实验动物 获取SPF猪的剖腹产技术规范

DB23/TXXXX—XXXX

实验动物获取SPF猪的剖腹产技术规范

1范围

本文件规定了妊娠母猪的选择、术前准备、保定与麻醉、剖腹产手术、新生仔猪处置和母猪护理等。

本文件适用于利用生物学净化方法从普通级猪和SPF猪通过剖腹产手术获取SPF猪的操作。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB14925实验动物环境及设施

GB16551猪瘟诊断技术

GB/T18641伪狂犬病诊断方法

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T27416实验动物质量和能力的通用要求

GB/T34791实验动物质量控制要求

GB/T35823实验动物动物实验通用要求

GB/T35892实验动物福利伦理审查指南

GB/T50333医院洁净手术部建筑技术规范

NY/T541兽医诊断样品采集、保存于运输技术规范

NY/T678猪伪狂犬病免疫酶试验方法

NY/T679猪繁殖与呼吸综合症免疫酶试验方法

NY/T3466实验用猪微生物学等级及监测

SN/T1919猪细小病毒病检疫技术规范

3妊娠母猪的选择

3.1普通级猪

3.1.1母猪来源

应来源于未注射PRRS疫苗、临床上无经胎盘垂直传播的疾病，即猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪

伪狂犬病、猪细小病毒病等症状的猪场。

3.1.2胎次的选择与采样

选择第二至第六胎妊娠母猪，剖腹产前现场采集样本，按照NY/T541规定的采样方法采样。

3.1.3猪瘟病原检测

1

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按照GB/T16551规定的方法进行检测。

3.1.4猪繁殖与呼吸综合征病原检测

按照NY/T679规定的方法进行检测。

3.1.5猪伪狂犬病病原检测

按照GB/T18641规定的方法进行检测。

3.1.6猪细小病毒病原检测

按照SN/T1919规定的方法进行检测。

3.2SPF猪

3.2.1微生物学质量

符合NY/T3466中的规定。

3.2.2寄生虫学质量

符合NY/T3466中的规定。

3.3手术时间

预产期前一周观察母猪分娩征兆，尽量接近自然顺产时间施行手术。

4术前准备

4.1器械

母猪剖腹产常规手术器械、脊髓穿刺针、猪用开口器、动物用喉镜、灭菌纱布、灭菌毛巾、20mL

金属注射器、灭菌绑定绳等若干，使用前灭菌；5mL和10mL一次性注射器若干。

4.2设备

动物用外科手术台、动物用呼吸麻醉机、动物用监护设备、手术用隔离器和保育设备。

4.3药品

4.3.1麻醉药品

丙泊酚注射液（100mg/10mL）、异氟烷（100mL/瓶）、盐酸利多卡因注射液（100mg/5mL）。

4.3.2急救药品

盐酸肾上腺素注射液（1mg/mL）、尼可刹米注射液（375mg/1.5mL）、硫酸阿托品注射液（5mg/mL）、

盐酸纳洛酮注射液（400mg/mL）、酚磺乙胺注射液（0.25g/2mL）。

4.3.3常用药品

1%碘伏、5%碘酊、75%酒精、5%新洁尔灭消毒液、0.2%～0.5%过氧乙酸消毒液、0.9%NaCl注射

液、10%葡萄糖注射液、广谱抗生素（如头孢类等）。

2

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4.4手术室

手术室的环境控制与检测，按照GB50333中的规定执行。

4.5保育猪舍

保育猪舍的质量控制和检测，按照GB14925中的规定执行。

5保定与麻醉

5.1术前清洗消毒

待术母猪称重后，全身用温热清水冲洗，喷涂5%新洁尔灭消毒液，暖风吹干，再进入手术室。

5.2保定

母猪采用侧卧保定，牢固固定头及四肢，保定后，将腹部全部涂抹1%碘伏消毒。

5.3麻醉

5.3.1麻醉方法

麻醉方法为全身麻醉结合局部麻醉。

5.3.2诱导麻醉

手术前12h禁食，实时监测实验猪的生理指标（体温、呼吸频率、心率、脉搏、黏膜颜色和毛细血

管再充盈时间、血氧饱和度）；

麻醉前需检查呼吸麻醉设备（直流呼末二氧化碳探头需提前预热）及监护设备的功能完整性以及麻

醉机的气密性，以保证麻醉顺利进行；

麻醉前准备工作做好后，预吸氧3min～5min（3L/min），肌肉注射阿托品（0.04mg/kg），15min

后耳缘静脉注射丙泊酚（7mg/kg），缓慢推注，严格监测麻醉状态，直至四肢肌肉松弛、下颌松弛并

可将舌拉出口腔即刻停止推注。

5.3.3维持麻醉

用开口器或人工打开猪上下颌，迅速进行气管插管，连接呼吸麻醉机，设置潮气量（Vt）10mL/kg，

呼吸频率15bpm，氧流量1L/min，呼吸比2:1，异氟烷吸入浓度设置为2%～3%维持麻醉，术中可根据猪

临床体征进行适当调节。

5.3.4局部麻醉

硬膜外腔麻醉+切口线性阻滞麻醉：用脊髓穿刺针经腰荐结合处进入硬膜外腔后，推注利多卡因（0.2

mg/kg）。手术切口可使用利多卡因（0.2mg/kg）进行线性阻滞麻醉。

6剖腹产手术

6.1术部选择

6.1.1腹侧壁斜切口

3

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沿左侧或右侧髋结节下角与脐孔连接线中点（为切口中点）做15cm～20cm的切口。

