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文档简介
HLA-B27检测及临床意义病
因学临
床表
现AS血
清学流
行病
学AS年轻男士多见男:女比例约为(2—3):1种族差异,白种人患病率1%,黑人最低中国人HLA
—B27阳性率约6—8%,中国
人群患病率0.3%,在患者家系中为4%,
南方较北方高AS发
病
率病因学遗传感染血清学RF阴性HLA-B27阳性HLA-B*27位
于
第
6
号染色体的短
臂上HLA-B
含
有
1
000个
等位
基因Ⅰ
型
M
HC基因,基本
上表达在机体
中所有有核的
细胞上,尤其
是淋巴细胞的
表面HLA-B27亚
型(B27*02;B27*04;
B27*05;
B27*07)HLA-B27检测意义
超
过
9
0%的强直性脊椎炎患者其H
LA-B27
抗原表达为阳
性
,
普通人群中仅5-10%的为阳性
HLA-B27阳性者AS
发病率约为1
0%
~20%
,而普通人群发
病
为
1
‰~2‰,相差约1
00
倍
与传统方法相比,用流式细胞仪来检测
HLA-B27的表达,
灵
敏
度可达1
00%,特异性达9
7.4%PCR-SSP/SSO方法基
因
芯片技术Real-time
PCR
方
法补
体
依赖性微量淋巴细胞毒试验ELISA法流
式
细胞术(FCM法)HLA-B27检测方法补
体
依
赖
性微量淋巴细
胞毒抗体与
淋巴细胞
表面的
膜抗原特
异性结
合后,免
疫球蛋
白的
补体
结合位点暴露,该I
C
与补体结合而使其活化,形成攻膜复合体在细胞
膜上穿孔,导致靶细胞的溶解死亡。在细胞被穿孔但尚未裂解前加入
染
料
,可使染料进入细胞内,使细胞着色。补
体
依
赖
性
淋
巴细
胞毒•
缺
少
高纯度的单价抗血清•
人
工
计数淋巴细胞数量,易误诊和漏诊
•
可
疑
结果,难判断结果,常需复查•
血
标
本要求高,实验条件的影响•
成
本
低流
式
细胞术流式细胞术BD
FACSAria
™
II
Flow
Cytometer流式细胞术•
荧
光
标记的单克隆抗体,特异性高
•
操
作
简便,灵敏度和准确性高•
成
本
较高•
抗
体
发生交叉反应•
样
本
要求较高ELISA方法ELISA方法
•
快
速
、简单•
特
异
性和灵敏度低•
溶
血
标本影响检测结果
•
成
本
低PCR-SSP
序列特异性引物PCR扩增抽提DNA琼脂糖凝
胶电泳实
验
步骤PCR-SSP/SSO•••••Real-time
PCR通
过
融
解
曲
线
对
扩
增
片
断
进
行
检
测本
体
系
包
含
两
对
引
物
——
质
控
引
物、B27
扩增引物同
一
份
样
本
,
只
扩
增
出
质
控
峰
—
—阴性同
一
份
样
本
,
扩
增
出
现
双
峰
—
—
阳性阴
阳
性
结
果依
据
质控
峰
与
B
27阳性峰
的
比值进行判断19质控峰
B27峰操
作
流程核
酸
提取3
小时PCR扩增3
小时软
件
判读,报告输出20基因芯片技术
病
人
样本的D
NA
提取PCRDNA
芯
片
杂
交全自动结果判读基因芯片技术病
人
D
NA荧
光
信号寡
核
苷酸探针Spot
→芯
片
基质基因技术
准
确
性
高
:基因型检测
特
异
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