时间后，测定不同浓度制糖废液中S产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度为生产S的最适碳源浓度(5)削减污染、节约原料、降低生产成本考向3|微生物数量测定的方法5．土壤中有丰富的微生物，若利用其中某种微生物，则须要进行菌种的分别和纯化，过程如下图。下列相关叙述错误的是()A．若目的是筛选分解尿素[CO(NH2)2]的细菌，则尿素可以作为该菌的氮源和碳源B．3号试管的稀释倍数为1×104，理论上3号试管的活菌数应是4号试管的10倍C．4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×108个D．该种方法统计的菌落数比活菌的实际数目少A解析：若目的是筛选分解尿素[CO(NH2)2]的细菌，则尿素可以作为该菌的氮源，不能作为碳源，A错误；由样品稀释示意图分析可知，3号试管的稀释倍数为1×104倍，3号试管中的活菌数应是4号试管的10倍，B正确；4号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(110＋108＋112)÷3×10×105＝1.1×108(个)，C正确；稀释涂布平板得到的菌落可能是由两个或多个细菌细胞长成的，故该试验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D正确。6．(2024·广东汕头一模)热纤梭菌是一种能高效降解纤维素的嗜热厌氧细菌，可分泌一种多酶复合体将纤维素水解为可溶性糖，在农林废弃物的转化利用中具有应用价值。下图是筛选该菌的过程，相关叙述错误的是()A．从牛粪堆的深层取样比从表层取样更加合理B．甲、丙都是以纤维素为唯一碳源的选择培育基C．用平板乙统计菌落数可精确反映该菌的真实数量D．丙中纤维素的残留量可反映该菌降解纤维素的实力C解析：热纤梭菌是一种嗜热厌氧细菌，牛粪堆的深层比表层氧气含量更低，温度更高，更适合热纤梭菌生存，因此从牛粪堆的深层取样比从表层取样更加合理，A正确；题图是筛选能高效降解纤维素的嗜热厌氧细菌，因此甲、丙都是以纤维素为唯一碳源的选择培育基，B正确；依据图乙中平板上菌落分布匀称可知，其为稀释涂布平板法接种的菌种，由于当两个或多个菌体连在一起时，平板上视察到的只有一个菌落，因此用该方法统计的菌体数量会比活菌的实际数量少，C错误；热纤梭菌可分泌一种多酶复合体将纤维素水解为可溶性糖，因此丙中纤维素的残留量可反映该菌降解纤维素的实力，D正确。【命题动态】针对人类生产或生活的某一需求，或结合生活或生产实例，考查微生物的养分要求，微生物的消毒与灭菌技术、微生物的选择培育、微生物分别与计数的原理及操作过程的分析。呈现形式一般以选择题为主，难度中档。1．(2024·山东卷)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并汲取利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能干脆汲取脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培育。甲菌菌落四周呈现深蓝色，乙菌菌落四周不变色。下列说法错误的是()A．甲菌属于解脂菌B．试验中所用培育基以脂肪为唯一碳源C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的实力[思维培育]B解析：依据题干信息“甲菌菌落四周呈现深蓝色”，说明甲菌可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A正确；乙菌菌落四周没有出现深蓝色，说明乙菌不能产生脂肪酶，不能利用脂肪为其供能，但乙菌也可以在培育基上生存，说明该培育基不是以脂肪为唯一碳源，B错误；可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比，更加直观，C正确；可以依据平板中菌落四周深蓝色的面积大小来比较解脂菌分泌脂肪酶的实力，D正确。[技法总结]选择培育基与鉴别培育基的比较项目选择培育基鉴别培育基制备方法培育基中加入或削减某些化学物质培育基中加入某种指示剂或化学药品原理依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好或抗性而设计产生特定的颜色或其他改变用途从众多微生物中分别出所需的微生物鉴别不同种类的微生物2．(2024·广东卷)探讨深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海疆1146米深海冷泉旁边沉积物样品，分别、鉴定得到新的微生物菌株并进一步探讨了其生物学特性。