6.1.2腹中线旁切口

在最后3个乳头外侧乳腺基部以外3cm～4cm左右处，做20cm左右平行于腹中线切口。

6.2术部消毒

在手术准备区，剃除术部20cm～30cm范围内被毛，用清水冲洗，同时使用5%新洁尔灭消毒液清

洗术部。待实验猪麻醉后，对术部距创缘20cm范围剃毛，并用清水冲洗。用灭菌纱布擦干，使用75%

酒精脱脂。用5%碘伏消毒创术部，使用75%酒精脱碘，覆盖创巾并使用无菌自粘外科手术膜进行覆盖。

6.3剖宫产手术

6.3.1切开腹腔

切开术部皮肤，钝性分离皮下组织，逐层切开肌层直至腹膜，按照外科标准进行止血处理，暴露腹

腔。手术助手使用灭菌纱布对创口进行堵塞，防止肠管、网膜等其它组织涌出创口。

6.3.2检查子宫角

暴露腹腔后，术者将手伸入腹腔探查含有胎儿的子宫角，将一侧子宫角牵引至切口外的灭菌创布上，

并用浸润过温生理盐水的纱布覆盖。根据胎儿数量及分布位置确定另一侧子宫角的暴露程度，避免过度

牵出引起子宫血管受压迫，影响胎儿血液供应。

6.3.3取出胎儿

子宫角暴露以后，根据子宫角内胎儿数量及分布位置，若两侧子宫角中都有胎儿，且能暴露子宫角

基部，则仅在基部做一切口；若两侧胎儿均较多，不能暴露子宫角基部，宜在两个子宫角的中段分别做

1个切口。

切口选在子宫大弯，靠近子宫体的背侧血管相对较少处，切开子宫壁5cm～8cm，小心依次取出胎

儿。

6.3.4术后缝合

逐个取出胎儿，再次探查胎儿数量和取出胎盘数量，检查两侧子宫角内有无残留胎儿。待清理干净

后，缝合子宫创口（创口进行两次缝合，第一次连续缝合，第二次采用内翻缝合）。用35℃温生理盐

水（内加广谱抗生素）进行体外子宫冲洗，冲洗时使用灭菌纱布对创口进行堵塞与保护，避免冲洗液流

入腹腔，冲洗干净后将子宫还纳回腹腔；在腹腔内布撒广谱抗生素，依次按照兽医外科学操作标准缝合

腹膜、各肌肉层及皮肤。

6.4子宫摘除取胎术

腹腔暴露同6.3.1。将双侧子宫角及子宫体全部牵引至腹腔外，全部牵出后，在子宫颈处使用2把肠

钳双重夹持，进行子宫隔断。隔断子宫后将输卵管、子宫颈结扎，进行全子宫摘除术。将摘除子宫放入

含有0.5-1.0%过氧乙酸的渡槽中消毒10s～20s，30s内将子宫传送至保育装置内。结扎及包埋缝合，保

留部分子宫断端，在腹腔内布撒广谱抗生素，依次按照兽医外科学操作标准缝合腹膜、各肌肉层及皮肤。

6.5母猪处置

非存活母猪按照GB/T35823中的规定实施安死术。

4

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7新生仔猪处置

新生幼崽取出后，交由手术助手或保育助手结扎脐带，0.55%碘伏涂擦脐带断端，并用灭菌毛巾迅

速清理口鼻黏液，擦干体表并按摩体表，躯体做屈伸运动，必要时进行胸肺复苏和急救操作。确定生命

体征良好，称重记录，置于保育箱内哺育。

8母猪护理

8.1术中护理

母猪在手术过程中维持耳静脉输入10%葡萄糖注射液，80mL/h，至手术结束。

8.2术后护理

8.2.1饲养空间要求

