植物工厂化育苗教学课件 9驯化移栽

试管苗驯化移栽——植物工厂化育苗壮苗继代培养---细胞分裂素浓度增加—有助于增殖系数提高（芽分化）-----芽增殖往往伴有生长势减弱，表现为瘦弱细小----不适合移栽，移栽成活率低壮苗----生长好的芽可以分成单株进行培养，未成形型的可以分成几块芽丛进行培养。培养基----高浓度生长素低浓度细胞分裂素。光照，暗光培养是辅助。不仅依靠强光和暗光调节。思路：光照环境的辅助暗培养—创造黑暗根系生活状态---暗培养强光------光照促进木质部发育，抑制生长速率，促进器官发育暗培养帮助生根状态良好。植物较好的生根，并且这种方式对水分威胁和疾病抗性有所增加，植株可能表现生长迟缓和轻微失绿，但生产实践证明比低光形成的苗有较高移栽成活率。提高光照强度，对壮苗有利。刺激植株光合作用制造有机物，便于异养转向自养。组培苗经过初代继代，生根的过程以后，最终的目的是为了组培苗能成活于外界环境。成为陆地苗，继而被生产、商业而应用。

试管苗移栽是组织培养过程的重要环节，这个工作环节做不好，就会造成组培苗培养的前功尽弃，直接影响了经济效益。

试管苗环境特点、组培苗的生理特点、如何驯化组培苗使组培苗顺利适应外界环境、驯化方法及移栽方法步骤。（一）试管苗环境特点1．试管苗的生活环境组织培养中培育出来的苗通常称试管苗或组培苗。组培苗在含有培养基组培瓶中生长，与外界环境自然隔离，形成了独特的生态系统。这个生态系统与外界环境条件相比具有以下四大差异，即恒温、高湿、弱光和无菌。这也是组培苗的环境。（1）恒温组培苗培养---培养室进行

培养室温度采用空调，或者其他电脑操作可人工控温系统。组培苗恒温下生长

温度控制在适合植物生长合适的温度，一般控制在25±2℃，可以打破季节，温差的影响，常年生长。

自然环境条件，温度处于不断变化之中，温度的调节完全是由自然界太阳辐射的日辐射量决定的，温差大

。季节差异，温度也有较大的浮动。（2）高湿组培瓶内的水分移动有两条途径:一是试管苗吸收的水分，从叶面气孔蒸腾到培养瓶；二是培养基水分向外蒸发，而后水汽凝结又进入培养基。培养瓶内的水分循环，培养瓶内空气相对湿度接近于100%，远远大于培养瓶外的空气湿度。（3）弱光组织培养中的光更多来源于人工灯源与太阳光照强度相比，远小于太阳光直射，所以组培苗一般生长也较弱，经受不了太阳光的直接照射，容易发生灼伤。（4）无菌试管苗所在环境的另一大特点是无菌，

不仅培养基无菌，而且试管苗也无菌。在移栽过程中试管苗要经历由无菌向有菌环境的转换。面对有菌环境---组培苗抵抗力的问题

2．组培苗的特点恒温、高湿、弱光和无菌的环境导致组培苗与自然苗在生理功能和形态结构上存在差异，组培苗生理功能形态结构对逆境的适应和环境的抵抗能力比较差（1）叶片保护组织不发达。

试管苗叶表面角质层薄或蜡质层不发达，叶片没有表皮毛，或仅有较少表皮毛，保护叶片，防止强光灼烧，保护功能较差。试管苗长期在高湿环境条件下生长，气孔只开不闭，缺乏控制水分蒸发的调节功能，导致试管苗在驯化过程中以及移栽后叶片大量失水萎蔫。（2）茎的支撑能力较差

自然界木本植物木质部发达，茎干直立坚硬，草本植物表皮层有纤维细胞使茎秆坚硬。

试管苗机械组织都发育不好，茎秆嫩而不坚强，在缺水时容易萎蔫和倒伏。（3）根系不发达

组培苗的根系不发达，有些不容易生根的植物有时只能形成1-2条根，而且经常没有侧根和根毛，或根毛少，无根毛的现象。

有些愈伤组织上产生的根没有和维管束相连接，这种根基本上没有吸收和运输水分和无机盐的能力。（4）试管苗茎叶虽呈绿色，但叶绿体的光合作用较差。（5）对逆境的适应和抵抗能力弱。自然苗：气孔生理活性强，叶绿体光合性能好，根系发达，吸水力好，，起到保护作用。组培苗：气孔生理活性差，气孔不关闭，叶绿体光合作用差，茎支撑能力差，根系不发达，吸水能力差，有菌无菌的环境状态，抵抗力。（二）试管苗的驯化1．驯化（炼苗）