回答下列问题：(1)探讨者先制备富集培育基，然后采纳________________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培育一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培育物，为了获得纯种培育，除了稀释涂布平板法，还可采纳________________法。据图分析，拟杆菌新菌株在以__________为碳源时生长状况最好。(2)探讨发觉，将采集的样品置于各种培育基中培育，仍有很多微生物不能被分别筛选出来，推想其缘由可能是______________________________________(答一点即可)。(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)深海冷泉环境特别，推想此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能还有___________________________________________________________________________________________________。解析：(1)培育基通常采纳高压蒸汽灭菌法进行灭菌。可以采纳稀释涂布平板法或平板划线法，将单个微生物分散在固体培育基上，经过培育得到单菌落，从而获得纯净培育物。分析题图可知，在以纤维素为碳源的培育基中，细胞数量最多，可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。(2)深海冷泉中可能存在某些微生物，只有利用冷泉中的特有物质才能生存(或须要在深海冷泉的特定环境中才能存活)，故将采集的样品置于各种培育基中培育，仍可能有很多微生物不能被分别筛选出来。(3)拟杆菌为异养生物，作为该生态系统的分解者，能将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到无机环境中，有利于碳循环的顺当进行。(4)深海冷泉温度和氧含量均较低，故生活在其中的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，应具有耐低温、耐低氧的特性，才能高效降解多糖，保证拟杆菌在极端环境条件下进行正常生命活动。答案：(1)高压蒸汽灭菌平板划线纤维素(2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或须要在深海冷泉的特定环境中才能存活)(3)拟杆菌作为分解者，将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到无机环境中，有利于碳循环的顺当进行(4)耐低温、耐低氧等(极端环境耐受性)1．(科学试验和探究情境)为了分别和纯化高效分解石油的细菌，科研人员用被石油污染过的土壤进行如图A所示的试验。同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培育后的菌落分布如图B所示。下列叙述错误的是()A．步骤③与步骤②中培育基成分的最大区分是步骤③的培育基中石油是唯一碳源B．步骤⑤振荡培育的目的是提高培育液溶氧量，同时使菌体与培育液充分接触C．图B培育基的结果可能是由于涂布不匀称造成的D．步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出能分解石油的细菌D解析：该试验的目的是为了分别和纯化高效分解石油的细菌，因此步骤③与步骤②中培育基成分相比，最大的区分是石油是唯一碳源，A正确；步骤⑤须要振荡培育，缘由是提高培育液中(溶解)氧的含量，通过振荡可使菌体与培育液充分接触，提高养分物质的利用率，B正确；图B采纳的接种方法是稀释涂布平板法，出现图B结果(菌落分布不匀称)可能的操作是涂布不匀称，C正确；步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油实力最强的细菌，D错误。2．(生活、学习和实践情境)塑料(聚乙烯)在自然界中很难降解，俗称“白色污染”，某高校教授偶然发觉装米的塑料袋上有很多孔洞，还有黄粉虫幼虫和成虫爬出。带着这些疑问，他对黄粉虫幼虫消化道的微生物进行分别，在幼虫肠道中胜利分别出塑料降解菌——微小杆菌YT2。下列有关叙述错误的是()A．要视察塑料降解菌的菌落，需用固体培育基进行选择培育B．试验室分别塑料降解菌时应在培育基中加入葡萄糖作为碳源C．采纳平板划线法分别微小杆菌YT2时，划线时总是从上一次划线的末端起先划线D．