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文档简介

HLA-B27检测及临床意义病

因学临

床表

现AS血

清学流

行病

学AS年轻男士多见男:女比例约为(2—3):1种族差异,白种人患病率1%,黑人最低中国人HLA

—B27阳性率约6—8%,中国

人群患病率0.3%,在患者家系中为4%,

南方较北方高AS发

率病因学遗传感染血清学RF阴性HLA-B27阳性HLA-B*27位

6

号染色体的短

臂上HLA-B

1

000个

等位

基因Ⅰ

M

HC基因,基本

上表达在机体

中所有有核的

细胞上,尤其

是淋巴细胞的

表面HLA-B27亚

型(B27*02;B27*04;

B27*05;

B27*07)HLA-B27检测意义

9

0%的强直性脊椎炎患者其H

LA-B27

抗原表达为阳

普通人群中仅5-10%的为阳性

HLA-B27阳性者AS

发病率约为1

0%

~20%

,而普通人群发

1

‰~2‰,相差约1

00

与传统方法相比,用流式细胞仪来检测

HLA-B27的表达,

度可达1

00%,特异性达9

7.4%PCR-SSP/SSO方法基

芯片技术Real-time

PCR

法补

依赖性微量淋巴细胞毒试验ELISA法流

细胞术(FCM法)HLA-B27检测方法补

性微量淋巴细

胞毒抗体与

淋巴细胞

表面的

膜抗原特

异性结

合后,免

疫球蛋

白的

补体

结合位点暴露,该I

C

与补体结合而使其活化,形成攻膜复合体在细胞

膜上穿孔,导致靶细胞的溶解死亡。在细胞被穿孔但尚未裂解前加入

,可使染料进入细胞内,使细胞着色。补

巴细

胞毒•

高纯度的单价抗血清•

计数淋巴细胞数量,易误诊和漏诊

结果,难判断结果,常需复查•

本要求高,实验条件的影响•

低流

细胞术流式细胞术BD

FACSAria

II

Flow

Cytometer流式细胞术•

标记的单克隆抗体,特异性高

简便,灵敏度和准确性高•

较高•

发生交叉反应•

要求较高ELISA方法ELISA方法

、简单•

性和灵敏度低•

标本影响检测结果

低PCR-SSP

序列特异性引物PCR扩增抽提DNA琼脂糖凝

胶电泳实

步骤PCR-SSP/SSO•••••Real-time

PCR通

线

测本

——

物、B27

扩增引物同

—阴性同

阳性阴

果依

质控

B

27阳性峰

比值进行判断19质控峰

B27峰操

流程核

提取3

小时PCR扩增3

小时软

判读,报告输出20基因芯片技术

样本的D

NA

提取PCRDNA

交全自动结果判读基因芯片技术病

D

NA荧

信号寡

苷酸探针Spot

→芯

基质基因技术

:基因型检测

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