术后母猪的饲养空间应允许母猪能适当活动，以防止腹腔脏器发生粘连。

8.2.2抗生素

连续3天肌注广谱抗生素，以防感染。

8.2.3创口消毒

每日用碘伏消毒创口2次，2～3周拆除皮肤缝合线。

8.2.4饲喂

应单独饲养，给予易消化、营养丰富的流质食物，营养与卫生符合GB/T27416中的规定。

5

ICS65.020.99

CCSB44

DB23

黑龙江省地方标准

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实验动物获取SPF猪的剖腹产技术规范

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

黑龙江省市场监督管理局发布

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1范围

本文件规定了妊娠母猪的选择、术前准备、保定与麻醉、剖腹产手术、新生仔猪处置和母猪护理等。

本文件适用于利用生物学净化方法从普通级猪和SPF猪通过剖腹产手术获取SPF猪的操作。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB14925实验动物环境及设施

GB16551猪瘟诊断技术

GB/T18641伪狂犬病诊断方法

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T27416实验动物质量和能力的通用要求

GB/T34791实验动物质量控制要求

GB/T35823实验动物动物实验通用要求

GB/T35892实验动物福利伦理审查指南

GB/T50333医院洁净手术部建筑技术规范

NY/T541兽医诊断样品采集、保存于运输技术规范

NY/T678猪伪狂犬病免疫酶试验方法

NY/T679猪繁殖与呼吸综合症免疫酶试验方法

NY/T3466实验用猪微生物学等级及监测

SN/T1919猪细小病毒病检疫技术规范

3妊娠母猪的选择

3.1普通级猪

3.1.1母猪来源

应来源于未注射PRRS疫苗、临床上无经胎盘垂直传播的疾病，即猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪

伪狂犬病、猪细小病毒病等症状的猪场。

3.1.2胎次的选择与采样

选择第二至第六胎妊娠母猪，剖腹产前现场采集样本，按照NY/T541规定的采样方法采样。

3.1.3猪瘟病原检测

1

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按照GB/T16551规定的方法进行检测。

3.1.4猪繁殖与呼吸综合征病原检测

按照NY/T679规定的方法进行检测。

3.1.5猪伪狂犬病病原检测

按照GB/T18641规定的方法进行检测。

3.1.6猪细小病毒病原检测

按照SN/T1919规定的方法进行检测。

3.2SPF猪

3.2.1微生物学质量

符合NY/T3466中的规定。