若杀死微小杆菌YT2，黄粉虫无法消化塑料，推想该菌和黄粉虫幼虫的种间关系是互利共生B解析：固体培育基上能长出菌落，要视察塑料降解菌的菌落，需用固体培育基进行选择培育，A正确；试验室分别塑料降解菌时应在培育基中加入塑料作为唯一碳源，B错误；采纳平板划线法分别微小杆菌YT2时，在其次次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端起先划线，这样做的目的是将聚集的微生物逐步稀释，以便获得单个菌落，C正确；微小杆菌YT2生活在黄粉虫的消化道内，若杀死微小杆菌YT2，黄粉虫无法消化塑料，可推想该菌和黄粉虫幼虫的种间关系是互利共生，D正确。课时质量评价(三十六)(建议用时：40分钟)一、选择题：每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求。1．艺术不只存在于纸笔之间，我们可以用培育皿当纸，接种环当笔，各种形态、颜色的细菌和真菌当颜料，画出别具风格的作品。如在下列作品培育过程中，白色霉菌带有毛茸茸的感觉，可描绘大熊猫的皮毛，红色大肠杆菌可以描绘鹅嘴，假单胞杆菌可以描绘水波。下列说法错误的是()A．制备培育基时要经过计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板等步骤B．图甲作品培育基的pH需为酸性，图乙作品培育基的pH则需为中性或微碱性C．运用接种环接种时，取菌种前和接种后都需将接种环进行干热灭菌D．培育成型的作品应低温保存，以免菌株疯长影响整体效果C解析：培育基配制过程要经过称量→溶化→灭菌→倒平板，灭菌之前须要调整pH到相宜范围以利于真菌或细菌的繁殖，A正确；不同微生物培育时对pH的要求往往不同，培育真菌时需将培育基的pH调至酸性，培育细菌时需将pH调至中性或微碱性，B正确；每次运用接种环前后都要进行灼烧灭菌，灼烧待冷却后，才能置于菌液中运用，C错误；低温保存可抑制菌株的生长，以免菌株疯长影响整体效果，D正确。2．(2024·福建漳州一模)关于下列生产生活实例中生物学原理的分析，错误的是()选项生产生活实例生物学原理A不宜食用长时间存放的剩菜剩菜简单滋生细菌，易产生亚硝酸盐B用巴氏消毒法对牛奶消毒杀死牛奶中全部微生物，且不破坏牛奶中的养分成分CDNA指纹技术用于侦破案件不同人体内的DNA所含的脱氧核苷酸序列不同D轮换种植不同农作物不同农作物对矿质元素的汲取具有选择性B解析：剩菜简单滋生细菌，细菌代谢产生亚硝酸盐，人体摄入过多亚硝酸盐不利于健康，A正确；巴氏消毒不能杀死全部微生物，B错误；DNA指纹技术的原理是不同人体内的DNA所含的脱氧核苷酸序列不同，C正确；不同植物对矿质元素的汲取具有选择性，轮种可以复原及提高土壤的肥力，D正确。3．巴氏杀菌乳是以生牛(羊)乳为原料，经巴氏杀菌等工序制得的液体产品，杀灭了牛奶中有害菌群的同时保存了牛奶的养分物质和纯正口感。据国家标准每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50000个。某爱好小组进行了簇新牛奶合适的消毒温度的探究，下列相关试验操作不合理的是()A．配制牛肉膏蛋白胨培育基并在121℃、100kPa条件下处理15～30minB．将等量的簇新牛奶分别置于60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理30minC．对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在37℃下培育24hD．统计培育基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为牛奶最适消毒温度D解析：配制的牛肉膏蛋白胨培育基需运用高压蒸汽灭菌法灭菌，即在121℃、100kPa条件下处理15～30min，将培育基彻底灭菌，以避开培育基上的微生物影响试验结果，A正确；簇新牛奶应运用巴氏消毒法消毒，为了探究簇新牛奶合适的消毒温度，可将等量的簇新牛奶分别置于60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理30min，并通过检测不同温度处理下的牛奶中微生物的数量进行比较，B正确；若要统计消毒后的牛奶中微生物的数量，可用稀释涂布平板法接种，所以可对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在37℃下培育24h，C正确；由于温度过高会破坏牛奶中的养分成分，所以菌落数最少的组对应的温度不肯定是最适的消毒温度，因为还须要考虑牛奶的养分价值不被破坏，D错误。