组培苗在培养瓶中与温室的条件差别很大，主要是培养瓶中的温度恒定、湿度高、光照较弱，为了使组培苗适应移栽后的环境并进行自养，必须要有一个逐步锻炼和适应的过程，这个过程叫驯化或炼苗。（3）驯化的原则

驯化应从温度、湿度、光照及有无菌等环境要素进行，从环境上逐渐贴合自然界状态。

组培苗从组培瓶内移到外界加强自然光，由异养变为自养，由无菌到适应有菌，由恒温、高湿、弱光向自然变温、低湿、强光过渡。

驯化开始数天内，应和培养时的环境条件相似，驯化后期，则要与移栽的条件相似。（4）驯化的目的

提高组培苗对外界环境条件的适应性、提高其光合作用的能力、促进组培苗健壮、最终达到提高组培苗移栽成活率的目的。

（4）驯化方法

先放置自然光下闭瓶炼苗7-20天左右（2-3周），遮光度为50%-70%。先增加光照，（增加光照可以增加抵抗力），同时起到壮苗的作用（叶子深绿，春天叶子发红）壮苗后的组培苗状态。

移栽前开口1-3天，与外界环境相互交换，适应自然环境温湿度及有菌环境（叶片绿色加深，根系颜色白变黄褐色可以移栽）

优点：抵抗力较强（培养基经过阳光照射失水较多，微生物繁衍慢，组培苗经驯化也起到壮苗效果，移栽更容易成活。

驯化成功的试管苗茎叶颜色加深。开瓶强光炼苗法：

将培养容器的盖子打开，在自然光下进行开瓶炼苗3-7天。

注意的问题：（开瓶炼苗分阶段进行:首先松盖一两天，然后部分开盖一两天，然后完全揭去盖。）（

光照：正午强光或南方光照较强的地区应该注意要采取遮阴措施，如用遮阴棚或温室避免灼伤小苗）

（污染问题：开盖培养不够1周，一般不会引起含蔗糖培养基的污染问题)在试管苗驯化过程中其最大的障碍是湿度问题。试管苗叶片角质层不发达，叶片通常没有表皮毛，或仅有较少表皮毛。叶片上甚至出现了大量的水孔，此外，气孔的数量、大小也往往超过普通苗。当将它们直接移栽到自然环境中，试管苗蒸滕作用极大，失水率很高，非常容易死亡。所以驯化过程中要精心照看，加强水分管理，确保驯化成功。

2．移栽生根试管苗移栽的合适时期适合生根组培苗的标准：当试管苗长出白色粗壮的小不定根3-4条时，根长约0.5-1cm，芽苗长2cm左右时，可以进行试管苗的驯化、移栽。如果根生长很长而且变成黄褐色，说明根系已老化，移栽时则成活率降低。如果短时期移苗有困难，可以有计划地降低培养室温度，抑制根的生长，达到在合适时期同步移苗。空白培养基。（2）基质的选择

透气性、保湿性和一定的肥力，一般可选用珍珠岩、蛭石等

组培移栽首选颗粒大，缝隙大的基质珍珠岩---考虑不容易烂根（如果粘基质浇水多，组培苗烂根）。其次蛭石

沙子比重大，移栽苗容易伤根，太阳晒吸热，晚上凉，温差大对组培苗培养不利（为了增加粘着力和一定的肥力可配合草炭土或腐殖土）珍珠岩、蛭石、草炭1：1：1（3）灭菌

用塑料装好高压灭菌锅灭菌20分钟-30分钟备用或

喷洒高锰酸钾或者多菌灵溶液，喷洒全面。喷后用塑料覆盖20-30分钟。①河砂河砂分为粗砂、细砂两种类型。粗砂即平常所说的河砂，其颗粒直径为1-2mm。细砂即通常所说的面砂，其颗粒直径为0．1-0．2mm。河砂的特点是排水性强，但保水蓄肥能力较差，一般不单独用来直接栽种试管苗。②草炭土草炭土是由沉积在沼泽中的植物残骸经过长时间的腐烂所形成，其保水性好，蓄肥能力强，呈中性或微酸性反应，但通常不能单独用来栽种试管苗，宜与河砂等种类相互混合配成盆土而加以使用。③腐殖土腐殖土是由植物落叶经腐烂所形成。一种是自然形成，一种是人为造成，人工制造时可将秋季的落叶收集起来，然后埋人坑中，灌水压实令其腐烂。第二年春季将其取出置于空气中，在经常喷水保湿的条件下使其风化，然后过筛即可获得。腐叶上含有大量的矿质营养、有机物质，它通常不能单独使用。掺有腐殖土的栽培基质有助于植株发根。（3）容器选择栽培容器可用6×6cm-10×10cm的软塑料钵，也可用育苗盘。前者占地大，耗用大量基质，但幼苗不用再移，后者需要二次移苗，但省空间、省基质。也可在事先做好的苗床上直接进行移栽。（4）移栽方法