4．(2024·山东潍坊模拟)某爱好小组为探讨“运用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为3盘，一盘取样冷藏，一盘运用公筷，一盘不用公筷，试验过程如下图。下列相关操作或叙述正确的是()A．配制培育基X并在121℃、100kPa条件下处理15～30minB．固体培育基X对菜品中的细菌有选择性C．在固体培育基X上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种细菌D．依据菌落的特征可以精确推断细菌的种类A解析：配制好的培育基须要采纳高压蒸汽灭菌法进行灭菌，即在121℃、100kPa条件下处理15～30min，A正确；固体培育基没有做任何处理，所以对菜品中的细菌没有选择性，B错误；据题意可知，在固体培育基X上接种后还需进行计数，故只能用稀释涂布平板法接种而不能用平板划线法，C错误；在肯定的培育条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，依据菌落的形态、大小、颜色等特征，可以初步区分出不同种微生物，但不能精确推断，D错误。5．(2024·山东日照三模)金黄色葡萄球菌(可产生色素使菌落呈金黄色)可以产生溶血素，因而在血琼脂平板(加入了脱纤维羊血)上生长时，菌落四周会出现透亮溶血环。金黄色葡萄球菌对高盐环境有肯定耐受实力。下列叙述正确的是()A．血琼脂平板配制时须要在加入血液后进行高压蒸汽灭菌B．在平板中加入脱纤维羊血的目的是为该菌的生长供应碳源和氮源C．培育基中加入较高浓度的NaCl溶液有利于对金黄色葡萄球菌的筛选D．无法在血琼脂平板上区分金黄色葡萄球菌和也能形成溶血环的溶血性链球菌C解析：高压蒸汽灭菌会破坏脱纤维羊血，添加脱纤维羊血需在高压蒸汽灭菌后，A错误；在平板中加入脱纤维羊血的目的是通过视察在金黄色葡萄球菌菌落四周是否出现透亮溶血环，从而检测菌落是否是金黄色葡萄球菌，B错误；由于金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，较高浓度NaCl不影响金黄色葡萄球菌的生长，但是能抑制其他菌的生长，因此，金黄色葡萄球菌的培育基中加入较高浓度NaCl溶液有利于对金黄色葡萄球菌的筛选，C正确；可以依据菌落的特征，如菌落的形态、大小、隆起程度、颜色区分金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌，D错误。6．土壤中的溶磷菌能够把难溶态的磷转化为可被植物干脆利用的可溶性磷，从土壤中筛选出溶磷实力强的溶磷菌制成菌肥，有利于植物对磷元素的汲取。下列有关操作和分析错误的是()A．土壤取样、称取土壤、稀释样品都在酒精灯火焰旁进行B．须要用含难溶态磷的固体培育基进行目的菌株的分别C．推想难溶态磷的分解可能与溶磷菌分泌的代谢产物有关D．试验组与比照组可溶性磷含量差值最大的菌株适合制成菌肥A解析：土壤是土壤微生物的培育基，土壤取样时不须要在酒精灯火焰旁操作，A错误；分别菌株需用固态的选择培育基，土壤中的溶磷菌能够把难溶态的磷转化为可被植物干脆利用的可溶性磷，而其他微生物不能在此环境中生长，所以要用含难溶态磷的固体培育基进行目的菌株的分别，B正确；土壤中的溶磷菌能够把难溶态的磷转化为可被植物干脆利用的可溶性磷，说明难溶态磷的分解可能与溶磷菌分泌的代谢产物有关，C正确；试验组与比照组可溶性磷含量差值最大说明菌株把难溶态的磷转化为可被植物干脆利用的可溶性磷的实力较强，适合制成菌肥，D正确。7．菜籽粕含有35%～45%的蛋白质，是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等抗养分因子限制了菜籽粕的应用。探讨者将不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的固体培育基中发酵48h，测定菜籽粕中单宁的含量，结果如下图。下列相关叙述错误的是()A．菜籽粕与麸皮为微生物供应碳源和氮源B．接种后需对培育基进行高压蒸汽灭菌C．黑曲霉菌对单宁的去除效果最为志向D．比照组为不接种微生物的固体培育基B解析：菜籽粕含有35%～45%的蛋白质，麸皮富含纤维素，菜籽粕与麸皮可为微生物供应碳源和氮源，A正确；对培育基灭菌应在接种前，接种后再灭菌，菌种将被全部杀死，B错误；据图可知，与比照组相比，黑曲霉菌发酵菜籽粕中单宁含量最低，说明黑曲霉菌对单宁的去除效果最为志向，C正确；比照组为不接种微生物的固体培育基，目的是作为比照，说明微生物去除单宁的作用，D正确。8．(2024·广东深圳模拟)金黄色葡萄球菌是一种耐高盐的食源性致病微生物。哥伦比亚血平板是含无菌脱纤维羊血等成分的固体培育基，生长在该培育基上的金黄色葡萄球菌菌落能破坏其四周的红细胞，产生透亮的溶血圈。下图为检测某种饮料是否被金黄色葡萄球菌污染的操作流程，据此分析不正确的是()A．7.5%的NaCl肉汤培育基从功能角度划分属于选择培育基B．振荡培育后培育基变浑浊是耐高盐的微生物数量增多所致C．若最终长出的菌落四周出现透亮的溶血圈，则说明该饮料被金黄色葡萄球菌污染D．若取菌种后的接种方法为稀释涂布平板法，则可对待测饮料中金黄色葡萄球菌计数D解析：金黄色葡萄球菌是一种耐高盐的食源性致病微生物，因此7.5%的NaCl肉汤培育基从功能角度划分属于选择培育基，A正确；7.5%的NaCl肉汤培育基振荡培育后培育基变浑浊是由于耐高盐的微生物数量增多所致，B正确；金黄色葡萄球菌可破坏菌落四周的红细胞，产生透亮的溶血圈，若最终长出的菌落四周出现透亮的溶血圈，则说明该饮料被金黄色葡萄球菌污染，C正确；因为接种的菌种经7.5%的NaCl肉汤培育基培育过，因此用稀释涂布平板法也不能对待测饮料中金黄色葡萄球菌进行计数，D错误。9．有机磷农药(如对硫磷，俗称1605)一般都具有很强的毒性，且结构稳定，难以清除，易在土壤、果蔬中残留，会对人体造成潜在的危害。为了获得高效降解有机磷农药的微生物，探讨人员设计了下图所示的试验方案。下列有关叙述正确的是()A．选取的土壤样品需进行灭菌处理B．该方案中的CNFM是选择培育基C．平板培育的目的是为了加速微生物生长D．依据检测结果，选出对硫磷浓度最低的锥形瓶内的微生物D解析：本试验是要从土壤样品中获得能降解有机磷农药的微生物，土壤样品不须要灭菌，假如灭菌样品中可能就没有微生物了，A错误；该方案中的CNFM只含生长因子、无机盐和水，不属于培育基，B错误；平板培育的目的是为了筛选和分别微生物，C错误；对硫磷浓度越低，说明分解越多，说明降解有机磷农药的微生物最多，依据检测结果，选出对硫磷浓度最低的锥形瓶内的微生物，D正确。10．一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维(PP)，某科研团队打算从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌。图甲表示PP分解菌分别与计数的过程，6号试管涂布的三个平板的菌落数为550、601、688；7号试管涂布的三个平板的菌落数为58、73、97；8号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。图乙表示在培育基中加入能与PP结合而显色的染色剂，目的菌落四周出现透亮圈的状况。下列说法错误的是()A．图甲、图乙所用培育基分别为选择培育基和鉴别培育基，都以PP作为唯一碳源B．图甲、图乙所用接种方法分别为稀释涂布平板法和平板划线法，都需在酒精灯火焰旁进行C．1g土壤样品中含有PP分解菌的估算数目是7.6×1010个，此数值一般偏小D．可选择图乙培育基中D/d比值大的PP分解菌作为目的菌种推广运用B解析：图甲是筛选PP分解菌的过程，培育基为选择培育基，图乙表示在培育基中加入能与PP结合而显色的染色剂，鉴别PP分解菌的过程，所以图乙所用培育基为鉴别培育基，都以PP为唯一碳源，A正确；图甲、图乙所用接种方法都为稀释涂布平板法，都需在酒精灯火焰旁进行，B错误；由于平板计数范围为30～300，故取7号试管中的菌落数，7号试管的稀释倍数为1×108，则1g土壤样品中含有PP分解菌的估算数目是[(58＋73＋97)÷3]÷0.1×108＝7.6×1010(个)，此数值一般偏小，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上视察到的只是一个菌落，C正确；可选择图乙培育基中D/d较大的菌株，因为这一指标越大说明单个菌株分解PP的实力越强，所以可作为目的菌种推广运用，D正确。二、非选择题11．为获得高效产酸的醋酸菌用于果醋制作，某爱好小组以苹果皮为材料，进行试验，试验流程如下，回答下列相关问题。培育基：米曲汁乙醇碳酸钙培育基——米曲汁1000mL，CaCO310g，95%乙醇30mL(灭菌后加入)。在该培育基上，醋酸菌菌落四周会形成透亮圈。(1)微生物的培育、分别必需严格无菌操作处理，培育基无菌处理的方法是________________，培育皿、锥形瓶的无菌处理方法是______________，上述______________不能进行无菌处理。(2)①过程通常需在________℃进行________(填“静置”或“振荡”)培育，缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________