取苗：

从瓶中取苗，动作要轻，不能用力过猛，防止扯断苗根。

如果培养基太干燥，可以先用清水浸泡一段时间再取苗。

清洗：一只手轻轻捏住苗，另一只手轻揉苗根，将附于其上的琼脂块和松散的愈伤组织清理掉（20℃左右的温水洗苗），放入另一盆温水中再清洗一次，将培养基彻底洗掉。如果根过长，可以进行适当裁剪留2-3厘米即可（也有的操作取出试管苗后在20℃的温水浸泡10分钟，换水两次，清洗。）清洗一定要干净，否则残留的培养基会导致霉菌污染。

组培苗灭菌：温水涮洗干净之后，放入500-800倍多菌灵水溶液浸泡10-15分钟。

移栽：软塑料钵或育苗盘，将消毒后珍珠岩、蛭石放在苗盘内，厚度4-6cm,用水淋透，每穴种一棵，于中心位置，用一个筷子粗的竹签先挖一小坑，种后轻轻镇压；不要折根，将清洗完的组培苗栽植在培养基质，用水喷淋后放置在拱棚内2-3周培养。栽植深度、间距要求：

深度：叶片不接触基质。

边栽边覆盖基质，成行栽植，而后轻轻镇压。

株距以苗不相互接触为宜，行距以为株距的2-3倍。种好后用喷雾器喷水，冲掉叶面上沾着的基质。栽后浇透水不要折根另一种手法培养生根苗——达到移栽标准后-打开培养瓶注入少量自来水-半遮光3-5天-取出试管苗-20度温水浸泡（目的洗去干粘在苗的琼脂及培养基）---清洗干净—移栽到经过消毒的基质中，保持温度水分，长出2-3片新叶时可以移栽田间或喷薄（三）移栽后幼苗的管理1．保持小苗的水分供需平衡。（1）在移栽后5-7d内，应给予较高的空气湿度条件，使叶面的水分蒸发减少，尽量接近培养瓶的条件，让小苗始终保持挺拔的状态。（2）营养钵的培养基质浇透水，搭设小拱棚，以减少水分的蒸发，并且初期要常喷雾处理，保持拱棚薄膜上有水珠出现。

（3）5-7d后，发现小苗有生长趋势，可逐渐降低湿度，减少喷水次数，将拱棚两端打开通风，使小苗适应湿度较小的条件。

约15d后揭去拱棚的薄膜，并给予水分控制，逐渐减少浇水，促进小苗长得粗壮。2．防止菌类滋生。基质进行高压灭菌或烘烤灭菌或高锰酸钾搅拌。可以适当使用一定浓度的杀菌剂以便有效地保护幼苗，如多菌灵、托布津，浓度800-1000倍，喷药宜7-10d一次。移苗时尽量少伤苗，伤口过多，根损伤过多，微生物进入，菌类滋生，都是造成死苗的原因。

3．一定的温度、光条件。适宜的生根温度是18-20度.冬春季地温较低时，可用电热线来加温。温度过低会使幼苗生长迟缓，或不易成活。温度过高会使水分蒸发，从而使水分平衡受到破坏，并会促使菌类滋生。

初期可用较弱的光照，在小拱棚上加盖遮阳网或报纸等，以防阳光灼伤小苗和增加水分的蒸发。

保持温室内每天通风3、4h。当小植株有了新的生长时，逐渐加强光照，后期可直接利用自然光照。促进光合产物的积累，增强抗性，促其成活。4．保持基质适当的通气性。要选择适当的颗粒状基质，保证良好的通气作用。在管理过程中不要浇水过多，过多的水应迅速沥除，以利根系呼吸。

栽后管理最重要的工作保湿：基质颗粒大，透水快，透气好空气环境小拱棚或密闭塑料膜保湿加喷雾保湿结合。保证不萎蔫不失水（四）移栽常见问题移栽是整个培养过程的最后一个阶段，也是很重要的阶段。如果不精心，细致的进行移栽及栽后管理，组培苗生产将前功尽弃。思考为什么要对植物组织培养苗进行驯化？植物组织培养苗具有哪些特点？如何对植物组织培养苗进行驯化？植物组织培养苗移栽过程中要注意哪些问题？在温室培养一段时间后，幼苗完全适应自然环境